原发性胃癌中DCC抑癌基因杂合性丢失的研究

目的：探讨原发性胃癌组织中结直肠癌缺失基因（deleted in colorectal carcinoma.DCC)杂合性丢失（loss of heterozygosity,LOH)的情况及其与胃癌临床病理学间的关系。方法：用多聚酶链反应－单链构相多态性（PCR－SSCP）银染法分析49例原发性胃癌组织中DCC的杂合性丢失。结果：D18S484位点发生LOH的频率为26．6％（12／45），D18S487为23．9％（11／46），DCC发生LOH的频率为36．7％（18／49）。36．8％（7／19）的肠型胃癌发生DCC LOH，24．0％（6／25）的弥漫型胃癌发生DCC LOH，而100％（5／5）的混合型胃癌为DCC LOH（P＜0．05）。在淋巴结有转移的胃癌中，52％（13／25）的原发性胃癌发生DCC LOH，无转移者中为20．8％（5／24）（P＜0．05）；发生远处转移者，原发性胃癌DCC LOH为100％（3／3），而无转移者为32．6％（15／46）（P＜0．05）；在TNM Ⅲ、Ⅳ期中DCC LOH为50．0％（12／24），有高于TNM I、Ⅱ期（24％，6／25）的趋势（P＝0．059）。DCC LOH与病人的性别、年龄、肿瘤发生部位、大小、组织学分级均无统计学意义（P＞0．05）。结论：DCC的杂合性丢失可能在胃癌的发展和转移中起重要作用，是胃癌发展后期的重要分子事件。     

激光捕获显微切割结合RNA线性扩增技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用

目的 当对有问质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与癌细胞进行基因差异表达分析时，激光捕获显微切割技术(LCM)是不可缺少的。LCM与RNA线性扩增结合，目的是确定一条可行的技术路线，获取均质的、足量的RNA，以备进一步用于膀胱癌相关基因研究。方法 采用LCM技术分别从正常膀胱黏膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及癌细胞，提取RNA，并对120ng上皮细胞RNA进行线性扩增，获得aRNA 20μg。用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)验证扩增前、后RNA中β-actin基因表达水平。结果对照实验Ⅰ证实LCM后RNA完整性较好；产物RNA扩增后获得片段大小为0．5～2．5kb的水NA，且β-actin表达完整。结论 LCM结合RNA线性扩增技术获取均一的、足量的、完整性好的目的细胞RNA．能用干讲一步研究．     

激光捕获显微切割技术在神经科学研究中的应用进展

背景 激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)是一项在显微镜直视下应用激光技术从组织中分离同质细胞,进行后续研究的新技术.目的 现就LCM的基本原理和分类、在神经科学研究的近期应用、主要进展及未来发展作一综述.内容 近年来随着样本切片制备、染色、核酸提取和扩增等辅助技术的改进,该技术在神经科学的研究中得到广泛应用,且表明其具有显著优势.趋势 针对神经科学研究的特点,进一步探索和改进相关技术,促进LCM技术在神经科学研究领域中的应用.     

激光捕获显微切割技术及其在男科学研究中的应用

激光捕获显微切割技术是近年发展起来的一种新技术。该技术可以在显微镜下快速地从由多细胞组成的组织中捕获感兴趣的单一同类细胞群甚至单个细胞。这一技术迅速地被运用到疾病发生的细胞和分子机制的研究之中。这将有利于提高疾病的诊断、治疗及预后判断的水平。本文就激光捕获显微切割技术目前在男科学研究中的应用作一综述。     

胃癌表型与5p15.33位点等位基因丢失相关性研究

目的 探讨胃癌5p15．33区微卫星标记杂合性缺失（LOH）与临床病理学表型的相关性。方法 抽提80例胃癌标本及其配对正常胃黏膜中基因组DNA，应用4个微卫星标记对5p15．33区进行LOH检测并与Lauren分型等临床病理学指标分析。结果 有76例临床信息齐全病例纳入统计分析。5p15．33区4个微卫星标记平均信息性病例比例为71．05％。其中31．58％（24／76）病例至少一个位点检测到LOH，以D5S2849位点LOH频率最高（37．25％）。5p15．33位点LOH以肠型胃癌多见（P〈0．01），与年龄、性别、部位、肿瘤大小、TNM分期及有无淋巴结转移无明显关系。结论 5p15．33区可能存在控制胃癌形态学表型的候选抑癌基因，但该基因可能不是决定其他临床表型的主要基因。     

