菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜血流动力学和细胞因子表达的影响

目的：探讨菩人丹超微粉（简称PRD）对糖尿病大鼠视网膜血流动力学和细胞因子表达的影响,阐明PRD对糖尿病视网膜病变（DR）的保护作用。方法：36只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和PRD组,每组12只。糖尿病组和PRD组大鼠腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病模型。建模成功后,PRD组大鼠灌胃给予PRD （1.8 g·kg^-1）,连续3个月。采用多普勒超声检测大鼠视网膜中央动脉（CRA）血流动力学参数,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测视网膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF） mRNA表达水平,采用免疫组织化学染色法和Western blotting法检测视网膜组织中VEGF和bFGF蛋白表达水平。结果：与对照组比较,糖尿病组大鼠血糖、尿量、肝指数和肾指数明显升高（P<0.05）,视网膜CRA峰血流速度（PSV）、舒张期末流速（EDV）和平均血流速度（MV）明显降低（P<0.05）,阻力指数（RI）和搏动指数（PI）明显升高（P<0.05）,视网膜组织中VEGF和bFGF mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与糖尿病组比较,PRD组大鼠血糖、尿量、肝指数和肾指数明显降低（P<0.05）,视网膜CRA的PSV、EDV和MV明显升高（P<0.05）,RI和PI明显降低（P<0.05）,视网膜组织中VEGF和bFGF mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论：PRD可降低糖尿病大鼠血糖水平,增加视网膜组织血供,增加微循环血液灌注量,降低血管床灌注阻力,下调VEGF与bFGF表达,对糖尿病视网膜微血管损伤起保护作用。     

丁苯酞对急性缺血性脑卒中大鼠的脑保护作用及其机制

目的：探讨丁苯酞对急性缺血性脑卒中大鼠的脑保护作用,阐明其对急性缺血性脑卒中的治疗机制。方法：48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组（局灶性脑缺血大鼠模型）和丁苯酞组（局灶性脑缺血大鼠模型+丁苯酞治疗）,每组16只。对各组大鼠进行神经症状评分测定,对大鼠脑组织进行HE染色,采用氯化三苯基四氮唑（TTC）测定脑梗死面积百分率,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定大鼠脑组织中肝细胞生长因子（HGF）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、核转录因子κB抑制蛋白α（IκBα）和核转录因子κB（NF-κB）亚单位p65（NF-κB p65）蛋白及mRNA表达水平。结果：假手术组大鼠脑组织无梗死灶形成,无神经功能缺损症状;与模型组比较,丁苯酞组大鼠脑梗死面积百分率和神经功能评分明显降低（P<0.01）。假手术组大鼠脑组织细胞结构完整、分布均匀;模型组大鼠脑组织大部分细胞坏死,胞浆破裂,细胞核破裂、凝缩;丁苯酞组大鼠脑组织少量细胞肿胀和坏死。与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中HGF、VEGF、MMP-2、MMP-9和NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）,IκBα蛋白及mRNA表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,丁苯酞组大鼠脑组织中HGF、VEGF、MMP-2、MMP-9和NF-κB p65蛋白及mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）,IκBα蛋白和mRNA表达水平明显降低（P<0.01）。结论：丁苯酞可改善急性缺血性脑卒中大鼠的神经功能,减少脑梗死面积,其机制可能与丁苯酞升高脑组织HGF水平,并通过干扰NF-κB信号通路而促进脑血管形成有关。     

通心络对糖尿病大鼠心肌RAGE、NF-κB的影响

目的研究通心络对糖尿病大鼠心肌组织糖基化终末产物受体(RAGE)及核转录因子(NF-κB)表达的影响,探讨其对糖尿病大鼠心肌的保护作用及机制。方法雄性W istar大鼠60只,随机选出15只作为正常对照组(C组,n=15),剩余45只尾静脉注射0.1%链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,成模大鼠40只,随机分为糖尿病模型组(DM组,n=20)和糖尿病通心络治疗组(TXL组,n=20),通心络500m g/(kg.d)。喂养24周后,各组大鼠存活数为C组12只、DM组9只、TXL组13只,处死大鼠迅速心脏穿刺取血,测空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)及糖基化终末产物(AGEs)等指标。RT-PCR及W estern b lot法测定大鼠心肌组织中RAGE和NF-κB的表达。结果与C组相比,DM组大鼠血清中AGEs水平及心肌组织中RAGE和NF-κB的表达显著升高(P均<0.05)。经通心络治疗后,TXL组大鼠血清中AGEs的水平与DM组无统计学差异(P>0.05),但心肌组织中RAGE和NF-κB的表达较DM组显著降低(P均<0.05)。结论通心络可能通过抑制糖尿病大鼠心肌组织RAGE及NF-κB的表达而对糖尿病大鼠心肌组织起到一定的保护作用。     

