2013年河南省腹泻人群志贺菌、沙门菌血清型分布

目的为早发现、早预警食源性疾病暴发和食品安全隐患提供科学依据。方法根据GB 4789.4—2010《食品卫生微生物学检验沙门菌检验》和GB 4789.5—2012《食品卫生微生物学检验志贺菌检验》中血清学鉴定的方法,对分离自河南省2013年腹泻病人粪便标本中的67株沙门菌和172株志贺菌进行血清学分型。结果从67株沙门菌中检出24种血清型,主要为肠炎沙门菌,所占比例为32.8%,从172株志贺菌中只检出了福氏志贺菌(B群)和宋内志贺菌(D群)2种血清型,其中又从福氏志贺菌中检出了8个亚型。在所有的型或亚型志贺菌中B2a亚型所占比例最高,为54.1%。结论河南省腹泻人群沙门菌、志贺菌血清学分布有一定的地域特征。     

一株与沙门菌性状非常相似的鲍氏志贺菌鉴定结果分析

[目的]探讨在CHROMagar沙门菌显色培养基上与沙门菌性状特征非常相似的鲍氏志贺菌的鉴定方法。[方法]对CNAS提供的样本运用科玛嘉沙门菌显色培养基,并结合生化反应、血清凝集试验和噬菌体裂解试验等检验技术进行食源性肠道致病菌分离鉴定。[结果]从CNAS提供的样本中分离出的鲍氏13型志贺菌无论在科玛嘉沙门菌显色培养基上生长的菌落形态,还是部分生化反应试验结果、噬菌体试验结果都与沙门菌非常相似,须借助血清凝集试验才能正确鉴定。[结论]应综合详细生化反应、血清凝集试验和噬菌体裂解试验等检验技术更妥善的鉴别细菌种属。     

结晶紫沙门菌培养基应用研究

目的:研究结晶紫沙门菌培养基应用于健康人群粪便中志贺菌和沙门菌检测效果.方法:采用结晶紫沙门菌培养基和SS培养基配对,同时对同一样本进行检验.结果:对已知志贺菌和沙门菌的检出率为100%;对12048份样本检验,沙门菌的检出率前者为0.42%,后者为0.27%(χ2=6.564,P<0.025).结论:沙门菌培养基检测志贺菌和沙门菌的效果明显优于SS培养基.     

浙江省海盐县2007年志贺菌、沙门菌菌型分布及耐药性分析

目的:了解海盐县志贺菌、沙门菌的菌型分布及耐药情况,为制定有效防治措施及指导临床合理用药提供科学依据。方法:按照GB16002-1995、GB17012-1997进行志贺菌、沙门菌检验,药敏试验采用K-B法,依据NCCLS(美国临床实验室标准委员会)规定判断结果。结果:2007年度检出的志贺菌中,B群占60.0%,D群占40.0%,A群和C群未检出,B群中以福氏2 a占优势,构成比为58.3%;检出的沙门菌中,A群占4.8%、B群占47.6%、C群占19.0%、D群占19.0%、E群占9.5%,各菌型中以B群的阿贡纳沙门菌和D群的肠炎沙门菌所占比例稍高,构成比均为19.0%。药敏试验显示志贺菌对四环素、复方新诺明、氨苄青霉素、萘啶酸的耐药率分别为95.0%、90.0%、95.0%、95.0%;沙门菌对四环素、复方新诺明、氨苄青霉素、萘啶酸的耐药率分别为28.6%、33.3%、19.0%、42.9%。结论:2007年海盐县志贺菌感染的优势菌型为福氏志贺菌2 a和宋内志贺菌,沙门菌没有明显的优势菌型。志贺菌和沙门菌的耐药情况相当严重,均对1种或多种抗生素耐药,志贺菌和沙门菌的耐药率无显著性差异,临床治疗宜选诺氟沙...     

