磷酸化的蛋白激酶p44／42MAPK在成年大鼠脑内的分布

目的：研究活化形式的p44／42MAPK在成年正常大鼠脑内的分布。方法：免疫组织化学方法（ABC法）。结果：磷酸化的p44／42MAPK在正常大鼠脑内有广泛的表达,出现在许多核团,特别在岛皮质、感觉运动及视、听皮质、扣带前皮质、海马尾侧的内嗅区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和中介核、视上核、蓝斑、臂旁外侧核、小脑Purkinje细胞、A5区、旁巨细胞外侧核、吻侧（C1区）和尾侧（A1区）延髓腹外侧网状结构等,阳性结构主要见于神经元的胞浆、胞核和突起内,在部分脑膜细胞和少突胶质细胞内也有表达,结论：活化的p44／42MAPK在脑内的广泛存在提示其作为重要的信号转导分子在正常状的脑功能活性中可能起重要作用。     

p27在胃癌组织中表达的意义

胃癌的发生、发展和转移涉及多种基因异常 ,其中癌基因的激活和抑癌基因的失活起着十分重要的作用。ｐ2 7Ｋｉｐ1为近年新发现的一种抑癌基因 ,其表达产物 ｐ2 7蛋白参与调控细胞周期和细胞凋亡 ,为细胞周期负性调节因子 ,它在胃癌中的表达国外已见报道〔1〕,认为ｐ2 7Ｋｉｐ1表达减少是中晚期胃癌预后不良的指标 ,但国内相关性研究较少。笔者运用免疫组化Ｓ Ｐ法 ,对 6 2例胃癌组织中的 ｐ2 7Ｋｉｐ1进行表达研究 ,目的在于探讨 ｐ2 7Ｋｉｐ1在胃癌组织中表达的确切意义及其与胃癌临床病理参数之间的相关性 ,进而分析它们在胃癌发生、发展…     

胃癌p16和cyclin D1的表达及意义

一、材料与方法1.标本 :86例胃癌组织为我院外科 1993～ 1995年间手术切除标本。参照文献进行组织学分类及分级[1] 。其中高分化腺癌 14例 ,中分化腺癌 2 4例 ,低分化腺癌 4 8例 ;2 4例不典型增生取自癌旁组织 ;另取 2 2例正常胃粘膜作对照。临床分期 :Ⅰ期 2 2例 ,Ⅱ期 18例 ,Ⅲ期 3 8例 ,Ⅳ期 8例。 78例有完整随访资料 ,生存超过 5年者 2 8例 ,占 3 2 .5 6%。2 染色方法 :按ＬＳＡＢ试剂盒 (丹麦ＤＡＫＯ公司产品 )进行染色。ｐ16蛋白多克隆抗体 (Ｎ 2 0 )为美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品 ,1∶5 0稀释 ;ｃｙｃｌｉｎＤ1单克隆抗体为Ｄ…     

hMLH1和干细胞标志物CD44在胃癌的表达及相互间的关系

目的研究错配修复基因hMLH1和干细胞标志物CD44在胃癌的表达状况、意义及相互间的关系。方法采用免疫组化SP法检测79例胃癌组织和相对应的癌旁组织中错配修复基因hMLH1和干细胞标志物CD44的表达状况,结合临床资料分析这两个指标的表达与肿瘤病理参数间的关系,运用卡方检验分析该两个指标间的相互关系。结果79例胃癌标本中,hMLH1阳性表达的有15例,占19%,,CD44阳性表达的有53例,占67.1%,两者在癌旁正常组织表达的阳性率分别为51%和15.2%,两者差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中hMLH1的表达与CD44呈负相关(P<0.05);hMLH1阴性表达、CD44阳性表达与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及脉管浸润呈正相关(P<0.05)。结论 hMLH1在胃癌的形成过程中起到重要作用,它与胃癌干细胞标志物CD44之间存在拮抗关系。     