晚期糖基化终末产物抑制大鼠外周血单个核细胞及成骨细胞增殖的作用机制

目的: 探索核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)以及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路在晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)干预大鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)及下颌成骨细胞(osteoblasts,OB)后的作用机制,为进一步研究糖尿病所致牙周组织炎症的临床治疗提供一定的实验基础和理论依据。方法: 采用经典的制备方法获得AGEs,体外分离培养大鼠OB、PBMCs。应用CCK-8活力测试检测AGEs不同浓度、不同时间对细胞活力的影响。采用Western blot及qRT-PCR检测NF-κB、PI3K/PKB以及MAPK信号通路相关基因的表达变化。结果: 体外成功分离并培养出PBMCs和OB,PBMCs和OB的细胞活力与AGEs的作用浓度、时间以及二者交互作用均显著相关,随着AGEs刺激浓度及时间的增加,PBMCs和OB活力显著降低(P<0.001)。AGEs刺激可显著增加PBMCs 中NF-κB的表达,并使肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量增加(P<0.01);抑制NF-κB通路后,TNF-α、IL-1β含量显著降低(P<0.01)。AGEs刺激OB后,随着作用时间的延长,NF-κB p65、JNK、p38磷酸化和非磷酸化蛋白显著升高(P<0.05),而IκB磷酸化蛋白表达显著升高的同时还伴有非磷酸化蛋白表达下降(P<0.01)。在mRNA水平,NF-κB p65、JNK、p38的表达显著升高,IκB mRNA表达显著下降(P<0.05);而Akt不论是磷酸化及非磷酸化蛋白表达,还是在mRNA水平的表达,差异均无统计学意义(P>0.05);加入MAPK信号通路抑制剂后,NF-κB p65、p38、JNK磷酸化和非磷酸化蛋白表达较只加了AGEs组均显著降低,IκB磷酸化蛋白显著降低,非磷酸化蛋白显著升高(P<0.05);qRT-PCR结果发现,与只加了AGEs组相比,加入JNK通路阻断剂后IκB表达显著升高(P<0.05),NF-κB p65、p38、JNK的表达呈下降趋势,但差异不具有统计学意义(P>0.05);与只加了AGEs组相比,加入p38信号通路阻断剂后NF-κB p65、p38、JNK的表达显著降低(P<0.05),IκB表达显著升高(P<0.05);而Akt改变在蛋白水平和mRNA水平依然未见统计学意义(P>0.05)。结论: AGEs能够抑制PBMCs和OB的增殖,NF-κB和MAPK信号通路很有可能参与调控过程,但与PI3K/PKB信号通路无关。     

大黄素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的：探讨大黄素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用,阐明其作用机制。方法：将60只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（给予生理盐水）,模型组（给予生理盐水,建模）,阳性对照组（给予5mg·kg^-1地塞米松,建模）,低、中和高剂量大黄素组（给予10、20和40 mg·kg^-1大黄素,建模）（n=10）。采用大脑中动脉阻断法（MCAO）建立局灶性脑缺血大鼠模型。检测各组大鼠行为学评分,采用TTC染色法检测各组大鼠脑梗死体积百分比,ELISA法检测各组大鼠缺血侧海马组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测各组大鼠缺血侧海马组织中核转录因子κB （NF-κB） p65和核转录因子κB抑制蛋白α（IκBα）蛋白表达水平。结果：假手术组大鼠未发现神经功能缺损症状和脑梗死;与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显升高（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与模型组比较,阳性对照组,中和高剂量大黄素组大鼠行为学评分降低（P<0.05）,脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）,缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与低剂量大黄素组比较,中和高剂量大黄素组大鼠行为学评分降低（P<0.05）、脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）,缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：大黄素对大鼠局灶性脑缺血损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路和降低炎症因子分泌有关。     

