天花粉蛋白对HeLa细胞抑制作用的实验研究

目的:研究天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用,探讨TCS抗肿瘤的作用机制。方法:采用MTT法检测TCS对Hela细胞的抑制作用,形态学观察、DNA电泳检测TCS对HeLa细胞的诱导凋亡作用。结果:TCS对HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用,DNA凝胶电泳呈梯级格局,DNA细胞出现断裂,细胞凋亡现象,凋亡比例具有剂量和时间依赖性。结论:天花粉蛋白通过诱导细胞发生凋亡而抑制宫颈癌He-La细胞的增殖。     

天花粉蛋白诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及APC基因去甲基化

目的:研究天花粉蛋白(TCS)抗宫颈癌作用机制。方法:MTT还原法检测TCS对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用,流式细胞仪检测TCS对HeLa细胞周期及凋亡率的影响,MSP检测TCS作用前后APC基因启动子甲基化状态。结果:TCS对HeLa细胞的生长具有明显的抑制作用,呈剂量依赖性;TCS可以将HeLa细胞阻滞于S期;TCS诱导HeLa细胞发生凋亡,有剂量依赖性;80 mg/LTCS处理HeLa细胞48 h后,APC基因启动子出现去甲基化。结论:TCS对HeLa细胞有明显抑制作用,抑制机理与将HeLa细胞阻滞于S期、诱导细胞凋亡及APC基因启动子出现去甲基化有关,TCS有良好的抗宫颈癌临床应用前景。     

天花粉蛋白对结肠癌细胞株SW-1116凋亡的影响

目的探讨天花粉蛋白抗肿瘤的机制，为天花粉蛋白在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法采用流程式细胞仪检测结肠癌细胞株SW-1116凋亡。结果501μmol／L、1001μmol／L、2001μmol／L天花粉蛋白能够诱导结肠癌细胞株SW-1116凋亡，凋亡率与剂量呈正相关，SW-1116的凋亡随药物浓度及作用时间变化，细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。结论天花粉蛋白能诱导结肠癌细胞凋亡，并明显抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用。     

天花粉蛋白对结肠癌细胞株SW-1116凋亡的影响

目的探讨天花粉蛋白抗肿瘤的机制,为天花粉蛋白在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法采用流程式细胞仪检测结肠癌细胞株SW-1116凋亡。结果50!mol/L、100"mol/L、200#mol/L天花粉蛋白能够诱导结肠癌细胞株SW-1116凋亡,凋亡率与剂量呈正相关,SW-1116的凋亡随药物浓度及作用时间变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高,并出现典型的凋亡峰。结论天花粉蛋白能诱导结肠癌细胞凋亡,并明显抑制癌细胞增殖,具有抗肿瘤作用。     

天花粉蛋白对胃癌细胞株SGC-7901凋亡影响的体外研究

目的：探讨天花粉蛋白（TCS）抗肿瘤的机制，为TCS在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法：采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。结果：50、100、200μmol／LTCS能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡，凋亡率与剂量呈正相关，SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化，细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。结论：TCS能诱导胃癌细胞凋亡，并明显抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用。     

天花粉蛋白对A549细胞增殖和细胞凋亡的影响

目的 观察天花粉蛋白对人肺腺癌细胞株A549生长增殖的影响和在体外诱导A549肺腺癌细胞凋亡的效果.方法 应用MTT法检测栝萎中提取的天花粉蛋白对A549细胞生长增殖的影响,DNA Ladder凝胶电泳及流式细胞术检测天花粉蛋白对A549细胞的诱导凋亡作用.结果 经天花粉蛋白处理后A549细胞生长明显受抑,并呈一定的剂量时效依赖性;流式细胞仪直方图出现明显的亚二倍体峰,经TCS(40 μg/ml)处理48 h、72 h后A549细胞的凋亡率分别为(27.00±2.08)%和(39.43±4.92)%,均高于顺铂组(2 μg/ml)(P＜0.01).结论 天花粉蛋白在体外能抑制A549肺腺癌细胞的生长繁殖,并能诱导该细胞发生凋亡.     

