不同固定液对冰冻切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对冰冻切片质量的影响以指导临床应用.方法 冰冻切片采用五种不同固定液固定,HE染色,与同组织常规石蜡切片依照石蜡切片质量标准评判对照.结果 五种固定液都可用于冰冻切片,制片技术操作未发现问题,但不同固定液的冰冻切片镜下组织细胞形态有一定差别.结论 乙醚-无水乙醇固定液最佳,含有冰醋酸成分的固定液建议谨慎使用.     

冰冻切片制作方法改进探讨

目的:探讨制片效果比较理想的冰冻切片制作方法,以提高冰冻切片的质量.方法:择取新鲜活体组织,取材后直接冻结,经恒温式冰冻切片机切片,冰冻固定液固定,HE染色.剩余组织做石蜡切片对照.结果:质量较好,染色鲜艳,镜下组织结构细胞形态清晰,细胞核浆对比分明.结论:此方法简便快速,制片质量满意,可提高病理诊断的准确性.     

不同因素对石蜡切片和冰冻切片ANAE的染色效果探讨

用大白鼠淋巴组织的石蜡切片和冰冻切片,探索不同因素(固定液、固定时间、染液 pH 值、孵育时间等)对 ANAE 染色效果的影响。结果显示石蜡切片和冰冻切片 ANAE 染色各有特点:石蜡切片较冰冻切片的染色定位准确,组织结构清晰,背景干净;但冰冻切片处理简便、快速,能较好地保存组织和细胞酶的活性,便于定性分析。     

脂肪组织切片制备方法的改进

目的探讨脂肪组织石蜡切片及冰冻切片方法的改进。方法取脂肪组织迅速固定于10%中性福尔马林中,设置不同的脱水程序制备石蜡切片,HE染色。免疫组化法观察PPARγ和ITLN1的表达。取脂肪组织迅速固定于甲醛钙或10%中性福尔马林固定液中24 h以上,OCT包埋,置于-80℃冰箱至少30 min,设置冰冻切片机箱体温度-20℃,样品头温度-30℃,切片后HE染色。结果用改进方法制备的脂肪组织石蜡切片,切面平整,无皱褶,无裂隙,脂肪细胞结构完整,染色清晰,且对免疫组化结果无影响;冰冻切片的改进提高了切片质量,结构完整,形态好,染色清晰。结论改进的脂肪组织石蜡切片和冰冻切片均可成功应用于不同实验动物,为脂肪组织的研究提供了有力的支撑条件。     

不同温度和固定液对冰冻切片质量的影响

临床病理检查中冰冻切片质量受多种因素的影响,其中固定液的选择和冰冻温度至关重要.本文作者以不同温度冰冻切片,并选用比较常用和容易配置的10%甲醛、甲醇和Bouin 3种固定液,比较不同温度及不同固定液处理的冰冻切片的质量.     

三种固定液对神经纤维冰冻切片固定效果之比较

目的:观察比较10%甲醛、丙酮和Bouin三种固定液对神经纤维的固定效果,为临床做出更好的神经纤维的快速冰冻切片提供实验基础.方法:取健康大鼠双侧坐骨神经,冰冻切片后分别用三种固定液固定,然后做HE染色,观察各自的组织结构及染色情况.结果:10%甲醛固定的神经纤维组织结构较清楚但是组织发生收缩;丙酮固定的神经纤维染色效果较好,组织没有发生收缩;Bouin固定液固定的神经纤维结构和染色都比较好但是组织收缩最明显.结论:三种固定液都可用于固定神经纤维,但丙酮效果最好.     

常见组织快速冰冻切片技术探讨

目的探讨提高冰冻切片质量的技术和方法.方法新鲜活体组织取材,根据组织大小、形态结构和性质组成调解适当温度冷冻后切片,切片制成后立即放入酒精中固定,HE染色,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片.结果切片完整,厚薄均匀,染色鲜艳,核浆对比鲜明,符合术中快速冰冻诊断要求.结论一张优质的冰冻切片需对不同组织区别对待,从取材、冷冻、切片、固定、染色等环节认真做起.     