14,15-EET通过EGFR和p44/42 MAPK信号通道诱导肿瘤细胞增殖

目的探讨14,15-EET促进肿瘤细胞增殖的机制。方法Tca-8113培养于含10%小牛血清的DMEM,必要时更换无血清DMEM使其进入静止期。用14,15-EET和/或抑制剂处理后收集细胞蛋白,用Western印迹检测EGFR和p44/42MAPK(ERK1/ERK2)的磷酸化水平。结果14,15-EET以剂量依赖性方式刺激EGFR和p44/42MAPK(ERK1/ERK2)蛋白磷酸化,该效应能够被特异性的EGFR抑制剂AG1478阻断。MTT分析显示,AG1478能够完全取消14,15-EET诱导的Tca-8113细胞增殖效应。结论EGFR的活化是花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶代谢产物14,15-EET丝裂原信号途径中的关键事件;在该途径中EGFR的活化是p44/42MAPK(ERK1/ERK2)活化的上游事件。     

胰腺癌p53上下游基因mdm2、p21WAF/CIP1以及P14ARF蛋白的表达及相互关系

目的 探讨p14ARF、p53、mdm2及p21WAF/CIP1蛋白在胰腺癌组织中的表达、相互关系及意义。方法 选取167例胰腺癌、101例癌旁与13例良性病变组织构建组织芯片(又称组织微阵列),应用免疫组织化学EnVision二步法检测这4种蛋白在胰腺良恶性病变中的表达。结果 p14ARF、p53、mdm12及p21WAF/CIP1在胰腺癌中表达的阳性率分别为35.3％(59/167)、57.5％(96/167)、64.1％(107/167)和39.5％(66/167)。同癌旁组织相比,p53和mdm2表达明显升高(P<0.01),而p14ARF和p21WAF/CIP1的表达明显降低(P<0.05)。p21WAF/CIP1的阳性表达与年龄、神经受累显著相关(P<0.05);p53的阳性表达与肿瘤的分化、淋巴结转移和神经受累均显著相关(P<0.05);mdm2的阳性表达与肿瘤的分化显著相关(P<0.05);p14ARF与年龄和浸润转移显著相关(P<0.05)。四者阳性表达两两之间统计学上具有关联性(P<0.05)。结论 p53和mdm2的过表达以及p14ARF和p21WAF/CIP1的缺失表达可能会导致胰腺癌的形成和进展;4种蛋白主要以p14ARF-p53-mdm2-p21WAF/CIP1通路的方式作用于细胞的转化和肿瘤的形成;联合检测p53和mdm2的表达可用于评定胰腺癌的恶性程度。     

胃癌组织cyclinE和p21^WAF1／CIP1蛋白表达的意义

目的探讨cyclinE和p21WAF1/CIP1蛋白在胃癌发生发展中的作用及其表达的意义.方法采用免疫组化S-P法检测正常胃黏膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生、萎缩性胃炎伴不典型增生各20例和78例胃腺癌组织中cyclinE和p21WAF1/CIP1蛋白表达.结果cyclinE蛋白阳性表达在胃癌组高于正常胃黏膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生组,而p21WAF1/CIP1蛋白表达则相反,差异均有显著性(P<0.05);cyclinE、p21WAF1/CIP1蛋白表达与胃癌细胞分化程度相关(P<0.05);有肝转移的胃癌组cyclinE阳性表达率高于无肝转移组(P<0.05);有淋巴结转移组p21WAF1/CIP1蛋白表达率低于无淋巴结转移组(P<0.05).结论cyclinE蛋白高表达与p21WAF1/CIP1蛋白失表达可能参与胃癌的发生发展过程,检测cyclinE和p21WAF1/CIP1蛋白作为反映胃癌病理学特点的参考指标可能有一定意义.     