AGEs对老年大鼠内皮细胞NF-κB活性与Fn mRNA表达的影响

目的：探讨糖基化终末产物（AGEs）对老年大鼠内皮细胞中NF-κB活性及纤维结合蛋白fibronectin（Fn）mRNA表达的影响。方法：取24月龄的SD大鼠主动脉内皮细胞进行原代培养．实验分为3组。A组葡萄糖（5mmol／L）的对照组;B组AGEs（25mg／L,48h）处理组;C组AGEs（50mg／L．48h）处理组。采用荧光免疫化学法检测NF-κB活性和逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测Fn mRNA的表达。结果：与对照组相比,AGEs呈浓度依赖性地诱导NF-κB的激活（P〈0．05）和上调Fn mRNA表达（P〈0．05）。结论：AGEs呈浓度依赖性地诱导内皮细胞NF-κB的活化、Fn的基因表达上调,这可能与糖尿病慢性血管并发症的发生发展有关。     

孟鲁司特钠通过抑制TLR4/NF-κB信号通路影响哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡

目的：探讨孟鲁司特钠（Mon）对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡及炎症因子分泌的影响,阐明哮喘大鼠气道重塑及炎症反应的分子机制。方法：采用卵清蛋白致敏和激发构建急性哮喘大鼠模型,原代培养大鼠气道平滑肌细胞,取第5代细胞用于实验。实验分为对照组（正常气道平滑肌细胞）、模型组（哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞）和治疗组（哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞+Mon干预）。采用噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测各组细胞上清液中白细胞介素6（IL-6）和转化生长因子β1（TGF-β1）水平,Western blotting法检测各组细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Toll样受体4（TLR4）和核因子κB（NF-κB）p65蛋白表达水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组细胞中TLR4和NF-κB p65 mRNA表达水平。结果：与对照组比较,模型组和治疗组细胞活性明显升高（P<0.05）,细胞凋亡率明显降低（P<0.05）,IL-6和TGF-β1水平升高（P<0.05）,PCNA、CyclinD1、Bcl-2、TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平及TLR4和NF-κB p65 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）,而Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,治疗组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）,细胞凋亡率明显升高（P<0.05）,IL-6和TGF-β1水平降低（P<0.05）,PCNA、CyclinD1、Bcl-2、TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平及TLR4和NF-κB p65 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）,而Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：Mon可抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖,促进细胞凋亡,减轻哮喘气道炎症反应,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。     

AGEs-RAGE/NF-κB途径对慢性间歇低氧小鼠脏器的影响及大株红景天对其脏器的保护作用

目的 通过建立慢性间歇低氧小鼠模型探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs) -糖基化终末产物受体(advanced glycosylation end product-specific receptor,RAGE) /核因子-κB（NF-κB）途径与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome,OSAS）脏器损伤的关系以及大株红景天注射液对其脏器的保护作用。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测10只健康对照组小鼠（对照组）、11只单纯慢性间歇低氧小鼠（A组）、11只慢性间歇低氧后再复氧小鼠（B组）、11只慢性间歇低氧后使用大株红景天注射液腹腔注射的小鼠（C组）血清中AGEs、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平,用Western Blotting方法检测小鼠大脑及心脏中RAGE及NF-κB蛋白的表达情况,并观察经HE染色后组织形态学改变情况。结果ELISA结果：与对照组相比,A组小鼠血清中ACEs、IL-6、TNF-α水平显著升高（P＜0.05）;与A组对比,B组及C组小鼠血清AGEs水平有下降趋势（P＞0.05）;与A组相比,C组血清IL-6水平有所降低（P＜0.05）。而B组及C组之间差异无统计学意义(P>0.05);而在血清TNF-α水平方面,B组及C组均较A组下降（P＜0.05);而B组及C组两组间差异无统计学意义（P>0.05）。RAGE免疫组化结果: 心脏组织：对照组小鼠RAGE及NF-κB的表达最弱;A组小鼠的NF-κB的表达在各组中表达最强,其RAGE蛋白表达比对照组及B组强,而与C组相仿;C组小鼠RAGE及NF-κB较对照组及B组表达增多。大脑组织：A组的RAGE及NF-κB蛋白在各组小鼠的大脑组织中表达最强;对照组小鼠RAGE表达较少,NF-κB蛋白在各组中表达最弱;与A组相比,C组的RAGE表达稍有减少,而NF-κB的表达则较其有更为明显的下降。HE染色结果：对照组小鼠心肌组织结构清晰完整、界限清楚、排列紧密;而A组小鼠心肌组织排列紊乱,结构、纹理不清,部分肌细胞核固缩深染。B组小鼠心肌结构较A组小鼠清晰,核固缩深染现象亦较其减少,而C组小鼠心肌结构较清楚,排列亦较紧密。结论OSAS可引起多器官、组织如心脏、大脑组织的损害。OSAS可激活AGEs-RAGE/NF-κB通路,调节炎症细胞释放IL-6、TNF-α等炎症因子,或是OSAS易合并多脏器损害的原因之一。大株红景天注射液有一定程度的抗炎作用,可用于防治OSAS多脏器的损害,但其作用机制与AGEs-RAGE/NF-κB信号通路的激活无明显关系。     

