上海瑞金医院1 887株临床分离菌的耐药性分析

上海瑞金医院１８８７株临床分离菌的耐药性分析倪语星乔静贤项明洁张轶毛向群细菌耐药性问题已成为医药界共同关注的问题，当前监测和研究的焦点集中在耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）、耐万古霉素的肠球菌（ＶＲＥ）和产β－内酰胺酶的革兰阴性菌等重要耐药菌株...     

1135株革兰阴性杆菌对头孢菌素耐药情况分析

通过对１９９２～１９９４年院内感染的１１３５株革兰阴性杆菌对头孢菌素的耐药分析，指导临床合理用药。方法：应用ＶＩＴＥＫＡＭＳ－６０自动微生物分析仪，Ｋ－Ｂ法对菌株进行鉴定，药敏试验，并按美国临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）标准分析，质控，结果，药敏质控符合ＮＣＣＬＳ标准，１１３５株革兰阴性杆菌对头孢呋肟，头孢哌酮等耐药性检测，均经Ｕ检验，Ｐ〈０．０１，表明耐药性明显增加，结论，随头孢菌素广泛使用     

全自动细菌分析系统在检测产超广谱β-内酰胺酶细菌中的临床应用

目的　了解超广谱β内酰胺酶（ Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ） 细菌在医院分离及分布情况,以利于对 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 细菌的监控和治疗。方法　用 Ｖ Ｉ Ｔ Ｅ Ｋ３２ 型全自动细菌分析系统药敏检测卡 Ｇ Ｎ Ｓ Ｎ Ｔ 进行细菌 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 的测定。结果　在１３２ 株大肠埃希菌、１１９ 株肺炎克雷伯菌、６０ 株阴沟肠杆菌中 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 的检出分别为２８８ ％ 、１９３ ％ 、５０ ％ ,而７３ 株绿脓假单胞菌未检到 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 菌;各病区产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 菌的分离率以重症监护（ Ｉ Ｃ Ｕ） 病房最高（３３６ ％ ） ,其次为慢性病病房和干部病房（ 各为２００ ％ ） ,介入科病房（１９６ ％ ） ,呼吸科病房（１２９ ％ ） ,其他病房（３０ ％ ） ;产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 菌对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮／ 舒巴坦未发现有高耐株,中介占２３４ ％ （１５／６４） 。结论　 Ｖ Ｉ Ｔ Ｅ Ｋ３２ 型全自动细菌分析系统的 Ｇ Ｎ Ｓ Ｎ Ｔ 卡可正确检测产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 菌, Ｉ Ｃ Ｕ 病房是产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 菌的主要来源,对产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 菌的治疗以亚胺培南最佳,其次为高浓度的头孢哌酮／ 舒巴坦。     

房室旁道射频消融时房室传导阻滞的预防

完全性房室性传导阻滞（Ａ－ＶＢ）是经导管射频消融（ＲＦＣＡ）治疗阵发性室上性心动过速（ＰＳＶＴ）最严重的并发症之一,发生率为３％左右,多见于房室结双径道的快径消融［１］,但房室旁道（ＡＰ）的消融如果不慎,也有造成Ａ－ＶＢ的可能。现就我院对于ＡＰ进行ＲＦＣＡ时发生Ａ－ＶＢ的情况总结如下。１　临床资料１．１　一般资料　１９９４年３月～１９９８年７月应用ＲＦ－ＣＡ治疗ＰＳＶＴ１３４例,其中预激ＡＰ９５例,左侧显性ＡＰ１９例,左侧隐匿ＡＰ４２例（其中２例同时合并有房室结双径道）,右侧显性ＡＰ２０例,右侧…     

超广谱β—内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的 了解超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）细菌的检测及耐一的情况,以利于对ＥＳＢＬｓ的监控和治疗。方法 用ＮＣＣＬＳ推荐的初筛和确证实验及双纸片协同实验、Ｅ －ｔｅｓｔ、 Ｖｉｔｅｋ３２型全自动分析系统药敏检测卡ＧＮＳ－ＮＴ对１６０株大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌进行ＥＳＢＬｓ的鉴定,并检测确证ＥＳＢＬｓ阳性菌株的药敏情况。结果 共检出ＥＬＳＬｓ菌株３３株,双纸片协同实验、Ｅ－ｔｅｓｔ、ＧＮＳ－ＮＧ三者     