天花粉蛋白对结肠癌细胞株CMT-93凋亡及增殖的影响

目的探讨低剂量天化粉蛋白（TCS）对结肠癌细胞株CMT-93凋亡及增殖的影响。方法以不同质量浓度的TCS对体外培养的CMT-93进行十预,设立未添加TCS的CMT-93作为对照组,利脂实时细胞动态监测（RTCA）系统检洲细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡,Real—TimePCR检测细胞凋亡相关基因的表达,Westernblotting检测丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶Akt和γ-H2AX蛋白表达以及Akt磷酸化水甲（pAkt473和pAkt308蛋白表达）。结果与对照组比较,5．0μg／ml。TCS干预能使CMT-93增殖活性降低,细胞凋亡率升高;促凋产相关蛋hBid、Bax、BadmRNA表达上调;pAkt473和pAkt308蛋门表达减少,γ-H2AX蛋白表达增加。结论TCS对结肠癌细胞株CMT-93具有诱导凋亡和抑制增殖的作用;其机制可能与TCS通过抑制Akt的活性,进而激活促凋亡相关蛋白诱导细胞发生凋亡,以及TCS的DNA损伤作用有关。     

天花粉蛋白诱导人宫颈癌HeLa细胞调亡的分子机制研究

目的：利用基因芯片技术研究天花粉蛋白对人宫颈癌Hela细胞基因表达谱的影响,以深入探讨其作用的分子机制.方法：提取药物处理前后HeLa细胞RNA并逆转录成cDNA,在获得的cDNA上分别标记CY3和CY5两种荧光物质,然后与BiostarH-I 表达谱芯片杂交,扫描后对获得的数据用GenePix Pro 3.0软件分析.结果：两组间存在差异性表达基因78条,其中与细胞黏附及细胞间相互作用相关的MGST3、LGALS3BP等16条基因表达下降,与细胞凋亡密切相关的NOP56、TNFSF10、CASP9、DFFB等62条基因表达上调.结论：基因芯片技术能高通量分析天花粉蛋白作用于HeLa细胞的相关靶基因,为进一步揭示天花粉蛋白的抗癌机制提供了新的思路.     

天花粉蛋白体外诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:本研究探讨天花蛋白(Trichosanthin,TCS)对HL-60细胞凋亡的影响。方法:采用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率;光学显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:TCS抑制HL-60细胞的增殖,促进其凋亡,随作用时间的延长、TCS浓度的增加,增殖抑制及促凋亡作用更加明显。结论:TCS对HL-60细胞有时间和剂量依赖性的细胞凋亡诱导效应。     

天花粉蛋白对胃癌细胞株SGC-7901凋亡影响的体外研究

目的:探讨天花粉蛋白(TCS)抗肿瘤的机制,为TCS在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法:采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。结果:50、100、200μmol/LTCS能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,凋亡率与剂量呈正相关,SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高,并出现典型的凋亡峰。结论:TCS能诱导胃癌细胞凋亡,并明显抑制癌细胞增殖,具有抗肿瘤作用。     

慢性低O2高CO2对大鼠海马Bcl-2、Bax基因表达和细胞凋亡的影响

目的：探讨慢性低O2高CO2对大鼠海马神经细胞凋亡的诱发作用及对Bcl-2、Bax基因表达的影响。方法：雄性SD大鼠50只,随机均分成5组：正常对照组（NC）、低O2高CO21周组（1HH）、2周组（2HH）、3周组（3HH）和4周组（4HH）。采用TUNEL法检测海马神经细胞凋亡;以RT-PCR检测海马Bcl-2mRNA和BaxmRNA的表达。结果：随着低O2高CO2时间延长,凋亡指数（AI）及BaxmRNA水平进行性升高;Bcl-2mRNA先升高后下降（均P〈0.01）。AI与BaxmRNA之间呈显著正相关（r=0.814,P〈0.01）,而与Bcl-2mRNA/BaxmRNA比值之间呈显著负相关（r=-0.405,P〈0.01）。结论：慢性低O2高CO2可以诱发大鼠海马神经细胞凋亡,Bcl-2/Bax比值下降是促进凋亡的重要因素。     

大蒜素调节Bcl-2/Bax促进宫颈癌U14细胞凋亡的研究

目的探讨大蒜素对小鼠宫颈癌U14细胞凋亡的影响及作用机制。方法体外培养U14细胞,将细胞分为对照组(不加大蒜素处理组)和大蒜素组(质量浓度分别为5、10和20mg.L-1)。采用四甲基偶氮噻唑蓝法测定大蒜素作用24、48、72h时对U14细胞的增殖抑制率;膜联蛋白A5-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测U14细胞的凋亡率;逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法分别检测U14细胞Bcl-2和Bax mRNA和蛋白的表达水平。结果 5、10和20mg.L-1大蒜素组对U14细胞增殖的抑制率:24h时分别为(6.6±1.41)%、(23.5±2.79)%和(58.9±1.65)%,48h时分别为(25.5±2.89)%、(47.9±8.78)%和(69.5±3.72)%,72h时分别为(58.9±1.66)%、(78.9±1.19)%和(92.6±7.33)%,均显著高于对照组(P<0.05),且细胞增殖抑制率呈浓度和时间依赖性。5、10和20mg.L-1大蒜素组作用24h后,细胞凋亡率分别为(9.22±0.55)%、(22.34±1.53)%和(35.73±1.98)%,与对照组的(3.23±0.35)%比较差异有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性。与对照组比较:10、20mg.L-1组Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而10、20mg.L-1组Bax mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。结论大蒜素可能通过上调Bax表达,下调Bcl-2的表达诱导U14细胞凋亡。     

