川芎嗪对脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导引起的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)损伤的保护作用。方法以人脐静脉内皮细胞为实验对象,MTT法检测细胞活力,比色法测定一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性,硝酸还原酶法测上清液一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,荧光法测定胞内NO及ROS水平,流式细胞仪法测定细胞凋亡与周期。结果川芎嗪与脂多糖同内皮细胞孵育后没有引起细胞活力的明显改变,排除了实验模型中药物直接细胞毒作用。脂多糖可以抑制细胞NOS活性(P<0.05)及胞内外NO含量(P<0.05),增加胞内ROS水平(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.05),抑制正常细胞周期的进程(P<0.05),而川芎嗪可以恢复脂多糖所致的上述效应,并具有一定的浓度依赖性。结论川芎嗪可以通过有效抑制脂多糖诱导的HUVEC NO、ROS水平改变所引起的细胞凋亡,从而起到内皮细胞损伤的保护作用。     

一氧化氮与一氧化氮合成酶在妊高征疾病过程中的变化及其意义

目的:探讨一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(NOS)在妊高征发病过程中的致病机理及其临床意义。方法:用分光光度计对正常妊娠孕妇34例(正常妊娠组)和妊高征孕妇39例(妊高征组)的血浆 NO和脐静脉血管内皮细胞 NOS 活性进行测定比较。结果:与正常妊娠组相比,妊高征组产前 NO 活性明显低于对照组(P<0.01),重度妊高征的降低尤其显著,但产后各组无显著差异;妊高征组脐血 NO 水平和跻静脉血管内皮细胞 NOS 活性明显低于正常组;正常妊娠组脐血 NO 水平比其外周血高;妊高征患者外周血 NO 水平与平均动脉压(MAP)呈显著负相关。讨论:NO 的合成、释放减少及 NOS 活性降低在妊高征的病理生理过程中起着重要作用。     

晚期糖基化终末产物对人脐静脉内皮细胞分泌NO功能的影响

【摘要】 目的 探讨晚期糖基化终产物（AGEs）对人脐静脉内皮细胞一氧化氮分泌功能的影响。方法 培养人脐静脉内皮细胞,制备晚期糖基化终末产物（AGEs-HSA）。将体外培养的人脐静脉内皮细胞随机分为AGEs-HSA组和HSA（人血白蛋白）组, 分别用不同浓度的AGEs-HSA、HSA刺激内皮细胞24 h。然后用酶联免疫法分别测定细胞培养上清液中的NO含量、NOS活性、SOD活性和MDA含量。结果 1与HSA组相比,AGEs-HSA组在浓度为100、200、400 mg/L 时能够明显抑制内皮细胞NO的产生和NOS的活性,并呈浓度依赖性（P <0.05）。2与HSA组相比,AGEs-HSA组在浓度为25、50、100、200、400 mg/L 时均能够明显抑制内皮细胞SOD的活性和促进MDA含量的增加,并呈浓度依赖性（P <0.05）。3 AGEs-HSA组中在AGEs-HSA刺激浓度为400 mg/L时, NO浓度和NOS活性、SOD活性呈正相关（P <0.01）,而与MDA含量呈负相关（P <0.01）。NOS的活性与SOD活性呈正相关（P <0.01）,与MDA含量呈负相关（P <0.01）。结论 晚期糖基化终末产物能够抑制人脐静脉内皮细胞NO的分泌。其机制之一可能是AGEs介导内皮细胞发生氧化损伤致使NOS活性降低进而导致内皮细胞NO分泌下降。      

艳山姜挥发油对氧化低密度脂蛋白诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤及一氧化氮合酶-一氧化氮的影响

目的:研究艳山姜挥发油对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及一氧化氮合酶-一氧化氮(NOS-NO)的影响。方法:体外传代培养人脐静脉内皮细胞,给予0.1μg·mL-1和0.01μg·mL-1艳山姜挥发油孵育24h后,加入100μg·mL-1 ox-LDL作用24h诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型,倒置相差显微镜及吉姆萨染色观察细胞形态学变化,比色法分析细胞培养液NO的含量与细胞裂解液NOS分型活力。结果:Ox-LDL与人脐静脉内皮细胞作用24h后,细胞胞膜皱缩,细胞数目减少,tNOS与eNOS活力显著降低,培养液NO含量降低。艳山姜挥发油显著改善细胞形态学变化,提高细胞tNOS与eNOS活力及培养液中NO含量。模型组与艳山姜挥发油组均对iNOS未见显著影响。结论:艳山姜挥发油对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用,其保护作用与改善eNOS活力,提高NO水平相关。     