耐甲氧西林葡萄球菌耐药性观察

目的 研究葡萄球菌的感染及耐药性状况，指导临床用药。方法 ＡＰＩ－Ｓｔａｐｈ鉴定分离菌株，药敏试验应用Ｋ－Ｂ法、最低抑菌浓度（ＭＩＣ）法、琼脂筛选法及ｍｅｃＡ基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测耐甲氧西林葡萄球菌（ＭＲＳ）；并分别了ＭＲＳ、甲氧西林敏感葡萄球菌（ＭＳＳ）对青霉素等１３种抗生素的耐药率（Ｋ－Ｂ法）；分析了病人住院时间、抗生素使用与ＭＲＳ分离率间的关系。结果 ３０１株葡萄球菌中，耐甲西林金黄     

亚胺硫霉素等12种抗生素对革兰阴性杆菌抗菌活性比较

用Ｅｔｅｓｔ法对１５０株革兰阴性杆菌进行药敏试验，测定它们对１２种抗生素的最低抑菌浓度（ＭＩＣ），报告如下。１　材料和方法１１　菌株来源　１５０株革兰阴性杆菌取自本院１９９７年６月～１９９８年４月院内感染病人的送检标本。１２　药敏培养基和Ｅｔｅｓｔ纸条均为ＡＢＢｉｏｄｉｓｋ公司产品。１３　细菌鉴定　所有菌株用ＡＰＩ编码系统鉴定到种。１４　药敏试验　按《全国临床检验操作规程》和Ｅｔｅｓｔ法产品说明书进行药敏试验。用大肠埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２和铜绿假单胞菌ＡＴＣＣ２７８５３作质控监测。１…     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１），经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实这些融合蛋白具有ＨＣＶ的特异抗原活性，提示这些融合蛋白可用于ＨＣＶ感染的临床诊断和发病机理的研究。     

重症监护病房中耐甲氧西林金葡菌的流行

目的调查耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）在重症监护病房（ＩＣＵ）的流行情况。方法将临床分离２８株ＭＲＳＡ包埋于琼脂块中，原位溶解细菌，ＳｍａⅠ消化染色体ＤＮＡ，经脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）分离，比较染色体限制性内切酶图谱，确定菌株的亲缘关系。结果２８株ＭＲＳＡ的ＰＦＧＥ图谱有Ｋ、Ｍ、Ｌ、Ｎ４型，以Ｋ型为主（１８株）。ＩＣＵ本次流行期间的ＭＲＳＡ分离株均为Ｋ１亚型（１４株），与前次流行株Ａ１亚型完全不同。采集２０位ＩＣＵ医护人员鼻拭子，分离到２株ＭＲＳＡ，阳性率１０％，其ＰＦＧＥ图谱与流行株一致。结论ＭＲＳＡ在ＩＣＵ流行情况十分严重，及时采取有效措施控制这种流行及播散是至关重要的     