白屈菜赤碱对大鼠肺组织的长期毒性作用及其对肺组织中 NF-κB表达的影响

目的：观察白屈菜赤碱对大鼠肺组织形态的长期毒性作用及其对大鼠肺组织中核转录因子κB （NF-κB）表达的影响,探讨其引起大鼠肺损伤的相关机制。方法：将120只Wistar大鼠随机分为对照组（给予生理盐水）和低、中及高剂量白屈菜赤碱组（给予3.7、5.6和8.4 mg·kg^-1白屈菜赤碱）,每组30只。观察各组大鼠一般情况;HE染色观察各组大鼠肺组织形态表现;酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠血清白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肺组织中NF-κB和细胞间黏附分子1（ICAM-1） mRNA表达水平;Western blotting法检测各组大鼠肺组织中NF-κB和ICAM-1蛋白表达水平。结果：高剂量白屈菜赤碱组大鼠累积死亡率最高,其次为中和低剂量白屈菜赤碱组。各剂量白屈菜赤碱组大鼠体质量和摄食量均明显低于对照组（P<0.05）,高剂量白屈菜赤碱组大鼠体质量和摄食量低于低和中剂量白屈菜赤碱组（P<0.05）。白屈菜赤碱能引起大鼠肺充血和血性腹水。HE染色,随着白屈菜赤碱剂量的增加,各剂量白屈莱赤碱组大鼠肺组织损伤加重。与对照组比较,各剂量白屈菜赤碱组大鼠血清IL-6、IL-8和TNF-α水平升高（P<0.05）;与低和中剂量白屈菜赤碱组比较,高剂量白屈菜赤碱组大鼠血清IL-6、IL-8和TNF-α水平升高（P<0.05）。与对照组比较,各剂量白屈菜赤碱组大鼠肺组织中NF-κB和ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）,并呈剂量依赖性;与低和中剂量白屈菜赤碱组比较,高剂量白屈菜赤碱组大鼠肺组织中NF-κB和ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：白屈菜赤碱以剂量依赖的方式对大鼠肺组织产生长期毒性作用,中和高剂量白屈菜赤碱可能通过NF-κB活化和产生炎性细胞因子加重中毒性肺损伤。     

慢性氟中毒大鼠大脑皮质中AGEs和RAGE的改变

目的：研究慢性氟中毒大鼠大脑皮质中晚期糖基化终末产物（AGEs）及其受体（RAGE）表达,探讨氟中毒神经损害的发病机制。方法：60只SD大鼠按体质量随机分为对照组、小剂量染氟组和大剂量染氟组,采用酶联免疫方法、蛋白印迹方法和实时荧光定量PCR方法分别检测AGEs含量、RAGE的蛋白和mRNA表达水平。结果：染氟大鼠大脑皮质中AGEs含量和RAGE蛋白表达水平比对照组明显增高（P〈0．05）,染氟大鼠大脑皮质中RAGE的mRNA表达较对照组明显升高（P〈0．05）。结论：慢性氟中毒引起大鼠大脑皮质中AGEs含量和RAGE表达明显升高,这些改变可能与氟中毒性神经损伤发生机制有关。     

