Th17细胞与Treg细胞比例失衡在慢性炎症性疾病中研究进展

慢性炎症性疾病涉及许多疾病的发展过程,如变应性鼻炎、支气管哮喘、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,R A)、炎症性肠病(inflammator y bowel disease,IBD)等。研究发现,Th17和Treg细胞通过其自身及产生的相应细胞因子,在慢性炎症性疾病发生发展过程中起着重要作用,而Th17和调节性T细胞(T Regulator Cell,Treg细胞)的分化共用了TGF-β这个细胞因子,提示他们在分化过程中有某种关联。本文旨在阐述Th17细胞与Treg细胞比例失衡在相关慢性炎症性疾病的发生发展中所起的关键作用。     

特异性细胞因子对T辅助17细胞和T调节性细胞表达的调节作用

目的 探讨多种细胞因子包括转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素2(IL-2)对CD+4T淋巴细胞的分化调节作用.方法 将人外周血T淋巴细胞、鼠脾脏T淋巴细胞在不同的刺激条件下进行体外培养,采用流式细胞仪分析活化T淋巴细胞中CD+4IL-17+T辅助17细胞(Th17细胞)、C+4IL-17+T淋巴细胞、CD+4CD+25FOXP+3T调节性细胞(Treg细胞)的表达情况.结果 鼠脾脏T淋巴细胞培养液中有TGF-β存在时可促进Treg细胞、rh17细胞和CD+8;IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(7.8±2.2)%、(12.6±3.1)%、(10.1±2.6)%.无细胞因子培养的同类细胞为实验对照组,表达水平分别为(4.8±0.6)%、(1.7±0.5)%、(1.0±0.4)%,差异均有统计学意义(q=4.09、8.80、9.61,P<0.05或P<0.01).TGF-β与IL-6细胞因子共同存在时可促进Th17和CD+8IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(17.8±5.3)%、(15.0±4.2)%,而分化受抑制的Treg细胞的表达水平为(4.I±1.2)%,与TGF-β组同类细胞表达水平比较差异均有统计学意义(q=5.03、5.17、5.04,P均<0.01).在TGF-β刺激的T淋巴细胞中加入IL-2细胞因子可使Th17细胞、CD+8;IL-17+T淋巴细胞表达减少,同时伴有Treg细胞表达量的增加;在加入抗IL-2后结果相反,即Th17细胞、CD+8IL-17+T淋巴细胞表达水平增加,Treg细胞表达水平减少.人外周血T淋巴细胞上Th17、CD+8IL-17+、Treg细胞表达水平变化趋势与鼠脾脏淋巴细胞相似.结论 不同细胞因子对于调控Th17细胞和Treg细胞之间的平衡起着十分重要的作用.     

特应性皮炎患者外周血Th17细胞比例及不同细胞因子微环境对其分化的影响

目的探讨Th17细胞在特应性皮炎(AD)发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测39例AD患者外周血单一核细胞(PBMC)中Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR(real-timeRT-PCR)检测PB-MC中Th17细胞相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-23和TGF-βmRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中上述细胞因子的含量;同时以34例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。分离AD患者PBMC体外培养,加入不同细胞因子微环境,观察其对Th17细胞数量及特异性转录因子RORγt表达的影响。结果 AD患者外周血Th17细胞比例(CD4+IL17+T细胞/CD4+T细胞%)显著高于正常对照者(P<0.01)。PBMC中IL-1β、IL-6、IL-17和IL-23mRNA表达水平及血清中相应细胞因子含量均显著高于正常对照者(P<0.01),PBMC中TGF-βmRNA表达水平及其血清中含量与正常对照者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AD患者PBMC在不同细胞因子微环境中培养,IL-1β+IL-23+IL-6处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达最高,TGF-β处理组表达最低,与其余处理组比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达水平低于IL-1β+IL-23+IL-6处理组,高于TGF-β处理组和未处理组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 AD患者外周血Th17细胞比例及相应促分化细胞因子表达水平升高,IL-1β+IL-23+IL-6对Th17细胞具有明显的促分化作用,Th17细胞在AD发病机制中发挥作用。     