64株与沙门菌、志贺菌血清凝集的肠杆菌鉴定

<正>我县每年一次的从业人员健康体检粪便检测标本中,经常发现有符合沙门菌、志贺菌三糖铁反应的可疑菌落与沙门、志贺菌诊断血清发生凝集,而系统生化鉴定又不符合的交叉凝集现象。因为工作量大,血清凝集很费时间,我们采用可疑菌落-三糖铁-多价血清凝集-系统生化-血清分型的操作流程。一经多价血清凝集先做系统生化,生化确证后再血清分型。在检测中我们发现有64株与沙门菌、志贺菌多价血清凝集的菌株,经系统生化鉴定,血清学分型,与     

两步生化法检验粪便中沙门菌与志贺菌

从业人员粪便沙门菌、志贺菌分离鉴定是一项任务重、难度又较大的工作 ,因各实验室鉴定方法不一 ,致使一些如枸橼酸杆菌和无动力不产气的大肠杆菌混入其中 ,给正确鉴定带来不少困难。我们参考有关资料 ,通过计算机运用概率运算手段确定了沙门菌志贺菌的两步生化筛选检验法。1　材料与方法1 1　材料　ＳＦ、ＧＮ增菌液 ,ＨＥ琼脂 ,三糖铁琼脂 ,动力靛基质尿素 (ＭＩＵ)琼脂 ,赖氨酸培养基及对照 ,氰化钾培养基及对照 ,ＯＮＰＧ、山梨醇、水杨素、苯丙氨酸脱氨酶、葡萄糖铵培养基 ,0 7%～ 0 8%半固体琼脂 ;沙门菌属诊断血清、志贺菌属诊断血…     

深圳市龙华辖区食品、公共场所从业人员沙门菌和志贺菌健康带菌情况

目的 了解深圳市龙华辖区食品、公共场所从业人员中，沙门菌和志贺菌的健康带菌情况及流行特点，为制定疾病预防控制措施提供可靠依据。方法 取从业人员肛拭子，增菌后划种平板，再取可疑菌落作生化鉴定和血清学鉴定。结果 2005、2006年共检查56316份肛拭子样本，检出沙门菌和志贺菌219株，带菌率0．39％，沙门菌和志贺菌带菌率分别是0．12％和0．27％。结论 带菌率与国内有关报道相比偏高，志贺菌带菌率高手沙门菌。提示：①肠道传染病的防治还应进一步加强，并对志贺菌有所侧重。②国家应规范健康带菌检测的适用方法，并加强培训和监管。     

一种沙门菌和志贺菌保存用培养基

在日常微生物学检验中和检验方法研究中需要保存一些菌种.有些菌种比较容易保存,有些菌种保存较难,原因是保存时间短,容易死亡,尤其是沙门菌和志贺菌.有比较好的菌种保存培养基"[1],但能够较长时间地保存志贺菌的培养基还没有报道.为此研究出了一种在斜面上能够较长时间保存沙门菌和志贺菌等肠杆菌科细菌的培养基.     

沙门菌和志贺菌通用增菌液增菌效果实验观察

在对食品生产经营单位或公共场所从业人员作伤寒、痢疾带菌检查，对各类食品样品作沙门、志贺菌检测时，由于沙门菌和志贺菌检验所用的增菌液不同，即使是对同一份标本也只能分别增菌，分别划线分离，使实验室的工作量成倍增加，同时由于两者增菌时间不相同，（沙门菌18～24h，志贺菌6～8h），给实验测定的工作安排带来一定困难，因此，研究和选择合适的可同时用作沙门、志贺菌增菌的通用增菌液，对提高实验室的工作效率具有重要的现实意义。选择了市售的2个牌号的沙门、志贺菌增菌液与SC增菌液及GN增菌液分别进行了增菌效果的对比观察，现将结果报告如下。     

