胰岛素样生长因子Ⅰ基因治疗对糖尿病大鼠血糖调节的研究

本研究以基因治疗的方法 ,将胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )基因导入实验性糖尿病 (DM)大鼠体内 ,使IGF Ⅰ在动物模型体内得到高效表达 ,DM大鼠血糖显著降低 ,血IGF Ⅰ升高     

人胰岛素基因转染鼠成纤维细胞致糖尿病大鼠血糖下降效应的研究

目的研究人胰岛素基因表达质粒转染鼠成纤维细胞（Ｌｔｋ－）后对糖尿病大鼠血糖的影响。方法重组的人胰岛素基因表达质粒通过脂质体法转染鼠成纤维细胞（Ｌｔｋ－），经Ｇ４１８选择性筛选获得一株较高胰岛素表达水平的细胞株（Ｌｔｋ－／ＰＲＩ１２），大量扩增，直接注射至糖尿病大鼠腹腔内，并与转染空载体的对照Ｌｔｋ－细胞比较，观察在糖尿病大鼠体内的胰岛素表达及对血糖等变化的影响。结果空载体转染的对照细胞与未转染组相似，无胰岛素表达，植入糖尿病大鼠腹腔后，血糖仍持续稳定在较高水平，体重进行性下降；而接受胰岛素表达载体细胞的糖尿病大鼠，在观察的２１天内血Ｃ肽持续表达，血糖明显下降，体重逐渐恢复。结论人胰岛素基因能成功转染非胰岛β细胞并表达目的基因使血糖水平下降。本研究为进一步开展糖尿病基因治疗研究奠定了基础。     

糖尿病的胰岛素基因治疗

糖尿病有着复杂的遗传背景,基因治疗可能成为其最终治疗手段。糖尿病基因治疗以胰岛素基因治疗为主,通过胰岛素基因导人,获得内源胰岛素替代。胰岛素基因可通过载体直接导入,也可通过体外构建的基因工程细胞输入体内;在胰岛素基因治疗中,病毒载体较为常用,但人工染色体等新型载体亦已出现;而寻找理想的胰岛素基因表达调控方案,是目前胰岛素基因治疗的主要研究方向。     

体内直接人胰岛素原基因转移对糖尿病小鼠治疗作用的研究

目的　研究人胰岛素原基因表达质粒直接转移至糖尿病小鼠体内后对其血糖和血浆胰岛素水平的影响。　方法　将人胰岛素原基因和大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 (PEPCK)启动子的重组质粒 p N - PEPCK- INS经脂质体介导 ,直接转入糖尿病小鼠体内 ,监测空腹血糖并测定血浆胰岛素水平 ,PCR法鉴定基因转入。　结果　人胰岛素原基因转移组小鼠血浆胰岛素为 (49.2 9± 14 .5 6 )ml U / L ,显著高于生理盐水对照组 (37.5 6± 8.4 ) m l U / L (P<0 .0 5 )和质粒 PL NC对照组 (33.5 4±13.35 ) ml U / L (P<0 .0 5 ) ,生理盐水组与质粒 PL NCX组差别无显著性 (P>0 .0 5 ) ,人胰岛素原基因转移组空腹血糖显著低于基因转入前 (P<0 .0 5 )。生理盐水组和质粒 PL NCX组空腹血糖基因转入前后差异无显著性。　结论　人胰岛素原基因可通过脂质体介导直接转移入糖尿病小鼠体内并发挥治疗作用     

人胰岛素基因转染鼠成纤维细胞致糖尿病大鼠血糖下降效 …

研究人胰岛素基因表达质粒转染鼠成纤维细胞后对糖尿病大鼠血糖的影响。方法重组的人胰岛素基因表达质粒通过脂质体法转染鼠成纤维细胞，经Ｇ４１８选择性筛猩 株较高的胰岛素表达水平的细胞株，大量扩增，直接注射至糖尿病大鼠腹腔内，并与转染载体的对照Ｌｔｋ细胞比较。     