葡萄籽原花青素提取物对糖尿病牙周炎大鼠牙周组织炎症的缓解作用及其对牙周组织中TLR4和NF-κB表达水平的影响

目的 探讨葡萄籽原花青素提取物（GSPE）对糖尿病牙周炎大鼠牙周炎症的改善作用,并阐明其作用机制。 方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病牙周炎模型组（模型组）、低剂量（100 mg·kg^－1）GSPE组和高剂量（200 mg·kg^－1）GSPE组,每组10只,除对照组外,其他各组大鼠采用牙周结扎法联合一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病牙周炎模型。模型建立成功后,低和高剂量GSPE组大鼠分别按100和200 mg·kg^－1GSPE灌胃给药,对照组和模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,每天1次,连续8周。观察大鼠一般情况和血糖水平变化,采用HE染色观察各组大鼠牙周组织病理形态表现,测量各组大鼠牙槽骨吸收量,采用相关试剂盒检测各组大鼠牙周组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平, Western blotting法检测各组大鼠牙周组织中Toll样受体4（TLR4）和核因子κB（NF-κB）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,模型组大鼠出现明显“三多一少”症状,血糖水平明显升高（P<0.05）,牙周结缔组织中炎性细胞浸润,牙周组织损伤,牙槽骨吸收量明显增加（P<0.05）,牙周组织中SOD和CAT活性明显降低（P<0.05）,ROS和MDA水平明显升高（P<0.05）,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高（P<0.05）,牙周组织中TLR4和NF-κB蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,低和高剂量GSPE组大鼠一般情况均明显好转,血糖水平明显降低（P<0.05）,牙周组织损伤明显减轻,牙槽骨吸收量减少（P<0.05）,牙周组织中SOD和CAT活性明显升高（P<0.05）,ROS和MDA水平明显降低（P<0.05）,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低（P<0.05）,牙周组织中TLR4和NF-κB 蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与低剂量GSPE组比较,高剂量GSPE组大鼠牙周组织中SOD和CAT活性明显升高（P<0.05）,ROS和MDA水平明显降低（P<0.05）,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低（P<0.05）,牙周组织中TLR4和NF-κB 蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 GSPE可改善糖尿病牙周炎大鼠牙周组织炎症,其作用机制与调节牙周组织中TLR4/NF-κB信号通路有关。     

姜黄素对睡眠剥夺小鼠认知功能的改善作用及其机制

目的：研究姜黄素对睡眠剥夺小鼠认知功能和海马组织中Toll样受体4/核转录因子κB （TLR4/NF-κB）通路的影响,探讨姜黄素治疗睡眠剥夺的机制。方法：将100只小鼠随机分为对照组,模型组,低、中和高剂量姜黄素组,每组20只。除对照组外,其他各组小鼠采用改良多平台水环境睡眠剥夺法建立睡眠剥夺模型;建模后,低、中和高剂量姜黄素组小鼠分别腹腔注射5、10及20 mg·kg^-1姜黄素,每天1次,共3 d。Morris水迷宫实验测定各组小鼠学习记忆能力,旷场实验测定小鼠垂直得分和水平得分,ELISA法检测各组小鼠海马组织中白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测各组小鼠海马组织中TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平,RT-PCR法检测各组小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB mRNA表达水平。结果：与模型组比较,各剂量姜黄素组小鼠逃避潜伏期缩短（P<0.05）,停留原平台象限时间延长（P<0.05）,穿越原平台次数增加（P<0.05）,旷场实验垂直得分和水平得分降低（P<0.05）,小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB P65蛋白表达水平均降低（P<0.05）,小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TLR4和NF-κB mRNA表达水平降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。结论：姜黄素可能通过抑制TLR4/NF-κB通路改善睡眠剥夺小鼠的认知功能。     

分泌型晚期糖基化终产物受体对妊娠糖尿病胚胎保护的实验研究

【摘要】目的 研究分泌型晚期糖基化终产物受体（sRAGE）在实验动物罹患妊娠糖尿病（GDM）时的表达差异及对子鼠发育的影响。方法 采用给SD孕鼠空腹一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）25mg/kg的方法建立宫内高血糖孕鼠模型。STZ注射后对小鼠随机分为实验组和对照组,每间隔24小时,实验组孕鼠行尾静脉注射重组sRAGE蛋白（5 mg/kg, 0.2 ml PBS）即为sRAGE组,对照组注射相同剂量的白蛋白溶液。分别于第3、13、19天检测孕鼠血糖、血清AGEs及脑、心脏组织中的RAGE蛋白水平。最后一日剖宫取胎,剥离胎盘,检测胎盘RAGE、NOX2、MCP-1、VCAM-1的mRNA表达水平,探讨血清中AGEs、RAGE表达水平与胚胎发育的关系。结果 实验组孕鼠血清中血糖和AGEs的浓度显著高于对照组(P＜0.05),相关性分析显示血糖与血清中AGEs水平呈显著正相关(r=0.693,P＜0.05);与正常对照组相比,实验组孕鼠的胎盘、脑及心脏组织中活性氧产生,炎症相关基因的mRNA和RAGE蛋白水平显著升高,而sRAGE处理可以部分降低这些活性氧产生、炎症相关基因的表达和RAGE的表达。对照组孕鼠胎盘、脑以及心脏组织中的RAGE蛋白表达极弱,实验组在3种组织中的RAGE表达则明显增强。在sRAGE注射干预后,RAGE蛋白表达与实验组相比显著降低,仍高于对照组。结论sRAGE静脉注射可显著降低孕鼠子代组织中NF-κB的活性,通过调控相关细胞因子发挥对胚胎的保护作用。     