双色实时荧光PCR法快速检测感染性腹泻人群中的沙门菌和志贺菌

目的调查沙门菌和志贺菌在南京市腹泻人群中的分布情况,为做好防治工作提供资料。方法对监测哨点医院腹泻患者的粪便样本提取核酸,采用双色实时荧光PCR方法对携带SsaR毒力基因的沙门菌属和携带Ipah毒力基因的志贺菌属进行检测,阳性样本再采用传统分离培养方法进行分离,获得的可疑菌株采用ATB生化鉴定,血清凝集确认血清型,从而了解这2种病原菌在腹泻人群中的检出率和相应菌型的分布情况。结果在检测的1 558份样本中,检出沙门菌25株,检出率为1.60%;志贺菌9株,检出率为0.58%。结论本市2012年-2013年肠道门诊腹泻中,分离志贺菌属以福氏志贺菌为主,宋内志贺菌次之,无鲍氏志贺菌和痢疾志贺菌。沙门菌属以D群和C1群血清型为相对优势血清型,血清型分布较广。     

应用LAMP同时快速检测沙门菌和志贺菌的效果评价

目的探讨环介导等温扩增（LAMP）方法同时快速检测沙门菌和志贺菌的应用价值。方法通过通用增菌培养,应用LAMP方法和分离培养法分别对76份食堂从业人员粪便标本进行沙门菌和志贺菌检测。结果LAMP方法检出1份标本沙门菌阳性,阳性率为1．32％;分离培养法检出1份都柏林沙门菌,阳性率为1．32％;2种方法的检测结果一致。LAMP方法可在3h内检出沙门菌、志贺菌,而分离培养法需要3-5d,鼠伤寒沙门菌LAMP方法的灵敏度为170CFU／ml,福氏志贺菌LAMP方法的灵敏度为190CFU／ml,与常见的食源性致病菌均无交叉反应。结论与分离培养法相比,LAMP方法特异性高,灵敏度高,不需要特殊仪器,能够在简易的实验条件下,快速、简便地同时检测沙门菌和志贺菌,LAMP方法适用于基层疾病控制实验室开展沙门菌和志贺菌的快速筛查检测。     

沙门菌和志贺菌二联实时荧光定量PCR的临床检测应用研究

目的:进行沙门菌和志贺菌二联实时荧光PCR检测的研究,并探讨在CDC体检中临床检测的应用.方法:在沙门菌、志贺菌的fimY基因和缸ipaH基因保守区设计特异性引物和探针,对引物、探针、Mg2 浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,并与传统检测方法进行对比.结果:该方法从细菌核酸提取至完成检测仅需3 h左右,对两种菌的检测灵敏度均达到100 cfu/ml,检测自2007年11月以来CDC临床肛拭子样本5896份,实验结果与权威检验机构的结果符合率达100%.结论:二联实时荧光定量PCR可同时定量的检测出沙门菌和志贺菌,灵敏度高,特异性强,检测周期短.适用于CDC体检等同时对沙门菌和志贺菌的快速临床检测.     

改良TT增菌液对沙门菌属和志贺菌属的分离效果研究

目的探讨改良硫代硫酸钠碳酸钙(TT)增菌液对肠道感染菌种沙门菌属和志贺菌属的分离效果。方法收集2015年3月-2016年9月288例因急性腹泻住院患者的粪便作为研究样本,对照组和观察组各144例,采用常规接种法接种于麦康凯琼脂培养基(MAC)和沙门氏菌-志贺氏菌琼脂培养基(SS),另外加种改良TT增菌液进行增菌培养,同时使用改良TT增菌液、革兰阴性(GN)增菌液、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液分别对外购的沙门菌属和志贺菌属进行培养,比较不同增菌液对肠道感染菌种沙门菌属和志贺菌属的分离效果。结果对照组采用直接接种培养基的方法检测出沙门菌属15株,志贺菌属4株,检出率分别为10.42%和2.78%;观察组采用改良TT增菌液培养后接种方法检测出沙门菌属43株,志贺菌属12株,检出率分别为29.86%和8.33%;观察组沙门菌属与志贺菌属的检出率明显高于对照组(P<0.05);改良TT增菌液对沙门菌属的增菌效力与SC增菌液相当,其中对鼠伤寒沙门菌属增菌效果最高达到10-8,优于SC增菌液10-7,改良TT增菌液对志贺菌属的增菌效力与GN增菌液相似,两种志贺菌属的最大增菌效果均达到10-7。结论改良TT增菌液对沙门菌属和志贺菌属的增菌效果与SC、GN增菌液相当,不仅可以有效促进沙门菌属和志贺菌属的增殖,提高病原菌分离效果,还能简化工作流程,提高实验室工作效率。     

