清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎淋巴细胞凋亡调控蛋白Bcl-2及Bax表达的影响

目的:探讨清肠栓治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:SD大鼠48只随机分为正常组、模型组(空白组)、西药组(SASP组)、中药组(清肠栓组)共4组,正常组6只,其余每组14只。用5%2,4,6三硝基苯璜酸100mg.kg-1灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型,第3天开始,除正常组外,各组分别给予生理盐水、柳氮磺胺吡啶、清肠栓处理,至7天后处死动物。运用电镜、TUNEL染色法、Bcl-2及Bax蛋白免疫组化染色,分别检测溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果:与各对照组相比,模型组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡减慢;其结肠黏膜固有层淋巴细胞上Bcl-2的表达率增加,而Bax的表达率下降(P<0.01)。结论:清肠栓可能通过调节Bcl-2及Bax二者之间的比例变化,诱导淋巴细胞凋亡,发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。     

中药清肠栓对溃疡性结肠炎大鼠结肠通透性的影响

目的探讨复方中药清肠栓对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜通透性的影响及其修复结肠溃疡的作用机制。方法采用异硫氰酸荧光素-右旋糖4000(FITC-dextran4000,FD-4)作为标记物,在体实验与离体实验相结合测定大鼠结肠通透性,观察中药清肠栓对UC大鼠结肠通透性的影响。结果 (1)在体动物实验:发现模型组大鼠结肠对FD-4的通透性较正常组显著增加,在30min内增加为对照组的6倍。清肠栓高剂量及中剂量组能不同程度的抑制UC大鼠结肠通透性的升高(P0.05)。(2)离体实验:通过测定FD-4的通透性系数(Papp)反映发现,大鼠升结肠黏膜通透性120min内,模型组FD-4的Papp为(5.001±1.316)×10-8cm/s,Papp增加为正常组的2.5倍,清肠栓高剂量及中剂量组能有效降低升结肠黏膜对FD-4的Papp(P0.05)。结论清肠栓能有效抑制UC大鼠结肠通透性的升高,改善肠黏膜屏障功能,促进溃疡愈合。     

青黛、靛玉红对溃疡性结肠炎小鼠脾脏CD4+T细胞的影响

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种以腹痛、腹泻、黏液脓血便为主要临床表现的肠道疾病,其病因和发病机制尚不明确,目前主要认为与遗传、免疫平衡失调、肠道微生态失衡、饮食及精神因素等有关;免疫失调尤其是CD4+T细胞失调是UC发病的重要机制之一,也是目前的研究热点之一.     

中药清肠栓对实验性溃疡性结肠炎大鼠结肠黏液的影响

目的：观察中药清肠栓对实验性溃疡性结肠炎大鼠结肠黏液的影响。方法：用三硝基苯磺酸复制大鼠实验性质溃疡性结肠炎模型，随机分为清肠栓大小剂量组、西药组，模型组，空白对照组和正常对照组，治疗14天后处死，剖取结肠，AB－PAS染色，图象分析系统分析黏液阳性面积。结果：正常组大肠黏膜上皮黏液丰富；模型和空白对照组大鼠肠黏膜上皮黏液明显减少，与正常组相比有极显著差异，中西药物各治疗组肠黏膜上皮黏液无明显减少，与正常组相比有极显著差异，中西药物各治疗组肠黏膜上皮黏液无明显差异，较模型和空白对照组升高，但低于正常。结论：清肠栓可促进溃疡愈合，使炎症破坏的组织恢复正常，杯状细胞明显增多，黏膜组织中的黏液含量增加，从而增强结肠黏膜的防御功能。     

中药清肠栓对实验性溃疡性结肠炎大鼠结肠黏液的影响

目的 :观察中药清肠栓对实验性溃疡性结肠炎大鼠结肠黏液的影响。方法 :用三硝基苯磺酸复制大鼠实验性溃疡性结肠炎模型 ,随机分为清肠栓大小剂量组、西药组、模型组、空白对照组和正常对照组 ,治疗 14天后处死 ,剖取结肠 ,AB -PAS染色 ,图象分析系统分析黏液阳性面积。结果 :正常组大鼠肠黏膜上皮黏液丰富 ;模型和空白对照组大鼠肠黏膜上皮黏液明显减少 ,与正常组相比有极显著差异 ;中西药物各治疗组肠黏膜上皮黏液无明显减少 ,与正常组相比有极显著差异 ;中西药物各治疗组肠黏膜上皮黏液无明显差异 ,较模型和空白对照组升高 ,但低于正常。结论 :清肠栓可促进溃疡愈合 ,使炎症破坏的组织恢复正常 ,杯状细胞明显增多 ,黏膜组织中的黏液含量增加 ,从而增强结肠黏膜的防御功能。     