免疫调节性细胞及其效应分子在CITP免疫功能紊乱中的作用研究

目的探讨调节性T细胞(Treg)、调节性B细胞(Breg)、辅助性T细胞17(Th17)、辅助性T细胞22(Th22)及其相关细胞因子的变化在慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者免疫功能紊乱中的作用。方法选择CITP患者40例、健康者40例,分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测Treg、Breg、Th17、Th22细胞数量与比例,采用酶联免疫吸附法检测血浆中白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素(IL-22)水平,计算IL-17/IL-10、IL-22/TGF-β1比值。比较CITP患者、健康者各指标检测结果。结果 CITP患者Th17、Th22细胞及IL-17、IL-22水平高于健康者,Treg、Breg细胞及IL-10、TGF-β1水平低于健康者(P0.05)。CITP患者Th17/Treg、Th22/Breg、IL-17/IL-10、IL-22/TGF-β1比值水平均高于健康者(P0.05)。结论 Th17、Treg、Th22、Breg细胞水平异常及IL-17/IL-10、IL-22/TGF-β1比值变化可能与CITP患者免疫功能紊乱密切相关。     

妊娠糖尿病患者Th17/Treg细胞相关因子的检测及临床意义

目的 检测妊娠糖尿病(GDM)患者外周血Th17/Treg细胞相关因子的表达水平,探讨Th17/Treg在GDM炎症机制中的作用.方法 选取GDM患者(GDM组)45例,妊娠糖耐量正常者(非GDM组)40例,健康对照者(NGT组)50例,采用ELISA法分别检测Th17细胞相关因子IL-17、IL-6、IL-1β及Treg细胞相关因子TGF-β、IL-10的表达水平,并分析上述细胞因子与GDM患者空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、C反应蛋白(CRP)的相关性.结果 与NGT组比较,非GDM组、GDM组IL-17、IL-6、IL-1β水平明显上升,差异有统计学意义(P<0.05),且GDM组较非GDM组上升更明显(P<0.05); GDM组TGF-β、IL-10水平明显低于NGT组和非GDM组,差异有统计学意义(P<0.05),而后两组间无明显差异(P>0.05);相关性分析显示,CRP与IL-17、IL-1β均呈正相关,与TGF-β呈负相关.结论 GDM患者中存在Th17细胞相关因子的高表达和Treg细胞相关因子的表达下调,提示Th17/Treg可能以炎症与抗炎症失衡的方式参与GDM的炎症发病机制.     

急性荨麻疹患者外周血Th17细胞数量和功能的变化

目的分析急性荨麻疹患者外周血辅助性T细胞17(Th17)细胞数量和功能的变化,探讨Th17细胞在急性荨麻疹免疫致病机制中的作用。方法收集50例急性荨麻疹患者和50例健康体检者外周血标本,流式细胞术分析其外周血Th17细胞数量,实时荧光定量PCR(qPCR)法分析其转录因子维甲酸相关孤儿素受体γt(RORγt)mRNA水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法分析其外周血Th17细胞相关细胞因子转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A、IL-17F和IL-23水平。结果急性荨麻疹患者Th17细胞数量(t=36.634 1,P0.05)和RORγt mRNA水平(t=23.840 1,P0.05)明显高于对照组,Th17细胞相关细胞因子TGF-β(t=15.521 1,P0.05)、IL-6(t=7.247 3,P0.05)、IL-17A(t=15.415 3,P0.05)和IL-17F(t=13.032 1,P0.05)水平均明显高于对照组。结论 Th17细胞可能通过分泌IL-17A、IL-17F和IL-6等炎症因子在急性荨麻疹发病过程中发挥作用。     

三种不同方法体外诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化与增殖的效率

背景:研究认为Th17细胞参与了许多炎症性疾病的发生,但其体外诱导分化效率尚不明确.目的:比较采用3种不同方法在体外诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化与增殖的效率.方法:分别采取以下3种方法体外诱导Th17细胞:①给予CD3及CD28抗体刺激.并在培养体系中加入白细胞介素6及转化生长因子β.培养3d.②在方法①的基础上加入白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α,培养3d.③在方法②的基础上第3天洗去细胞因子,培养2d;再次给予CD3及CD28抗体刺激,并在培养体系中加入白细胞介素23,培养3d.结果与结论:3种方法培养后CD4+T细胞中Th17细胞的比例分别为(8.5±2.8)%,(26.9±4.3)%,(44.3±5.5)%,三组之间差异有显著性意义(P<0.01).提示在培养体系中加入白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及白细胞介素23,更有利于增加CD4+T细胞向Th17细胞分化的比例.     