胃癌中BRG1蛋白的表达及意义

目的 探讨BRG1基因蛋白在胃癌组织中的表达及与pRb、p53基因的相互关系。方法 应用S-P免疫组化法检测30例胃癌组织中BRG1及pRb和p53的表达情况，分析其相关性，并且结合临床病理因素，初步探讨其和胃癌发生、发展及预后的关系。结果 BRG1与pRb的表达有相关性，而和p53无关。BRG1在胃癌中的表达率为76.67％(23/30)，与正常组织相比呈高表达。BRG1和pRb的表达与胃癌的浸润、淋巴结转移、分级和分期有关。结论 BRG1蛋自在胃癌中高表达，对胃癌的发生、发展可能起重要作用。BRG1及pRb的表达可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要指标。     

葛根素通过p42/44丝裂素活化蛋白激酶途径促进脑微血管内皮细胞增殖

目的:探讨葛根素对自发性高血压大鼠(SHR)脑微血管内皮细胞增殖的影响及其信号转导机制。方法:体外培养SHR及正常血压(WKY)大鼠脑微血管内皮细胞,随机分为(1)WKY对照组:以20%丙二醇孵育24h;(2)SHR对照组:同上处理;(3)葛根素组:SHR内皮细胞以不同浓度(25、50、100ng/L)葛根素分别孵育24h;(4)胎牛血清(FBS)组:SHR内皮细胞以10%FBS孵育24h;(5)PD98059+葛根素组:SHR内皮细胞以丝裂素活化蛋白激酶(MAPKs)抑制剂PD98059(50μmol/L)预孵育10min,再以100ng/L葛根素孵育24h;(6)蛋白磷酸酶激动剂(BDM)+葛根素组:培养的SHR内皮细胞以蛋白磷酸酶激动剂2,3-丁二酮肟(20mmol/L)预孵育10min,再以100ng/L葛根素孵育24h。采用[3 H]-胸腺嘧啶核糖核苷酸([3 H]-TdR)掺入法测定各组细胞增殖,采用免疫印迹法检测各组细胞p42/44MAPKs磷酸化水平。结果:50ng/L和100ng/L葛根素组SHR大鼠微血管内皮细胞[3H]-TdR掺入值较SHR对照组分别高74.1%和96.5%(均P0.05),与FBS组比较差异无统计学意义(P0.05)。PD98059和BDM+葛根素组[3 H]-TdR掺入值分别较100ng/L葛根素组低44.7%和47.5%(均P0.05),与SHR对照组水平无统计学差异(P0.05)。25、50和100ng/L葛根素组p42MAPK磷酸化水平较SHR对照组分别高25.0%、66.7%和75.0%(均P0.05),p44MAPK磷酸化水平较SHR对照组分别高17.8%、60.2%和62.7%(均P0.05)。PD98059和BDM+葛根素组p42MAPK和p44MAPK磷酸化水平均较100ng/L葛根素组明显下调(P0.05),而与SHR对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论:葛根素能诱导SHR脑微血管内皮细胞增殖,其细胞内信号转导可能与p42/44MAPKs磷酸化途径有关。     

转化生长因子β1及其受体和Smad2、Smad4蛋白在横纹肌肉瘤中的表达

转化生长因子—β1(transforming growth factor—β1，YGFβ1)是一种对各种细胞具有刺激或抑制作用的多功能细胞生长因子，其信号通路中某一成分缺失，抗增殖作用丧失而可诱发上皮性肿瘤。而在横纹肌肉瘤中，TGFβ1及其受体(TGFBR)的过表达或异常表达可能促进肿瘤的发展和演进。尚不清TGFβ1受体的下游分子Smads在横纹肌肉     

胃癌组织中p27KIP1和MMP-9的表达及其临床意义

目的：探讨p^27KIP和MMP－9在胃癌中的表达其与临床病理参数之间的关系。方法：采用免疫组化S－P法检测56例胃癌中p^27KIP和MMP－9蛋白的表达。结果：p^27KIP和MMP－9蛋白在胃癌中的阳性率分别为46．4％和53．6％。p^27KIP蛋白的表达与肿瘤的分化程度、Lauren分型、淋巴结转移和浸润深度有关（P＜0．05），MMP－9的表达只与胃癌的Lauren分型、淋巴结转移和浸润深度有关（P＜0．05），而与分化程度无关（P＞0．05）。结论：p^27KIP蛋白低表达参与了胃癌的发展，MMP－9可能在胃癌的侵袭和转移中发挥作用。     

