广西人感染猪链球菌病的病原学及分子生物学鉴定分析

目的:用细菌分离培养和分子生物学方法鉴定猪链球菌,为确定疫情、及时治疗及控制提供依据.方法:疑似患者血液、脑脊液,死亡患者的肝、脾、肾等尸检组织进行分离培养、API 20 Strep生化鉴定、药敏试验及PCR检测.结果:从11份血液、4份脑脊液标本中分离出5株猪链球菌,API 20 Strep生化鉴定为猪链球菌Ⅱ型;经PCR检测5株菌均具有猪链球菌种特异性基因16St‘RNA(spe)基因、猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J)和猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因(mrp),1例死亡患者尸检组织标本和2例患者(1例为死亡病例)的脑脊液标本,具有猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J),脾脏组织和1份脑脊液标本具有猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因(mrp),全部确定为猪链球菌2型,并携带强毒力基因.药敏试验表明,猪链球菌2型对万古霉素、氯霉素、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松、克林霉素敏感.结论:广西6起疫情均为人感染猪链球菌2型所致.     

人—猪链球菌感染性综合征的病原分离与鉴定

目的：分离和鉴定猪链球菌,为诊断和治疗提供科学依据。方法：用3种增菌液和7种培养基对病人血液,脑脊液培养和病死猪的内脏培养,并对分离到的病原体进行染色形态观察,API Strep20生化及其它生化试验,血清凝集试验,结果：从4例病人血液,1例脑脊液和7例病死猪中分离到12株病原菌,经鉴定9株编码为0641453,2株为0640453,1株为1641453,12株菌均与猪链球菌2型血清凝集,结论：12株细菌均为猪链球菌2型。     

人源和猪源猪链球菌的同源性研究

目的 进一步鉴定菌种;评价人源株与猪源株猪链球菌的同源性。方法 对分离自猪无菌部位、患者血液和脑脊液的７株猪链球菌Ⅱ型和标准猪链球菌Ⅱ型,用菌体脂肪酸分析和随机引物基因扩增技术进行菌种的表现型和基因型分类。对其结果进行聚类分析和主成分分析。结果 随机引物基因扩增技术分析提示,被检的７株猪链球菌Ⅱ型与标准株一致,均为猪链球菌Ⅱ型;人源株与猪源株同源;分离自病人血液和脑脊液的菌株同源。这些结果在菌体脂     

重庆市人感染猪链球菌病的病原分离与鉴定

目的：分离和鉴定猪链球菌，为疫情的确定、预防及控制提供理论依据。方法：用血琼脂、生化反应及PCR对疑似猪链球菌感染病例、接触者和病死猪的血液、脑脊液及脏器等共30份标本进行分离培养和鉴定，阳性菌株进行药敏试验。结果：从病人脑脊液和血液中检出猪链球菌2型菌株2份。经PCR方法检测菌株，含有猪链球菌种特异性基因16SrtLNA（SPE基因），猪链球菌荚膜多糖编码基因（CPS2A基因），猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因（MRP基因）。药敏试验表明，猪链球菌2型对四环素耐药，对左旋氟沙星、氨苄西林、青霉素、阿齐霉素、头孢吡肟、头孢肟、万古霉素等敏感。结论：猪链球菌2型是引起此次人类感染疫情的病原微生物。     

猪链球菌四川资阳分离株特征分析

目的了解猪链球菌四川资阳分离株的生物学特征。方法以血平板分离培养获得分离株,用猪链球菌分型血清进行分型,用VITEK2compact微生物鉴定系统进行生化鉴定,PCR技术检测猪链球菌荚膜多糖基因(CPS2J)、溶菌酶释放蛋白基因(MRP)和溶血素基因(SLY),用K-B纸片法进行药物敏感性分析。结果从患者中分离到34株猪链球菌,从病死猪中分离到8株猪链球菌,血清分型均为血清2型,VITEK2compact微生物鉴定系统生化鉴定也为猪链球菌2型,均具有CPS2J、MRP、SLY毒力基因,42株菌对青霉素G、阿莫西林、奥恪门丁、头孢曲松、头孢他啶、氯霉素、氧氟沙星、环丙沙星、红霉素、克林霉素、万古霉素均敏感,对吡哌酸、四环素、庆大霉素、链霉素、阿米卡星、复方磺胺甲恶唑、氨曲南、呋喃唑酮、呋喃妥因均耐药。结论人源株和猪源株均为猪链球菌2型,血清鉴定与生化鉴定结果一致,致病力强,菌株耐药谱非常相似。     