急性髓系白血病患者外周血Th22细胞水平的变化

研究已经证实,急性髓系白血病(AML)患者免疫功能低下,体内树突细胞(DC)、浆细胞样DC(pDC)、Th17细胞等数量减少、功能减低,而调节性T细胞(Treg)数量增加、功能增强[1-2].Th22型细胞是一种最新发现的独立的辅助性T细胞亚群,是体内分泌IL-22的主要细胞,具有促进机体固有免疫和适应性免疫应答,使肿瘤细胞的周期停滞在G2/M期,降低细胞增殖率的作用[3-4].在DC、pDC刺激的条件下,IL-6和TNF-α可以促进人CD4+初始T细胞向Th22型细胞的分化.转化生长因子β( TGF-β)显著抑制Th22细胞的分化和IL-22产生[5-6].对于AML患者体内Th22细胞变化情况目前尚无文献报道,我们通过检测Th22细胞比例、IL-22和IL-22相关转录因子的表达水平在AML初诊组、化疗缓解组及正常对照组外周血中的变化,为进一步研究Th22细胞在肿瘤免疫机制中的作用提供资料.     

ITP患者外周血Th9、Th17和Treg细胞水平及IL-9、IL-17和TGF-β表达在ITP发病中的作用

目的:检测免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血Treg、Th17、Th9细胞水平及转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-17(IL-17)、白介素-9(IL-9)表达水平并探讨他们在ITP发病中的意义。方法:对54例ITP患者(病例组)与40例健康体检者(对照组)外周血Treg、Th17、Th9细胞水平,用流式细胞术检测2组外周血中TGF-β、IL-17、IL-9等细胞因子的表达用酶联免疫吸附法测定。结果:病例组外周血Treg细胞比例较对照组显著降低,而Th17、Th9细胞比例较对照组均显著升高(P 0.01)。病例组外周血中细胞因子TGF-β的表达水平较对照组显著降低,而IL-17、IL-9的表达水平较对照组均显著升高(P 0.01)。经Pearson相关性分析发现,病例组外周血Treg细胞比例与血小板计数(Plt)存在正相关关系(r=0.35,P 0.05),而Th17、Th9细胞比例与Plt均存在负相关关系(r=-0.37、-0.43,均P 0.05);病例组细胞因子TGF-β的表达水平与Plt存在正相关关系(r=0.46,P 0.05),而IL-17、IL-9的表达水平与PLT均存在负相关关系(r=-0.48、-0.54,均P 0.05)。结论:ITP患者外周血Treg、Th17、Th9细胞比例异常,伴有细胞因子TGF-β、IL-17、IL-9表达水平异常,提示可能在ITP的免疫发病中发挥着重要作用。     

Th17细胞与再生障碍性贫血研究进展

辅助性T细胞17（Thl7）是近年来发现的一群以表达IL-17而命名的新型CD4＋T细胞亚群,可分泌IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-22、IL-26等多种细胞因子.TGF-β、IL-6、IL-21、IL-23等在Th17细胞分化过程中起着积极的促进作用,而IL-27、IL-2、IFN-γ等则参与Th17细胞分化发育的负向调控.Th17细胞具有促进免疫反应的效应,在以慢性炎症为损伤机制的自身免疫性疾病中发挥着重要作用.越来越多的研究发现Th17细胞与再生障碍性贫血（AA）的发生发展密切相关,并有望成为AA诊断、治疗、预后及预防的一个新靶点.     

全反式维甲酸对川崎病患儿外周血Th17/Treg细胞平衡的影响研究

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对川崎病患儿外周血Th17/Treg细胞平衡的影响。方法研究纳入10名川崎病患儿为病例组,选择10名健康儿童作为对照组,采取外周静脉血后,无菌分离、制备外周血单个核细胞(PBMC),给予不同浓度ATRA诱导培养PBMC72h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液的细胞因子IL-10、IL-17A、TGF-β以及IL-6水平,实时PCR检测RORγt mRNA和FOXP3 mRNA表达水平,流式细胞术检测Th17/Treg占外周CD4+T细胞百分比。结果未加ATRA作用下,病例组Th17细胞比例,转录因子RORγt的mRNA表达水平以及相关细胞因子IL-10、IL-17A均高于对照组(P均0.01),而Treg细胞比例,FOXP3mRNA表达水平以及相关细胞因子TGF-β、IL-6低于对照组(P均0.01)。给予不同浓度ATRA作用后,病例组以及对照组Th17比例、IL-10、IL-17A、RORγt的mRNA均有所下降,而Treg细胞比例、FOXP3mRNA表达水平、TGF-β、IL-6均有所上升(P均0.01)。结论 ATRA在体外可促进川崎病患儿外周血Treg分化,同时抑制Th17分化,改变川崎病患儿外周血Th17/Treg失衡状态,该研究为阐明川崎病的免疫学发病机制及探索新疗法提供实验依据以及思路。     