基因治疗与胰岛素依赖型糖尿病

近年来许多研究致力于探索胰岛素依赖型糖尿病基因治疗的途径和可行性。首先可利用各种现代分子生物学技术改造胰岛Ｂ细胞系或建立人工Ｂ细胞，以获得能够分泌胰岛素并可对引起胰岛素分泌的生理刺激作出正确反应的各种细胞，然后再进行细胞移植。另外还可通过体内胰岛素基因转移直接在体内表达胰岛素     

体内胰岛素基因转移治疗1型糖尿病的研究现状

基因治疗是近年来随着基因重组和基因转移技术的迅速发展而出现的治疗1型糖尿产现的一条新途径，而胰岛素基因是糖尿病基因治疗的主要目的基因。文中分别就生殖细胞水平基因转移、体内间接基因转移以及体内直接基因转移3个方面，从基因转移方法、途径等角度，就胰岛素基因转移治疗1型糖尿病的研究现状作一简要综述。     

体内胰岛素基因转移治疗1型糖尿病的研究现状

基因治疗是近年来随着基因重组和基因转移技术的迅速发展而出现的治疗 1型糖尿病的一条新途径 ,而胰岛素基因是糖尿病基因治疗的主要目的基因。文中分别就生殖细胞水平基因转移、体内间接基因转移以及体内直接基因转移 3个方面 ,从基因转移方法、途径等角度 ,就胰岛素基因转移治疗 1型糖尿病的研究现状作一简要综述。     

糖尿病基因治疗中胰岛素基因表达调控的研究进展

目前糖尿病基因治疗的方向之一是寻找理想的胰岛素表达调控方案 ,以达到胰岛素生理性合成和释放的目的。肝脏是目前胰岛素基因异位表达的最佳靶器官 ,而且肝细胞可转化成为合成并分泌胰岛素的细胞。另外 ,通过控制内质网的凝聚过程、与胰岛 β细胞同源的K细胞及四环素调控基因实现胰岛素的可控分泌也是很有前途的胰岛素基因治疗途径     

2型糖尿病精氨酸刺激后胰岛素原的释放及其与血糖的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者精氨酸刺激后胰岛素原(PI)释放的变化及其与血糖水平的关系。方法选择2001年11月至2003年8月上海交通大学附属第六人民医院的106例T2DM患者及35名正常糖耐量(NGT)健康对照者行精氨酸刺激试验,分析比较精氨酸刺激试验后PI及其增值(ΔPI)和PI/[真胰岛素(TI) PI]的变化。结果(1)T2DM组精氨酸刺激后各时间点PI、PI/(TI PI)值显著高于NGT组(P均<0.01),其PI在2min时达峰值,随后呈逐渐下降趋势。(2)不同空腹血糖(FPG)的T2DM患者各时间点PI、PI/(TI PI)分析显示FPG2组(7mmol/L≤FPG<9mmol/L)和FPG3组(FPG≥9mmol/L)明显高于FPG1组(FPG<7mmol/L,P均<0.05)。结论精氨酸刺激后PI“不成比例”增加是T2DM患者胰岛B细胞功能缺陷的重要表现之一,因此在比较T2DM与NGT人群胰岛B细胞功能时应测定TI以减少PI的干扰。     

连续胰岛素静脉注射对老年糖尿病患者并发功能性消化不良的干预效果

目的 探究在老年糖尿病并发功能性消化不良患者干预中将连续胰岛素静脉注射方法进行应用的临床效果。方法 选取该院2018年2月—2021年10月收治的100例老年糖尿病并发功能性消化不良患者,给予常规干预的为对照组,给予连续胰岛素静脉注射的为研究组,每组50例。对比两组患者的血糖变化、干预前后的临床症状积分和胃肠动力恢复情况。结果 干预后,研究组患者的空腹血糖、餐后2 h血糖和糖化血红蛋白值分别为（6.34±1.32）mmol/L、（8.56±2.41）mmol/L和（6.75±1.61）%,饱胀不适、腹胀和上腹灼烧感评分分别为（0.68±0.21）分、（0.75±0.25）分和（0.63±1.55）分,胃电幅、胃电主功率、胃泌素（CAS）和胃动素（MTL）指标值分别为（149.34±20.11）μV、（98.56±8.22）dB、（88.12±5.45）μmol/L和（182.34±19.65）μmol/L,各项指标均优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在老年糖尿病并发功能性消化不良患者中将连续胰岛素静脉注射方法进行应用,对患者恢复具有积极意义,可促进患者血糖水平和...     