二苯乙烯苷对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶及其基因的调节作用

目的探讨二苯乙烯苷（THSG）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）一氧化氮（NO）含量及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性的影响及其机制。方法培养HUVECs,分为阴性对照组和THSG 1,10,100 μmol&#8226;L－1组,用分光光度比色法检测HUVECs上清液中NO含量和eNOS活性,RT PCR法检测HUVECs eNOS mRNA水平,Western Blot检测HUVECs eNOS蛋白表达。结果与阴性对照组比较,THSG各剂量组HUVECs中NO含量和NOS活性显著提高,eNOS mRNA和蛋白表达上调（P＜0.05）,并呈剂量依赖性。结论THSG可通过上调血管内皮细胞中eNOS表达来增加NO量,从而发挥舒张血管作用。     

芹菜素延缓人脐静脉内皮细胞衰老的体外实验研究

目的：探究芹菜素对人脐静脉内皮细胞衰老的延缓作用及相关机制。方法：将人脐静脉内皮细胞培养至第12代（老年细胞）,且自第4代（幼年细胞）起,与芹菜素（1、3、10μmol&#183;L^-1）共孵育。通过检测细胞β-半乳糖苷酶（sAβ-gal）阳性率,推断细胞衰老程度;通过检测胞内双氢罗丹明氧化产物Rh123的荧光强度,推断胞内活性氧簇（ROS）水平,即氧化应激水平;通过检测培养液中硝酸盐／亚硝酸盐含量,推断胞内一氧化氮（NO）水平。结果：与幼年细胞组相比,老年细胞对照组中内皮细胞SAβ-gal阳性率及ROS水平均明显提高（P〈0．05）,且其培养液中硝酸盐／亚硝酸盐含量明显降低（P〈0．05）;在老年细胞组中,与对照组相比,芹菜素组中内皮细胞sAβ-gal阳性率及ROS水平均明显呈芹菜素剂量依赖性降低（P〈0．05）,而其培养液中硝酸盐／亚硝酸盐含量也明显呈芹菜素剂量依赖性增加（P〈0．05）。结论：芹菜素可延缓人脐静脉内皮细胞的衰老,且该作用与胞内ROS生成减少及NO生成增加有关。     

卡托普利和阿司匹林相互作用对培养乳鼠心肌细胞损伤的影响及其机制探讨

目的　观察卡托普利和阿司匹林相互作用对培养乳鼠心肌细胞损伤的影响及其机制。方法　建立培养乳鼠心肌细胞损伤模型 ,分别采用酶联法及Griess试剂法测定培养液中乳酸脱氢酶和一氧化氮活性 ,采用Fura 2负载荧光技术检测胞内游离钙水平。结果　与模型组相比 ,卡托普利和阿司匹林均显著减少培养介质中LDH水平 ,显著增加NO生成 ,但二者联用存在显著的相互作用 ,且表现为拮抗效应。卡托普利显著减少胞内游离钙浓度 ,而阿司匹林单用及合用卡托普利均明显增加胞内游离钙浓度。结论　卡托普利和阿司匹林联用时对培养乳鼠心肌细胞损伤存在显著的相互作用 ,其机制与其减少NO生成及增加胞内游离钙浓度有关     

2型糖尿病血浆一氧化氮、一氧化氮合成酶水平的观察

目的　研究血管内皮细胞合成分泌的血管活性物质一氧化氮 (NO)、一氧化氮合成酶 (NOS)在 2型糖尿病的变化及临床意义。方法　用化学比色法方法测定 76例有和无血管并发症的 2型糖尿病患者以及 5 1例正常人血浆NO的水平。结果　 2型糖病血浆NO水平明显低于正常对照组 ,而有血管并发症的糖尿病血浆NO的水平低于无血管并发症的糖尿病组 ;而NOS的水平各组间无显著差异。结论　本组观察结果提示NO在 2型糖尿病血管并发症的发生发展过程中起重要作用 ,可影响病人的血流动力学 ,NO的水平一定程度上反映糖尿病及血管损伤的程度 ;NOS无明显的差异可能为NO前体不足导致NO减少 ,尚需进一步研究。     

脂联素对人脐静脉内皮细胞保护作用的实验研究

目的体外培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）,加入低密度脂蛋白（LDL）建立细胞损伤模型,观察脂联素（APN）对模型细胞结构和功能的影响。方法观察对照组、LDL损伤组、APN预处理组和APN干预组内皮细胞（EC）的形态改变,测定细胞活性,测定细胞培养上清中一氧化氮（NO）、乳酸脱氢酶（LDH）和6-酮前列腺（6-keto-PGF1）的含量变化,测定细胞中一氧化氮合酶（NOS）的含量。结果与正常细胞对照组比较,LDL损伤组的细胞形态明显改变,细胞存活率明显降低,LDH释放明显增高,NO、NOS和6-keto-PGF1合成明显降低（P〈0.01）;而APN预处理组和干预组能明显降低LDH释放,促进NO、NOS和6-keto-PGF1合成（P〈0.01）。结论 APN对EC有一定的保护作用,能拮抗LDL对EC的损伤。     