毛樱桃总黄酮对RAW264.7细胞中炎症因子水平的影响及其机制

目的：探讨毛樱桃总黄酮（PTTTF）对脂多糖（LPS）诱导的细胞炎症模型中炎症因子的影响,阐明其作用机制。方法：通过LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7和人中性粒细胞（PMN）建立细胞炎症模型,将细胞分为对照组、模型组、地塞米松（DXM）组和不同剂量（0.4、4.0和40.0 mg·L^-1）PTTTF组。采用RT-PCR法检测RAW264.7细胞中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、诱导性一氧化氮合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）mRNA表达水平;采用Western blotting法检测RAW264.7细胞中核转录因子κB（NF-κB）及信号通路关键分子细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、C-Jun氨基末端激酶1/2（JNK）和磷酸化JNK（p-JNK）蛋白表达水平;采用流式细胞术检测RAW264.7细胞S期细胞百分率和PMN细胞凋亡率。结果：与对照组比较,模型组RAW264.7细胞中IL-1β、IL-6、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,S期细胞百分率明显升高（P<0.05）,PMN细胞凋亡百分率明显降低（P<0.05）。与模型组比较,4.0及40.0 mg·L^-1PTTTF组和DXM组RAW264.7细胞中IL-1β、iNOS、TNF-α和HMGB1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,S期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01）,PMN细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：PTTTF能够下调LPS诱导的细胞炎症模型中炎症因子表达水平,该作用可能与其降低S期细胞百分率,促进其凋亡,并下调NF-κB、ERK1/2和p-JNK蛋白表达有关。     

沉默信息调节因子1对慢性牙周炎模型大鼠肾损伤的影响

目的 探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）在结扎诱导的慢性牙周炎模型大鼠肾损伤中的变化,阐明SIRT1对慢性牙周炎模型大鼠肾损伤的影响。 方法 20只大鼠随机分为对照组和牙周炎组,每组10只。采用结扎双侧上颌第一磨牙颈部建立大鼠牙周炎模型。肉眼观察2组大鼠牙龈色形质,检测并记录牙龈出血指数（BI）、牙周探诊深度（PD）和牙齿松动度（TM）,苏木素-伊红（HE）染色观察2组大鼠牙周组织病理形态表现,微型计算机断层成像（Micro-CT）评价2组大鼠牙槽骨吸收情况,HE和PAS染色观察2组大鼠肾组织病理形态表现,生化试剂盒检测2组大鼠肾脏功能指标和氧化应激水平,Western blotting法检测2组大鼠肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和核因子κB（NF-κB） p65蛋白表达水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和免疫组织化学法检测2组大鼠肾组织中SIRT1和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）mRNA及蛋白表达水平。 结果 牙周组织临床指标,与对照组比较,牙周炎组大鼠牙龈肿胀,质地松软,可探及深牙周袋,探诊易出血,牙齿出现不同程度松动。牙周组织HE染色和Micro-CT观察,与对照组比较,牙周炎组大鼠出现附着丧失,牙槽骨吸收。肾组织HE和PAS染色观察,与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中肾小囊腔扩张,肾小球基底膜轻度增厚,肾小管上皮细胞脱落,刷状缘破坏。生化检测,2组大鼠肾脏功能指标比较差异无统计学意义（P>0.05）;与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中总抗氧化状态（TAS）、锰-超氧化物歧化酶（Mn-SOD）和谷胱甘肽（GSH）水平降低（P<0.01）,丙二醛（MDA）水平升高（P<0.01）。Western blotting法检测,与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中TNF-α和NF-κB p65蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。RT-qPCR和免疫组织化学法检测,与对照组比较,牙周炎组大鼠肾组织中SIRT1和PGC-1α mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 慢性牙周炎模型大鼠肾组织中SIRT1表达下调,氧化应激水平升高,加重了慢性牙周炎大鼠肾组织损伤。     