重症监护病房耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的耐药特征

摘要：目的 了解重症监护病房耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌（ＣＲＥ）的耐药特征。 方法 收集 ２０１９ 年 １ 月至 ２０２０ 年 １０ 月北 京友谊医院分离的 ９８ 株非重复 ＣＲＥ，采用纸片扩散法、Ｅ?ｔｅｓｔ 法和肉汤微量稀释法进行药敏试验，ＰＣＲ 方法检测碳青霉烯酶 基因（ｂｌａＫＰＣ 、ｂｌａＮＤＭ 、ｂｌａＶＩＭ 、ｂｌａＩＭＰ 、ｂｌａＯＸＡ?４８ ），多重 ＰＣＲ 方法检测质粒介导的黏菌素耐药基因（ｍｃｒ?１、２、３、４ 和 ５），多位点序列 分型（ＭＬＳＴ）分析菌株间的同源性。 结果 半数以上 ＣＲＥ 菌株来自痰液（３２．７％）和血液（２４．５％），以耐碳青霉烯类肺炎克雷 伯菌（ＣＲ?ＫＰＮ）占优势（８７．８％）。 所有 ＣＲＥ 菌株呈多重耐药性，对头孢他啶／ 阿维巴坦和黏菌素的耐药率分别为 ４．１％和 ７．１％。 ８４．７％的 ＣＲＥ 菌株携带碳青霉烯酶基因，ＣＲ?ＫＰＮ 菌株中 ｂｌａＫＰＣ?２检出率最高，耐碳青霉烯类大肠埃希菌（ＣＲ?ＥＣＯ）和 耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌（ＣＲ?ＥＣＬ）中以携带 ｂｌａＮＤＭ?１为主。 ＳＴ１１ 为 ＣＲ?ＫＰＮ 主要克隆株，占 ８３．７％。 ７ 株黏菌素耐药的 ＣＲＥ 菌株仅 １ 株携带 ｍｃｒ?１。 结论 重症监护病房分离的 ＣＲＥ 菌株呈多重耐药，已出现头孢他啶／ 阿维巴坦和黏菌素的耐药株，需 要谨慎选择抗菌药物，加强感染控制措施，避免耐药菌株进一步传播。     

维甲酸诱导HL-60细胞分化中对细胞周期素依赖性激酶活性的影响

目的探讨维甲酸（ＲＡ）对ＨＬ６０细胞的增殖抑制和诱导分化作用与细胞周期素依赖性激酶（ＣＤＫ）活性变化的相关性。方法用５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）或芳维甲（ＡＥ）处理ＨＬ６０细胞１～４天,在观察细胞生长、四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原实验以及细胞周期分析的基础上,用组蛋白Ｈ１激酶活性分析技术检测ＣＤＫ２的活性,免疫沉淀法分析结合于ＣＤＫ２和ＣＤＫ４上的相应的细胞周期素（ｃｙｃｌｉｎ）Ｅ和Ｄ的量。结果ＨＬ６０细胞在ＡＴＲＡ或ＡＥ作用下,细胞增殖减慢,对ＮＢＴ的还原能力明显增强,９０％左右的细胞被阻滞在Ｇ１／Ｇ０期;在Ｇ１到Ｓ期转换过程中起关键作用的ｃｙｃｌｉｎＥ／ＣＤＫ２的活性显著下降,结合于ＣＤＫ４上的ｃｙｃｌｉｎＤ１的量减少。结论ＲＡ抑制ＨＬ６０细胞增殖并诱导其分化可能与ＣＤＫ２和ＣＤＫ４的活性下降有密切关系     

加温诱导肿瘤细胞凋亡与逆转多药耐药性的实验研究

目的　探讨加温逆转肿瘤细胞株ＫＢＶ２００ 多药耐药性及与诱导细胞凋亡的关系。方法用四唑蓝快速比色法（ＭＴＴ法） 检测细胞存活率;用形态学（ 光镜、电镜观察） ;生化学（ＤＮＡ 末端转移标记法,ＴＵＮＥＬ法） 及流式细胞术分析细胞凋亡状况。结果　加温４２ ℃,１ ｈ 可明显降低ＫＢＶ２００ 细胞存活率,提高长春新碱细胞毒性作用;单加ＶＣＲ 细胞存活率为（９０ ．７０ ±８．７８） ％ ,加ＶＣＲ 加温为（５７ ．４０±２１ ．５５）％ ,Ｐ＜ ０ ．００２。加温与细胞分化剂ＣＤＡ－ Ⅱ合用,有明显协同逆转作用。ＣＤＡ－ Ⅱ与ＶＣＲ合用细胞存活率为（５９ ．２４ ±３０．８０）％ ,加温与ＣＤＡ－ Ⅱ及ＶＣＲ 合用为（１５ ．３２ ±２ ．６８）％ ,Ｐ＜ ０．０５。４２ ℃或４３ ℃处理１,２４ ｈ 后即可观察到明显细胞凋亡。４３ ℃１ ｈ 处理诱导作用更强。结论　加温可明显逆转肿瘤细胞多药耐药及诱导细胞凋亡。加温对肿瘤细胞凋亡的诱导,在加温逆转肿瘤细胞耐药性中可能起着重要作用。     

