肝癌病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞表达水平的临床研究

目的 了解CD4+CD25+FOXP3+T调节性T细胞在肝癌病人外周血中的表达水平并探讨其临床意义.方法 应用流式细胞术测定18例肝癌病人外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞百分比,并与26例l临床对照者和24例健康对照者进行比较.结果 肝癌病人外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞百分比(4.25%±3.98%)明显高于临床对照组(1.34%±1.14%)及健康对照组(1.29%±0.95%)(P＜0.01),而两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌病人外周血所占CD4+T细胞比率(2.94%±0.91%)也较临床对照组(0.76%±0.34%)及健康对照组(0.81%±0.29%)显著升高(P＜0.001),且升高幅度强于CD4+CD25+T细胞水平,两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).结论 CD4+CD25+FOXP3+T细胞是更为准确的调节性T细胞,其在肝癌病人外周血中表达水平明显升高,检测CD4+CD25+FOXP3+T水平对肝癌的预防治疗具有重要临床意义.     

胃癌患者围手术期CD28及调节性T细胞的动态变化

目的:探讨胃癌患者手术前后外周血CD4+CD25+T细胞和CD8+CD28+的表达变化及其意义,探讨其在胃癌的发病机制中的作用.方法:用流式细胞仪检测89例胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞表面的调节性T细胞和CD28的表达,并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较.结果:①术前胃癌组外周血中CD8+CD28+水平明显低于健康对照组和胃良性肿瘤组,CD4+CD25+水平显著增高;②胃癌组CD4+CD25+及CD8+CD28+表达水平随着临床分期的进展而有显著变化;③根治性及姑息性切除肿瘤后,CD8+CD28+表达显著升高;CD4+CD25+的表达明显降低.结论:胃癌患者外周血中CD8+CD28+表达水平低下,而具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞的数量较健康人明显增高,提示胃癌患者机体免疫功能低下,施行手术切除肿瘤有助于改善患者的细胞免疫功能.     

胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞的检测及其临床意义

目的 研究胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞含量,并探讨其含量与肿瘤的临床病理类型及临床分期的相关性.方法 应用流式细胞仪分析胰腺癌患者和健康对照组外周血中CD4-CD8-T细胞含量.结果 20例胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(4.13±1.81)%;20例健康对照组CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(6.39±1.83)%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).高、中分化的胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(4.41±1.66)%;低分化胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞比例为(4.18±2.32)%,两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(2.96±1.50)%;Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(5.09±1.50)%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 CD4-CD8-T细胞在胰腺癌中低表达,可能促进胰腺癌进一步发生发展.     