重组exendin-4对遗传性胰岛素抵抗糖尿病大鼠糖耐量的影响

目的研究重组exendin-4对遗传性胰岛素抵抗糖尿病(OLETF)大鼠血糖和胰岛素分泌的影响以及与转录因子胰十二指肠同源盒因子(pdx-1)mRNA表达的关系。方法将雄性OLETF大鼠随机分成对照组及EX4 A、B、C组。对照组腹腔内注射生理盐水,EX4 A、B、C组分别腹腔内注射5、20、100μg/kg的exendin-4,每日1次。1周后行口服葡萄糖耐量试验及胰岛素释放试验。半定量RT-PCR检测胰腺pdx-1 mRNA表达。结果EX4注射组糖耐量改善,空腹、120 min血糖及高峰血糖均明显降低,胰岛素分泌明显增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。B细胞功能指数(HOMA-B)EX4各组分别为98.18±29.14、73.74±22.19、135.86±58.62,与对照组(36.88±15.14)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。而胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI)EX4 A、B组与对照组比较,差异无统计学意义。pdx-1 mRNA EX4各组分别是0.40±0.15、0.56±0.15和0.65±0.17,均明显高于对照组的0.24±0.13(P<0.05)。结论exendin-4能促进OLETF大鼠胰岛素分泌,改善大鼠糖耐量及B细胞功能,并上调pdx-1 mRNA的表达。     

人胰岛素原基因在体外培养的NIH 3T3细胞中的基因转移和表达的研究

研究人胰岛素原基因在体外培养的小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３细胞系的基因转移和表达情况,进而为１型糖尿病的基因治疗提供实验依据。方法采用脂质体转染法分别将未携带外源基因的反转录病毒载体ｐＬＮＣＸ和携带大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶启动子－人胰岛素原基因的重组反转录病毒载体ＰＮ－ＰＥＰＣＫ－ＩＮＳ转染到体外培养的ＮＩＨ３Ｔ３细胞中,转染后７２小时,用Ｇ４１８筛选出阳性细胞克隆并培养至２４天,提取细胞的染色体     

高表达Klotho基因对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制

目的探讨Klotho基因对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机制。方法取2月龄Wistar大鼠,腹腔注射STZ诱导产生糖尿病,2 w后检测大鼠尿微量白蛋白增高证明糖尿病肾病(DN)大鼠模型制备成功,另取18只正常大鼠腹腔注射等量柠檬酸缓冲液作为对照组(Con组)。将54只DN模型大鼠随机分成DN组、Ad组和Klotho组,Klotho组每隔2 w大鼠尾静脉注射含Klotho基因病毒3×108PFU,Ad组注射等量不含Klotho基因的病毒,Con组和DN组注射等体积生理盐水。四组大鼠均至第4、8、16周处死,取肾组织。病理观察肾脏形态学变化,免疫组化观察Klotho蛋白和PAI-1的表达与分布;RT-PCR检测基因Klotho、TGF-β1、p15、p21、p27、PAI-1 mRNA在肾组织的表达,Quantity one图像分析软件分析其表达量差异。结果免疫组化检测结果显示,与Con组对比,4、8、16 w时,DN组和Ad组大鼠肾小球、肾小管及肾间质内Klotho蛋白表达量减少,而Klotho组大鼠肾脏Klotho蛋白表达量变化不明显,与Con组接近;与Con组相比,DN组和Ad组PAI-1蛋白表达量增加,Klotho组的PAI-1蛋白表达量变化不明显,接近Con组。RT-PCR结果显示,Klotho、TGF-β1、p15、p21、p27、PAI-1基因PCR产物与预期扩增产物大小一致,与Con组对比,在4、8、16 w时DN组和Ad组的Klotho mRNA表达量明显减少(P=0.010～0.001),Klotho组Klotho mRNA表达量变化不明显,但高于DN组和Ad组(P=0.002～0.001)。DN组和Ad组TGF-β1、p15、p21、p27、PAI-1 mRNA表达量明显高于Con组(P=0.041～0.002),Klotho组变化不明显,接近Con组,但低于DN组和Ad组(P=0.048～0.002)。结论 Klotho基因通过下调TGF-β1、PAI-1、p15、p21、p27基因的表达而实现对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