白头翁汤对溃疡性结肠炎患者CD4~+CD25~+Treg细胞、IL-10的影响

溃疡性结肠炎(UC)属于炎症性肠病(IBD),是以腹痛、腹泻、黏液脓血便为主要临床表现的非特异性肠道炎症性疾病,该病缠绵难愈、易于复发,且有癌变倾向,被WHO列为难治病之一。其具体机制仍未完全阐明,近年来其免疫的异常倍受关注,认为免疫调节异常在UC的发病中起重要作用,CD4+CD25+Treg是一种具有免疫调节作用的T细胞亚群,     

清肠泡腾栓对溃疡性结肠炎模型大鼠细胞因子的影响

目的探讨中药清肠泡腾栓治疗溃疡性结肠炎的免疫学疗效机制。方法实验分设正常对照组、模型对照组、空白泡腾栓组、清肠泡腾栓组、清肠栓组、柳氮磺胺吡啶栓组共6个组,ELISA法检测血清、结肠上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-13(IL-13);免疫组化、原位杂交检测白细胞介素8(IL-8)mRNA阳性表达。结果模型对照组血清TNF-α较正常对照组升高(P<0.05),结肠黏膜IL-8 mRNA阳性表达明显增强(P<0.01);清肠泡腾栓明显降低结肠上清TNF-α含量以及IL-8 mRNA阳性表达,与模型对照组比较差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);清肠泡腾栓对IL-13的调控作用不明显,与模型对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论清肠泡腾栓通过抑制促炎细胞因子而对溃疡性结肠炎产生治疗作用。     

清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎急性期模型CINC-1的影响

目的观察清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎(UC)急性期模型结肠黏膜CINC-1蛋白含量的影响。方法SD大鼠48只,分为正常组、模型组、清肠栓组和SASP组,每组12只。用三硝基苯磺酸(TNBs)诱导大鼠UC急性期模型。造模后第3日开始给药,连续给药7 d后处死。ELISA检测病变部位结肠组织中的CINC-1蛋白含量。结果 CINC-1蛋白含量,模型组较正常组明显升高(P0.05),清肠栓组及SASP组较模型组均降低(P0.05)。结论清肠栓通过调节结肠黏膜CINC-1蛋白含量,减少中性粒细胞向病变局部黏膜组织的趋化和激活,从而起到缓解病变部位炎症的作用。     

清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎caspase-3影响的研究

目的:观察大鼠溃疡性结肠炎结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及其凋亡调控关键酶caspase-3的表达以及清肠栓对相关表达的影响,探讨清肠栓(马齿苋、青黛、三七、五倍子)治疗溃疡病性结肠炎的作用机制.方法:64只SD大鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、SASP组、清肠栓组,每组各16只.除正常组外,其余大鼠用5%2,4,6-三硝基苯磺酸100 mg/kg灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型后,分别予0.9%生理盐水、SASP、清肠栓处理7 d后,处死大鼠.运用电镜,免疫组化染色、RT-PCR、Western-blot等技术,分别检测溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞caspase-3的表达.结果:清肠栓组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡呈上升趋势;其结肠黏膜固有层淋巴细胞上caspase-3的表达率上升,与模型蛆相比(P＜0.01).结论:清肠栓可能增加结肠黏膜淋巴细胞凋亡效应酶caspase-3表达,诱导结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡,降低淋巴细胞毒作用,缓解大鼠溃疡性结肠炎效应.     