甲基莲心碱对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞的保护作用

摘 要 目的：探讨甲基莲心碱对脂多糖（LPS）诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护机制。方法: 通过预实验筛选出LPS最佳的诱导浓度;再采用最适浓度的LPS模拟人脐静脉内皮细胞炎性损伤模型,通过CCK8测定不同浓度的甲基莲心碱（0.3,1,3,5,10 μmol·L^-1）对损伤细胞的凋亡率的影响;Griess Reagent法用于检测一氧化氮(NO)的含量; 比色法测定一氧化氮合酶( NOS)分型的活力;倒置显微镜观察细胞形态变化。结果: CCK8检测到LPS的浓度为100μg·mL^-1时,细胞抑制率为54.50%,此时细胞的损伤适中,确定为诱导浓度（P＜0.01）。在0.3～5.0 μmol·L^-1内,不同浓度的甲基莲心碱能明显提高损伤后的HUVECs的细胞活性,但在10 μmol·L^-1时,HUVECs细胞的增殖明显减少（P＜0.05）。甲基莲心碱能显著性逆转LPS诱导的人脐血管内皮细胞中NO含量的增加和总NOS（tNOS）和iNOS的活性的升高（P＜0.05）。倒置显微镜结果显示,甲基莲心碱在0.3~5.0 μmol·L^-1的浓度范围内,随着浓度增加,漂浮的死细胞变少,细胞形态基本良好,细胞间排列紧密。结论:甲基莲心碱能够逆转LPS诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤,其机制可能与调节内皮细胞中NO的释放和NOS的活力有关。     

戊四唑癫痫大鼠脑组织一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性变化

探讨一氧化氮在戊四唑癫病发机制中的作用。方法每天注射戊四唑建立在鼠癫痫模型,测定癫病发作后大鼠大脑皮质,海马一氧化氮和一氧化氮合酶活性变化,结果癫痫发作后海马ＮＯ含量和ＮＯＳ活性显著升高,结 戊四唑诱导的癫痫中具有致痫性。     

Influence of salt on subcellular localization of nitric oxide synthase activity and expression in the renal inner medulla

1. The aims of this study were: (i) to characterize the subcellular localization of nitric oxide synthase (NOS) 1 and NOS3 activity and expression within the cytosolic, plasma membrane and intracellular membrane subcellular fractions of the renal inner medulla of rats; and (ii) to determine whether NOS1 and NOS3 activity and expression in subcellular fractions of the renal inner medulla are regulated by dietary salt intake. Although the NOS system is important in maintaining Na(+) and water homeostasis, the identity of the NOS isoform that is sensitive to dietary Na(+) remains unclear. In addition, subcellular localization of both NOS1 and NOS3 has been shown to regulate enzymatic activity and influence the ability of NOS to produce nitric oxide (NO). 2. Renal inner medullae were dissected from male Sprague-Dawley rats and separated into cytosolic, plasma membrane and intracellular membrane fractions for measurement of NOS activity and western blot analysis. 3. On a normal-salt diet, NOS activity and NOS1 and NOS3 protein expression were present in all three subcellular fractions, although total NOS activity was enriched in the intracellular membrane fraction. In response to a high-salt diet, urinary nitrate/nitrite (NO(x)) increased. Despite an increase in NO(x) excretion, total NOS activity in the renal inner medullary homogenate was decreased. There were no detectable differences in NOS activity in the subcellular fractions. Expression of NOS1 protein was decreased in the cytoplasmic and plasma membrane fractions, although maintained in the intracellular membrane fraction, in response to high salt. Expression of NOS3 protein was unaffected by high salt. 4. In conclusion, we hypothesize that NOS1 localization in the intracellular membrane is important in increasing NO production to aid Na(+) and water homeostasis.     

花色素苷诱导小鼠巨噬细胞一氧化氮生成及其机制

目的研究花色素苷对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)合成的诱导作用及其机制。方法用CCK-8试剂检测花色素苷对小鼠脾细胞增殖的影响;硝酸盐还原酶法检测小鼠腹腔巨噬细胞NO含量;荧光法检测一氧化氮合酶(NOS)活性;RT-PCR检测iNOS mRNA的表达。结果花色素苷可促进小鼠脾细胞增殖,诱导小鼠腹腔巨噬细胞合成NO,提高NOS活性,其中矢车菊素-3-葡萄糖苷能够诱导iNOS mRNA的表达。结论花色素苷能够促进脾细胞的增殖,诱导小鼠腹腔巨噬细胞合成NO,使巨噬细胞激活,具有一定的免疫调节活性。     

