血脂康对db/db糖尿病小鼠胰岛微环境的影响

目的探讨血脂康对db/db糖尿病小鼠胰岛微环境的影响。方法将40只db/db小鼠分为血脂康组和db/db组,另取20只db/m小鼠作为正常对照组,分别给予血脂康和安慰剂灌胃。每周监测代谢指标,8周后每周取10只小鼠行腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT),离体胰岛灌流评价胰岛分泌功能,免疫组织化学标记并半定量分析胰岛β细胞含量、胰岛微环境与超微结构的变化。结果与db/db组比较,血脂康组代谢指标明显改善,胰岛分泌功能增强,胰岛β细胞数量、质量明显改善,血管内皮细胞标志物CD31明显增多,且线粒体形态损伤趋势明显缓解。结论血脂康能通过增加胰岛血管内皮细胞密度、修复超微结构的损伤、减少β细胞凋亡而改善胰岛微环境及胰岛素分泌功能。     

血脂康通过葡萄糖感受器影响db/db小鼠胰岛分泌功能的研究

目的探讨血脂康对db/db小鼠胰岛内葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)和葡萄糖激酶(GCK)表达的影响。方法将40只8周龄清洁级雄性C57BL/Ks J-db/db小鼠随机分为血脂康组和db/db组,每组20只,分别给予300 mg/(kg·d)血脂康和等剂量安慰剂(0.5%纤维素钠)灌胃;选取20只同周龄同窝C57BL/Ks J-db/m小鼠作为非糖尿病对照组(db/m组),给予安慰剂灌胃。各组小鼠均连续灌胃8周后行腹腔葡萄糖耐量试验,以离体胰岛灌流法评价胰岛分泌功能,分别采用qRT-PCR和Western blot方法检测胰岛β细胞葡萄糖感受器GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平。结果在糖负荷后30,60,120 min,血脂康组血糖水平均明显低于db/db组(P均<0.05),但均高于db/m组(P均<0.05);在糖负荷后30 min,血脂康组血浆胰岛素水平明显高于db/db组(P<0.05)。与db/db组比较,血脂康组在2.8 mmol/L低糖灌流时胰岛素分泌无明显升高,而给予16.7 mmol/L高糖刺激1 min后胰岛素分泌明显升高(P<0.05),但仍低于db/m组(P<0.05)。db/db组GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平均明显低于db/m组(P均<0.05),血脂康组GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平均明显高于db/db组(P均<0.05)。结论血脂康能通过增加胰岛β细胞GLUT-2和GCK的表达改善胰岛分泌功能。     

大黄酸治疗对db/db小鼠第1相胰岛素分泌的影响

目的:通过db/db小鼠先天性2型糖尿病动物模型,探讨大黄酸对胰岛β细胞第1相胰岛素分泌功能的影响。方法:20只4周龄db/db雄性小鼠,随机分成治疗组和对照组,每组10只。另取10只db/m雄性小鼠作为非糖尿病正常对照。治疗组每日固定时间给予大黄酸120 mg.kg-1灌胃,db/db对照组和db/m对照组均给予相同体积的1%纤维素钠,连续给药8周,测定给药前后小鼠体重和空腹血糖,并于给药结束后分离胰岛,建立离体胰岛灌流系统,开始2.8 mmol.L-1KRB0.5 mL.h-1速度灌流1 h,后换为16.7 mmol.L-1KRB 1 mL.h-1灌流,在-30,-20,-10,0,1/3,2/3,1,4/3,5/3,2,3,4,5,6,7,8,9,10,15,20,30 min时分别收集灌流出的液体,-80℃保存后测定胰岛素。结果:db/db大黄酸治疗组和对照组相比,空腹血糖明显下降。db/db对照组小鼠的离体胰岛第1相胰岛素分泌明显受损,而db/db大黄酸治疗组小鼠离体胰岛在高糖刺激后立即出现明显的第1相胰岛素分泌高峰,较db/db明显好转。结论:早期大黄酸治疗可以明显改善db/db小鼠的葡萄糖耐量,恢复第1相胰岛素分泌功能,保护胰岛功能。     

