氯化三乙基锡对体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

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五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的作用及机制

目的探讨五味子多糖对裸鼠胶质瘤细胞的诱导凋亡作用的机制。方法体外提取和原代培养裸鼠胶质瘤细胞,将浓度为0、200、400和800μg/ml的五味子多糖作用于裸鼠胶质瘤细胞中培养48 h后,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测其上清液中Bax和Bcl-2的蛋白表达;细胞免疫组织化学法观察五味子多糖作用后裸鼠胶质瘤细胞Bax和Bcl-2阳性表达率。结果不同浓度五味子多糖作用细胞后,细胞培养上清中Bcl-2蛋白表达水平均下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),Bax/Bcl-2值均升高(P<0.01)。细胞免疫组化结果显示,400和800μg/ml多糖组Bax阳性表达率明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。400和800μg/ml多糖组Bcl-2阳性表达率下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的机制可能是通过上调Bax/Bcl-2比值,使促凋亡因素占优势,从而使胶质瘤细胞发生凋亡。     

5-硝基-2-(3-苯丙胺)-苯甲酸对C6胶质瘤细胞生长的影响

目的探讨氯离子通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)-苯甲酸(NPPB)对大鼠神经胶质瘤C6细胞生长的影响机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分析NPPB对C6细胞生长的影响;ELISA法检测细胞培养上清中Bax、Bcl-2及半胱氨酸蛋白酶(Caspase)3蛋白的变化。结果与对照组相比,40、80、160μmol/L NPPB作用12、24 h时,能明显促进C6细胞的生长(P<0.05),但40、80、160μmol/L NPPB作用48 h后细胞活力明显下降(P<0.05),且作用呈浓度依赖性。ELISA结果显示,与对照组相比,80、160μmol/L NPPB作用后Bax蛋白、Caspase-3蛋白水平明显上调(P<0.05);80、160μmol/L NPPB作用后Bcl-2蛋白水平明显下调(P<0.05);160μmol/L NPPB作用后Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05)。结论 NPPB可能是通过上调Bax水平,下调Bcl-2的水平,使Bax/Bcl-2比值升高后促使Caspase-3蛋白激活,进而诱导C6细胞凋亡发挥抑制细胞生长的作用。     

氯化镧诱导脑胶质瘤SHG44细胞凋亡作用的机制

目的探讨氯化镧对人脑胶质瘤细胞株SHG44细胞诱导凋亡及其作用机制。方法体外培养人胶质瘤细胞,流式细胞仪、电镜检查细胞周期和超微结构的改变,原位杂交技术及免疫组化染色技术检测bcl-2、bax基因、蛋白表达情况。结果氯化镧能促进入脑胶质瘤SHG44细胞发生凋亡,明显增加G1期DNA含量,减少S期DNA含量。使bax基因、蛋白表达显著增强,bcl-2、bax基因蛋白表达显著减弱（P〈0．05）。结论氯化镧可抑制人脑胶质瘤SHG44细胞的生长,并促进其凋亡。     

黄连解毒汤对胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的观察黄连解毒汤在体外对胶质瘤C6细胞增殖的影响。方法制备黄连解毒汤固体样品,采用细胞培养技术以含10％胎牛血清的DMEM培养基体外培养C6细胞,不同浓度的黄连解毒汤作用不同时间后,用MTY比色法观察其对C6细胞增殖的影响,倒置显微镜观察C6细胞形态变化。结果随着黄连解毒汤浓度增加、培养时间的延长,C6细胞增殖抑制率逐渐增加,抑制作用呈剂量-效应和时间-效应关系（P均〈0．05）。黄连解毒汤作用下C6细胞胞质回缩,细胞变圆、固缩,贴壁细胞数量减少。结论黄连解毒汤体外对胶质瘤C6细胞增殖有抑制作用。     

蟾蜍灵联合奥沙利铂对胃癌MGC803细胞增殖抑制及凋亡的影响

目的 研究蟾蜍灵联合奥沙利铂诱导人胃癌细胞株MG C803凋亡及对凋亡因子Bax、Bcl-2的影响.方法 应用MTr法检测不同浓度蟾蜍灵及奥沙利铂单药及联合对胃癌细胞MGC803增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡和周期阻滞;Western印迹法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达.结果 (1)蟾蜍灵及奥沙利铂单药均抑制MGC803细胞增殖,呈剂量时间依赖效应,且联合用药的细胞增殖抑制率高于单药组,差异有统计学意义.24、48 h及72 h联合指数(CI)分别为0.693、0.596、0.481;(2)药物作用细胞24h,流式细胞仪检测10 nmol/L蟾蜍灵及10 μg/ml奥沙利铂凋亡率分别为2.9％及4.3％,联合用药组为14.13％,与单药组对比有统计学差异;(3)Western印迹结果显示,蟾蜍灵、奥沙利铂单用于胃癌细胞24h后,Bax及Bcl-2表达无明显变化,而联合组Bax蛋白表达上调到对照组145.94％,Bcl-2蛋白下调到对照组57.14％.结论 蟾蜍灵联合奥沙利铂协同诱导胃癌MGC803细胞凋亡,且可能与下调Bcl-2、上调Bax蛋白有关.     

