土鳖虫胰酶酶解物抗凝活性部位分离纯化及组成分析

目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶酶解物进行分离纯化,初步确定其抗凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物,以APTT(活化部分凝血酶时间)为指标,采用溶剂萃取法,获得抗凝活性部位IV,经凝胶柱色谱法对其进行分离纯化获得胰酶酶解纯化物;采用考马斯亮蓝法对纯化物进行定量分析,通过MALDI-TOF-MS检测分离部分的分子量分布范围。结果:土鳖虫胰酶酶解物部位IV有较强的抗凝活性,其抗凝活性强度与酶解物质量浓度相关;部位IV经Sephadex G-25纯化后,通过考马斯亮蓝法测得其蛋白质量分数5.5%;进一步经Sephadex G-10脱盐的纯化物,采用MALDI-TOF-MS检测,确定为相对分子质量在850～910 Da的3组多肽混合物。结论:采用凝胶柱色谱法分离纯化土鳖虫胰酶酶解物是可行的,抗凝活性组分是<1 000 Da的小分子肽类。     

吴茱萸多糖的分离和组成研究

目的 对吴茱萸中多糖进行提取、分离和纯化,进一步研究吴茱萸多糖主要组分的单糖组成.方法 采用水提醇沉法提取粗多糖,H2O2脱色、Sevag法除蛋白、透析制备精制品,用DEAE-32纤维素阴离子交换柱、Sephacryl S-400 SF型凝胶柱分离纯化多糖,经酸水解后,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化HPLC法分析单糖组成.结果 从吴茱萸中分离纯化得两个主要多糖组分ERPS2a、ERPS3,二者的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,ERPS2a的单糖物质的量比为2.1:2.6:3.4:1.0:7.9:4.9,ERPS3的单糖物质的量比为1.0:17.6:2.7:3.2:19.8:9.4.结论 吴茱萸多糖得到有效分离纯化,两纯组分所含单糖种类相同,仅各单糖的组成比例不同.     

刺梨多糖的分离纯化及其神经营养活性

 目的对刺梨多糖进行分离纯化及神经营养活性研究。方法采用DEAE-纤维素柱色谱及Sepharose CL-6B凝胶柱色谱对刺梨粗多糖进行分离纯化,得到RRTP-1～RRTP-8共8个多糖组分。凝胶柱色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定纯度。采用PC12细胞对各组分的神经营养活性进行筛选,并对纯化的单一多糖进行活性定量测定。结果RRTP-1和RRTP-3为相对分子质量分布均一多糖。PC12细胞实验结果表明,多个多糖组分能刺激PC12细胞产生神经纤维样突起。结论多数刺梨多糖组分具有神经营养活性。     

蜈蚣胃蛋白酶解物体外抗凝活性肽类的分离与分析

目的:采用凝胶过滤色谱和C18反相色谱对蜈蚣胃蛋白酶解物的抗凝活性部位进行分离纯化,并检测其相对分子质量分布范围。方法:按色带及280 nm紫外光谱法收集凝胶色谱分离各流分;以活化部位凝血活酶时间(APTT)为指标,检测各流分体外抗凝活性;用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测其相对分子质量分布范围。结果:经凝胶过滤色谱和C18反相色谱纯化得到了抗凝活性组分,用MALDI-TOF-MS测得其相对分子质量分布范围为597～1 146。结论:凝胶过滤色谱和C18反相色谱可用于蜈蚣胃蛋白酶解物抗凝活性组分的分离纯化,其抗凝活性组分为小分子肽类。     

五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定

目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成。方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分。用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成。结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×10~4,6×10~4;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等。结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究。     

白毛藤多糖的分离、纯化和鉴定

目的分离、纯化和鉴定白毛藤S olanum ly ra tum中的多糖的成分。方法经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、酶-Sevag法脱蛋白得到的粗多糖,再经DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换和Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱色谱分离得到纯化的白毛藤多糖(SLPS),用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖,凝胶渗透色谱(GPC)法测定其相对分子质量,运用薄板色谱(TLC)和纸色谱(PC)法初步测其结构组成。结果红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰。结论本实验所提取的白毛藤多糖为单一组分的多糖。     

气相色谱分析生地黄多糖的单糖组成及其含量

目的:对生地黄多糖进行分离纯化,并进行组成分析.方法:经沸水抽提、乙醇沉淀、三氯乙酸脱蛋白,再经superdex 200和sephadex G100凝胶色谱得到纯化的生地黄多糖SRP Ⅰ和SRP Ⅱ,经凝胶色谱分析,均为单一多糖.经水解、衍生化后,用气相色谱分析其多糖的组分.结果:经分离纯化,从生地黄中得到了2个单一的纯品多糖SRP Ⅰ和SRPⅡ.结论:生地黄多糖SRP Ⅰ是由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖等单糖组成,其质量分数分别为6.11%,66.46%,3.93%和21.50%;而生地黄多糖SRP Ⅱ是由鼠李糖、岩藻糖、甘露糖、半乳糖和果糖等单糖组成,质量分数分别为21.82%,24.47%,10.48%,29.94%和13.29%.     

