表没食子儿茶素没食子酸酯抑制长波紫外线诱导的HaCaT细胞氧化损伤和凋亡

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否能对长波紫外线(UVA)诱导的人角质形成细胞(HaCaT细胞)氧化损伤和凋亡起保护作用以及其可能的作用机制.方法:将HaCaT细胞分成空白组、EGCG组、UVA照射组以及UVA照射 EGCG组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度;检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量变化;流式细胞仪检测细胞膜电位变化;末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测不同组细胞凋亡率.结果:UVA照射组的SOD和GSH-Px明显下降、MDA相应上升,线粒体膜电位下降,凋亡率上升(P＜0.05).EGCG处理的细胞UVA照射后其活性以及上清液中的SOD、GSH-Px活性相对于未加药UVA照射组明显增加,MDA相应下降;线粒体膜电位上升,细胞凋亡率明显下降(P＜0.05).结论:EGCG可以减少UVA诱导HaCaT细胞氧化损伤和细胞凋亡.其机制可能与增强抗氧化成分活性和减少氧自由基有关.     

橙皮苷抑制长波紫外线诱导的人角质形成细胞氧化损伤和凋亡

目的:探讨橙皮苷是否能对长波紫外线(UVA)诱导的人角质形成细胞(HaCaT细胞)氧化损伤和凋亡起保护作用以及其可能的机制.方法:HaCaT细胞分成空白组、橙皮苷组、UVA照射组以及UVA照射+橙皮苷组.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度;比色法检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)活性以及丙二醛(MDA)含量的变化;流式细胞仪检测细胞膜电位变化和不同组细胞凋亡率.结果:UVA照射组的SOD和T-AOC明显下降,MDA上升,线粒体膜电位下降,凋亡率上升(P<0.05).橙皮苷组细胞照光后其活性以及上清液中的SOD、T-AOC活性相对于未加药照光组明显增加,MAD下降,线粒体膜电位上升,细胞凋亡率也明显下降(P<0.05).结论:橙皮苷可以减少UVA诱导的HaCaT细胞氧化损伤和细胞凋亡.其机制可能与增强抗氧化能力和减少氧自由基有关.     

UVB诱导人皮肤成纤维细胞的氧化应激损伤研究

目的 观察人皮肤成纤维细胞被UVB照射后的光损伤、凋亡、周期阻滞和氧化应激损伤状态,并检测氧化应激的相关信号蛋白p66Shc的表达情况。方法 用小剂量UVB多次照射培养的人皮肤成纤维细胞,以细胞衰老β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）化学染色法观察细胞衰老状态,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,ELISA法检测细胞内超氧化物歧化酶活性和丙二醛的含量,并以Western印迹法检测p66Shc蛋白的表达。结果 SA-β-Gal染色显示,培养的人皮肤成纤维细胞在UVB照射后呈强阳性染色;细胞凋亡率在未照射的对照组为0.96％,UVB照射组为37％;而细胞周期检测显示,经UVB照射的人皮肤成纤维细胞大部分阻滞于G0/G1期（80.07%）。细胞内超氧化物歧化酶水平对照组为（52.35 ± 4.97） ng/g蛋白,UVB照射组为（7.81 ± 0.68） ng/g蛋白（两组比较,P < 0.01）;而丙二醛水平两组分别为（3.52 ± 0.34） ng/g蛋白和（33.91 ± 3.20） ng/g蛋白（两组比较,P < 0.05）。人皮肤成纤维细胞经UVB照射诱导后24 h,p66Shc呈弱阳性表达,48 h后表达进一步增强。结论 培养的人皮肤成纤维细胞经UVB照射后进入氧化应激增强状态。p66Shc蛋白在此过程中表达逐渐增强。     