常州市人群感染沙门菌和志贺菌血清型分布及耐药分析

目的:了解常州市人群感染沙门菌和志贺菌的血清型分布和耐药性。方法:按国家标准和NCCLS推荐的K-B法对体检标本和临床标本检出的沙门菌和志贺菌进行血清分型和耐药性检测。结果:检出的沙门菌血清型中除临床标本中检出的较多的伤寒沙门菌外,德尔卑沙门菌、阿贡纳沙门菌、肠炎沙门菌和鸭沙门菌在两类标本都有较高的检出率;志贺菌都以B群居多,D群次之,B群中以福氏2 a型检出率最高,2b型次之。药敏试验显示沙门菌和志贺菌的耐药情况相当严重,且耐药产生迅速,多重耐药比较严重,两种细菌对复方磺胺甲恶唑、青霉素和四环素有严重的耐药性,其次是氨苄西林和呱拉西林,本次实验发现两种细菌对第三代头孢如头孢噻肟和头孢他定等也产生了一定的耐药性。     

多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌

目的 建立改良分子信标，多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法，应用于食源性致病菌的快速诊断。方法 根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因，分别设计一对引物和改良分子信标探针，用同色荧光标记，用于同体系检测沙门菌。志贺菌根据ipaH基因的保守序列，设计引物和改良分子信标探针，加入沙门菌检测体系中，建立三重实时PCR一改良分子信标检测体系，应用于同时对沙门菌、志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果 改良分子信标一多重实时PCR反应体系DNA灵敏度为69～93fg/μl。菌液灵敏度为32～64CFU／ml或1～2CFu／PCR反应体系，无交叉反应。该反应体系同时检测134株沙门菌和67株志贺菌，均出现特异的荧光信号，两种细菌检测互不干扰。对细菌性食物中毒样本等共1100份同时进行沙门菌和志贺菌检测，569份沙门菌实时PCR阳性，其中551份沙门菌培养阳性；42份志贺菌实时PCR阳性，其中41份志贺菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需时间2h至1d。结论 改良分子信标-多重实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于沙门菌和志贺菌食物中毒的快速诊断，伤寒、痢疾等肠道传染病的初筛及预防医学门诊的健康人群体检，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

多重PCR检测食品中的金黄色葡萄球菌、志贺菌和沙门菌

目的建立一种能同时检测食品中金黄色葡萄球菌、志贺菌和沙门菌的多重PCR检测方法。方法采用7.5%NaCl肉汤对食品样品中的金黄色葡萄球菌进行增菌,同时采用GN增菌剂对食品样品中的志贺菌和沙门菌进行增菌。根据金黄色葡萄球菌的nuc基因、志贺菌的ipaH基因、沙门菌的invA基因设计引物,通过多重聚合酶链反应(PCR)反应对食品样品中上述三种病原菌的目标基因进行扩增,同时对反应体系进行优化。结果特异性实验表明本方法的特异性良好。对污染金黄色葡萄球菌、志贺菌和沙门菌的牛奶样品进行检测,检出限为1cfu/ml。结论本实验建立的多重PCR检测方法适用于食品中金黄色葡萄球菌、志贺菌和沙门菌的快速检测,具有快速、简便、灵敏的特点。     