CD44v6在胃癌中表达及其临床意义

目的：探讨ＣＤ４４Ｖ６与胃癌发生及胃癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组化Ｓ－Ｐ方法研究１０例胃粘膜肠化及４６例胃癌的ＣＤ４４Ｖ６表达。结果：胃粘膜肠化及胃癌阳性率分别为１０％和６３％，淋巴结转移组阳性率（７５％）明显高于非转移组（４５％，Ｐ＜０．０５），且ＣＤ４４Ｖ６表达与Ｌａｕｒｅｎ分型相关。结论：ＣＤ４４Ｖ６分子参与肿瘤发生、发展     

p27~(kip1)在胃癌中的表达及与临床病理分期和预后的关系

目的 :探讨 p2 7kip1在胃癌中的表达状况及其预后价值。方法 :应用免疫组化技术 (S P法 )检测了 p2 7kip1在 6 7例胃癌中的表达。结果 :p2 7kip1在胃癌中的阳性表达率为 5 0 7% ,表达呈异质性。p2 7kip1的表达与胃癌的浸润深度 (P <0 0 5 )、淋巴结转移 (P <0 0 0 5 )、分化程度 (P <0 0 5 )及临床病理分期 (P <0 0 0 5 )显著相关 ,而与肿瘤大小、部位无关。结论 :p2 7kip1在胃癌中低表达反映了其恶性进展 ,是一个有价值的预后因子     

Smad2/3与Smad7在大鼠化疗性卵巢早衰卵泡中的表达和意义

目的 探讨顺铂对大鼠卵巢结构和功能损伤的影响及其可能的分子机制。方法 3月龄SD 雌性大鼠随机分为对照组（C组,5只）和化疗组（H组,5只）。H组给予每只大鼠腹腔注射顺铂2 mg/（kg.d）,C组给予腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d后检测大鼠卵巢指数（卵巢湿重/体重）;酶联免疫吸附法检测血清雌二醇（E₂）和促卵泡刺激素（FSH）水平;苏木素-伊红染色观察卵泡发育并计数各级卵泡;免疫组织化学和Real-time PCR法检测各组Smad2、磷酸化Smad2（p-Smad2）、Smad3、磷酸化Smad3（p-Smad3）、Smad4和Smad7的蛋白和mRNA表达。结果 与C组相比,H组大鼠卵巢体积减小,生长卵泡数明显减少（P<0.05）,大鼠卵巢指数下降（P<0.05）,血清中E2水平降低和FSH水平上升（P<0.05）。免疫组织化学和Real-time PCR结果显示,Smad2（p-Smad2）、Smad3（p-Smad3）、Smad4和Smad7蛋白在卵巢各级卵泡均有表达,H组Smad2蛋白和mRNA表达增加（P<0.05）,Smad2磷酸化水平（p-Smad2）表达增高（P<0.05）;Smad3、Smad4和Smad7蛋白和mRNA表达减少（P<0.05）,p-Smad3 表达降低（P<0.05）。结论 顺铂诱导大鼠卵泡损伤并促进卵巢早衰,引起卵泡细胞内Smad2表达增加,Smad3、Smad7表达降低,Smad细胞内信号通路参与了化疗性卵巢损伤的过程。     

CD44s在肺癌中的表达及其意义

目的:探讨CD44s在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测117例原发性肺癌的CD44s异常表达。结果:CD44s在小细胞肺癌(SCLC)不表达,而表达于非小细胞肺癌(NSCLC)中,并且鳞癌的CD44s表达强度明显强于腺癌(P＜0.05);未发生淋巴结转移的肺癌病例中CD44s的表达明显高于已经发生转移的病例(P＜0.01);按照临床肿瘤TNM分期,早期肺癌的CD44s表达显著高于进展期肺癌(P＜0.05)。结论:CD44s对肺癌组织的病理类型、淋巴结转移、临床分期以及预后的判断是一个较好的评价指标。