微小卫星DNA在膀胱肿瘤研究中的应用

本文通过阐述微卫星DNA的概念、分类及生物学意义 ,说明了微小卫星DNA在膀胱肿瘤研究中的现状 ,指出 9号染色体上存在着与膀胱肿瘤发生发展相关的多个基因     

抑癌基因微卫星杂合性丢失在膀胱癌诊断中的应用

目的探讨抑癌基因p16、p53、VHL的微卫星（MS）DNA杂合性丢失（LOH）的发生率与膀胱移行细胞癌（TCC）临床分期、病理分级的关系。方法随机提取50例膀胱TCC组织标本DNA,并取50例癌旁正常膀胱黏膜作对照；提取40例患者尿液标本DNA,取位于p16、p53、VHL的6个微卫星位点引物行PCR扩增,8％变性聚丙烯酰胺电泳,银染结果检测杂合性丢失与TCC分期、分级的关系。结果50例TCC标本中,6个微卫星位点中至少1个位点LOH阳性者45例（90．0％）；40例尿液标本中,以上位点至少1个位点LOH阳性者35例（87．5％）,尿脱落细胞组织学检查阳性者25例（62．5％）,主要见于中、晚期肿瘤。p16、p53、VHL基因6个微卫星位点中,LOH阳性率由高到低分别为D9s259（76．3％）、D9s270（65．7％）、D17s786（50．0％）、D3s1284（41．7％）、D3s1038（41．2％）、D17s379（40．5％）。D9s259、D9s270、D3s1038、D17s786的LOH阳性率与TCC分期、分级无关,D3s1284、D17s379主要见于高分期、分级肿瘤。结论TCC组织标本和尿液标本抑癌基因微卫星位点LOH检测是一项新颖、高敏感的方法,D9s259、D9s270、D3s1038、D17s786可用于膀胱肿瘤的早期诊断,D3s1284、D17s379可作为膀胱肿瘤判断预后的指标。     

激光捕获显微切割制备垂体腺瘤蛋白质组学研究样品

目的 探讨应用免疫组织化学导航激光捕获显微切割(LCM)技术获取高同质性泌乳素垂体腺瘤细胞及正常垂体泌乳素细胞的方法及可行性.方法 冰冻泌乳素腺瘤标本及对照正常垂体常规制备8μm冰冻覆膜切片,采用两步法免疫组织化学方法染色;应用LCM技术切割腺瘤内及正常对照垂体内泌乳素细胞;选择性获取同质泌乳素细胞和配对正常细胞.结果 60 min内完成免疫组织化学染色,细胞显色较理想.采用4μm紫外线激光可以准确、快速地分离片状甚至单个泌乳素分泌细胞;无间质细胞污染,细胞形态保持完好.结论 应用LCM技术可以成功获垂体瘤蛋白组学研究中的异质性问题,所获组织同质性高、操作过程稳定是垂体瘤蛋白质组学研究较有价值的样品制备方法.     

单细胞测序技术在胃癌研究中的应用

胃癌是一种高异质性肿瘤,传统测序方式通常将胃癌组织或细胞当做整体进行分析,易忽视其中各个细胞亚群的作用。作为一种新兴技术,单细胞测序可在单个细胞水平对基因组、转录组等多组学进行分析,可识别胃癌组织中的罕见细胞亚群,有助于解析胃癌的发生发展轨迹。本文就单细胞测序的优势、流程以及在胃癌研究中的应用进行综述,并探讨其应用前景...     

Microsatellite analysis in multiple chromosomal regions as a prognostic indicator of primary bladder cancer

This study investigated gene abnormalities in bladder cancer patients and the relationship between chromosomal alteration and the clinical outcome using microsatellite analysis. A total of 45 human bladder tumor patients were analyzed. The microsatellite markers for 18q21.1 (D18S46, D18S363, and D18S474), 9p21–22 (D9S171, D9S747, D9S1747, and IFNA), and 17p13.1 (TP53) were used for the loss of heterozygosity (LOH) detection. The clinical outcomes were estimated with univariate and multivariate analyses. The results show that patients with LOHs in 18q21.1 and 9p21–22 exhibited a significantly poor prognosis. LOHs of these chromosomal regions had the most predictable potential compared with the other known prognostic factors, such as tumor grade, TNM stage, and age. It is concluded that microsatellite analysis for 18q21.1 and 9p21–22 is capable of predicting the clinical outcome of bladder cancer patients. Received: 24 April 1999 / Accepted: 28 July 2000     