沙门-志贺菌增菌培养基的研究

目的采用分值计算法研制沙门、志贺菌增菌培养基和制订质量标准。方法分值计算法。结果大肠埃希菌菌落平均菌落直径为0.99 mm,S=0.17;生长率为15.7%,δρ=3.12;痢疾志贺菌菌落平均菌落直径为1.48mm,S=0.29;生长率为70.2%,δρ=8.98;鼠伤寒沙门菌菌落平均菌落直径为1.65 mm,生长率为99.2%δρ=3.41。三株指示菌菌悬液浓度用沙门-志贺增菌培养基稀释10-8~10-12,培养6 h后计数结果:大肠埃希菌10-10稀释度为1.0cfu/ml;痢疾志贺菌10-11稀释度为1.0 cfu/ml;鼠伤寒沙门菌10-11稀释度为3.0 cfu/ml。质量分值结果表明:大肠埃希菌质量分值≥29.9(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥14.90;生长率分值≥5.00)。痢疾志贺菌质量分值≥13.05(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-1.95;生长率分值≥5.00)。鼠伤寒沙门菌质量分值≥11.65(其中:菌落直径分值≥10.00;菌落差分值≥-3.35;生长率分值≥5.00)。结论沙门、志贺菌增菌培养基对大肠埃希菌具有较好的抑制作用;对痢疾志贺菌达到促生长的作用;对鼠伤寒沙门菌的生长未受到不良的影响。     

沙门菌和志贺菌双重实时荧光定量PCR的应用效果评价

目的研究沙门菌和志贺菌双色实时荧光PCR法的应用价值。方法收集2017年8月到2018年4月深圳市西丽人民医院临床肛拭子样本2700份,运用双色实时荧光PCR法检测沙门菌与志贺菌,统计阳性检出率,并与培养法的检测结果进行对比。结果 2700份样本中,培养法检出沙门菌与志贺菌阳性分别为2株、0株,检出率分别为0.07%、0.00%,双色实时荧光PCR法检出沙门菌与志贺菌阳性分别为6株、3株,检出率分别为0.22%、0.11%,双色实时荧光PCR法检出率高于培养法,对比差异有统计学意义(P0.05)。结论双色实时荧光PCR法检测沙门菌和志贺菌的临床效果显著,具有较高的特异性、敏感度及准确率,值得临床推广与应用。     

实时荧光PCR快速同时检测从业人员沙门菌和志贺菌结果分析

目的 了解双重实时荧光PCR快速同时检测从业人员沙门菌和志贺菌的效果.方法 采集从业人员肛拭子样本,用双重实时荧光PCR法检测沙门菌和志贺菌,检出的疑似阳性样本按国标法进行培养鉴定.结果 采用双重实时荧光PCR反应体系共检测从业人员39 974人次,荧光PCR检测出沙门菌阳性41份,阳性率1.22‰,培养法检测出31份,阳性率为0.78‰,沙门菌荧光PCR检测法的灵敏度为100％,特异性为99.95％.荧光PCR检测出志贺菌10份,阳性率为0.25‰,培养法检测出3份,阳性率为0.08‰,志贺菌荧光PCR法的灵敏度为100％,特异性为99.98％.从样品处理到检测结果仅需要时间2h～ld.结论 双重实时荧光PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于从业人员体检的快速诊断和肠道传染病的初筛,为肠道传染病的分子流行病学调查提供新的检测手段.     

常州市沙门菌和志贺菌的菌型分布及药敏分析

目的了解常州地区沙门菌和志贺菌的菌型分布和药敏情况。方法对51株沙门菌和115株志贺菌的菌群分布及药敏进行分析。结果51株沙门菌,B群占37.25%,D群占31.37%,C群占17.64%,E群占11.76%;115株志贺菌中,B群占82.34%,D群占13.04%,B群中以F2型为主。药敏试验显示对氨苄西林、四环素、青霉素、复方磺胺甲恶唑耐药严重,对阿莫西林/克拉维酸、氨曲南、亚胺培南敏感。结论该地区沙门菌的菌群分布比较分散,志贺菌主要以F2型为主;药敏试验显示2种细菌对使用时间越久、使用范围越广、使用频率越高的抗生素,耐药现象越普遍。