中央记忆T细胞和效应记忆T细胞亚群在肝癌患者外周血中分布特点分析

【摘要】 目的 研究肝癌患者外周血中CD45RO+记忆T细胞(memory T cells, Tm)表面标志CD45RO、CD62L和CCR7的表达,以了解CD45RO+CD62L+CCR7+T细胞(中央型记忆T细胞, central memory T cells,TCM)和CD45RO+CD62L-CCR7-T细胞(效应型记忆T细胞,effector memory T cells, TEM)亚群在肝癌患者外周血中的分布特点。方法〓获取正常人健康志愿者(正常对照组)28例和2011年8月至2013年8月的初诊慢性乙型病毒性肝炎患者(乙肝对照组)28例以及同期患有乙肝的肝癌患者(乙肝肝癌组)30例的外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC)。用多色流式细胞仪检测技术(polychromatic flow cytometry, PFC)检测外周血PBMC中记忆T淋巴细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD45RO、CD62L、CCR7的表达情况。结果〓乙肝肝癌组外周血PBMC中,CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞分别占外周血PBMC的比例显著高于乙肝对照组(28.15±12.32 VS 11.56±5.78,29.33±15.54 VS 13.11±6.64)(P<0.001,P=0.019);而较正常对照组无明显差异。乙肝肝癌组外周血PBMC的T淋巴细胞中CD4+TEM占CD4+T记忆淋巴细胞比例显著高于乙肝对照组、正常对照组(93.78±5.63 VS 75.82±19.74,93.78±5.63 VS 68.25±15.65)(P=0.001, P=0.018),而CD4+TCM则显著低于乙肝对照组、正常对照组(0.55±1.02 VS 4.87±6.28,0.55±1.02 VS 4.16±3.49)(P均小于<0.001)。三组的CD4+TEM记忆细胞占外周血PBMC中CD4+T记忆淋巴细胞的比例显著高于CD4+TCM记忆细胞占外周血PBMC中CD4+T记忆淋巴细胞的比例(91.78±5.63 VS 0.55±1.02,75.82±19.74 VS 4.87±6.28,68.25±15.65 VS 4.16±3.49)(P值均小于0.001)。乙肝肝癌组外周血PBMC的T淋巴细胞中CD8+TEM和CD8+TCM占CD8+T记忆淋巴细胞比例与乙肝对照组、正常对照组相比,差异均无显著意义。三组的CD8+TEM记忆细胞占外周血PBMC中CD8+T记忆淋巴细胞的比例显著高于CD8+TCM记忆细胞占外周血PBMC中CD8+T记忆淋巴细胞的比例(80.12±13.56 VS 3.25±2.47,79.21±11.34 VS 4.44±7.19,73.33±16.88 VS 2.66±3.10)(P值均小于0.001)。结论〓在乙肝肝癌组、乙肝对照组和正常对照组中,无论是CD4+T记忆淋巴细胞,还是CD8+T记忆淋巴细胞,均以TEM占绝大多数,而TCM比例很小。乙肝肝癌组中,CD4+TEM显著高于乙肝对照组和正常对照组,CD4+TCM显著低于乙肝对照组和正常对照组,而CD8+TEM和CD8+TCM则与乙肝对照组、正常对照组均无明显差异。     

不同分期前列腺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的相关性

目的 :观察不同分期前列腺癌患者外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系。方法:采用流式细胞术检测62例前列腺癌患者(患者组,临床TNM分期Ⅰ期5例、Ⅱ期16例、Ⅲ期21例、Ⅳ期20例)外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目,计算CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率;并检测其空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用ELISA法测定外周血胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗的相关性,并与42例健康体检者进行对照。结果:与健康对照组相比,前列腺癌患者HOMAIR明显升高(6.68±1.66 vs 3.68±1.42),IGF-1水平明显下降[(96.39±21.21)ng/ml vs(164.56±30.58)ng/ml],PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率[(13.88±0.96)%vs(5.33±0.65)%]及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值[(3.55±0.29)×107vs(1.99±0.78)×107]明显升高(P0.05,P0.01)。患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数﹑HOMA-IR均随TNM分期逐渐加重而增加,IGF-1逐渐下降;相关性分析表明:CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与HOMA-IR呈明显正相关(r分别为0.689、0.722,P0.01),与IGF-1呈明显负相关(r分别为-0.896、-0.747,P0.01)。结论:前列腺癌患者存在不同程度的胰岛素抵抗,且随着疾病程度的加重,外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例及胰岛素抵抗逐渐加重;CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与其形成和发展。     

慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达

目的分析慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达,初步探讨其分化表型。方法采集分离健康人和慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),利用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,再用流式细胞仪检测CD8 和CD4 T淋巴细胞表面CD27和CD28分子的表达。结果31例慢性乙型病毒性肝炎患者CD8 CD27 CD28 T细胞占CD8 T细胞(41.13±24.89)%,低于28例健康对照组的(71.93±14.47)%(P<0.05)。而CD8 CD27-CD28-T细胞占CD8 T细胞(42.16±10.98)%,显著高于健康对照组的(9.16±5.24)%(P<0.01)。慢性乙型病毒性肝炎患者CD4 CD27 CD28 T细胞(80.89±7.93)%和健康对照组(83.17±8.31)%比较,差异无统计学意义。结论健康人外周血T淋巴细胞以CD27 CD28 早期分化表型为主。而慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中不同的亚群分化特征又有所不同,CD4 T淋巴细胞的分化表型仍然以CD27 CD28 早期分化表型为主,而CD8 T淋巴细胞中早期分化表型明显减少,晚期分化表型(CD27-CD28-)显著增加。     