胃癌与上皮内瘤变差异基因表达谱的研究

目的 观察胃癌与上皮内瘤变(GIN)的差异基因表达.方法 利用基因芯片技术,筛选12例胃癌与12例GIN胃镜病理标本的差异表达基因.结果 通过t检验和SAM检验筛选差异基因185个,它们与细胞黏附、血管生成、细胞增殖与凋亡等有关,与Wnt信号通路,血管内皮生长因子(VEGF)信号通路,酪氨酸蛋白激酶/信号转导及转录激活因子(JAK/STAT)信号通路,p53信号通路等细胞通路密切相关,而这些细胞通路可能与胃癌的发生有关.结论 胃癌与GIN差异基因的筛选为后续胃癌分子机制的研究提供前期试验基础.     

腹腔镜、胃镜联合治疗早期胃癌的临床体会

目的:探讨腹腔镜与胃镜联合行早期胃癌手术的可行性和临床价值.方法:将2007年4月至2010年6月56例早期远端胃癌患者随机分为两组,其中实验组26例,施行腹腔镜联合胃镜胃癌根治术;对照组30例,施行常规开腹胃癌根治术,对比分析两组手术时间、术中副损伤、术中出血量、术后肠功能恢复、术后并发症及住院时间.结果:实验组与对...     

多种癌基因检测在青、老年胃癌中的对比研究

目的 观察多种癌基因在青，老年胃癌中异常表达特点的临床意义。方法 取９４例胃癌手术后石蜡切片，采用免疫组化法检测；ｐ５３，ｐ２１ｒａｓ，Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｎｍ２３－Ｈ１的表达情况。结果 ｐ５３在分化较差，浸润超出浆膜，有淋巴结转移的青年人胃癌的阳性表达率明显高于老年患者。ｐ２１ｒａｓ在浸润超出浆膜和有淋巴结转移的青年人胃癌阳笥表达率显著高于老年人胃癌。     

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目的探讨胃癌的临床病理特征与预后的关系。方法应用单因素和多因素的分析方法,回顾性分析1996年1月至2001年7月有完整临床病理资料和随访资料的256例胃癌病人的临床特点、病理特征及其预后影响因素。结果胃癌病人总的1、3年存活率分别为82.6%和63.1%。单因素分析显示,其预后与贫血、血小板增多、分化等级、浸润深度及转移情况均有相关性。应用Cox比例危险回归模型分析显示,血小板增多、浸润深度和转移情况是影响胃癌病人术后生存的独立因素。结论血小板增多是继肿瘤转移、肿瘤浸润深度后,影响胃癌预后的重要指标。     

Detection of loss of heterozygosity in theAPC tumor suppressor gene in nonpapillary renal cell carcinoma by microdissection and polymerase chain reaction

The role of theAPC (adenomatouspolyposiscoli) tumor suppressor gene in the genesis of nonpapillary renal cell carcinoma is addressed. The frequency of allelic deletion in theAPC gene was analyzed using microdissection of the tumor specimens and a PCR (polymerase chain reaction)-based assay for the detection of intragenic loss of heterozygosity (LOH). Twelve of 29 carcinomas investigated were informative (41%). In five of these (42%) LOH was detected in theAPC gene. LOH did not correlate with tumor grade or stage. This high frequency of intragenic LOH suggests an implication of theAPC gene or a closely linked gene in the genesis of a subset of nonpapillary renal cell carcinoma. The use of a microdissection technique allows the reliable detection of tumor-specific LOH when using a PCR-based assay.     

Her-2基因扩增与胃癌患者临床病理及预后相关性分析

目的 探讨胃癌组织中Her-2 的基因扩增比例与胃癌临床病理及预后的相关关系.方法 采用荧光原位杂交技术（FISH）法检测62 例胃癌组织中Her-2 基因扩增状态,结合临床病理及总生存率,分析Her-2 基因与临床病理参数、预后的相关性.结果 62 例胃癌组织中Her-2 阳性10 例（16.1%）,阴性52 例（83.9%）.Her-2 在胃癌组织中基因扩增与患者病理T 分期、N 分期、分化程度、远处转移有关（P 〈 0.05）; 而与性别、临床发病年龄、部位、CEA 增高（〉 5 μg/L）、脉管受侵无关;Kaplan-Meier 分析显示Her-2 基因扩增阳性组患者生存时间较阴性组短,差异有统计学意义（P 〈 0.05）.结论 胃癌原癌基因Her-2 与患者的临床及病理特征、5 年生存率有关.