热休克蛋白70抗肿瘤免疫的研究进展

热休克蛋白70(HSP70)是热休克蛋白家族中最重要的一族,除了以分子伴侣的形式发挥重要作用外,还在抗原递呈、交叉递呈、激活淋巴细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞以及诱导树突状细胞成熟中发挥重要作用,参与机体特异性免疫和固有免疫,但其在肿瘤免疫中的具体作用机制还有待进一步阐明。     

HSP90在肿瘤中的研究

热休克蛋白90(HSP90)是一组结构高度保守的蛋白质,作为分子伴侣参与细胞的发育、生长和分化,近年来因HSP90与肿瘤发生发展、生物学行为及其预后有较密切的关系,而成为抗癌药物作用的靶点。很多癌基因蛋白均为HSP90的作用靶点,HSP90抑制剂将促使在肿瘤生长信号通路中起重要作用的HSP90效应蛋白降解,从而阻断肿瘤增殖信号通路的多个靶点,有效阻止肿瘤的生长,体内外实验也证实了HSP90抑制剂的抗肿瘤活性。     

热休克蛋白70在食管鳞癌中的表达

研究热休克蛋白（HSP）70在食管鳞癌中的表达及与临床病理的联系。方法：用ABC免疫组化法，检测了40例食管鳞癌组织中HSP70的表达情况。结果：食管鳞癌组织中HSP70表达阳性率为57．5％（23／40）。HSP70表达在不同分化程度的癌组织中及在有、无淋巴结转移的病例中差异均无显著性（P＞0．05）。结论：食管鳞癌是HSP70高表达的肿瘤。食管鳞癌中的HSP70的表达与肿瘤的预后无关。     

热休克蛋白在肿瘤治疗领域中的研究进展

热休克蛋白(HSP)是一个成员庞大的多肽类蛋白质家族。大量资料表明，HSP作为分子伴侣，参与其他蛋白质的折叠、转运、合成等过程，并可与细胞内的其他肽类蛋白质结合，参与细胞的抗损伤、修复和热耐受过程。近来随着对热休克蛋白研究的不断深入，HSP在肿瘤发病学、治疗和预防医学中的意义已引起广泛关注，成为近年来最活跃的研究领域之一。     

树突状细胞在肿瘤免疫中的作用

继手术、化疗、放疗之后免疫治疗越来越受到医学界的重视。但是,肿瘤的低免疫原性和机体对肿瘤的低免疫反应性,使得免疫治疗受到限制。目前,树突状细胞(DC)的免疫呈递作用,在提高机体对肿瘤的免疫反应得到进一步认识。有望成为临床上治疗肿瘤的新方法。     

清热复方对热休克大鼠肝、肺组织热休克蛋白基因表达的调控作用

[目的]探讨清热复方对大鼠热休克蛋白 70(HSP70)表达的调控作用。[方法]将 70只大鼠随机分为热休克模型组、热休克加白虎汤组、热休克加黄连解毒汤组、内毒素模型组、内毒素加白虎汤组、内毒素加黄连解毒汤组和正常对照组7组,每组10只。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对热休克模型组、内毒素模型组和正常对照组大鼠的肝、肺组织进行了HSP70 mRNA表达的检测,观察清热复方白虎汤和黄连解毒汤分别对两种模型大鼠肝、肺组织 HSP70 mRNA表达的影响。【结果】热休克模型组、热休克加白虎汤组和热休克加黄连解毒汤组中HSP70 mRNA的表达高于正常对照组(P<0.05);热休克加白虎汤组和热休克加黄连解毒汤组均高于热休克模型组(P<0.05);内毒素模型组、内毒素加白虎汤组和内毒素加黄连解毒汤组之间的HSP70 mRNA表达以及与正常对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。[结论]提示不同因素导致的热证状态下HSP70的基因表达不一致,清热复方可诱导热休克大鼠肝、肺组织中HSP70表达的增加,从而提高细胞的耐受力,避免细胞组织的损伤。     

热休克蛋白90在防治肿瘤方面的研究进展

热体克蛋白90是热休克蛋白家族中重要的蛋白之一,其作为分子伴侣参与调控、维持细胞内多种蛋白的构象和功能,在调节细胞生长、分化和凋亡等方面发挥重要的作用。近年发现,热体克蛋白90作为伴侣蛋白对肿瘤的恶性转变、生长、增殖及侵袭有着重要的作用,因而成为肿瘤治疗中的很有希望的药物作用分子靶点。本文对热体克蛋白90与肿瘤的关系及其抑制剂在肿瘤治疗中的应用进展进行了简要综述。     