血脂康对db/db糖尿病小鼠坐骨神经传导速度影响的研究

目的探讨血脂康对db/db糖尿病小鼠坐骨神经传导速度的影响。方法将12周龄db/db小鼠随机分为3组,分别给予血脂康低剂量（0.3 g/kg）、高剂量（0.6 g/kg）及安慰剂灌胃8周,同周龄db/m小鼠作为非糖尿病对照组。投药8周后行糖耐量试验,治疗前后分别测定db/db糖尿病小鼠及db/m小鼠坐骨神经的传导速度。结果与db/db对照组比较,血脂康不同剂量组治疗8周后总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、三酰甘油（TG）及空腹血糖下降（P〈0.05）。糖负荷120 min后葡萄糖曲线下面积（AUCg）和胰岛素曲线下面积（AUCins）均低于db/db对照组,而血脂康两组之间比较无统计学意义。血脂康两组治疗后坐骨神经传导速度明显高于对照组,而高剂量组优于低剂量组。结论血脂康在降低血脂、血糖的同时,能提高坐骨神经传导速度,对周围神经具有保护作用,其作用独立于调脂降糖。     

血脂康对db/db糖尿病小鼠周围神经病变的保护作用研究

目的探讨血脂康对db/db糖尿病小鼠周围神经病变的治疗作用及机制。方法将12周龄的db/db小鼠随机分为3组,分别给予血脂康0.3 g/kg(低剂量)、0.6 g/kg(高剂量)及安慰剂灌胃8周治疗,同周龄的db/m小鼠作为正常组。投药8周观察血脂康对db/db糖尿病小鼠空腹血糖、血脂、空腹胰岛素及坐骨神经传导速度的影响,同时检测坐骨神经组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与db/db对照组比较,血脂康低高剂量组治疗8周后TC、LDL-C、空腹血糖和空腹胰岛素均下降,但2组之间比较无明显差异;血脂康治疗后坐骨神经传导速度、SOD活性和GSH-Px活性均增高,MDA降低,其中高剂量组坐骨神经传导速度快于低剂量组,GSH-Px活性高于低剂量组。结论血脂康在调脂降糖的同时能提高坐骨神经传导速度,减轻神经组织氧化应激,对周围神经具有保护作用,其作用独立于调脂降糖。     

益气活血通络方对db/db小鼠胰腺组织JNK信号通路及IL-1β、TNF-α表达的影响

目的:观察益气活血通络方对db/db小鼠胰腺组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路及炎症因子表达的影响,探讨益气活血通络方对胰岛细胞炎性损伤的保护作用及其机制。方法:用自发性2型糖尿病C57BL/Ks J-db/db小鼠为动物模型,将db/db小鼠随机分成模型组、硫辛酸组(0.078g/kg)、益气活血通络方6.4、3.2、1.6g/kg剂量组,另取10只db/m小鼠为正常对照组,连续灌胃给药8周,模型组给予生理盐水。药前、药后4周和8周测定小鼠血糖。实验结束后,摘取胰腺组织,HE染色法观察病理变化,ELISA法检测小鼠胰腺组织胰岛素含量,Western bloting与免疫组织化学法检测IL-1β、TNF-α、JNK、p-JNK蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组胰岛细胞出现严重的病理性损伤,药后4周和8周血糖、胰腺组织中IL-1β、TNF-α、P-JNK蛋白的表达水平明显高于正常组;与模型组比较,益气活血通络方组胰岛细胞病理损伤程度减轻,血糖降低,胰腺组织胰岛素含量升高,胰腺组织IL-1β、TNF-α、P-JNK蛋白表达水平显著下降。结论:益气活血通络方能够减轻db/db小鼠胰岛细胞损伤,可能与降低炎症因子表达,抑制JNK信号通路过度激活有关。     

三七皂苷Fc对糖尿病db/db小鼠肾组织α-dystroglycan表达的影响

目的:研究三七皂苷Fc对2型糖尿病db/db小鼠肾脏足细胞的保护作用及机制。方法:8周龄雄性db/db及其同窝对照db/m小鼠分为db/m对照组,db/db模型组及db/db模型+三七皂苷Fc治疗组,每组5只。三七皂苷Fc组给予三七皂苷Fc 5 mg/(kg·d)橄榄油溶液灌胃,db/m对照组,db/db模型组给予等量橄榄油灌胃,连续8周。分别采用HE染色法(Hematoxylin-Eosin staining)和PAS染色法(Periodic Acid-Schiff staining)检测肾脏病理损伤;采用透射电镜观察小鼠肾组织足细胞超微结构。免疫组织化学方法检测肾组织足细胞黏附分子α-dystroglycan表达。结果:与db/db模型组比较,三七皂苷Fc组可明显改善肾脏病理损伤及足细胞足突融合。此外,三七皂苷Fc还可明显上调db/db小鼠肾组织α-dystroglycan表达。结论:三七皂苷Fc可上调2型糖尿病db/db小鼠肾组织α-dystroglycan表达,改善足细胞损伤,从而降低尿蛋白,延缓DN进展。     