一例人感染猪链球菌病流行病及病原学调查

目的通过对衢州市衢江区一例人感染猪链球菌病病人进行流行病学调查,实验室检测包括对分离株进行病原学及分子生物学鉴定,为疫情预测和制定防治措施提供依据。方法将患者脑脊液进行增菌培养,并对分离的菌株进行涂片染色形态观察、rapid ID 32STREP试条生化鉴定、PCR技术检测分离株的种属特异性基因、毒力基因。结果从患者的脑脊液中分离出病原菌,经rapid ID 32 STREP试条鉴定为猪链球菌Ⅱ型,并从该分离株检测到种属特异性基16SrRNA及EF、Cps2J毒力基因,MRP毒力基因未检出。结论该患者是由SS2引起的,需要相关部门加大对猪链球菌病的防控力度。     

宁波市首例人感染猪链球菌2型的实验室鉴定

目的:对首例人感染猪链球菌2型菌株进行鉴定,了解病原学及毒力。方法:将疑似猪链球菌感染患者血液、脑脊液进行增菌培养,对所分离的病原菌进行染色形态观察、APIStrep20生化鉴定;合成引物检测菌株的16SrRNA、cps2J、mrp、ef、sly、gapdh基因片段;制作cps2J、mrp、ef、sly长片段产物,进行基因序列测定。结果:从患者血液和脑脊液中分离的病原菌,经API20Strep生化鉴定编码为4641453,确认为猪链球菌2型,16SrRNA扩增结果进一步证实该菌为猪链球菌2型,基因测序结果与Genebank中注册05ZYH33的猪链球菌2型序列同源性在99%以上。结论:根据流行病学调查、临床表现和实验室鉴定结果,本起人感染猪链球菌的病原为猪链球菌2型,带有多种毒力基因其分子生物学特征典型。     

贵州省死亡病例1型猪链球菌的分离及分子生物学特征分析

目的 对来自贵州省1例疑似人感染猪链球菌患者的血液标本进行细菌分离鉴定,了解该菌株的分子生物学特征,为病例的快速确诊提供病原学依据。方法 采用血培养法对疑似感染猪链球菌患者的血液进行细菌分离培养,对分离菌株采用细菌16S rRNA 基因通用引物进行PCR扩增和DNA序列测定,将测序结果通过GenBank数据库的BLAST程序进行在线比对,再用猪链球菌种特异的16S rRNA 基因进行猪链球菌种的鉴定,进一步分别采用PCR检测常见强致病性血清型1、2、7和9型特异的cps 1j、cps 2j、cps 7h和cps9h基因以鉴定其血清型,并对菌株毒力基因gapdh、mrp、sly和ef进行检测。结果 血培养分离出1株链球菌可疑菌株,序列比对结果显示该分离菌株16S rRNA基因与猪链球菌的同源性最高,进一步的猪链球菌特异性PCR检测显示分离菌株16S rRNA基因为阳性,血清型特异PCR检测结果显示cps 1j基因为阳性,而cps 2j、cps 7h和cps 9h基因为阴性,毒力基因检测结果显示分离菌株gapdh,sly和ef毒力基因为阳性,而mrp为阴性。结论 本次从疑似感染猪链球菌死亡病例分离的菌株为猪链球菌1型,其毒力特征为gapdh、sly和ef基因阳性,mrp基因阴性,该病例为1型猪链球菌感染所致,且菌株毒力较强。     

2014—2022年湖南省病人来源猪链球菌2型鉴定及毒力基因分析

目的 了解2014—2022年湖南省人感染猪链球菌病病人分离株型别分布与毒力基因携带情况,为人感染猪链球菌病的防控提供依据。方法 收集2014—2022年湖南省人感染猪链球菌病临床分离株,通过传统生化反应和聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测猪链球菌种特异性基因16S rRNA,同时用PCR对2型血清型鉴定基因(兼荚膜多糖毒力基因)cps2J和7种毒力基因进行扩增,用毛细管电泳检测扩增产物,分析病人来源猪链球菌的型别与毒力基因携带情况。结果 2014—2022年湖南省38株人感染猪链球菌病临床分离株中,1株为羊链球菌,32株为猪链球菌2型,5株生化鉴定为2型的菌株经分子分型鉴定为猪链球菌其他型别。32株猪链球菌2型菌株中,46.88%的菌株携带全部8种毒力基因,40.63%的菌株携带除mrp外的7种毒力基因。携带cps2J、fbps、ef、gdh、orf2、gapdh 6种毒力基因与携带cps2J、sly、gdh、orf2、gapdh 5种毒力基因的菌株均占3.13%,6.25%的菌株携带cps2J、gdh、orf2、gapdh 4种毒力基因...     