慢性阻塞性肺病患者IL-21表达及其与其他细胞因子的相关性

目的探讨白细胞介素-21(IL-21)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)炎性反应中的作用。方法采用辅助性T细胞1/2/17(Th1/Th2/Th17)定量抗体芯片检测稳定期COPD组、健康吸烟组、健康无吸烟组研究对象的血清IL-21、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)等细胞因子的表达水平,并同时检测各组的肺通气功能。结果稳定期COPD组患者IL-21的表达水平与IL-6、IL-10、TGF-β1呈显著正相关(r值分别为0.902、0.589、0.683,均P0.01);与IL-17也呈正相关(r=0.313,P0.05)。结论 IL-21在COPD的发病过程中起重要促炎作用,可作为一种有效治疗手段。     

人外周血初始CD4~+T细胞向Th17细胞分化条件研究

目的探讨细胞因子水平对人外周血初始CD4~+T细胞向辅助性T细胞17(Th17细胞)分化的影响。方法选取人外周血单个核细胞分选初始CD4~+T细胞,在转化生长因子(TGF)-β存在下,以白细胞介素(IL)-1β和IL-23系列水平刺激其向Th17细胞分化。以流式细胞术检测IL-17A~+细胞比例,以荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测IL-17A、IL-17F、维A酸相关孤独受体(ROR)γt、RORα和IL-23R等相关因子表达水平。结果初始CD4~+T细胞经细胞因子刺激,IL-17A~+细胞比例显著升高(0.2%~1.0%),同时IL-17A等相关因子表达均显著增高,差异有统计学意义(P0.05),但IL-1β和IL-23系列水平刺激没有出现显著的量效关系,差异无统计学意义(P0.05)。结论现有条件可成功诱导人外周血初始CD4~+T细胞向Th17细胞分化,但分化效率不高,提高IL-1β和IL-23水平未显著提升分化效率,具体原因亟待进一步探索。     

重组脂联素对自然流产模型小鼠妊娠结局及Th17/Treg平衡的影响

目的探究重组脂联素(APN)对自然流产(SA)模型小鼠妊娠结局及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法将雌性CBA/J小鼠与雄性BALB/c小鼠交配建立正常妊娠(NP)模型(n=10),雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠交配建立SA模型(n=20),造模成功后,将20只SA模型小鼠随机分为脂联素组(APN组,n=10)和生理盐水组(NS组,n=10),妊娠第5d,APN组腹腔注射10μg/(kg·d)重组脂联素,1次/d,NP组和NS组腹腔注射等量生理盐水,3组疗程为9 d。疗程结束,眼球取血,检测血清中白细胞介素17(IL-17)、脂联素、转化生长因子β(TGF-β)、IL-17/TGF-β水平;处死孕鼠,计算胚胎吸收率,检测脾脏淋巴细胞中Th17/Treg细胞分群。结果与NP组比较,NS组胚胎吸收率及血清中IL-17、IL-17/TGF-β水平及Th17/CD4+T细胞比例、Th17/Treg比值明显升高(P0.05),血清中脂联素、TGF-β水平及Treg/CD4+T细胞比例明显下降(P0.05);与NS组比较,APN组胚胎吸收率及血清中IL-17、IL-17/TGF-β水平及Th 17/CD4+T细胞比例、Th 17/Treg比值明显下降(P0.05),血清中脂联素、TGF-β水平及Treg/CD4+T细胞比例明显升高(P0.05);NP组、APN组胚胎吸收率及血清中脂联素、IL-17、TGF-β、IL-17/TGF-β水平及脾脏淋巴细胞中Th17、Treg细胞分群比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论重组脂联素治疗可能通过纠正Th17/Treg细胞失衡及相关细胞因子水平,改善SA模型小鼠的妊娠结局。     

转化生长因子-β在器官移植中作用的研究进展

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族是一类经典的动物蛋白,作用于组织分化、生长发育以及免疫系统。其通过对一系列免疫细胞的调控,介导抗炎性反应,在动物移植模型中,发挥诱导免疫耐受的作用。TGF-β诱导免疫耐受的核心源于其诱导Foxp3以及对CD4+T细胞的调节能力。与此同时,TGF-β与一些炎性细胞因子,例如IL-6,IL-1共同驱动Th17的分化,发生免疫排斥,伴随着其他一些信号通路的激活,导致移植器官发生纤维化,影响移植器官的存活。因此,TGF-β在器官移植的作用具有其"两面性"。     