阿魏酸保护人成纤维细胞光源性氧化损伤的研究

目的观察阿魏酸是否可以保护人成纤维细胞,抑制长波紫外线（UVA）辐射对其所致的氧化损伤。方法加入200μg/mL阿魏酸孵育培养的成纤维细胞4h后,以5、10J／cm^2的UVA照射细胞,照光后继续培养24h。以四甲基偶氮唑蓝还原法（MTT）法检测细胞活性,比色法检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）和丙二醛（MDA）含量变化。结果接受UVA照射后,成纤维细胞出现不同程度的增殖活性下降,活性下降程度与辐射强度成正比：阿魏酸干预处理可使细胞活性明显恢复。UVA照射组的SOD和GSH—Px水平明显下降、而MDA则明显上升：经阿魏酸预处理的细胞上清液中SOD和GSH—Px活性显著增加,而MDA水平明显下降（P〈0．05）。结论阿魏酸可明显保护人成纤维细胞免于UVA损伤,其具体机制可能与抑制氧化损伤和增强细胞抗氧化能力有关。     

黄芪甲苷抑制长波紫外线引起人成纤维细胞氧化损伤的研究

目的 观察黄芪甲苷对长波紫外线(UVA)辐射引起的人成纤维细胞增殖活性变化及氧化损伤的影响.方法 采用5、10J/cm2 的UVA照射培养的成纤维细胞,加入黄芪甲苷干预处理,以四甲基偶氮唑蓝还原法(MTT法)检测细胞活性,比色法检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量变化.结果 不同剂量UVA照射后24 h,成纤维细胞出现增殖活性下降,活性下降程度与辐射强度成正比;黄芪甲苷干预处理可使细胞活性有一定程度恢复.UVA照射组的SOD明显下降、MDA上升,黄芪甲苷处理的细胞上清液中SOD活性明显增加,而MDA下降(P＜0.05).结论 黄芪甲苷可在一定程度上抑制UVA引起的成纤维细胞活性下降,其机制可能与其抑制氧化损伤和增强细胞抗氧化能力有关.     

黄芩苷对培养人原代成纤维细胞长波紫外线光损伤端粒的影响

目的 探讨黄芩苷对于长波紫外线（UVA）照射导致人皮肤成纤维细胞衰老的保护作用及对端粒途径的影响。方法 分离培养人原代成纤维细胞,将亚融合状态的培养细胞分为空白组、黄芩苷组、UVA组和UVA + 黄芩苷组,照光组中以10 J/cm2 UVA进行照射,药物干预组中加入50 μg/ml黄芩苷干预处理。以流式细胞仪测定细胞周期变化;以端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法（TRAP-ELISA）检测细胞端粒酶水平;以实时定量PCR法检测细胞端粒长度及衰老相关基因p53、p16和c-myc mRNA水平;以蛋白印迹法检测p16和c-myc蛋白水平。结果 UVA引起显著G1期阻滞,G1期细胞比值由正常对照组59.94%升高至81.04%,而黄芩苷处理后G1期细胞比值下降为65.55%。UVA照射后细胞端粒长度缩短为正常组的31.2%,黄芩苷干预组的端粒长度可恢复至正常细胞的63.9%。此外与正常组相比,UVA诱导p53和p16 mRNA表达水平升高为2.93 ± 0.21和2.14 ± 0.09,而c-myc mRNA水平下降为0.53 ± 0.03;黄芩苷干预可抑制上述改变。照射后与正常组相比,p16蛋白水平增高为5.84 ± 0.16,c-myc蛋白表达降低为0.35 ± 0.04;黄芩苷处理后p16蛋白表达量下降为4.09 ± 0.13（P < 0.05）;c-myc蛋白表达水平无明显变化（P > 0.05）。正常对照和UVA组的端粒酶活性为阴性,加入黄芩苷对端粒酶活性无影响。结论 黄芩苷可延缓人成纤维细胞光老化进程,其机制可能与调控p53等老化相关基因表达有关,与端粒酶活性无关。     

羟氯喹及没食子酸酯对HaCaT细胞光照射的影响

目的 探讨羟氯喹和绿茶活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)损伤永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)的保护作用及其机制。方法 采用UVB定时及定量照射培养的HaCaT细胞,分别加入羟氯喹和EGCG干预处理,以RT-PCR法检测各受试组p53、p21、c-fos基因表达水平。结果 UVB照射后可明显增加HaCaT细胞中p53,p21,c-fos mRNA表达,羟氯喹和EGCG可不同程度地下调上述基因表达水平。结论 羟氯喹和EGCG的光保护作用在HaCaT细胞可能与其抑制p53,p21,c-fos基因表达有关。     