唑尼沙胺对癫痫大鼠血清及脑组织 NO 含量及 NOS 活性的影响

摘要： 目的 探讨新型抗癫痫药物唑尼沙胺对癫痫大鼠血清及脑组织 NO 含量及一氧化氮合酶 （NOS） 活性的影响。方法 50 只健康雄性 SD 大鼠中随机抽取 8 只为正常对照组, 剩余 42 只全部腹腔注射戊四氮制成癫痫模型, 从中随机抽取 24 只, 以完全随机分组法分为癫痫模型组、 唑尼沙胺组及苯巴比妥组, 监测各组大鼠经药物干预后血清及脑组织 NO、 丙二醛（MDA）含量及 NOS、 超氧化物歧化酶（SOD）的活性变化。结果 35 只（83%）大鼠模型制备成功; 戊四氮致痫大鼠的脑电图中均可见阵发性癫痫波; 与正常对照组比较, 癫痫模型组和唑尼沙胺组大鼠的血清和脑组织的 NO、 MDA 含量及 NOS 活性明显升高, SOD 活性下降; 苯巴比妥组脑组织 NO、 MDA 含量升高, SOD 活性下降, 血清 MDA 含量升高。与癫痫模型组比较, 唑尼沙胺组和苯巴比妥组大鼠血清和脑组织 NO、 MDA 含量及 NOS 活性明显降低, SOD 活性升高, 差异有统计学意义 （P＜0.05）。结论 唑尼沙胺通过降低脑组织 NO 含量而发挥其抗癫痫作用。     

果糖二磷酸钠镁对缺血突触体游离钙浓度及一氧化氮合酶活性的影响

目的研究果糖二磷酸钠镁对缺血突触体游离钙浓度及一氧化氮合酶活性的影响,以探讨其保护脑缺血的作用机制。方法以相分离法制备正常大鼠脑突触体,氧糖剥夺培养建立缺血突触体模型,加入1.3 mmol·L^-1 SMFD,4.0 mmol·L^-1 FDP与之培养60 min后,测定突触体内游离钙浓度和一氧化氮合酶活性。结果1.3 mmol·L^-1 SMFD可明显降低缺血突触体内游离钙浓度,降低一氧化氮合酶活性,其作用强于4.0 mmol·L^-1 FDP。结论SMFD保护脑缺血的作用机制可能与其阻止脑缺血后细胞内钙超载,抑制一氧化氮合酶活性有关。     

高压氧对脑梗死后血清一氧化氮和一氧化氮合酶含量的影响

目的 研究高压氧对脑梗死后血清一氧化氮、一氧化氮合酶含量的影响。方法 将脑梗死患者分为高压氧治疗组和非高压氧治疗组,观察不同病期血清一氧化氮、一氧化氮合酶含量的变化,并与正常对照组进行比较。结果 高压氧治疗组一氧化氮含量较非高压氧治疗组上升快,在治疗后15天恢复正常,但在一疗程高压氧治疗结束后,却又有所下降;一氧化氮合酶含量在治疗后均有上升,未能恢复到正常水平,两组之间无差异。结论 高压氧通过提高NO的含量,减轻缺血区脑组织的损伤,改善脑血循环;高压氧对NOS有一定影响,但作用不大;应适当延长高压氧疗程,尽可能缓解因NOS含量下降所造成的NO释放量不足。     

血脂康对急性冠脉综合征患者内皮功能的影响

目的观察血脂康对急性冠脉综合征患者血清一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）的影响。方法随机选择急性冠脉综合征病患者67例．将其随机分为血脂康治疗组35例，阿托伐他汀组32例，并对两组患者治疗前后血清NO及NOS含量水平进行对比分析。结果血脂康和阿托伐他汀均可升高急性冠脉综合征患者血清NO及NOS水平，其作用无明显差异（P〉0．05）。结论血脂康可抑制脂质过氧化反应．保护血管内皮功能，对急性冠脉综合征的防治具有重要意义。     

Nitric Oxide Synthase Activity In Adrenocorticotrophin-Induced Hypertension In The Rat

1. The nitric oxide (NO) system has been implicated in the pathogenesis of various forms of experimental hypertension. We studied nitric oxide synthase (NOS) activity as a possible indicator of NO production in adrenocorticotrophin (ACTH)-induced hypertension in the rat. 2. Haemodynamic, metabolic and biochemical parameters were examined in sham (saline)- and ACTH (100 microg/kg per day)-treated male Sprague-Dawley rats (n = 20). 3. Adrenocorticotrophin treatment increased systolic blood pressure, serum corticosterone, adrenal NOS activity and adrenal nitrate and nitrite concentrations and decreased bodyweight and plasma nitrate/nitrite. 4. Previous observations of diminished NO production in ACTH- and corticosterone-induced hypertension in the rat were confirmed, but could not be explained by reduced NOS activity in the present study.