清肠栓对溃疡性结肠炎结肠粘膜固有层淋巴细胞凋亡影响的实验研究

目的:观察结肠粘膜固有层淋巴细胞(LPL)凋亡与溃疡性结肠炎的关系,并进一步探讨清肠栓对溃疡性结肠炎结肠粘膜LPL的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,用5%2,4,6三硝基苯璜酸100mg.kg-1灌肠建模,3天后开始,除正常组外,各组分别给予生理盐水、柳氮磺胺吡啶、清肠栓处理,至7天后处死动物。分别运用电镜、流式细胞仪碘化丙啶法(PI染色法)、原位细胞凋亡检测法,来检测溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜LPL凋亡。结果:模型组结肠粘膜LPL凋亡减慢,中、西药组均可诱导结肠粘膜LPL凋亡,中药组与模型组相比,P<0.05。结论:结肠粘膜LPL的减慢和溃疡性结肠炎的发生存在一定关系,清肠栓可能通过诱导结肠粘膜LPL凋亡达到缓解溃疡性结肠炎的目的。     

胃肠安丸对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用及机制

目的探讨胃肠安丸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用及机制。方法SPF级C57BL/6小鼠60只,除正常对照组小鼠外,其余小鼠均给予2.5%DSS水溶液,自由饮用7 d制备溃疡性结肠炎模型,模型评价后再随机分为模型组、美沙拉嗪组及胃肠安丸高剂量组、中剂量组、低剂量组。胃肠安丸低、中、高剂量组分别给予0.015、0.03、0.06 g/(kg·d)胃肠安丸混悬液0.5 mL灌胃,1次/d;美沙拉嗪组给予0.52 g/(kg·d)美沙拉嗪混悬液0.5 mL灌胃,1次/d;正常对照组和模型组给予等体积纯水灌胃,均连续干预10 d。对比各组小鼠疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度,用HE染色观察小鼠结肠组织病理形态学变化,用流式细胞术检测脾组织中Treg、Th17、CD4^+、CD8^+细胞百分比,ELISA法检测血清细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、CRP水平。结果药物干预过程中,各组小鼠体质量均逐日增加,腹泻、便血、体质量下降等症状逐日缓解,与模型组相比,美沙拉嗪组和胃肠安丸高剂量组能更快地缓解上述症状,2组DAI评分逐日下降(P<0.05)。药物干预结束后,与模型组比较,胃肠安丸高剂量组和美沙拉嗪组小鼠结肠较长(P<0.05),结肠组织充血、间质水肿及炎性细胞浸润较轻,CD4^+、CD8^+、Treg细胞百分比及血清IL-10水平较高(P<0.05),Th17细胞百分比及血清TNF-α、IL-6、IL-8、CRP水平较低(P<0.05)。结论胃肠安丸对DSS诱导的小鼠肠道黏膜损伤有一定的修复作用,其作用机制可能与恢复Treg/Th17免疫平衡以及调节相关细胞因子水平有关。     

四神丸对溃疡性结肠炎小鼠外周血CD40,CD40L的调节作用

目的评价四神丸治疗小鼠结肠炎的疗效并探讨其对外周血CD40/CD40L的调节作用。方法昆明种小鼠60只,TNBS/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,随机分成正常组、四神丸高、中、低剂量组,柳氮磺吡啶(SASP)对照组,给药10d,观察小鼠结肠重量指数、病理变化及病理损伤评分以评价四神丸疗效,同时采用流式细胞术法检测结肠炎小鼠外周血CD40/CD40L的表达情况。结果模型组小鼠结肠重量指数明显高于正常组,并具有统计学意义(P<0.05),同时,各治疗小鼠结肠重量指数明显降低(P<0.05或P<0.01),而且模型组小鼠结肠病理损伤评分明显高于正常组(P<0.01),同时除高剂量组外,各治疗组小鼠结肠病理损伤评分明显低于模型组,且均有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01),治疗组镜下可见黏膜上皮完整或少量受损,炎细胞散在性分布,淋巴滤泡增生,基底层可见纤维结缔组织增生,溃疡修复。在CD40/CD40L表达方面,与正常组比较,模型组小鼠外周血细胞CD40分子表达明显偏高(P<0.05),而CD40L分子表达明显偏低(P<0.01),并具有统计学意义。各治疗组可见CD40分子表达较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),而CD40L分子表达则明显偏高并具有统计学意义(P<0.01)。结论四神丸可有效缓解结肠炎小鼠结肠损伤其作用途径可能与调节外周血CD40/CD40L信号有关。     