LncRNA-ATB通过调节miR-200c表达对肾移植大鼠急性排斥反应的影响

目的：探讨被转化生长因子β活化的长链非编码RNA（LncRNA-ATB）调节微小RNA（miRNA）-200c对肾移植大鼠移植后急性排斥反应（AR）和受体组织炎症反应的影响,分析肾移植AR潜在的分子机制,为临床诊断和治疗AR提供理论参考。方法：30只SD大鼠为供体,30只Wistar大鼠为受体,通过手术将供体肾脏移植到受体大鼠体内,建立肾移植AR模型,将建模成功大鼠（27只）随机分为模型组、LncRNA-ATB短发夹RNA（shRNA）组和LncRNA-ATB-NC组,每组9只。选取10只Wistar大鼠为假手术组。术后2 h,LncRNA-ATB-shRNA组和LncRNA-ATB-NC组大鼠按每只200 μL分别尾静脉注射含LncRNA-ATB-shRNA和LncRNA-ATB-NC的psiCHECK2基因重组质粒脂质体复合物,假手术组和模型组大鼠按每只200 μL尾静脉注射Opti-MEM培养基。干预7 d后,RT-PCR法检测各组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平,全自动生化分析仪检测各组大鼠血肌酐（Scr）和血尿素氮（BUN）水平,酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,苏木精-伊红（HE）染色法观察各组大鼠肾组织病理形态表现并对AR进行诊断分级和半定量评分,RT-PCR法和Western blotting法检测各组大鼠肾组织中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）和核转录因子κB（NF-κB）mRNA及蛋白表达水平。结果：HE染色,与假手术组比较,模型组大鼠肾脏出现AR,表现为炎性细胞浸润、动脉炎症、间质细胞水肿和皮质出血等,LncRNA-ATB-NC组与模型组大鼠肾脏组织病理形态表现相似,LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织病理学形态表现较模型组和LncRNA-ATB-NC组均减轻。与假手术组比较,模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均升高（P<0.05）,外周血中miR-200c表达水平均降低（P<0.05）;与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较,LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均降低（P<0.05）,外周血中miR-200c表达水平升高（P<0.05）;模型组与LncRNA-ATB-NC组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：沉默LncRNA-ATB可以减轻肾移植大鼠移植后AR,抑制受体组织发生炎症反应,其机制可能是通过上调miR-200c,抑制TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达而发挥炎症抑制作用。     

胰岛素对糖尿病大鼠视网膜VEGF和Ang-2表达的影响

目的观察胰岛素治疗对糖尿病大鼠视网膜血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）和血管生成素-2（angiopoietin-2, Ang-2）表达的影响,探讨胰岛素在糖尿病视网膜病变发生发展中的作用。方法链尿佐菌素（streptozotocin, STZ）诱导糖尿病大鼠动物模型,成模后经胰岛素治疗控制血糖,随机分为糖尿病血糖严格控制组、糖尿病血糖非严格控制组、糖尿病组和正常对照组。应用免疫荧光组织化学染色法检测大鼠视网膜组织VEGF、Ang-2的表达,用计算机-图像分析软件对VEGF、Ang-2免疫荧光强度进行半定量分析。结果与正常对照组比较,糖尿病组大鼠视网膜VEGF、Ang-2平均荧光强度分别增加了2.38倍和2.41倍（P〈0.05）。与糖尿病组比较,血糖严格控制组大鼠视网膜VEGF、Ang-2的表达分别下降了1.47倍和1.51倍（P〈0.05）,而血糖非严格控制组VEGF、Ang-2的表达无明显下降（P〉0.05）。结论胰岛素治疗严格控制血糖可降低糖尿病大鼠视网膜VEGF、Ang-2的表达,对糖尿病视网膜病变的发生发展有保护作用。     

荔枝核皂苷对糖调节受损大鼠胰腺组织氧化应激的改善作用及其机制

目的：研究荔枝核皂苷（SL）对糖调节受损（IGR）大鼠氧化应激及核转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶1（HO-1）信号通路的作用,阐明其相关机制。方法：采用高脂饲料喂养制备IGR大鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍组（0.20 g·kg^-1）、低剂量SL组（0.05 g·kg^-1）、中剂量SL组（0.10 g·kg^-1）和高剂量SL组（0.20 g·kg^-1）,同时设正常对照组,每组12只,连续给药6周。观察SL对实验大鼠糖脂代谢的影响,采用实时荧光定量（Real-time PCR）法检测大鼠胰腺组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和HO-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测大鼠胰腺组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达水平,采用SOD和MDA试剂盒检测大鼠胰腺组织中SOD活性和MDA水平。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖（FBG）和血脂水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平降低（P<0.01）,MDA水平和mRNA表达水平升高（P<0.01）,胞核和胞质中Nrf2蛋白表达水平和核转位率升高（P<0.01）,HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较,二甲双胍组和中、高剂量SL组大鼠FBG和血清甘油三酯（TG）水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平升高（P<0.05或P<0.01）,MDA水平和mRNA表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,胞质中Nrf2表达水平降低（P<0.05或P<0.01）,胞核中Nrf2表达水平和核转位率升高（P<0.05或P<0.01）,HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论：SL具有改善糖脂代谢和增强抗氧化应激作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路、促进Nrf2核转位及增强下游抗氧化基因HO-1表达有关。     