精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究精索静脉曲张(VC)对青春期大鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因Bcl-2／Bax表达的影响,探索精索静脉曲张致不育的机理。方法 通过部分结扎左肾静脉建立青春期大鼠实验性精索静脉曲张模型,分别于术后2周、4周、8周取双侧睾丸,用免疫组化SABC法检测Bcl-2／Bax基因表达。结果 随着精索静脉曲张时间的延长,Bcl-2表达呈下降趋势,曲张组比对照组低,左侧睾丸比右侧睾丸低;而Bax表达呈增加趋势,曲张组比对照组高,左侧睾丸比右侧睾丸高。结论 实验性精索静脉曲张可明显改变青春期大鼠睾丸组织生精细胞凋亡相关基因与Bcl-2／Bax表达。     

石斛合剂对糖尿病模型大鼠胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

研究石斛合剂对高糖、高脂+STZ造模糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡及相关基因Bax、Bcl-2mRNA表达的影响。方法大鼠高脂、高糖饲养1个月后腹腔注射STZ(30mg)制备糖尿病模型,经石斛合剂(7.5、15.0、30.0g.kg-1)治疗2周后检测胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA的表达。结果石斛合剂可显著地降低糖尿病大鼠空腹血糖(P<0.05或P<0.01);石斛合剂可显著减少糖尿病模型大鼠胰岛细胞凋亡(P<0.05),降低Bax mRNA表达(P<0.05),增加Bcl-2mRNA表达(P<0.05或P<0.01))。结论石斛合剂可降低血糖、减少大鼠胰岛细胞凋亡,可能与其降低糖尿病模型大鼠胰腺组织Bax、增加Bcl-2表达有关。更多还原     

玉竹提取物B对Hela细胞凋亡的影响

目的 观察中药玉竹提取物B(EB—PAOA)是否能引起人宫颈癌Hela细胞的凋亡。方法 将体外培养的人宫颈癌Hela细胞与不同浓度的EB—PAOA共育，通过倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察，确认凋亡细胞；通过流式细胞仪检测凋亡率和细胞周期的分布。结果 经过EB—PAOA处理后，在倒置显微镜和透射电镜下可观察到EB—PAOA引起的典型的凋亡形态学变化；流式细胞仪测定显示经EB—PAOA处理后的Hela细胞凋亡率呈时间-剂量依赖性，G0／G1期细胞减少，S期细胞减少，G2／M期细胞增多。结论 EB—PAOA能够诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡，EB—PAOA抑制Hela细胞生长的机制之一是诱导该细胞凋亡。     

Bax蛋白在丁酸钠诱导食管癌细胞凋亡中的表达

目的:探讨丁酸钠对人食管癌Eca-109细胞凋亡的作用。方法:以1 mmol/L、2.5 mmol/L和5 mmol/L丁酸钠分别与人食管癌Eca-109细胞共培养,倒置显微镜观察细胞生长情况,免疫组化(SP)法检测凋亡抑制基因bax蛋白的表达。结果:Eca-109细胞经丁酸钠处理后,在倒置显微镜下观察到丁酸钠处理后的Eca-109细胞形态学发生了改变,细胞生长明显受到抑制;免疫组化检测实验组细胞的bax蛋白表达阳性率低于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:丁酸钠可诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,其机制与下调凋亡抑制基因bax蛋白表达有关。     

输精管复通对生精细胞中Bcl-2及Bax基因蛋白表达的影响

为了解Bcl-2及Bax基因在输精管复通后大鼠生精细胞中的表达情况，作者建立了大鼠输精管结扎和复通模型，应用免疫组化法观察Bcl-2及Bax基因在大鼠输精管复通后生精细胞中的表达变化。结果显示：输精管复通组Bcl-2基因表达逐渐增强，复通后8周显著地强于输精管结扎组，到12周同假手术组；而输精管复通组的Bax基因表达无改变，与输精管结扎组无差异，都显著地强于假手术组。Bcl-2基因蛋白表达的变化说明在输精管结扎后，以及输精管复通后均发挥了抗凋亡的作用，而Bax基因蛋白表达在输精管复通前后的一致性，说明其对生精细胞凋亡作用有待进一步研究。