玉郎伞多糖化学成分的研究

目的:从玉郎伞中分离出玉郎伞多糖,并对其化学组成进行研究.方法:玉郎伞经醇提后的药渣用热水提取,乙醇沉淀,Sevag试剂脱蛋白,采用DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析分离纯化,气相色谱和薄层色谱分析其组成.结果:分离得到的玉郎伞多糖经Sephadex-75凝胶柱层析,硫酸-苯酚法以及高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)证实为单一多糖,紫外扫描显示无核酸和蛋白特征吸收峰,薄层色谱和气相色谱表明由葡萄糖和阿拉伯糖组成.结论:玉郎伞多糖首次从玉郎伞中提取获得,为玉郎伞主要成分之一.     

SE-HPLC测定刺糖多糖相对分子质量及纯度

目的建立高效液相凝胶色谱法(SE-HPLC)测定刺糖多糖相对分子质量和纯度的方法;分析刺糖多糖的相对分子质量分布及并进行含量测定。方法采用水提醇沉法及AB-8大孔吸附树脂和DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换树脂分离纯化不同相对分子质量的多糖组分,用TSK-GEL G4000PWXL,7.8mm×300mm色谱柱,2414示差折光检测器,测定其相对分子质量分布和纯度。结果得到刺糖多糖组分AP2-4,其多糖相对分子质量为4.9×10~4,纯度含量为(93±3)%;相对分子质量分布:重均分子量(M_r)为4.973 3;数均分子量(M_n)为4.951 8;峰值分子量(M_p)为6.311 2,4.873 2;多分散度(D)为1.0043。结论建立了简便、快捷、精密度高的凝胶色谱柱方法,可较准确地测定刺糖多糖的纯度和相对分子质量分布。     

水蛭不同工艺提取物抗凝与纤溶活性比较及酶解物组成分析

目的:比较水蛭不同提取工艺的抗凝溶栓作用;初步确定水蛭酶解产物的化学成分组成。方法:通过活化部分凝血活酶时间(APTT)试验及纤维蛋白平板试验,比较水蛭胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解、醇提、水煎提取物的体外抗凝与纤溶活性差异。采用Sephadex G-100凝胶柱色谱法对优选提取物进行进一步分离纯化,并采用MALDI-TOF-质谱法对其组成进行分析。结果:与生理盐水组比较,在相同的剂量下,水蛭胃蛋白酶酶解物可明显延长大鼠APTT,并具有较强的纤溶作用,其余几种提取物的作用不明显。胃蛋白酶酶解物经Sephadex G-100凝胶柱色谱分离纯化的活性部位经MALDI-TOF-质谱法检测为分子量在700～3 200之间的一组寡肽。结论:胃蛋白酶酶解是水蛭较为理想的提取方法,其有效部位的组成为寡肽。     

流式细胞术检测蜀葵花抑菌作用的初步研究

目的 探讨流式细胞术（FCM）在蜀葵花抑制金黄色葡萄球菌（金葡菌）药敏试验中的应用价值.方法 应用FCM检测蜀葵花对金葡菌的抗菌活性,药物作用3h后,用碘化丙啶（PI）染色,分别检测10株金葡菌阴性对照管和最低抑菌浓度（MIC）药物浓度作用管的平均荧光强度（MFI）,计算两者比值并设定流式细胞药敏试验（FCST）检测MIC的判断值,根据该判断值对21株临床菌株同时进行常规药敏和FCST双盲测定.结果 10株金葡菌测得的MFI比值为2.95±0.117,将MFI大于阴性对照管3倍（增加200%）的最低药物浓度定义为该菌的MIC;21株临床菌株中20株两种方法测得MIC值相差在1个倍比稀释度以内,两者比较无显著性差异（P〉0.05）.结论 FCST与常规药敏试验结果有很好的一致性,并具有快速、敏感、准确的优势.     

牛磺酸鹅去氧胆酸对小鼠免疫功能的影响

目的:研究牛磺酸鹅去氧胆酸(TCDCA)对小鼠免疫功能的影响.方法:分别采用流式细胞术双抗标记法、血清溶血素分光光度法、变态反应法、碳廓清法和比浊测定法分别测定TCDCA对T细胞亚群、对血清中抗体含量、单核-巨噬细胞吞噬功能及溶菌酶含量的影响.结果:TCDCA明显提高小鼠外周血中CD4 和CD19 细胞百分率及CD4 /CD8 比值;高、低剂量的TCDCA均能提高小鼠血清平均溶血素含量和血清中溶菌酶的含量,同时也可能增强单核-巨噬细胞吞噬功能及抑制小鼠迟发型变态反应.结论:TCDCA能明显提高小鼠机体的免疫功能.     