热休克大鼠小脑中小脑肽1和孤独谷氨酸受体2表达变化及其与血管活性物质相关性研究

目的:探讨热休克大鼠小脑小脑肽1(Cbln1)和孤独谷氨酸受体-2(Glud2)表达的变化及意义。方法:60只SD大鼠随机分为3组:空白组,休克早期组和休克晚期组。大鼠置于恒温恒湿箱模拟湿热天气。生理记录仪检测大鼠生命体征。ELISA检测小脑组织中Cbln1和血清中降钙素基因相关肽(CGRP)含量,流式细胞仪检测Glud2表达,放射免疫分析法检测血清中肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素-Ⅱ(AngⅡ)、肾素(RA)浓度。结果:休克早期组和休克晚期组Cbln1和Glud2含量显著高于空白组(P<0.05);休克晚期组Cbln1和Glud2含量显著高于休克早期组(P<0.05);相关性分析显示Cbln1、Glud2分别与E、NE、AngⅡ、RA呈正相关(P<0.05);Cbln1和Glud2与CGRP无明显相关性(P>0.05)。结论:热休克大鼠Cbln1和Glud2表达增加,它们可能是自身抗休克机制之一。     

热休克蛋白27、70和90在东方田鼠自发性卵巢癌中的表达

目的 观察主要类型热休克蛋白（heat shock protein，HSP）27、70和90在东方田鼠卵巢癌组织中的表达。方法 用SP免疫组化法检测8例东方田鼠卵巢癌组织中HSP27、HSP70和HSP90的表达并用正常卵巢组织作对照。结果 HSP27、HSP70和HSP90在东方田鼠卵巢癌中表达的阳性率分别为100％、100％和62．5％，在正常卵巢组织中均为阴性。结论HSP27、HSP70在东方田鼠卵巢癌中呈高表达，HSP90呈低表达或不表达。     

抗CD71人-鼠嵌合抗体的体外抗肿瘤效应研究

目的 对抗CD71人-鼠嵌合抗体体外抗肿瘤效应进行研究。方法 以表达CD71分子的3种人类肿瘤细胞（K562，CEM和SMMC-7721）为靶细胞，以正常人外周血单个核细胞（PBMC）为效应细胞，在效/靶细胞比为50：1的条件下，测定嵌合抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应（ADCC）；以CEM和SMMC-7721为靶细胞，在有新鲜补体存在下，测定嵌合抗体的补体依赖性细胞毒效应（CDC）。结果 抗CD71人-鼠嵌合抗体（D2C）能够通过识别CD71分子，并通过人抗体Fe段介导ADCC。在有新鲜补体存在下，介导CDC。结论 抗CD71人-鼠嵌合抗体对CD71^ 肿瘤细胞可介导ADCC和CDC。     

胆碱能抗炎通路对感染性休克大鼠肺的保护作用

目的:应用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立感染性休克模型,研究胆碱能抗炎通路对感染性休克大鼠肺的保护作用。方法:采用CLP复制感染性休克模型,取成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组。①假CLP组(Sham);②CLP组(CLP);③迷走神经切断组(VGX);④迷走神经电刺激组(STM)。各组动物均行颈总动脉置管连续监测平均动脉压。刺激方法是将左迷走神经远端连接刺激电极,于CLP术毕即刻持续电刺激(5V、2ms和1Hz)20min。分别在各组模型制备完毕或电刺激后0,1,2,4h检测血浆TNF-α含量和4h抽动脉血行血气分析、取肺组织在透射电镜下观察肺组织超微结构变化。结果:CLP组和VGX组平均动脉血压进行性下降,STM组血压下降幅度减轻,各时间点均显著高于CLP组相应的血压值。各组动物血浆TNF-α含量均在2h出现高峰,并在4h回落。STM组1h和2h与CLP组比较,血浆TNF-α含量则显著降低。4h取颈动脉血行血气分析,CLP组和VGX组血气分析pH值、PaO2和BE显著下降(P<0.01),明显低于假CLP组和STM组(P<0.05),表明CLP组和VGX组肺功能有明显损伤,STM组肺功能有明显改善。肺组织超微结构CLP组在电镜下可见肺泡Ⅱ型上皮细胞轻度增生,肺气血屏障的中间带增厚,部分线粒体膜断裂、解体、嵴粒溶解以及线粒体空泡化。STM组病理变化明显减轻。结论:电刺激迷走神经减轻肺损伤的机制与迷走神经兴奋释放大量神经递质乙酰胆碱有关。电刺激迷走神经兴奋后,其末梢释放大量乙酰胆碱,与存在于单核巨噬细胞上的乙酰胆碱受体α7亚单位结合后,阻止单核巨噬细胞TNF-α合成,从而减轻肺脏等脏器的炎性损害。电刺激迷走神经通过胆碱能抗炎通路能缓解CLP致感染性休克大鼠的进行性血压下降,降低血清TNF-α含量,减轻急性肺功能损伤和肺组织病理损害,对肺有潜在的保护作用。     