丙型肝炎病毒NS5A区插入序列因子的初步研究

研究丙型肝炎病毒ＮＳ５Ａ区插入序列（ＩＳ） 因子及其来源。以ＲＴ－ＰＣＲ法扩增ＨＣＶ ＮＳ５Ａ区第６８７１至７１２１ 区段， 对扩增产物进行核苷酸测序并与ＨＣＶ－Ｊ株相应区段序列相比较。结果发现ＨＣＶ ＮＳ５Ａ 区插入一个４８ ｂｐ 的ＩＳ因子， 将ＩＳ因子与ＨＣＶ－Ｊ株全核苷酸序列进行同源性对照， 发现该片段来源于ＨＣＶ Ｅ１区。该研究首次报告了ＨＣＶ ＮＳ５Ａ区有来自Ｅ１区的漂移基因片段， 并对其临床和生物学意义进行了初步讨论。     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，建立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式「ＨＣＶ非编码区（５ＮＣＲ）与ＮＳ５联合」技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献赠及３７例输血后丙型肝炎患 血清ＨＣＸＶＲＮＡ。结果 １０例抗ＨＣＶ阳性一献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ     

血性脑脊液对内皮功能影响及药物干预的研究

目的 观察血性脑脊液（ＢＣＳＦ）对内皮细胞（ＥＣ）分泌内皮素（ＥＴ）和一氧化氮（ＮＯ）的影响及川芎嗪（ＬＺ）、尼莫地平（ＮＭ）的干预作用。方法建立脐静脉ＥＣ体外培养的方法,测定ＥＴ、ＮＯ的代谢产物ＮＯ_Ｘ－ 含量,并观察ＢＣＳＦ和ＮＭ及ＬＺ的作用。结果ＬＺ和ＮＭ可抑制正常体外培养的ＥＣ分泌ＥＴ,对ＮＯ无影响;不同时间ＢＣＳＦ均使ＥＴ分泌增加,ＮＯ分泌减少;ＬＺ既能减少ＢＣＳＦ引起的ＥＴ升高,又可抑制ＮＯ的下降,而ＮＭ仅能抑制ＥＴ的增高,对ＮＯ无明显影响。结论蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后,通过破坏ＥＴ／ＮＯ的平衡,导致脑血管痉挛（ＣＶＳ）。ＬＺ和ＮＭ可通过抑制这一作用而防治ＣＶＳ。     

儿科感染致病菌814株耐药性检测

中华儿科杂志, １９９９, ３７（ １１）： ６８４－６８７．收集武汉地区１３所医院儿科分离的致病菌,采用Ｋ－Ｂ法进行药敏试验,用ＷＨＯ细菌耐药监测软件“ＷＨＯＮＥＴ－４”进行统计和分析,根据１９９３年发布的美国临床试验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）标准判断细菌耐药性。结果１９９６年总共收集儿科致病菌８１４株。志贺菌属、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、假单胞菌属和克雷伯菌属是主要菌种。１０．７％金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药,对其他抗生素的耐药也增加。肠杆菌科菌株对氨苄西林的耐药率超过７９．４％,对克雷伯菌属的…     

多位点VNTR用于异基因骨髓移植植入存活检定研究

目的：探讨多位点可变数串联重复序列（ Ｖ Ｎ Ｔ Ｒ）—— Ｄ１７ Ｓ３０、 Ｐ Ａ Ｈ、 Ｖ Ｓ１７、 Ｍ Ｌ Ｏ Ｗ １ 在异基因骨髓移植存活检定中的应用。方法：以聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ）扩增４ 个位点 Ｖ Ｎ Ｔ Ｒ, Ｐ Ｃ Ｒ 产物以聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法检测,对２ 名异基因骨髓移植（ Ａｌｌｏ Ｂ Ｍ Ｔ）患者作移植物成活检定研究。结果：受者获得了供者源性细胞植入存活的证据。结论：多位点 Ｖ Ｎ Ｔ Ｒ个体特异性强、识别力高,可作为 Ａｌｌｏ Ｂ Ｍ Ｔ 植活的可靠指标,尤其是用于血型、性别、 Ｈ Ｌ Ａ 表型全相合的 Ａｌｌｏ Ｂ Ｍ Ｔ,移植后 １５ 天便可获得植入证据。     