齐墩果酸对人早幼粒白血病NB4细胞增殖的影响及其机制

目的 探讨齐墩果酸对NB4细胞增殖的影响及其作用机制.方法 40、60、80和100 μmol/L的齐墩果酸分别处理体外培养的人早幼粒白血病NB4细胞24、48和72 h后,MTT比色法检测NB4细胞活力;实时荧光定量PCR分析凋亡相关基因Bcl-2及Bax mRNA的表达.结果 齐墩果酸在体外具有明显的细胞毒性,可抑制NB4细胞增殖,且呈现时间和剂量依赖性;实时荧光定量PCR实验证明,NB4细胞经齐墩果酸处理后,促凋亡基因Bax表达上调,抗凋亡基因Bcl-2表达下调.结论 齐墩果酸在体外能抑制NB4细胞增殖,并使促凋亡基因Bax表达升高,抗凋亡基因Bcl-2表达降低,上调Bax和下调Bcl-2 mRNA的表达可能是其作用机制之一.     

EGFR抑制剂AG1478对胶质瘤C6细胞增殖及凋亡的影响

[目的]观察表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478对胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的影响.[方法]C6细胞中分别加入5、10、25、50 mol/L的AG1478,作用48 h.用MTT法测算C6细胞生长抑制率,倒置显微镜观察细胞形态学的改变,流式细胞术测算细胞凋亡率.[结果]AG1487能够抑制C6细胞的增殖,其抑制作用呈剂量—效应依赖关系.在50 μmol/L的AGI478作用下,C6细胞变圆、细胞突起减少,贴壁瘤细胞数量明显减少,排列稀疏.25 μmol/L的AG1478作用C6细胞48h,细胞凋亡率显著增加.[结论]EGFR抑制剂AG1478可抑制胶质瘤C6细胞的增殖,促进细胞凋亡.     

林蛙卵油通过影响Bcl-2蛋白质家族抑制卵巢凋亡的机制

目的 观察Wistar大鼠卵巢中Bcl-2和Bax的表达水平,分析林蛙卵油的卵巢保护作用机制.方法 乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期予雄激素制造动物模型,分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组四组,并设置正常对照组.成年后给予治疗组相应剂量林蛙卵油灌胃后处死大鼠,Tunnel检测凋亡比率,Western印迹法检测各组Bcl-2和Bax的蛋白质表达水平.结果 Tunnel染色显示模型组的凋亡指数较正常对照组升高,给予林蛙卵油灌胃后,凋亡指数降低.正常对照组与模型组之间有显著差异,中剂量组和大剂量组与模型组比较有显著差异,小剂量组与模型组比较无显著差异.Western印迹实验显示:Bcl-2在模型组的表达较正常对照组低,给予林蛙卵油后,低、中、高剂量组表达有升高趋势,与模型组比较差异显著;Bax在模型组的表达较正常对照组高,给予林蛙卵油后,低、中、高剂量组表达有降低趋势,与模型组比较差异显著.结论 林蛙卵油可以通过影响Bcl-2蛋白质家族抑制卵巢细胞的凋亡,发挥保护卵巢的作用.     

氯化两面针碱对肝癌细胞增殖的抑制作用及机制探讨

目的探讨氯化两面针碱（NC）对体外培养的肝癌SMMC-7721细胞（以下简称肝癌细胞）DNA聚合酶6催化亚基基因P125蛋白的影响。方法取对数生长期的SMMC-7721肝癌细胞分为给药组和对照组,给药组分别予0．15、0．30、0．60mg／L的NC作用10d。采用集落形成试验观察SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;Westernblot法检测P125蛋白表达。结果与对照组相比,给药组NC作用后肝癌细胞集落形成数量明显减少（P〈0．05）,并呈现剂量依赖性。给药组P125蛋白表达明显降低,呈剂量依赖性。结论NC可明显抑制肝癌细胞增殖,其作用机制之一可能是从蛋白水平抑制P125表达。     

地塞米松对胶质瘤C6细胞增殖、凋亡的影响

目的 观察地塞米松(Dex)对胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的影响.方法 将C6细胞分为A、B、C、D组,每组1.25×106个细胞,A组不加Dex,B、C、D组分别与终浓度为10-5、10-4、10-3 mol/L的Dex共培养;用血计数板计算C6细胞数,用流式细胞仪检测C6细胞周期及凋亡率.结果 培养24 h时,A、B、C、D组C6细胞数依次为4.37×106、4.29×106、3.57×106、3.44 ×106个/瓶,B、C、D组与A组比较,P均＜0.05;C6细胞凋亡率依次为0.37％、0.52％、1.39％、8.24％,D组与A、B、C组比较,P均＜0.05.G0/G1期C6细胞所占比例分别为82.42％、93.21％、93.71％、77.52％,S期分别为13.22％、5.38％、4.06％、14.74％,G2/M期分别为4.36％、1.41％、2.23％、7.74％;B、C组与A组G0/G1、S期细胞比例比较,P均＜0.05;D组与A、B、C组G2/M期细胞比例比较,P均＜0.05.结论 Dex可通过阻滞C6细胞周期进程抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡.     