T细胞共刺激分子及其亚群在胃癌和大肠癌组织中表达的意义

目的 探讨T细胞共刺激分子及其亚群在胃癌、大肠癌发生及预后中的作用.方法 应用流式细胞术检测38例胃癌、42例大肠癌患者和21例健康人(对照组)外周血T细胞亚群及其共刺激分子CD28的表达.结果 T细胞共刺激分子CD28(CD28 CD3 )表达 胃癌组为(25.80±10.56)%,大肠癌组为(28.95±9.29)%,均明显高于对照组的(0.82±0.98)%,P＜0.01; 总T细胞(CD3 )表达 胃癌组为(53.61±13.84)%,大肠癌组为(55.96±10.68)%,均明显低于对照组的(72.07±7.83)%,P＜0.01; CD4 T细胞(CD4 CD3 )表达 胃癌组为(29.84±9.71)%,大肠癌组为(33.75±9.04)%,也均明显低于对照组的(38.79±5.08)%,P＜0.01, P＜0.05; 细胞毒T细胞(CTL,CD8 CD28 CD3 )表达 胃癌组为(1.57±1.99)%,大肠癌组为(1.93±2.61)%,均明显高于对照组的(0.02±0.04)%,P＜0.01; 胃癌组CD8 抑制性T细胞(CD8 CD28-CD3 )和CD4/CD8比值明显低于对照组[(16.06±6.94)% vs (20.56±6.54)%,P＜0.05; (1.10±0.51)% vs (1.36±0.31)%,P＜0.05]; 大肠癌组调节性T细胞(CD4 CD25 CD3 )明显高于对照组[(19.74±6.89)% vs (13.72±3.08)%, P＜0.01].胃癌组和大肠癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群(除外胃癌组的CD3 细胞和CD28 CD3-细胞)的差异无统计学意义(P＞0.05). 结论胃癌和大肠癌患者T细胞数量明显减少,T细胞共刺激分子CD28表达增高.胃癌患者CD4 T细胞显著减少; 大肠癌患者调节性T细胞显著增加.     

CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌肝移植肿瘤复发中的作用

目的 探讨肝癌肝移植病人移植前后外周血和肿瘤组织中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪检测肝癌肝移植病人和其他肝移植病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞的比例,并采用正常人作对照.用免疫组化法检测肝癌病人和非肝癌病人肿瘤组织中FoxP3的表达及CD8+T细胞浸润的比例.观察肝癌肝移植病人术后及肿瘤复发后调节性T细胞的变化及其对肿瘤复发的影响.结果 流式细胞检测显示肝癌肝移植、非肝癌肝移植的病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例较正常人明显升高,分别为(10.15±1.00)%、(5.30±1.64)%和(3.20±1.18)%,P<0.05.肝癌肝移植肿瘤复发病人较未复发病人外周血CD4+CD25+FOXP3+T比例明显升高,分别为(15.15±1.50)%和(6.80±1.50)%,P<0.01.免疫组化检测显示肿瘤组织中FOXP3+T细胞增多,CD8+T细胞浸润明显减少.结论 肝癌肝移植肿瘤复发的病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例升高.调节性T细胞可能通过减少CD8+T细胞浸润,加速肿瘤复发.     