固定液对恒冷箱切片组织结构与染色效果的比较观察

对Ｗｉｓｔａｒ大鼠６种器官进行恒冷箱新鲜冰冻切片,采用９种固定液分别固定切片,在同等条件下做Ｈ．Ｅ染色,观察不同固定液对器官组织结构与染色效果的影响,以寻找适用于恒冷箱切片的最佳固定液．结果表明：１０％中性甲醛固定的切片,器官的组织结构清晰,染色好,镜下与石蜡切片相似,我们推荐在恒冷箱切片Ｈ．Ｅ染色时选用１０％中性甲醛作为固定液,这对提高恒冷箱切片染色技术和临床病理快速诊断的准确性,有一定指导意义。     

冰冻切片固定方法的改进

冰冻切片在病理快速诊断中运用广泛，但要做好一张优良的冰冻切片并非容易，尤其是冰冻组织固定不良会造成切片背景不清，染色不良等问题［１］。近年来我们运用改良ＨＳ（ＨａｚａｒｄａｎｄＳｔｅｖｅｎｓｏｎ）固定液［２］和Ｃｌａｒｋｅ固定液的双重固定法替代Ｃｌａ...     

固定时间对乳腺癌快速冰冻切片免疫组化结果的影响

目的分析固定时间对乳腺癌冰冻切片免疫组化结果的影响，探寻最佳的固定时间。方法利用AAF固定液（配方为丙酮85mL、冰醋酸5mL、40％甲醛10mL）以1min、2min、4min、6min、8min、10min、12min、15min不同时间对乳腺癌组织冰冻切片进行固定，然后利用6种乳腺癌相应抗体进行免疫组化染色，根据2004—2008年全国十次免疫组化质控活动所用的免疫组化质控评分标准对图像质量进行评分量化。结果固定时间可以直接影响乳腺癌冰冻切片免疫组化图像的质量，最佳的固定时间为6～8min。结论对乳腺癌冰冻切片固定6～8min可取得质量最高的免疫组化结果。     

冰冻切片制作中时间和温度的研究

目的 探讨控制组织冷冻温度及时间,以提高诊断准确性.方法 择取新鲜活体组织,取材后直接冻结,经恒温式冰冻切片机切片,冰冻固定液固定,苏木素伊红快速染色.结果 质量较好,染色鲜艳,镜下组织结构细胞形态清晰,细胞核浆对比分明.结论 组织冷冻时的温度和时间的控制是制片的关键,快速特殊染色可辅助提高病理诊断的准确性.     

肿瘤组织急诊冰冻切片与HE染色技术的改进研究及应用

肿瘤组织急诊冰冻切片及染色质量的好坏,直接关系到能否准确、及时地对肿瘤做出诊断与鉴别诊断,以指导手术治疗方式,我们针对目前冰冻切片染色存在的组织结构被破坏,冰晶裂隙较多,核分裂像及对比染色差等缺点,从1991年开始对苏木素染色液的配制、包埋剂、组织预固定和切片的脱脂再固定等进行了研究。经四年多的实际应用证实:改进后的技术明显地改善了组织形态,减少了冰晶,提高了染色质量,为及时、准确地对肿痛的类型和良恶性作出诊断与鉴别诊断提供了可靠依据。现将该系列研究内容简介如下。     

冰冻切片法制作豚鼠眼球切片

目的探索豚鼠眼球切片制作的实验方法。方法灌注固定后,摘取眼球,用改良的AGFD眼球固定液[1]和丙酮固定,明胶包埋,冰冻切片机切片,HE染色,正丁醇透明[2],中性树胶封片。结果该方法制作的豚鼠眼球切片较为理想,可清楚观察睫状突和睫状小带,对显示视网膜和视盘微细结构也较好。结论经改良的AGFD眼球固定液加丙酮固定,很大程度上保持了眼球原有的形状。用明胶处理和冰冻切片法切片可简化操作过程,有效防止眼球破碎。制片较为理想。     

不同固定方法对冰冻切片间接免疫荧光结果的影响

目的：寻找一种冰冻切片间接免疫荧光染色以及HE染色过程中最佳的组织固定方法。方法：取健康成年小鼠双侧睾丸冰冻切片,分别采用3种方法进行固定：①丙酮4℃固定15分钟,-20℃保存24h;②95％酒精4℃固定15分钟,-20℃保存24h;③切片-20℃保存24h后,再用4℃丙酮固定15分钟。然后做间接免疫荧光和HE染色,观察组织结构及染色情况。结果：4℃丙酮固定的组织切片HE染色以及间接免疫荧光效果良好。-20℃保存24h后,4℃丙酮固定15分钟的冰冻切片HE染色和间接免疫荧光结果最差。结论：酒精和丙酮都可以固定组织,但是4℃丙酮固定效果最好。     