胰岛素依赖型糖尿病易感性基因的研究现状

ＩＤＤＭ１（ＨＬＡ区６ｐ２１）和ＩＤＤＭ２（ＩＮＳ区１１ｐ１５）为ＩＤＤＭ易感性基因，ＩＤＤＭ易患等位基因主要集中在ＩＤＤＭ１ＨＬＡⅡ类ＤＱ、ＤＲ亚区。从随机基因组的搜寻，推测有１０多个新的ＩＤＤＭ易感性基因，在ＩＤＤＭ发病中起一定作用。多基因疾病中建立候选基因与该病显著性连锁的统计标准还有争论。根据易感性基因相互作用提示：ＩＤＤＭ致病机制是异质性的     

德谷门冬双胰岛素与基础-餐时胰岛素短期强化治疗对新诊断2型糖尿病血糖控制的影响

目的 探讨德谷门冬双胰岛素（IDegAsp）2次/d与基础-餐时胰岛素4次/d注射方案对新诊断T2DM BG控制的影响。方法 选取2020年1月至2021年4月于安徽医科大学第一附属医院内分泌科门诊或住院治疗的新诊断T2DM患者60例,佩戴扫描式葡萄糖监测仪（FGM）1周后随机分为IDegAsp组及基础-餐时胰岛素（BB）组,每组各30例,强化治疗3周后再次佩戴FGM 1周。结果 胰岛素强化治疗4周后IDegAsp组葡萄糖目标范围内时间（TIR）高于BB组（P<0.05）,葡糖糖波动水平（IQR）、低血糖持续时间（HopD）及低血糖发生率低于BB组（P<0.05）。Pearson相关分析显示,△TIR与△FPG、△2 hPG、△IQR、△平均葡萄糖值呈正相关（P<0.05）,与△HpoD呈负相关（P<0.05）。多元线性回归分析结果显示,△IQR、△HpoD是△TIR的影响因素。结论 新诊断T2DM患者IDegAsp 2次/d优于基础-餐时胰岛素4次/d注射方案,具有减少低血糖风险、降低BG波动的优势。     

肥胖对APOE基因型与血浆胰岛素和血糖关系的影响

目的 本文旨在探讨超重／肥胖和载脂蛋白E（APOE）基因型间的交互作用对血浆胰岛素水平和血糖水平的影响。方法 利用北京自然人群横断面研究，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR—RFLP）进行APOE基因分型，将研究对象以性别、体重指数和基因型分层，比较不同基因型人群血浆胰岛素和血糖水平；分析不同APOE不同基因型和肥胖对血浆胰岛素和血糖水平的影响。结果 （1）随着体重指数的增加，血浆胰岛素和血糖水平明显升高，具有统计学意义；（2）APOE基因型与超重和肥胖的交互作用对血浆胰岛素和血糖水平的影响在女性中具有统计学意义（P=0．003）；（3）与APOE3基因型携带者相比，肥胖的男性APOE2携带者和女性APOFA携带者具有较高的血糖和胰岛素水平。结论 APOE基因多态性对血浆胰岛素和血糖水平的影响受超重／肥胖的调控。     

甘精胰岛素对2型糖尿病患者血糖波动幅度的影响

目的 观察甘精胰岛素对2型糖尿病（T2DM）患者血糖水平、24h波动幅度的影响及安全性。方法将同期收治的50例T2DM患者随机分为观察组和对照组各25例,分别采用甘精胰岛素及中性低精蛋白锌人胰岛素作为基础治疗药物。治疗前及治疗达标（空腹血糖〈7．0mmol／L）后第2天检测患者空腹、三餐后2h和睡前血糖,计算24h血糖标准差、极差（血糖最高值和最低值之差）,记录低血糖发生情况。结果两组治疗后24h血糖标准差和极差均显著低于治疗前,且观察组显著低于对照组（P均〈0．001）;两组低血糖发生率无显著差异。结论 甘精胰岛素可降低T2DM患者血糖水平及24h血糖波动幅度,且安全性高。