茶多酚对长波紫外线诱导HaCaT细胞急性光损伤的防护作用

目的探讨茶多酚对长波紫外线(UVA)诱导HaCaT细胞急性光损伤的防护作用及其机制。方法用光学显微镜、MTT法检测UVA对细胞形态及增殖活性影响,构建UVA致HaCaT细胞急性光损伤模型;用MTT法检测茶多酚对细胞增殖活性影响,获得茶多酚对HaCaT细胞最适浓度;检测茶多酚处理前后细胞增殖活性(MTT法)、细胞膜损伤(LDH)情况;Western blot、RT-PCR检测茶多酚处理前后核因子NF-E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)蛋白胞内分布、Nrf2 mRNA及下游Ⅱ相解毒酶表达情况。结果 20 J/cm~2 UVA致HaCaT细胞形态学改变且抑制细胞增殖活性(0.11±0.50;P0.05),可用于构建UVA致HaCaT细胞急性光损伤模型;茶多酚剂量依赖性抑制细胞增殖活性,11μg/mL为本实验最适茶多酚浓度;相比对照组、UVA组的细胞增殖活性(1.043±0.203;0.113±0.050)和LDH(1.000±0.092;1.858±0.016),照射前加入茶多酚可显著提高细胞增殖活性(1.322±0.080;均P0.05)和减少LDH释放(0.500±0.079;均P0.05);Western blot、RT-PCR结果显示,茶多酚可显著增加核内Nrf2蛋白表达,上调Nrf2 mRNA(1.804±0.229)及下游Ⅱ相解毒酶SOD mRNA(1.172±0.148)、CAT mRNA(1.617±0.259)、GCLC mRNA(1.183±0.083)、GCLM mRNA(1.228±0.256)的表达。结论茶多酚可有效防护UVA诱导HaCaT细胞急性光损伤,且茶多酚可增加核内Nrf2蛋白及其mRNA和下游Ⅱ相解毒酶mRNA的表达,茶多酚的光防护作用可能与Nrf2信号通路有关。     

甲基莲心碱对UV致人皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响

目的探讨甲基莲心碱抗光老化的作用机制,为防治皮肤光老化性疾病提供实验依据。方法建立中长波紫外线辐射人皮肤成纤维细胞光老化模型,实验分为对照组、模型组(单纯UVA+UVB照射)和药物组(UVA+UVB照射后加0.4μmol/L,0.8μmol/L,1.6μmol/L甲基莲心碱干预),检测细胞内ROS的水平和SOD和GPx的活力及MDA的含量。结果与模型组相比,甲基莲心碱可以降低ROS水平及MDA含量(P0.05),同时提高SOD及GPx的活力(P0.05)。结论适当浓度的甲基莲心碱能降低光老化细胞内ROS引起的氧化损伤,增加细胞内抗氧化酶的活性,减轻细胞膜脂质过氧化作用,延缓了皮肤光老化的进程。     

miRNA-7在中波紫外线诱导HaCaT细胞氧化应激损伤中的作用

目的探讨微小RNA-7(microRNA-7,miRNA-7)对中波紫外线(UVB)照射诱导的皮肤氧化应激损伤的保护性作用及其作用机制。方法建立UVB照射诱导的人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT)氧化应激损伤模型,脂质体转染法过表达miR-7,并设立阴性对照组(miR-NC)和空白对照组。CKK-8法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,荧光法检测细胞内活性氧自由基(ROS)的含量,Real-time PCR和Western blot检测细胞中miR-7、Keap1及Nrf2 mRNA表达。结果与空白对照组相比,UVB模型组HaCaT细胞活性、SOD和GSH-Px活性显著下降(P均0.05),ROS含量显著上升(P0.05)。miR-7过表达能显著增加HaCaT细胞活性、SOD和GSH-Px活性,同时抑制Keap1蛋白的表达,增加Nrf2蛋白表达(P均0.05),siRNA-Nrf2转染后能显著抑制Nrf2表达(P0.05),进而逆转miR-7对细胞的保护作用。结论 miR-7能削弱UVB作用下HaCaT细胞的氧化应激损伤,其机制可能与Keap1-Nrf2信号通路的活化有关。     