槲皮素对卵巢癌细胞HO-8910增殖的抑制作用及机制

目的观察槲皮素体外对卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制作用,并探讨其机制。方法将体外培养卵巢癌HO-8910细胞用0、10、20、40、80、160μmol／L的槲皮素处理。用MTF法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率,细胞免疫化学染色法检测细胞内Fas及HSP70的表达,分光光度计法检测细胞内Caspase-3和Csapase-8的活性。结果浓度10～160μmol／L的槲皮素均能抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,并有明显的时间和剂量依赖性（P〈0．05）。不同浓度的槲皮素作用48h后各组细胞凋亡率随槲皮素浓度增高,HSP70表达下调,FAS表达增强,Caspase-3、8活性上调,均呈剂量依赖性（P均〈0．05）。结论槲皮素能抑制卵巢癌细胞的增殖。其机制可能与槲皮素通过提高细胞内Fas的表达,降低HSP70的表达及诱导Caspase-3、8的活化及诱导卵巢癌细胞凋亡有关。     

嘌呤核苷酸对海洛因处理过大鼠C6神经胶质瘤细胞增殖的影响

目的 探讨海洛因及嘌呤核苷酸对大鼠C6神经胶质瘤细胞增殖的影响.方法 体外培养大鼠C6神经胶质瘤细胞,分别以不同浓度的海洛因及嘌呤核苷酸处理细胞,MTT比色法检测海洛因和嘌呤核苷酸对细胞增殖的影响.结果 MTT实验表明,海洛因对大鼠C6神经胶质瘤细胞的增殖有抑制作用,120 mg/L海洛因作用24 h对C6细胞的抑制率达52%,并表现为剂量依赖性;嘌呤核苷酸对C6细胞的增殖有促进作用,120 mg/L嘌呤核苷酸作用24 h,细胞增殖率为30%,并表现为剂量依赖性.结论 海洛因抑制大鼠C6神经胶质瘤细胞的增殖;嘌呤核苷酸促进大鼠C6神经胶质瘤细胞的增殖,并在某种程度上对抗海洛因对C6细胞增殖的抑制作用.     

Inhibitory effect of ubiquitin-proteasome pathway on proliferation of esophageal carcinoma cells

AIM: To investigate the inhibitory effect of ubiquitin-proteasome pathway (UPP) on proliferation of esophageal carcinoma cells.METHODS: Esophageal carcinoma cell strain EC9706 was treated with MG-132 to inhibit its UPP specificity. Cell growth suppression was evaluated with 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay. DNA synthesis was evaluated by ^3H-thymidine (^3H-TdR) incorporation. Morphologic changes of cells were observed under microscope. Activity of telomerase was examined by telomeric repeat amplification protocol (TRAP) of PCRELISA. Cell cycle and apoptosis were detected by flow cytometry (FCM). DNA fragment analysis was used to confirm the presence of apoptosis. Expression of p27^kip1 was detected by immunocytochemical technique. RESULTS: After exposed to MG-132, the growth and value of ^3H-TdR incorporation of EC9706 cells were obviously inhibited. Cells became round, small and exfoliative under microscope. TRAP PCR-ELISA showed that light absorption of cells gradually decreased after exposed to 5 μmol/L of MG-132 for 24, 48, 72 and 96 h (P&lt;0.01). The percentage of cells at G0/G1 phase was increased and that at S and G2/M was decreased (P&lt;0.01). The rate of apoptotic cells treated with 5 μmol/L of MG-132 for 48 and 96 h was 31.7% and 66.4%, respectively. Agarose electrophoresis showed marked ladders. In addition, the positive signals of p27^kip1 were located in cytoplasm and nuclei in MG-132 group in contrast to cytoplasm staining in control group. CONCLUSION: MG-132 can obviously inhibit proliferation of EC9706 cells and induce apoptosis. The mechanisms include upregulation of p27^kip1 expression, G1 arrest and depression of telomerase activity. The results indicate that inhibiting UPP is a novel strategy for esophageal carcinoma therapy.     

Inhibitory effects of rapamycin on proliferation of chronic myelogenous leukemia cells and its mechanism

Objective To explore the inhibitory effects of rapamycin on proliferation of chronic myelogenous leukemia (CML) cells and its possible mechanism. Methods The effects of rapamycin at various concentrations on cell proliferation of CML cell line K562 cells were analyzed by MTT. The expressions