番石榴叶抑制db/db小鼠肾脏TGF-β1蛋白表达研究

目的:观察番石榴叶提取物对自发2型糖尿病db/db小鼠肾脏HE染色及TGF-β1免疫组化的影响,探讨其肾脏保护的机制。方法:10周龄雄性肥胖db/db小鼠16只,适应性喂养2周后,随机分为模型组和番石榴叶提取物组,所有动物给予高脂饲料喂养,番石榴叶提物组按照0.11g/kg灌胃(相当于生药材2g/kg),模型组给予同体积蒸馏水灌胃,疗程为12周。每4周观察体重、血糖变化,试验结束后,HE染色观察肾脏病理变化,免疫组化法观察TGF-β1蛋白表达。结果:与对照组相比,经过12周的治疗后,番石榴叶提取物显著降低db/db小鼠体重和血糖。HE染色结果显示,番石榴叶提取物可以显著改善db/db小鼠肾小球系膜细胞增生、球旁器增生,颗粒样变性。免疫组化结果提示,番石榴叶提取物可以显著下调db/db小鼠肾脏TGF-β1蛋白表达(P0.05)。结论:番石榴叶提取物通过抑制肾脏组织TGF-β1免疫组化蛋白表达,改善db/db小鼠糖尿病肾病肾脏纤维化。     

蛭龙活血通瘀胶囊对db/db小鼠心肌组织中脂联素、ICAM-1、VCAM-1的影响

目的:探讨蛭龙活血通瘀胶囊通过调节脂联素,改善db/db小鼠心肌组织内皮功能的保护作用。方法:8周龄db/db小鼠随机分为模型组、罗格列酮4 mg/kg组、蛭龙活血通瘀胶囊50、100、200 mg/kg组,同周龄db/m小鼠为正常对照组。药物干预16周后,记录体质量、心脏质量,测定空腹血糖(FBG)、心脏功能检测,免疫组化染色观察IL-1β、P65的表达,qPCR检测脂联素、ICAM-1及VCAM-1 mRNA水平,ELISA检测血清脂联素、TC、TG等含量。结果:与正常组比较,db/db小鼠发生了肥胖、产生了高血糖、高血脂,心脏超声检测提示模型小鼠左心室壁明显增厚,射血分数均明显下降,心功能明显减退;脂联素mRNA明显下调及血清含量明显减低,ICAM-1、VCAM-1 mRNA水平上调。与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊200 mg/kg干预后,可以明显改善心功能,提高射血分数,上调脂联素从而抑制ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表达。结论:蛭龙活血通瘀胶囊改善db/db小鼠心脏功能可能与上调脂联素,抑制ICAM-1、VCAM-1的表达有关。     

红芪多糖对db/db小鼠糖尿病心肌病心肌组织TGF-β1与Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的:通过研究红芪多糖对db/db小鼠糖尿病心肌病心肌组织中TGF-β1与Collagen Ⅰ表达的影响,探讨其对db/db小鼠心肌纤维化的作用。方法:将60只6周龄雄性db/db小鼠随机分为5组:模型组、红芪多糖200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg剂量组和罗格列酮4mg/kg组;正常组为12只同周龄同背景的非转基因雄性db/m小鼠。连续灌胃干预8周,于给药前及给药后第2、4、6、8周末检测各组小鼠空腹血糖及体重;Masson染色观察小鼠左心室心肌胶原纤维化程度;Western blot、RT-PCR法检测心肌组织TGF-β1与Collagen I的蛋白和m RNA表达。结果:干预治疗8周后,红芪多糖200mg/kg、100mg/kg剂量组和罗格列酮4mg/kg组血糖较模型组明显下降;Masson染色可见亮绿色胶原纤维在模型组心肌细胞间及血管周围较正常组明显增多且呈堆积状分布;模型组TGF-β1与Collagen I蛋白及m RNA表达水平与红芪多糖50mg/kg剂量组无显著差异,其余各治疗组较模型组明显降低,其中红芪多糖200mg/kg剂量组和罗格列酮4mg/kg组改善更明显。结论:红芪多糖对db/db小鼠心肌纤维化具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的异常表达而降低Collagen I降解实现的。     