大黄牡丹汤改善DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠炎症状态及其贫血症

目的:研究大黄牡丹汤对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的治疗作用及其相关的贫血症的改善作用。方法:设正常组、模型组、美沙拉嗪组、大黄牡丹汤低剂量组、大黄牡丹汤中剂量组和大黄牡丹汤高剂量组,通过疾病活动指数(DAI)、结肠病理损伤评分、结肠髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、外周血中性粒细胞数量、红细胞总数及血红蛋白含量观察大黄牡丹汤对UC小鼠的治疗效果及对炎症性肠病相关的贫血症的影响。结果:模型组小鼠DAI评分显著升高,结肠横切面显著增厚,大量炎症性细胞浸润,溃疡部位明显,隐窝和肠腺减少,病理组织学评分显著升高,外周血中性粒细胞显著增多,红细胞数减少,血红蛋白含量显著减少。美沙拉秦可降低UC小鼠DAI评分、组织病理学评分,但对UC小鼠结肠增厚、中性粒细胞增多及红细胞及血红蛋白减少作用不明显。大黄牡丹汤个剂量组均能降低DAI评分、组织病理学评分、结肠MPO活性。大黄牡丹汤中剂量组和高剂量组还可显著防止结肠组织增厚,维持其结构的完整,显著抑制外周血中性粒细胞的增多和提高红细胞数及血红蛋白含量。结论:大黄牡丹汤可以改善葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠炎症状态及其贫血症。     

清肠栓对实验性溃疡性结肠炎大鼠IL-1β、 IL-6 mRNA表达的影响

目的：探讨中药清肠栓治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机理。方法：用TNBS50％乙醇溶液肛门注入制作大鼠UC模型，分组分别给予清肠栓、醋酸泼尼松等治疗14d后处死，迅速剖取远端结肠，置液氮中备用。用RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳及凝胶图象分析系统检测各组大鼠结肠粘膜IL-1β、IL-6mRNA的表达情况。结果：清肠栓、醋酸泼泥松均可抑制模型大鼠结肠粘膜IL-1β、IL-6mRNA表达。结论：IL-1β、IL-6是导致UC结肠粘膜损伤的重要炎症介质，清肠栓治疗UC的作用机理与抑制IL-1β、IL-6mRNA表达有关。     

升降散对脓毒症小鼠CD4~+、CD8~+T细胞的影响

目的观察升降散对脓毒症小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞的影响。方法雄性Balb/c小鼠84只,按随机数字表法分为正常组、假手术组、脓毒症组、升降散组,各组又分为6 h、12 h和24 h 3个时间点亚组。除正常组外,其余各组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症小鼠模型。各组在造模前72 h开始灌胃给药或0.9%Na Cl溶液,术后按各个时间点采用流式细胞仪方法检测小鼠脾细胞中CD4+、CD8+T细胞占淋巴细胞百分比。结果与脓毒症组相比,升降散组可显著上调CLP后6 h及12 h的CD4+水平,下调CLP后6 h及12 h的CD8+水平,差异均有统计学意义(P0.05)。结论升降散可以纠正脓毒症初期小鼠的细胞免疫功能紊乱,具有免疫调节作用。     

四申丸对溃疡性结肠炎小鼠外周血CD40,CD40L的调节作用

目的 评价四神丸治疗小鼠结肠炎的疗效并探讨其对外周血CD40/CD40L的调节作用.方法 昆明种小鼠60只,TNBS/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,随机分成正常组、四神丸高、中、低剂量组,柳氮磺吡啶(SASP)对照组,给药10d,观察小鼠结肠重量指数、病理变化及病理损伤评分以评价四神丸疗效,同时采用流式细胞术法检测结肠炎小鼠外周血CD40/CD40L的表达情况.结果 模型组小鼠结肠重量指数明显高于正常组,并具有统计学意义(P＜0.05),同时,各治疗小鼠结肠重量指数明显降低(P 0.05或P＜0.01),而且模型组小鼠结肠病理损伤评分明显高于正常组(P＜0.01),同时除高剂量组外,各治疗组小鼠结肠病理损伤评分明显低于模型组,且均有显著性统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),治疗组镜下可见黏膜上皮完整或少量受损,炎细胞散在性分布,淋巴滤泡增生,基底层可见纤维结缔组织增生,溃疡修复.在CD40/CD40L表达方面,与正常组比较,模型组小鼠外周血细胞CD40分子表达明显偏高(P＜0.05),而CD40L分子表达明显偏低(P＜0.01),并具有统计学意义.各治疗组可见CD40分子表达较模型组明显降低(P＜0.05或P＜0.01),而CD40L分子表达则明显偏高并具有统计学意义(P＜0.01).结论 四神丸可有效缓解结肠炎小鼠结肠损伤其作用途径可能与调节外周血CD40/CD40L信号有关.     