胃癌患者外周血调节性T细胞检测及初步分析

目的 检测胃癌患者外周血调节性T细胞(Treg)水平并对其进行初步分析.方法 四色流式细胞仪检测术前胃癌患者(n=25)及正常健康者(n=25)外周血CD4+ CD25+ FOXP3+Treg水平.结果 正常对照组CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg/PBL为(1.229±0.656)%,胃癌组CD4+ CD25+ FOXP3+ Tres/PBL为(1.993±0.830)%.胃癌患者外周血Treg较正常对照组明显升高(P<0.01).结论 胃癌患者周血Treg水平升高,可因其免疫负调作用而导致免疫抑制.     

Ⅲ型前列腺炎患者外周血中CD4+CD25+Treg及前列腺液中MCP-1的检测及意义

目的 探讨Ⅲ型前列腺炎/慢性骨盆底疼痛综合征(CAP/CPPS)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比率以及检测其前列腺液(EPS)中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平,分析各检测指标与临床症状的相关性.方法 采用流式细胞仪检测48例CAP/CPPS患者和10例正常对照者外周血CD4+CD25+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比;ELISA法检测两组受试者EPS中MOP-1水平.结果 CAP/CPPS组外周血中CD4+T细胞及CD4+CD25highTreg/CD4+T细胞(28.12±4.32)%,(3.99±0.61)%与对照组(28.29±4.30)%(3.96±0.66)%相比;差异无统计学意义,P>0.05.Ⅲ a组外周血中CD4+T细胞及CD4+CD25highTreg/CD4+T细胞(28.33±4.35)%,(3.98±0.60)%与Ⅲb组(27.91±4.26)%(4.01±0.62)%相比;P>0.05.Ⅲ型组CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞(6.48±1.34)%,低于对照组(14.66±2.16)%;P<0.01.CAP/CPPS组外周血中CD4+T细胞以及CD4+CD25hignTreg/CD4+T细胞与患者慢性前列腺炎症状指数评分(CPSI)均无相关性(P>0.05):CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞与患者疼痛评分呈负相关(r=-0.702,P<0.05).CAP/CPPS组外周血中CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞与EPS中MCP-1水平呈负相关(r=-0.682,p>0.05).CAP/CPPS患者前列腺液中MCP-1(0.45±0.09)ng/ml较对照组(0.18±0.02)ng/ml显著升高;P<0.01.Ⅲ a组EPS中MCP-1水平(0.54±0.02)ng/ml较Ⅲb组(0.35±0.02)ng/ml显著升高;P<0.01.CAP/CPPS组EPS中MCP-1水平与NIH-CPSI呈正相关(r=0.716,P<0.01),且与患者疼痛评分明显相关(r=0.875,P<0.01),CAP/CPPS患者前列腺液中MCP-1水平与EPS中白细胞数呈正相关(r=0.898,P<0.01).结论 Ⅲ型前列腺炎患者外周血中CD4+CD25+Treg数量表达下调,导致患者自身免疫反应增强,可能是CAP/CPPS的发病机制之一;MCP-1在CAP/CPPS的发病过程中起重要作用,并且与临床症状密切相关,MCP-1可能成为CAP/CPPS临床诊断的一个指标.     

CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA及可溶性白细胞介素2受体检测在肾移植中的意义

目的 观察肾移植患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平及其表面特异性标志物Foxp3和可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用和价值。 方法 选取42例维持性血液透析接受同种异体肾移植治疗的患者及30例健康体检对照者。在患者移植前、移植后1、2、4、8周或发生排斥反应时，以流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平；荧光定量PCR检测Foxp3 mRNA表达；双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISB）检测血浆中sIL-2R水平。 结果 (1)移植后第1、2、4、8周急性排斥反应组CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA水平明显低于同期未发生排斥的肾功能稳定组，而sIL-2R水平却显著高于肾功能稳定组。(2)血液透析患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞[(9.22±3.53)%]、Foxp3 mRNA[（0.82±0.36）×10-3]及sIL-2R[（856.30±108.24） U/ml]水平与健康对照组[分别为(6.09±1.99)%、(0.50±0.28)×10-3、(247.35±11.24) U/ml]比较，差异均有统计学意义(P < 0.01)。(3)肾移植后随着肾功能的恢复，外周血CD4+CD25+调节性T细胞[(16.53±4.14)%]、Foxp3 mRNA[(4.97±1.94)×10-3]显著升高(P < 0.01)，而sIL-2R[（463.72±31.23）U/ml]水平明显降低(P < 0.01)。(4)当发生急性排斥反应时，CD4+CD25+调节性T细胞[(12.18±2.86)%]、Foxp3 mRNA[(3.15±1.22)×10-3]显著降低(P < 0.01)，而sIL-2R[(748.36±115.41) U/ml]水平明显升高(P < 0.01)，并且这些变化早于Scr的变化。(5)患者移植前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率与Foxp3 mRNA水平均呈正相关（分别为r ＝ 0.904、0.932，P < 0.01），但与sIL-2R水平无相关。 结论 外周血CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA及sIL-2R水平的测定均可以作为肾移植患者移植后发生急性排斥反应的早期预测指标，并可判断预后。     

胰十二指肠切除术对胰头癌患者CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响及临床意义

目的研究胰头癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)比例及其在手术前、后的变化趋势。方法采用流式细胞仪检测胰头癌患者及正常对照组外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的数量,同时监测CD4+/CD8+比值,并进行手术前、后的比较。结果胰头癌患者术前外周血中CD4+CD25+和CD4+CD25highTreg所占比例较正常对照组高(P<0.05),术后则出现不同程度下降,以术后第3天下降最明显(P<0.01,P<0.05);胰头癌患者术后CA19-9水平低于术前,以术后第14天下降明显(P<0.05)。CD4+CD25highTreg与CA19-9的变化趋势大致相同。胰头癌患者术前CD4+/CD8+比值比正常对照组低(P<0.05),手术后进一步降低,于手术后第7天达最低(P<0.05)。结论胰十二指肠切除术可能有助于机体抗肿瘤免疫的恢复,胰头癌患者围手术期可作为免疫干预的重要窗口期,CD4+CD25+调节性T细胞可作为免疫干预的靶点。     

流式细胞术检测甲状腺癌患者外周血T细胞亚群及其与临床病理的关系

目的 探讨应用流式细胞术检测甲状腺癌患者细胞免疫功能的方法及其与临床病理的关系.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定25例甲状腺癌患者及10例甲状腺良性肿瘤对照者外周血T细胞亚群CD4+CD25+Treg/CD4+Treg比值.结果 甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+/CD4+(%)为72.62±3.16,良性肿瘤对照组为43.36±3.04,差异有统计学意义(P＜0.01),甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+/CD8+为0.70±0.08,良性肿瘤对照组为0.43±0.05,甲状腺癌中的升高更明显(P＜0.05).甲状腺癌外周血中的CD4+CD25+Treg细胞所占比值与甲状腺癌患者的年龄、性别、肿瘤的位置、大小、病理类型、临床分期无明显相关(P＞0.05).结论 甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+Treg增多.CD4+CD25+Treg与CD4+T细胞的比例亦升高.甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+Treg在甲状腺癌的早期即已经升高.     

肝癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4~+CD25~+/CD~+比值.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中转化生长因子β1(TGF-B1)的表达水平.结果 肝癌患者外周血CD4~+CD25~+/CD4~+比值较肝硬化患者显著增高,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-βl呈正相关(P<0.05).结论 肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞增多,对肝癌患者具有免疫抑制作用.     