冰冻切片的制作方法分析

目的：探讨冰冻切片制作方法,以提高冰冻切片的质量,确保实验结果科学性。方法：首先详细了解患者临床情况及既往有关的病理学检查情况,选择新鲜活体组织,取材后直接冷冻、切片,切片制成后,立即放入甲醇中固定10 s-20 s。染色1-2m in,水洗,逐级梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。结果：此方法简单,制片时间短,切片质量较好,染色鲜艳,镜下组织结构、切片组织切面完整、无裂纹;细胞形态清晰,细胞核、细胞浆染色佳,术后诊断符合率达96%以上。结论：冰冻切片是较难掌握的病理实验技术之一,具有简便快速,制片质量高等特点,可提高病理诊断的准确性。     

冰冻切片制作技术的探讨

冰冻切片技术借助低温使手术中的新鲜标本快速冷冻,达到一定的硬度后进行切片.从而来解决手术标本的诊断问题,决定手术的范围及手术的方法.但由于多种因素影响冰冻切片的质量,从而影响病理诊断的准确性.可见,快速制作一张优质的冰冻切片是非常重要的.经过多年实践,从标本取材、速冻、切片、固定、染色到封片等步骤着手,摸索出一些提高冰冻切片质量的可行方法.     

快速冰冻切片染色的一种新方法

缩短冰冻切片及染色时间 ,提高冰冻切片质量 ,是病理医师进行准确诊断的重要环节 ,也是临床医师及时决定治疗方案的关键所在。为此 ,我们在工作实践中逐步摸索出一种更快速、更简便的冰冻切片及染色方法。这种方法是以 - 2 5℃直接冰冻切片标本 ,用苏木素、伊红的混合液染片 ,使整个冰冻制片过程仅在 1～2分钟内完成 ,染色效果鲜艳且稳定。1　材料及方法1.1　材料　进口或国产冰冻切片机。染液配制 :1固定液 :5 5 %乙醇 85 ml,4 0 %甲醛 10 ml,冰醋酸 10 m l。2苏木精∶伊红混合染液。复制伊红一份 ,Herry苏木精3～ 8份混合即可使用。1.2　…     

快速冰冻切片制备方法的改进

目的:改进快速冰冻切片技术方法.方法:采用Leica-CM1900型恒冷切片机和Feather一次性刀片对手术切除的乳腺、甲状腺、胆囊、肝脏及喉等3 000例新鲜组织标本进行常规冰冻切片取材、普通胶水包埋(冰冻)、切片、染色后封片.所用试剂的组成为:AAF混合同定液(乙醇、乙酸、中性甲醛)、苏木素染色液、醇溶性伊红、梯度乙醇及二甲苯.结果:此方法制片时间10 min.镜下组织结构、切片组织切面完整、细胞形态清晰,染色佳,术后诊断符合率为98.1%.结论:该方法简便快速,冰冻切片质量好,可为快速准确的病理诊断提供保证.     

三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响

目的对比三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响,优选大、小鼠肠道组织切片固定液。方法选择三种常用的固定液:10%中性福尔马林固定液,Bouin’s固定液,改良Davidson’s固定液,对SD大鼠和KM小鼠小肠组织进行固定,常规制作石蜡切片、HE染色,对比观察其染色效果。结果三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量存在影响,单纯福尔马林固定的切片存在肠粘膜上皮脱落、坏死的假象;Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液则可避免这一假象的出现,而且切片结构更精细、清晰,但是,HE染色的色彩不如单纯福尔马林固定液的鲜艳。结论 Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液固定的大、小鼠肠道组织的石蜡切片质量优于10%中性福尔马林固定液。     

脱脂加温可提高冰冻切片染色质量

冰冻切片在组织学中已得到广泛应用,但冰冻切片的HE染色细胞着色不佳、背景不够清晰,影响了制片质量和诊断的准确性.经过摸索发现含脂质的冰冻切片在染色前通过脱脂和染色加温可提高冰冻切片染色的质量,现介绍如下.