db／db2型糖尿病小鼠的肠道、门脉血中LPS水平与血糖的相关性分析

目的：探讨LPS水平与2型糖尿病血糖相关性。方法：采用db／db2型糖尿病小鼠db／db组和对照组db／m,收集门脉血、结肠组织并取匀浆液,用酶联免疫法（ELISA）测定肠道、门脉血中脂多糖的水平;用血糖仪测血糖值。结果：db／db模型组与db／m组相比,肠道LPS水平高（P〈0．05）,门脉血中LPS水平高（P〈0．05）,肠道比门脉血中LPS水平高（P〈0．05）,FPG是高的（P〈0．05）,结肠、门脉血中LPS分别与血糖成正相关（r=0．72,P〈0．01;r=0．71,P〈0．01）。结论：LPS水平与2型糖尿病的血糖有关,可为糖尿病的机制的研究提供有力的依据。     

橄榄苦甙改善db/db小鼠肝脏胰岛素抵抗作用机制研究

目的：本研究主要观察橄榄苦甙（OL）改善肥胖db/db小鼠胰岛素抵抗的作用机制。方法：6-8周龄雄性db/db小鼠12只,按体质量和随机血糖随机分为OL组和模型组,每组6只,另设同周龄C57BL/6J小鼠6只为正常组。OL组灌服OL水溶液50mg·kg^-1体重,其余组给以等剂量生理盐水。治疗4周后,检测各组小鼠的空腹血糖（FBG）、胰岛素水平、计算胰岛素抵抗指数以及口服葡萄糖耐量实验（OGTT）,取肝脏组织,采用RT-PCR、Western Blot检测相关基因和蛋白表达。结果：治疗4周后,与模型组比较,OL组体重、空腹血糖、血清胰岛素水平和胰岛素抵抗指数显著降低（P<0.05或P<0.01）;OGTT实验后,OL组血糖明显低于模型组（P<0.01）;OL组小鼠肝脏组织InsR、IRS-1、GLUT-2 mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论：OL通过提高肝脏InsR、IRS-1、GLUT-2 mRNA和蛋白的表达起到降低血糖、改善胰岛素抵抗的作用。     

黄连水煎液对胰岛依赖型小鼠糖尿病模型的影响

目的:研究黄连水煎液对小鼠胰岛修复功能的影响,探讨黄连对高血糖的治疗作用及初步作用机制,为临床应用提供实验依据。方法:采用四氧嘧啶造高血糖模型,观察黄连水煎液对胰岛依赖型小鼠糖尿病模型体质量、血糖、胰岛B细胞形态的影响。结果:黄连水煎液能降低模型小鼠血糖,并能有效控制模型小鼠体质量下降且呈剂量依赖性,其中分别在第7、14天黄连水煎液高剂量组与模型组比较有显著性差异(P0.05),西药(二甲双胍)组与模型组比较有显著性差异(P0.01)。病理观察:黄连水煎液组胰岛B细胞形态均比模型组和西药组好,且成剂量依赖性。结论:黄连水煎液能显著降低胰岛依赖型糖尿病模型小鼠的血糖,能有效控制模型小鼠体质量下降,但短期效果均不如二甲双胍;并且对胰岛B细胞形态有明显的修复作用。     

鱼腥草合剂对db/db糖尿病小鼠肾损伤的影响

目的:比较鱼腥草合剂醇提液和水提液对db/db小鼠肾脏损伤的作用,并探讨鱼腥草合剂防治2型糖尿病肾病的机制。方法:8周龄的db/m和db/db小鼠分为4组:db/m正常小鼠对照组;db/db糖尿病小鼠对照组;db/db糖尿病小鼠鱼腥草合剂醇提液156 mg.kg-1治疗组;db/db糖尿病小鼠鱼腥草合剂水提液156 mg.kg-1治疗组。经鱼腥草合剂ig治疗4,8周后,观察小鼠体重、24 h尿白蛋白(Alb),血清胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)、胰岛素敏感指数(IAI)等生化指标的情况。结果:鱼腥草合剂在治疗8周后,血糖、胆固醇、24 h尿白蛋白与对照组相比,均有下降,改善了高脂血症、高血糖症、高胰岛素血症。结论:鱼腥草合剂具有改善糖尿病肾病的作用,其作用机制可能与降低微量尿白蛋白及改善胰岛素抵抗相关。     

Anti-hyperglycemic effects and mechanism of Bidens pilosa water extract

Aim of study

Bidens pilosa has traditionally been used as an anti-diabetic phytomedicine. However, its alleged benefits and mechanism remain elusive. This study aimed to evaluate the effect and action of Bidens pilosa water extract on type 2 diabetes.