从“正邪交争”谈胡希恕论治伤寒的顺势思维特征

胡希恕是中国近代著名中医医家。文章通过对其强调的"正邪交争"概念的阐述,提炼出胡希恕论治伤寒中具有的顺势思维及其特征。"正邪交争"是古人对人体本能排除疾病过程的描述方式,是一组变化的证的集合。贯穿此过程的是中人体排除疾病的"势"。"势"是病程中各个截面状态的证型依次排列而形成"正邪交争"集合的内在原因。胡希恕的顺势思维体现为论治伤寒中时时注重落实"正邪交争"的具体状态,强调熟悉和把握"正邪交争"过程中具有客观规律性的"势",而非进行主观推断。"势"的存在是内因和外因同时作用的结果,是客观存在的,有重复性,并可通过对"证"的干预进行验证。     

益气化痰活血汤治疗冠心病心绞痛120例

目的:观察益气化痰活血汤治疗冠心病心绞痛的疗效。方法:采用益气化痰活血汤治疗冠心病心绞痛患者120例,并与对照组单纯应用西医常规疗法治疗80例进行比较。结果:治疗组在心绞痛症状疗效及心电图疗效方面均优于对照组。结论:益气化痰活血汤治疗冠心病心绞痛有改善心肌缺血,通脉止痛的疗效,值得临床推广应用。     

清肝活血排石汤治疗肝内胆管结石45例

目的:探讨清肝活血排石汤对肝内胆管结石的临床疗效。方法:按照信封法将90例肝内胆管结石患者随机分为治疗组和对照组,分别服用清肝活血排石汤和胆维他胶囊(茴三硫),均以30天为1疗程,2疗程结束后评价疗效。结果:治疗组总有效率为64.4%,对照组总有效率为35.6%,两组比较差异显著(Ρ<0.05)。结论:清肝活血排石汤治疗肝内胆管结石疗效肯定。     

参芪活血胶囊治疗冠心病心绞痛100例

目的：观察参芪活血胶囊治疗冠心病心绞痛临床效果。方法：采用参芪活血胶囊治疗冠心病心绞痛100例,并与西药治疗94例对照观察。结果：治疗组中显效41例,有效53例,无效6例,总有效率94．00％。对照组显效37例,有效49例,无效8例,总有效率91．49％。两组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：参芪活血胶囊治疗冠心病心绞痛疗效较满意。     

补气活血汤治疗冠心病心绞痛52例疗效观察

目的：观察补气活血汤治疗中医辨证属气滞血瘀型冠心病心绞痛的疗效。方法：选气滞血瘀型冠心病心绞痛100例,随机分为两组。治疗组予补气活血汤,对照组用长效消心痛与肠溶阿斯匹林,治疗2个疗程。结果：治疗组心绞痛症状显效24例,改善20例,无效8例,总有效率为84．61％（95％CI=74．80％-94．42％）;对照组显效12例,改善15例,无效21例,总有效率为56．25％（95％CI=42．22％～70．47％）;两组综合疗效比较（u=2．8712,P=0．0063）,有显著性差异;心电图、血液流变学参数亦有明显差异。结论：补气活血汤治疗冠心病心绞痛疗效优于长效消心痛与肠溶阿斯匹林,其临床症状收益为OR=0．23（95％CI=0．09～0．60）,NNT=4（95％CI=2．17～9．46）;可改善心电图ST—T改变,降低血液黏度。     

补肾活血煎和银杏液对大鼠交配行为的研究

观察中药补肾活血煎和银杳液对去势大鼠跨背行为的影响。灌服补肾因煎和银杏液均设二个剂量进行观察，并以灌水空白对照组和皮下注射丙酸睾丸酮阳性对照组进行比较。补肾活血煎和银杏液各剂量组可使去势大鼠的交配次数与空白对照组比较有显著增加，阳生对照组作用量最为明显。     

四倍体鸡蛋参的诱导与鉴定

目的:利用秋水仙素处理和组织培养技术诱导鸡蛋参多倍体,丰富现有遗传资源。方法:通过不同浓度(0.01%~0.2%)的秋水仙素和不同的诱导时间(6~60h)处理已得到的鸡蛋参无菌苗。结果:诱导株经流式细胞术检测,获得秋鸡蛋参四倍体、嵌合体和八倍体。结论:0.2%秋水仙素处理36h,四倍体诱导率在33.3%,诱导效果最佳。     

滋阴活血汤治疗慢性萎缩性胃炎61例

目的：观察滋阴活血汤治疗慢性萎缩性胃炎的疗效。方法：113例患者随机分为两组。治疗组61例采用滋阴活血汤治疗,对照组52例采用西药治疗,3个月为1个疗程,2个疗程后统计疗效。结果：治疗组治愈15例（占24.59%）,显效19例（占31.15%）,有效22例（占36.07%）,无效5例（占8.20%）,总有效率为91.80%;对照组治愈9例（占17.31%）,显效16例（占30.77%）,有效17例（占32.69%）,无效10例（占19.23%）,总有效率为80.77%。治疗组治愈率、总有效率明显高于对照组,两组相比差异显著（P〈0.05）。结论：滋阴活血汤治疗慢性萎缩性胃炎具有良好效果。