电针腧穴“胃病方”对胃黏膜损伤大鼠热休克蛋白70的影响

目的:探讨电针腧穴"胃病方"抗胃黏膜氧化损伤的作用机制。方法:将健康SD雄性大鼠24只随机分为正常组、模型组和治疗组,每组8只。采用阿司匹林灌胃制备胃黏膜损伤模型。正常组和模型组只抓取,不做其他处理;治疗组取"内关""、中脘"和"足三里",电针20 min,每天1次,连续3 d。治疗结束后,按GUTH法计算胃黏膜损伤指数(UI),取大鼠胃黏膜组织,HE染色,光学显微镜观察,免疫组织化学法检测胃黏膜组织中热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果:与正常组比较,模型组UI升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组UI降低、HSP70表达上调(P<0.01),炎细胞浸润减少(P<0.05)。结论:电针腧穴"胃病方"保护黏膜、减轻炎症反应,其机制可能与诱导HSP70表达上调有关。     

戊乙奎醚联合托烷司琼预防小儿扁桃体/腺样体切除术后恶心呕吐的效果观察

目的观察戊乙奎醚对托烷司琼预防小儿扁桃体/腺样体切除术后恶心呕吐(PONV)效果的影响。方法 60例ASAⅠ～Ⅱ2～6岁的小孩随机分为单独使用托烷司琼组(T组)、使用托烷司琼和戊乙奎醚组(PT组)。观察并记录两组患者手术结束回到病房24h和48h后呕吐病例数和呕吐的次数,并对术后口渴饮水的情况进行观察和记录。结果在24h和48h内,PT组呕吐的病例数和呕吐次数均明显低于T组(P<0.05);但PT组在3h和6h内饮水的病例数和次数均明显高于T组。结论戊乙奎醚可增强托烷司琼预防小儿扁桃体/腺样体切除术后PONV的效果,但可引起术后口渴,增加术后饮水次数。     

热休克蛋白Hsp 70激活树突状细胞治疗肺癌

目的 利用热休克蛋白Hsp 70作为佐剂增强树突状细胞(DCs)递呈肿瘤抗原的能力并提高细胞毒T淋巴细胞(CTLs)对肺癌细胞的杀伤活性.方法 外周血单个核细胞体外经GM-CSF和IL-4诱导产生树突状细胞,负载A549肺癌细胞裂解物的同时加入Hsp 70,诱导的自体CTLs用细胞毒试验和ELISA测定杀伤活性和细胞因子的分泌.同时建立荷瘤裸鼠模型,不同分组裸鼠一次或多次皮下注射CTLs.结果 A 549冻融抗原 Hsp 70显著增强CTLs的增殖能力,诱导的CTLs对A 549细胞产生特异性杀伤并能抑制荷瘤裸鼠的肿瘤生长.结论 DCs能有效呈递肺癌冻融抗原,诱导产生抗原特异性CTLs.在抗原致敏阶段加入Hsp 70能使CTLs杀伤活性进一步增强,提示Hsp 70在以DCs为基础的肺癌疫苗和过继免疫治疗中具有广阔前景.     