T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白-3与鼻息肉的相关性研究

鼻息肉是耳鼻咽喉科常见的以鼻腔-鼻窦黏膜为主的慢性炎症疾病,目前其病因和发病机制尚未完全明确。既往研究证实T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(TIM-3)可促进Tregs的增殖,抑制Th1、Th17细胞的分化及其分泌细胞因子,在疾病中参与重要的免疫应答。Th1/Th2细胞、Th17/Treg细胞的失衡是近年来研究鼻息肉发生的重要因素,本文通过鼻息肉中TIM-3与Th1、Th17、Treg细胞的研究进行综述。     

手足口病患儿Th17/Treg及其相关细胞因子的临床意义

目的探讨外周血辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg),血清中相关细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)在手足口病(HFMD)中的作用。方法选取125例HFMD急性期患儿和45例健康体检者,其中急性期HFMD患儿分为普通组(69例)和重症组(56例)。外周血Th17、Treg百分数检测采用流式细胞术,血清IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β水平检测利用酶联免疫吸附试验测定。结果和对照组相比,重症组和普通组患儿外周血Th17百分比和Th17/Treg比值,以及血清IL-17、IL-6水平均升高(均P0.05),外周血Treg百分比和血清IL-10、TGF-β水平均降低(均P0.05)。重症组患儿外周血Th17百分比和Th17/Treg比值,以及血清IL-17、IL-6水平均高于普通组(均P0.05),外周血Treg百分比和血清IL-10、TGF-β水平均低于普通组(均P0.05)。结论 Th17和Treg及其相关细胞因子水平变化异常与HFMD发病及疾病进程相关。     

鼻咽癌放疗前后Th17/Treg及相关细胞因子变化及临床意义

目的探讨鼻咽癌放疗前后辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子的变化及临床意义。方法选取我院2015年2月—2016年2月收治的鼻咽癌50例作为鼻咽癌组,选取同期在我院体检健康的50例作为对照组。比较两组(鼻咽癌组放疗前后、随访3个月时)外周血Th17和Treg所占的占总T细胞百分比及相关细胞因子水平的变化。结果与对照组比较,鼻咽癌组血清Th17及Treg占总T细胞百分比、白细胞介素(IL)-17、IL-23、IL-10及转化生长因子(TGF)-β1水平显著升高(P0.05);与放疗前比较,放疗后血清Th17占总T细胞百分比、IL-17及IL-23水平升高(P0.05),放疗后Treg占总T细胞百分比、随访3个月时Th17及Treg占总T细胞百分比、随访3个月时IL-17及IL-23水平、放疗后及随访3个月时血清TGF-β1及IL-10水平均降低(P0.05);与放疗后比较,随访3个月时血清Th17及Treg占总T细胞百分比、IL-17、IL-23、IL-10及TGF-β1水平均显著降低(P0.05)。结论放疗可加剧鼻咽癌患者Th17/Treg的免疫失衡,期间辅以免疫治疗可改善患者的免疫功能。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17与Treg细胞及相关细胞因子表达的研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)与其相关细胞因子在外周血中的表达。方法选择38例SLE患者,根据病情严重程度SLEDAI评分进行分组;使用流式细胞仪检测38例SLE患者和对照组Th17和Treg细胞的数量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中相关细胞因子的表达。结果SLE患者外周血中Th17细胞及其相关细胞因子IL-17、IL-23和IL-6显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),且疾病活动组的表达也显著高于非活动组(P0.05);此外与对照组相比,SLE非活动组Treg的表达降低(P0.05),并且疾病活动组的表达也低于非活动组(P0.05);SLE活动组细胞因子TGF-β的表达高于非活动组和对照组(P0.05)。结论 SLE患者外周血中Th17细胞及其相关细胞因子表达水平显著升高,而Treg细胞的表达降低,两者平衡被打破,提示Th17/Treg的失衡可能在SLE发病机制中发挥重要作用。     

Th17＋ T细胞、吸烟与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究进展

Th17＋T细胞（T helper type 17 cell）是一种新近发现的不同于Th1、Th2细胞的CD4效应性T细胞亚群,其分化受到局部微环境中不同细胞因子的调节,可以清除特定的细胞外病原体起到保护作用,对自身抗原的特异性又可导致炎症和自身免疫性疾病发生。