耐甲氧西林葡萄球菌耐药性观察

目的研究葡萄球菌的感染及耐药性状况，指导临床用药。方法ＡＰＩ－Ｓｔａｐｈ鉴定分离菌株，药敏试验应用Ｋ－Ｂ法、最低抑菌浓度（ＭＩＣ）法、琼脂筛选法及ｍｅｃＡ基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测耐甲氧西林葡萄球菌（ＭＲＳ）；并分别测定了ＭＲＳ、甲氧西林敏感葡萄球菌（ＭＳＳ）对青霉素等１３种抗生素的耐药率（Ｋ－Ｂ法）；分析了病人住院时间、抗生素使用与ＭＲＳ分离率间的关系。结果３０１株葡萄球菌中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）占４４．０％（３７／８４）（筛选法），耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌占６１．８％（１３４／２１７）（筛选法），ｍｅｃＡ基因ＰＣＲ法、琼脂筛选法检测ＭＲＳ阳性率较高；ＭＲＳ对青霉素等１３种抗生素的耐药率均高于ＭＳＳ；病人住院天数、抗生素使用与ＭＲＳ的分离率呈正相关。结论ＭＲＳ感染较为严重，需加强其对抗生素包括万古霉素的耐药性监测；注意ＭＲＳ检测方法存在的问题。     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式［ＨＣ非编码区（５′ＮＣＲ）与ＮＳ５联合］ＰＣＲ技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献血员及３７例输血后丙型肝患者的血清ＨＣＶＲＮＡ。结果１０例抗ＨＣＶ阳性献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物及套式ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物扩增时，其ＲＮＡ检出率分别为５／１０、６／１０、７／１０、８／１０和９／１０；而３７例输血后丙型肝炎患者中３５例ＲＮＡ阳性，检出率为９５％，其中１８例１ｂ型和１９例２ａ型样品的检出率分别为１００％和８９％。结论ＨＣＶＮＳ５区的ＲＮＡ检出率与引物的选择有关     

大鼠三叉神经尾侧亚核和脊髓背角浅层内C纤维的主要神经活性物质

本文用免疫荧光双重标记技术对三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）和脊髓背角浅层内ＢａｎｄｅｉｒａｅａＳｉｍｐｌｉｃｉｆｏｌｉａＩｓｏｌｅｃｔｉｎＢ４（ＢＳＩ－Ｂ４）标记的Ｃ纤维及其终末与Ｐ物质（ＳＰ）能、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）能、谷氨酸（Ｇｌｕ）能和一氧化氮（ＮＯ）能纤维及其终末的分布和相互关系，三叉神经节（ＴＧ）和脊髓背根节（ＤＲＧ）中ＢＳＩ－Ｂ４标记并呈ＳＰ样、ＣＧＲＰ样、磷酸激活的谷氨酰胺酶（ＰＡＧ，谷氨酸能细胞的特异性标识物）样和ＮＯＳ样阳性的双标细胞进行了定位、定性和定量的系统研究。Ｖｃ和腰髓背角内ＳＰ样、ＣＧＲＰ样、ＰＡＧ样、ＮＯＳ样阳性纤维和终末及ＢＳＩ－Ｂ４标记的Ｃ纤维及其终末分布的主要重叠区域是Ⅱ层外带（Ⅱｏ）。ＴＧ和ＤＲＧ内可见ＢＳＩ－Ｂ４标记并呈ＳＰ样、ＣＧＲＰ样、ＰＡＧ样或ＮＯＳ样阳性的双标细胞，其中ＰＡＧ／ＢＳＩ－Ｂ４双标细胞的数量最多。此结果提示Ｃ纤维主要含Ｇｌｕ，Ｇｌｕ是初级传入最主要的神经活性物质。此外还有一些Ｃ纤维含ＳＰ、ＣＧＲＰ和ＮＯ。