外阴Pinkus纤维上皮瘤

报告1例外阴Pinkus纤维上皮瘤。患者女，71岁。左大阴唇外侧斑块10余年。皮肤科检查见左大阴唇外侧一2cm&#215;2cm灰黑色浸润性斑块．质地中等，边缘清楚，表面散在红色点状糜烂面，无明显渗液。皮损组织病理检查：棘层下方大量基底样细胞增生．增生的细胞呈条索状嵌入真皮增生的纤维间质中，彼此吻合形成网状，基底细胞胞核大而深染，胞质少，呈嗜碱性，表皮基膜完整，真皮内有以淋巴细胞为主的大量炎性细胞浸润。诊断：外阴Pinkus纤维上皮瘤。     

A review of the mechanisms of action of dimethylfumarate in the treatment of psoriasis

Fumaric acid esters (FAEs) such as dimethylfumarate (DMF) are used for the treatment of adults with moderate‐to‐severe psoriasis. The mode of action of FAEs is complex. Here, we provide a comprehensive review of the literature to describe the molecular mechanisms by which DMF and its active metabolite monomethylfumarate (MMF) exert their anti‐inflammatory and immune modulatory effects. MMF can bind to the hydroxy‐carboxylic acid receptor 2 (HCA2) on the cell surface and both DMF and MMF react with intracellular glutathione following cell penetration. DMF and to some extent also MMF modulate the activity of certain cellular signalling proteins such as the nuclear factor (erythroid‐derived 2)‐like 2 (Nrf2), nuclear factor kappa B (Nf‐κB) and the cellular concentration of cyclic adenosine monophosphate. Some studies show that DMF can also affect the hypoxia‐inducible factor 1‐alpha (HIF‐1α). These actions seem to be responsible for i) the downregulation of inflammatory cytokines and ii) an overall shift from a proinflammatory Th1/Th17 response to an anti‐inflammatory/regulatory Th2 response. Both steps are necessary for the amelioration of psoriatic inflammation, although additional mechanisms have been proposed. There is a growing body of evidence to support the notion that DMF/MMF may also exert effects on granulocytes and non‐immune cell lineages including keratinocytes and endothelial cells. A better understanding of the multiple molecular mechanisms involved in the cellular action of FAEs will help to adapt and further improve the use of such small molecules for the treatment of psoriasis and other chronic inflammatory diseases.     

Treatment of hemangiomas of infancy

Hemangiomas of infancy are the most common tumors of childhood. They are clinically heterogeneous and as such require individualized treatment plans. Although there are no Food and Drug Administration (FDA)-approved agents for treatment of hemangiomas of infancy, there are many widely used therapeutic options available. This review highlights the treatments currently in use and the factors that direct treatment.     

28例皮肤转移性肿瘤临床病理分析

对28例皮肤转移性肿瘤的临床及病理特征进行了分析。男性21例，女性7例，平均64例，临床表现为皮肤结节，病程平均为9个月，转移距原发瘤手术的时间平均13．6个月，有14例皮肤转移灶为首发症状。转移部位以胸，腹壁为多，其余为四肢，腰及颈部，原发部位包括乳房，肺，消化道，前列腺及膀胱。有8例原发部位不明。组织学类型以腺癌（46％）和鳞癌（25％）常见。患者多在1年内死亡，1例存活9年以上。     

两种切口的顶泌汗腺修剪术治疗腋臭的并发症对比分析

目的采用"W"形切口(A组)及"1"字形腋窝皱襞切口(B组)的顶泌汗腺修剪术治疗腋臭,统计分析两组患者术后并发症的发生率。方法回顾分析2011年5月-2013年12月采用两种切口的顶泌汗腺修剪术治疗腋臭163例,其中A组84例,B组79例,对其术后的并发症进行对比分析。结果 A组术后发生血肿5例、皮瓣坏死3例,切口裂开11例,局部瘢痕增生13例,异味残留3例;B组术后发生血肿4例,皮瓣坏死2例,切口裂开3例,局部瘢痕增生4例,异味残留4例。A、B组在切口裂开、局部瘢痕增生的发生率差异有统计学意义(P0.05)。结论 "1"字形腋窝皱襞切口较"W"形切口的顶泌汗腺修剪术在一定程度上可减轻腋臭术后并发症。     