急性脑出血患者血浆S100B和热休克蛋白70水平与预后关系的研究

目的探讨急性脑出血患者血浆S100B和热休克蛋白70水平与预后的关系。方法仙桃市第一人民医院采用酶联免疫吸附试验检测60例急性脑出血患者72 h内血浆中S100B和热休克蛋白70(HSP70)的水平,并分析其与患者预后的关系。结果急性脑出血急诊手术后好转组36例,无好转组24例,其中无好转组血浆中S100B及HSP70含量均显著高于好转组(P<0.01);分别以患者急性脑出血后血浆S100B水平2.0μg/L,HSP70水平15.0μg/L为标准评估预后,S100B特异度为82.1%,灵敏度为81.0%,相对危险度6.38;HSP70特异度73.5%,灵敏度57.7%,相对危险度2.05。结论急性脑出血患者早期血浆中S100B及HSP70水平显著升高,显示预后差;血浆中S100B及HSP70水平对评估脑出血患者预后具有较高的特异性和灵敏性。     

白花蛇舌草对H22肝癌细胞热休克蛋白70表达的影响

【目的】观察H22肝癌细胞热休克蛋白70(HSP70)表达及清热解毒中药白花蛇舌草对其表达的影响。【方法】以培养的H22肝癌细胞腹腔接种于小鼠使小鼠致瘤,然后将荷瘤小鼠分为模型组、白花蛇舌草组(剂量为25 g/kg)、党参对照组(剂量为25 g/kg)及热休克处理组共4组。采用免疫组化标记法检测各组活体腹水H22肝癌细胞HSP70的表达情况。【结果】白花蛇舌草组及热休克处理组H22肝癌细胞HSP70的表达显著性高于模型组(P<0.05或P<0.01);党参对照组H22肝癌细胞的HSP70表达与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】白花蛇舌草可能通过诱导H22肝癌细胞HSP70表达,增强其免疫原性而发挥抗肿瘤作用。     

大白鼠肠系膜上动脉夹闭休克时SOD抗脂质过氧化损伤的研究

本实验探讨大白鼠肠系膜上动脉夹闭休克时输注SOD的抗脂质过氧化作用和细胞保护效应。松夹1h,实验组肠和心肌MDA较对照组明显升高(P<0.05),而SOD治疗组肠和心肌MDA明显低于实验组(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。松夹2h,实验组肠、心、肝、肺MDA均明显高于对照组(P<0.5～0.01),而SOD治疗组肠、心、肺MDA仍低于实验组(P<0.05),但较对照组明显升高(P<0.05)。此外,SOD治疗组血浆β-葡萄糖醛酸酶和酸性磷酸酶明显低于实验组,动物存活时间明显延长。     

缺血后处理联合预处理对大鼠脑组织HSP70的表达和脑缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨缺血后处理、缺血预处理及两者联合应用对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织超微结构及热休克蛋白70(HSP70)的影响及其可能的机制。方法:采用改良的四血管法制造大鼠全脑缺血模型,实验分5组,假手术A组、缺血再灌注B组、缺血预处理C组、缺血后处理D组,联合处理E组,各组动物分别于再灌注结束后(6,8,24h)断头处死。采用免疫组织化学染色的方法测定大鼠脑组织中HSP70灰度值;电镜观察脑组织超微结构的变化。结果:缺血再灌注损伤后,各组脑组织HSP70表达增强,在各时间点E组HSP70表达明显高于B组、C组、D组,差异有显著性(P<0.01),C组与D组在各时间点无明显差异(P>0.05);电镜下观察B组脑组织损伤最重。E组脑组织损伤最轻,C组和D组优于B组。结论:短暂脑缺血再灌注损伤可诱导HSP70表达,有利于脑缺血再灌注后损伤神经元的修复。     

祛银汤对血热证银屑病的疗效观察

目的观察清热凉血中药-祛银汤治疗血热证寻常型银屑病的临床疗效及其对外周血肿瘤坏死因子（TNF—α）、白细胞介素（IL-8）时相表达的影响。方法观察30例血热证寻常型银屑病患者予祛银汤口服治疗前后皮损面积和严重性指数（psoriasis area and severity index,PASI）评分、中医症状评分的变化,并采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测治疗前、治疗后4周、8周血清TNF-α、IL-8的水平。结果祛银汤能明显改善寻常型银屑病的临床症状,治疗后PASI评分、各中医症状评分较治疗前均明显改善（P〈0．05）。治疗4周、8周后TNF—α、IL-8水平明显下降,与治疗前比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）,且TNF-α、IL-8分别与PASI评分呈正相关关系（r=0．46,P〈0．05;r=0．37,P〈0．05）。结论祛银汤可通过降低血清TNF—α、IL-8水平,从而起到治疗银屑病的作用;且两者与病情密切相关,可作为评价银屑病病情活动程度的参考指标之一。