人感染猪链球菌病的病原分离与PCR方法的快速检测

目的研究人感染猪链球菌的生物学特征，并建立一种快速、特异且敏感的检测方法。方法将疑似猪链球菌感染患者的血液进行增菌培养，对所分离的病原菌进行染色形态观察、API 32 Strep生化鉴定；同时从该疑似患者血液（抗凝血）中提取DNA为模板，并合成引物检测猪链球菌特异性16SrRNA基因片段、2型猪链球菌特异性荚膜多糖编码基因片段cps2J、溶菌酶释放相关蛋白编码基因片段mrp、细胞外蛋白因子编码基因片段ef。结果PCR扩增结果证实是猪链球菌2型，而从血液中分离的病原菌，经API 32 Strep生化鉴定，也证实为猪链球菌2型。结论人感染猪链球菌的病原学及PCR检测符合猪链球菌2型，同时该PCR反应体系是一种检测和鉴定猪链球菌2型的快速、特异且敏感的方法。     

97例丝虫性乳糜尿病人13年后的转归调查

苍山县芹堂乡原为班氏丝虫病的高度流行区，丝虫性乳糜尿发病率较高。对1985年确诊的97例丝虫性乳糜尿病人进行13年后的转归调查，其年平均病死率为1．9％。，现症乳糜尿病人的病死率明显高于非现症乳糜尿病人，有非常显著性差异（P＜0．01）。死亡病人中男性明显高于女性（P＜0．01）。现症和非现症乳糜尿之间交替现象存在着非常显著性差异（P＜0．01）。     

四川省人感染猪链球菌病流行病学调查分析

目的查明人感染猪链球菌病感染来源和途径,流行范围,流行特征与特点,为制定预防控制措施提供依据。方法制订统一的临床诊断标准对病例进行诊断,制订统一的流行病学个案调查表进行流行病学调查,采集病例的早期血、脑脊液样和病死猪组织样进行病原分离和鉴定,收集患者的临床表现和检查结果,对死亡病例进行病理改变观察,综合以上信息进行分析。结果2005-07中旬以来,发生在四川省资阳市等地的不明原因疾病,经调查证实为猪链球菌2型引起的人感染猪链球菌病。截至2005-08-09,在四川省的12个地区共发现病原学确诊和临床诊断病例180例,疑似35例,死亡39例。病例主要分布在资阳、内江2市,感染途径为宰杀、洗切病死猪等家畜,病例散在发生,病例之间无接触史,无续发病例,无人传人的现象,病例以参与宰杀病死猪的农村男性为主。病例的临床分型主要为脑膜炎和休克型,潜伏期短,平均2.37d,病理改变主要表现为全身多器官受损,败血症伴弥漫性血管内凝血。结论2005-07中旬以来,发生在四川省资阳市等地的人感染猪链球菌病,病原菌为猪链球菌2型,感染途径为直接接触(宰杀、洗切)病死猪等家畜。病例主要表现为脑膜炎型和休克型。     

湖南省1例猪链球菌2型菌株的PCR检测

目的从分子水平鉴定湖南省一例疑似猪链球菌病病原菌的种、型及毒力基因,为流行病学和临床提供诊断分析依据。方法采用猪链球菌2型多重PCR快速诊断试剂盒以及另外合成的四对引物进行聚合酶链反应。结果用三重PCR试剂盒检出该菌携带cps2以及mrp基因,用合成的16srRNA、cps2j、mrp以及sly引物进行PCR扩增电泳后均显示阳性条带。结论2006年8月湖南省一例疑似猪链球菌病例确为猪链球菌2型感染,并且该菌携带多种毒力基因。     

聚合酶链式反应诊断2型猪链球菌

目的从分子水平鉴定四川省2005年不明原因疾病病原菌的属、种、型及毒力基因,为诊断和治疗提供科学依据。方法聚合酶链式反应(PCR)检测链球菌属特异性基因(TUF)、猪链球菌种特异性基因(Species)、2型和毒力特异性基因(CPS2J)以及毒力基因溶菌酶释放相关蛋白基因(MRP)和溶血素基因(SLY);同时与VITEK2等全自动生化鉴定仪鉴定结果进行比对。结果所试103份标本中,98份均具有所检测的5个基因,确定为猪链球菌2型;另5份标本排除猪链球菌可能。73株纯培养细菌用VITEK2全自动生化鉴定仪鉴定有68株菌被鉴定为猪链球菌2型,3株菌被鉴定为猪链球菌1型,2株菌不能鉴定。结论2005年四川省不明原因疾病疫情为猪链球菌2型感染人造成。PCR检测5个特异基因鉴定猪链球菌2型,其结果优于VITEK2全自动生化鉴定仪。