麻风免疫学研究进展

麻风是由麻风分枝杆菌引起的慢性传染性疾病,发病与机体免疫密切相关。本文就麻风细胞免疫、体液免疫、免疫逃逸及遗传易感性等方面的研究进展作一综述。     

二期梅毒41例免疫组化特征分析

【摘要】 目的 探索梅毒螺旋体在二期梅毒皮疹中的分布特点及其与组织病理的相关性。方法 选取2008年1月至2018年12月在北京协和医院皮肤性病科通过组织病理检查，并根据临床表现和血清学检查确诊的二期梅毒患者41例，分析皮损组织切片的免疫组化结果，并以此为分组依据，分析不同组间临床及组织病理特点的差异。对连续数据使用t检验或Kruskal-Wallis检验评估两组间差异；对分类数据使用卡方或Fisher精确检验来评估组间差异。结果 免疫组化检查显示，42份二期梅毒皮损切片中，68.3%存在梅毒螺旋体，主要分布于表皮下部及真皮浅中层。以斑疹为主的二期梅毒疹的梅毒螺旋体阳性率［80%（16/20）］较以丘疹为主的二期梅毒疹［50%（11/22）］高（P < 0.05）。在10种病理特征中，免疫组化阳性组较阴性组更常表现出皮突延长（P < 0.05）、基底细胞液化变性（P < 0.05）、角质层中性粒细胞浸润（P < 0.05）、苔藓样浸润模式（P < 0.05）、点状角质形成细胞坏死（P < 0.05）。免疫组化显示有较多数量梅毒螺旋体的切片表现出更多病理特征（H = 17.914，P < 0.001）。梅毒螺旋体免疫组化染色显示有大量（8份）、中量（14份）及少量（5份）梅毒螺旋体的切片分别平均有8种、7种及6种梅毒特异性组织病理特征；15份梅毒螺旋体免疫组化阴性的组织切片平均只有4种病理特征。 结论 免疫组化可以显示梅毒螺旋体在二期梅毒皮疹中的分布，梅毒螺旋体含量较多的组织切片显示更多的梅毒特异性病理特征。     

红皮病120例病因分析

目的：探讨红皮病的病因及并发感染的情况。方法：回顾性分析120例红皮病患者的临床资料。结果：120例患者中73．3％红皮病继发于原有皮肤病，其他致病原因依次为药物过敏、肿瘤，部分原因不明。28．3％并发感染的红皮病患者中，41～60岁组和〉60岁年龄组的感染率高于≤40岁年龄组，差异有统计学意义（P均〈0．05）；血浆白蛋白降低组患者感染率高于血浆白蛋白正常组患者，差异亦有统计学意义（P〈0．01）。结论：红皮病病因多种多样，不能忽视非常见病因的存在。随着年龄的增长和血浆白蛋白的降低，红皮病患者的感染率增加，应注意皮肤护理及早期支持治疗。     

3种抗真菌药治疗甲真菌病疗效对比观察

应用伊曲康唑、特比萘芬、氟康唑３种不同抗真菌药物治疗１２０例甲真菌病患者,并作疗效对比观察,结果显示,３种药物均有较艰的抗真菌疗效,特比萘芬疗效优于伊曲康唑及氟康唑,伊曲康唑疗效优于所经康唑。３种药物近、中、远期临床治愈率及真菌学阴转率,复发率Ｐ值均〉０．０５,无统计学意义。     

天疱疮合并症的研究进展

天疱疮是一种以表皮内棘层松解为特征的自身免疫性大疱性皮肤病。天疱疮可以合并银屑病、神经系统疾病、血液系统疾病、其他自身免疫性疾病以及肿瘤等。近年来有关天疱疮合并症的报道越来越多,本文对天疱疮合并症的研究进展作一综述。