CD8+T细胞在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 观察胃癌组织中浸润性淋巴细胞CD8+T的表达及临床作用.方法 应用免疫组织化学染色检测102例胃癌患者手术标本中浸润淋巴细胞CD8+T的表达.结果 在胃癌、胃炎及胃息肉组织中均可见浸润淋巴细胞CD8+T的表达,但胃癌组浸润淋巴细胞CD8+T的表达[(29.53±14.71)个/HPF]明显高于慢性胃炎组[(19.54±8.10)个/HPF]和胃息肉组[(14.26±6.83)个/HPF],差异有统计学意义(P＜0.05).CD8+T细胞的表达与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、复发、病理分级和TNM分期无明显相关(P＞0.05);但与组织学类型和浸润深度有关,其中分化型胃癌患者CD8+T细胞的表达[(33.9±18.4)个/HPF]高于低分化型患者的表达[(27.6±12.0)个/HPF],差异有统计学意义(t=2.04,P＜0.05);未侵入肌层组的CD8+T细胞表达[(38.8±13.8)个/HPF]明显高于侵入肌层组[(27.7±14.1)个/HPF],差异有统计学意义(t=2.45,P＜0.05).与CD8+T细胞低表达组比较,CD8+T细胞高表达组胃癌患者中位生存时间延长5个月,但差异无统计学意义(χ2=1.0274,P＞0.05).多因素COX模型分析显示,与浸润淋巴细胞CD8+T低表达组比较,高表达组有降低胃癌死亡风险的趋势(RR=0.82,95%CI=0.41～1.65).结论 浸润性淋巴细胞CD8+T的表达与胃癌的预后有关.

Abstract：

Objective To study the expression and clinical significance of infiltrating lymphocytes CD8 + T in gastric carcinoma tissues.Methods The expression of infiltrating lymphocytes CD8 + T in 102surgically resected specimens of gastric cancer tissues was detected by using immunohistochemistry.Results CD8+ T cells were expressed both in gastric carcinoma,gastritis and gastric polyp tissues,but the number of CD8 + T cells in gastric carcinoma tissues [(29.53 ± 14.71 )/high powered field (HPF)]wassignificantly greater than in gastritis tissues [( 19.54 ±8.10)/HPF]and polyp tissues [( 14.26 ±6.83)/HPF](P ＜0.05).No correlation was found between CD8 + T lymphocyte count and gender,age,tumor location,tumor size,lymph node metastasis,tumor relapse,pathological grade or TNM stage ( P ＞ 0.05 ).However,there was a statistically significant correlation between the number of CD8 + T cells and the histological type,invasive depth.The CD8 + T cell count was obviously higher in the differentiated group [(33.9 ± 18.4)/HPF]than in the undifferentiated group [(27.6 ± 12.0)/HPF]( t = 2.04,P＜0.05 ).And the number of CD8 + T cells was greater in the non-invasive group [(38.8 ± 13.8)/HPF]than in the invasive group [(27.7 ± 14.1 )/HPF]( t = 2.45,P＜0.05 ).The median survival time of gastric cancer patients with high expression of CD8 + T cells was 5 months longer than in those with low expression,but there was no significant difference.Multi-factor COX model analysis demonstrated that the risk of death in gastric cancer patients was lower in the CD8 + T cells high expression group than in the low expression group ( RR = 0.82,95%,CI = 0.41-1.65 ).Conclusion Detection of infiltrating lymphocytes CD8 + T expression in gastric carcinoma tissues will be beneficial to the judgment of the prognosis.     

环孢素A对小鼠体内调节性T淋巴细胞的作用及机制

目的 探讨环孢素A(CsA)对小鼠体内CD4+Foxp3+调节性T淋巴细胞的作用及机制.方法 选择雄性C57BL/6小鼠20只,随机平均分为两组.实验组小鼠腹腔注射环孢素A20 mg·kg-1·d-1×2周;对照组小鼠腹腔注射等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)×2周.2周后,两组小鼠在无菌条件下经眼球采集外周血,并分离脾脏和胸腺,制备单细胞悬液.采用流式细胞仪检测小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞悬液中的CD4+Foxp3+T淋巴细胞的比例.结果 实验组小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞悬液中CD4+Foxp3+T淋巴细胞的比例分别为(0.581±0.089)%、(2.189±0.046)%和(0.472±0.049)%,对照组的比例分别为(1.751±0.227)%、(3.684±0.169)%和(1.412±0.188)%,两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.001).结论 CsA可以损害小鼠体内调节性T淋巴细胞的发育,从而减少调节性T淋巴细胞的数量.     

乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症患者脾切除后CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞的变化及意义

目的 观察乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症患者行脾切除术前后外周血中CD4＋CD25＋ CD127low/-调节性T细胞（Treg）的变化,探讨门静脉高压症患者行脾切除术对机体免疫功能的影响.方法 回顾性分析2012年5月至2013年5月河北医科大学第三医院收治的20例乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症合并脾功能亢进患者的临床资料,通过流式细胞仪分析乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症合并脾功能亢进患者（门静脉高压症组）脾切除术前1d、术后1周、1个月、3个月和来自河北医科大学第三医院的10例健康体检者（对照组）的外周血中CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg含量,分析Treg的变化对全身免疫系统造成的影响.组问比较采用t检验,手术前后数据比较采用重复测量方差分析.结果 门静脉高压症组患者术前和对照组受试者CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg比例分别为5.1％±3.5％和1.4％±0.2％,两组比较,差异有统计学意义（t=2.573,P＜0.05）.门静脉高压症组患者术后1周、1个月、3个月CD4＋CD25＋ CD127low/-Treg比例分别为9.2％±2.7％、5.6％±1.7％、2.5％±2.1％,其中术后1周与术前比较,差异有统计学意义（F=9.814,P＜0.05）;而术后3个月与术前比较,差异无统计学意义（F=2.364,P＞0.05）.结论 脾切除术后短期Treg水平明显升高,随时间延长逐渐下降.从Treg方面表明脾切除对机体免疫系统影响较小.     

前列腺癌患者外周血中CD4^＋CD25^high调节性T细胞及调节因子TGF-β1和COX-2的表达

目的：通过检测前列腺癌患者以及健康志愿者外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达,初步探讨CD4＋CD25high调节性T细胞在前列腺癌发病机制中的作用及其与TGF-β1和COX-2的相关性。方法：应用流式细胞术检测30例前列腺癌患者治疗前后（其中前列腺癌局限组11例,非局限组19例）及20例健康志愿者外周血单个核细胞（PBMC）中CD4＋CD25high调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其外周血清中TGF-β1和COX-2的表达。对前列腺癌患者上述指标进行术前术后对比分析,另对CD4＋CD25high调节性T细胞与TGF-β1及COX-2的相关性进行分析;并探讨上述指标在前列腺癌患者局限组和非局限组间是否存在差异性。结果：流式细胞术检测显示,前列腺癌患者治疗前PBMC中CD4＋CD25high调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例为（18.32±7.49）%,高于健康志愿者对照组（7.77±1.86）%（P〈0.05）。前列腺癌患者治疗后其比值为（17.34±5.87）%,较治疗前稍减低,但两者相比无显著差异（P〉0.05）。ELISA检测外周血清中TGF-β1和COX-2显示,前列腺癌组分别为（215.97±55.16）ng/ml和（6.88±5.14）ng/ml,对照组分别为（149.75±47.11）ng/ml和（5.65±2.69）ng/ml;前列腺癌患者外周血清中TGF-β1的表达水平高于健康志愿者对照组（P〈0.05）,COX-2的表达水平与对照组无显著差异（P〉0.05）。通过多重线性回归分析表明,前列腺癌患者PBMC中CD4＋CD25high调节性T细胞的表达与血清中TGF-β1和COX-2的表达无显著相关。前列腺癌局限组和非局限组外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达均无显著性差异（P〉0.05）。结论：前列腺癌患者PBMC中CD4＋CD25high调节性T细胞可能参与前列腺癌的发生,其增殖机制与血清中TGF-β1和COX-2的表达无关,可能与肿瘤本身及肿瘤局部微环境相关。