左金丸对DSS 诱导溃疡性结肠炎小鼠滤泡辅助性T 细胞的调控作用

目的探讨左金丸对溃疡性结肠炎（UC）小鼠滤泡辅助性T 细胞（Tfh）的调控作用。方法将BALB/c 小 鼠随机均分为正常组、模型组、左金丸组（3 g·kg-1）及美沙拉嗪组（300 mg·kg-1）,每组10 只。除正常组外其余 各组小鼠采用自由饮水的方式给予3%葡聚糖硫酸钠（DSS） 溶液,连续7 d,构建UC 小鼠模型。7 d 后按照相 应剂量灌胃给药,每日1 次,连续给药7 d。每天称小鼠体质量并观察其一般症状;采用流式细胞术检测Tfh 及滤泡调节性T 细胞（Tfr）数量;测定小鼠结肠质量、结肠长度,计算结肠质量指数;采用HE 染色法进行结肠 组织病理学观察;Western Blot 法检测小鼠结肠组织Bax、Bcl-2、Caspase-3 蛋白表达水平。结果与模型组比 较,左金丸组小鼠的结肠质量指数明显降低（P < 0.01）,结肠长度明显恢复（P < 0.01）,结肠组织病理评分明显 降低（P < 0.05）;CD4+CD44+ICOS+、CD4+CD44+IL-17+及CD4+CD44+CXCR5+细胞水平明显下降（P < 0.05,P < 0.01）,CD4+CXCR5+Foxp3+及CD4+CXCR5+Blimp-1+细胞水平均明显升高（P < 0.05）;结肠组织中的Caspase-3、 Bax 蛋白表达明显下调（P < 0.05,P < 0.01）,Bcl-2/Bax 蛋白比值明显升高（P < 0.01）。结论左金丸可能通过 调控Tfh/Tfr 细胞平衡,以及结肠组织的Bax、Bcl-2、Caspase-3 蛋白表达水平,发挥对UC 小鼠的治疗作用。 关键词：左金丸;溃疡性结肠炎;滤泡辅助性T 细胞;滤泡调节性T 细胞;Bax;Bcl-2;Caspase-3;小鼠     

清肠行气止痛汤治疗溃疡性结肠炎的疗效及对T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察清肠行气止痛汤治疗轻中度溃疡性结肠炎患者的疗效及T淋巴细胞亚群的影响。方法:选取2017年6月～2019年7月我院肛肠外科收治的70例轻中度溃疡性结肠炎患者进行研究。按照随机数字表法分为观察组(35例)与对照组(35例)。对照组采用西医治疗,观察组在对照组基础上加用清肠行气止痛汤治疗。治疗3个月,观察两组中医证候积分、临床疗效、淋巴细胞亚群、疼痛情况及不良反应。结果:治疗后,观察组中医证候积分低于对照组,差异显著(P0.05)。观察组治疗总有效率97.14%(34/35)明显高于对照组77.14%(27/35),差异显著(P0.05)。观察组CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+高于对照组,CD_4~+/CD_8~+低于对照组,差异显著(P0.05)。观察组视觉模拟评分法(VAS)得分低于对照组,差异显著(P0.05)。两组患者总不良反应发生率比较无显著差异(P0.05)。结论:清肠行气止痛汤治疗轻中度溃疡性结肠炎患者疗效显著,可有效改善临床症状,调节免疫功能,减少疼痛,且不良发应较小。     

白头翁汤对溃疡性结肠炎患者CD4+CD25+Treg细胞、IL-1O的影响

溃疡性结肠炎(UC)属于炎症性肠病(IBD),是以腹痛、腹泻、黏液脓血便为主要临床表现的非特异性肠道炎症性疾病,该病缠绵难愈、易于复发,且有癌变倾向,被WHO列为难治病之一.其具体机制仍未完全阐明,近年来其免疫的异常倍受关注,认为免疫调节异常在UC的发病中起重要作用,CD4+CD25+ Treg是一种具有免疫调节作用的T细胞亚群,可维持机体免疫平衡.笔者近年来观察白头翁汤对溃疡性结肠炎患者CD4+ CD25+ Treg的影响,并探讨其治疗UC的可能机制.     

益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏和母胎界面CD4~+CD25~+T细胞表达的影响

目的 观察益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏和母胎界面CD4+CD25+ T淋巴细胞表达的影响。