Materials and methods

A daily dose of Bidens pilosa water extract or glimepiride, a positive control, was given orally to C57BL/KsJ-db/db mice once or for 28 days. Levels of blood glucose, serum insulin, and glycosylated hemoglobulin A1C, glucose tolerance, and islet structure were used to evaluate its anti-diabetic effects in db/db mice. Rat pancreatic islets and streptozocin-treated mice were tested for insulin-releasing mechanism of Bidens pilosa water extract.

Results

A daily dose of Bidens pilosa water extract given once or for 28 days significantly decreased blood glucose levels and increased serum insulin levels in db/db mice. Besides, 28-day treatment with Bidens pilosa water extract significantly improved glucose tolerance, decreased HbA1C levels and protected islet structure in db/db mice. Mechanism study showed that Bidens pilosa water extract stimulated insulin secretion via pancreatic islets.

Conclusions

Our results suggest that Bidens pilosa water extract ameliorates type 2 diabetes in db/db mice via regulation of insulin secretion and islet protection.     

血脂康胶囊治疗血脂异常随机平行对照研究

[目的]观察血脂康胶囊治疗血脂异常疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将70例门诊患者按随机数字表分为两组。对照组25例血脂康胶囊模拟剂,2粒/次,2次/d。治疗组45例血脂康胶囊,2粒/次,2次/d。连续治疗8周为1疗程。观测血脂水平TC(总胆固醇)、TG(甘油三脂)、HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇):用药前2周、用药后当日、4周后及疗程结束后各检测1次。连续治疗2疗程,判定疗效。[结果]治疗组显效18例,有效20例,无效7例,总有效率84.44%。对照组显效2例,有效5例,无效18例,总有效率28.00%。治疗组疗效优于对照组(P0.05)。血脂水平对照组治疗前后无明显差异(P0.05);治疗组治疗前后有显著性差异(P0.05)。[结论]血脂康胶囊治疗血脂异常效果显著,值得推广。     

补肝益肾清脂饮对高脂血症大鼠的血脂干预研究

目的：通过研究补肝益肾清脂饮对实验性高脂血症大鼠的影响,观察其对血脂的影响。方法：选取Wistar大鼠,雄性,体重（180±20）g,将其随机分为6组,10只／组,分别为空白对照组,高脂模型组,清脂饮大、中、小剂量组,血脂康组。空白组正常饮食;高脂模型组喂食高脂饲料;药物组除高脂饮食外,每日给予相应的药物灌胃;各组每鼠每日喂20g,连续喂食6周。干预6周后,检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）含量。结果：补肝益肾清脂饮对高脂血症大鼠血清TC、TG、LDLC水平（P〈0．05或P〈0．01）有降低作用,并能升高HDLC水平（P〈0．05）。结论：补肝益肾清脂饮对高脂血症大鼠具有调节血脂的作用。     

复方糖耐康对GK大鼠胰脏的组织学影响

目的：观察中药复方糖耐康对自发性2型糖尿病GK大鼠胰脏组织病理变化的影响。方法：将50只SPF级GK大鼠按照血糖值随机分为5组：模型组、吡格列酮组、糖耐康低剂量组、糖耐康中剂量组、糖耐康高剂量组,并设Wistar大鼠10只作为正常对照组,连续给药8周,测定OGTT、空腹血清胰岛素、并计算胰岛素抵抗指数、观察胰脏的病理变化。结果：与正常对照组比较,GK大鼠空腹血糖正常或轻度升高,负荷2h后血糖明显升高;空腹血清胰岛素水平升高,呈高胰岛素抵抗状态;镜下观察到胰岛形态不规则,胰岛数及岛内细胞数目减少,胰岛细胞颗粒脱失,核大小不等,胰岛细胞被增生血管纤维所分隔,胰岛纤维化。糖耐康各剂量组及西药吡格列酮组对血糖、血清胰岛素及胰岛素抵抗指数以及胰腺病理变化均有不同程度改善,与模型组比较有显著差异。结论：中药复方糖耐康可通过降低血糖,改善胰岛素抵抗而发挥对胰岛细胞的保护作用。