基于Nrf2/RAGE/NF-κB信号通路探究丙泊酚对帕金森病大鼠认知障碍的影响

目的 探讨丙泊酚对帕金森病（PD）大鼠认知障碍及核因子E2相关因子2（Nrf2）通路与糖基化终末产物受体/核因子-κB（RAGE/NF-κB）信号通路的影响。方法 腹腔注射MPTP制备PD大鼠模型。按照随机数字表法将60只SPF级雄性SD大鼠分为对照组（Control组）、模型组（PD组）、丙泊酚低、高剂量治疗组（Propofol-L组、Propofol-H组,分别用25、50 mg/kg丙泊酚腹腔注射）。Morris水迷宫实验与Y迷宫实验检测大鼠认知功能,HE染色观察脑黑质区病理变化,试剂盒检测脑黑质区氧化应激因子(SOD、CAT、MDA)、炎症因子水平（TNF-α、IL-1β）,免疫荧光染色检测脑黑质区酪氨酸羟化酶（TH）,Western blot检测RAGE、p-NF-κB p65、Nrf2、HO-1蛋白表达。结果 与Control组比较,PD组大鼠逃避潜伏期增加,目标象限滞留时间百分比、穿过目标象限的次数、自发交替率明显减少（P<0.05）,脑组织病理改变,脑黑质区MDA活性及TNF-α、IL-1β水平、RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达水平显著增加,CAT、SOD活性及TH、Nrf2、HO-1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;与PD组比较,Propofol-L组与Propofol-H组大鼠逃避潜伏期减少,目标象限滞留时间百分比、穿过目标象限的次数、自发交替率明显增加（P<0.05）,脑组织病变减轻,脑黑质区MDA活性及TNF-α、IL-1β水平、RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达显著降低,CAT、SOD活性及TH、Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高,且呈剂量依赖性（P<0.05）。结论 丙泊酚可改善PD大鼠认知障碍,其机制可能与激活Nrf2信号通路,抑制RAGE/NF-κB信号通路有关     

丹参多酚酸对心房颤动大鼠心肌组织中VCAM-1和ICAM-1水平及ERK1/2-NF-κB信号通路的影响

目的：研究丹参多酚酸对心房颤动（房颤）大鼠心肌组织中血管细胞黏附分子1（VCAM-1）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）水平及细胞外信号调节酶1/2-核转录因子-κB（ERK1/2-NF-κB）信号通路的影响,探讨丹参多酚酸防治房颤的可能机制。方法：48只SD大鼠随机分为对照组、房颤组和丹参多酚酸组,每组16只。舌下静脉注射氯化钙-乙酰胆碱混合液建立房颤大鼠模型。丹参多酚酸组大鼠用丹参多酚酸（4 mg·kg^-1·d^-1）灌胃,对照组和房颤组大鼠用等量生理盐水灌胃,每天1次,共4周。采用苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠心肌组织病理形态表现,Masson染色观察心肌纤维化情况,免疫组织化学染色检测各组大鼠心肌组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中VCAM-1、ICAM-1、ERK1/2、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）、NF-κB和磷酸化核转录因子κB（p-NF-κB）蛋白表达水平。结果：HE染色,对照组大鼠心肌细胞未见明显异常;房颤组大鼠心肌组织间质增多,可见炎性细胞浸润;与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌组织间质稍多,炎性细胞浸润不明显。Masson染色,对照组大鼠心肌间质胶原纤维正常;房颤组大鼠心肌间质胶原纤维明显增多;与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌间质胶原纤维较房颤组明显减少。与对照组比较,房颤组和丹参多酚酸组大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9、VCAM-1、ICAM-1、p-ERK1/2和p-NF-κB蛋白表达水平升高（P<0.05）;与房颤组比较,丹参多酚酸组大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9、VCAM-1、ICAM-1、p-ERK1/2和p-NF-κB蛋白表达水平降低（P<0.05）。房颤组大鼠心肌组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与VCAM-1（r=0.435,P<0.01;r=0.512,P<0.01）和ICAM-1（r=0.486,P<0.01;r=0.579,P<0.01）蛋白表达水平呈正相关关系。结论：丹参多酚酸可通过抑制房颤大鼠心房组织ERK1/2-NF-κB信号通路激活,降低VCAM-1和ICAM-1水平,抑制心肌纤维化,从而发挥对房颤的治疗作用。