TRAP—ELISA法进行端粒酶半定量检测

为了建立一种端粒酶（telomerase）半定量检测方法,以适合临床及科研需要,我们采用TRAP－ELISA法,并加以改良,对45例宫颈活检组织端粒酶进行了半定量测定。结果发现宫颈癌阳性检出率为92.0%,特异性90.0%,批内变异系数为9.6%,且发现宫颈活检组织中端粒酶性随着宫颈病变的发展而有增强趋势,实验结果表明,本法具有操作简便、快速、灵敏性高、特异强、重复性好的特点,且能进行半定量分析,适用于临床及科研。     

端粒酶基因在乳腺导管不典型增生中的表达

目的：探讨端粒酶基因与乳腺导管不典型增生恶性转化的关系及其作用。方法：应用原位杂交方法检测端粒酶基因hTR和hTRT在50例乳腺导管增生组织（其中单纯性增生6例,轻度不典型增生9例,中度不典型增生12例、重度不典型增生23例）及26例乳腺癌中的表达。结果：在乳腺导管单纯性增生组织hTR、hTRT、mRNA呈弱表达（1／6）和阴性。在乳腺导管轻、中度不典型增生组织hTR、hTRT、mRNA呈弱表达（2／9、1／9;4／12、3／12）,在乳腺导管重度不典型增生组织中hTR、hTRT、mRNA表达增强（14／23,60．9％,12／23,52．1％）,在乳腺癌组织中端粒酶基因hTR、hTRT、mRNA呈较强阳性表达（23／26,88．5％;21／25,80．8％）。乳腺导管重度不典型增生组织中的端粒酶基因表达与在轻、中度不典型增生、浸润性导管癌组织中的表达比较差异有显著性意义（P＜0．05）,但与导管内癌表达差异无显著性意义（P＞0．05）。结论：端粒酶基因hTR、hTRT的表达与乳腺导管不典型增生细胞的恶性转化密切相关,端粒酶的重新激活可能在乳腺癌的组织发生中起关键性作用。     

宫颈癌新鲜组织和石蜡包埋组织中端粒酶检测比较

目的为了了解宫颈癌新鲜组织和石蜡包埋宫颈癌组织中端粒酶活性检测的差异。方法TRAP-PCR用于30例宫颈新鲜组织和40例石蜡包埋的宫颈组织中端粒酶活性的检测。结果宫颈癌新鲜组织端粒酶活性检出率为73.33%(22/30),石蜡包埋的宫颈癌组织检出率为27.50%(11/40)(P<0.001)。两组平均端粒酶活性分别为1.362±0.768和0.624±0.386(P<0.001)。结论宫颈癌新鲜组织端粒酶活性检出率显著高于石蜡包埋的宫颈癌组织,平均端粒酶活性有极显著差异。     

中国妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒感染及其地理分布…

应用核酸印迹技术（Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ）对我国十四省市自治区的１４５５例来源宫颈癌，宫颈不典型增生，宫颈湿疣和正常宫颈组织，进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染的型别检测，并分析了其型别地理分布特点，结果发现，８１５例宫颈癌组织ＨＰＶ总检出率５３．５％，其中ＨＰＶ１６和５８型检出率最高，分别是３１．９％和７．６％，ＨＰＶ６／１１和１８型的检出率为２．３％和１．０％，而在１９５例宫颈上皮不典型增生中，     

TLR4在宫颈癌与不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达及意义

目的 探讨TLR4在正常宫颈组织、宫颈上皮不典型增生、宫颈癌组织以及不同HPV亚型宫颈癌细胞株中表达与意义.方法 采用SP免疫组织化(IHC)检测TLR4在12例正常宫颈组织、30例宫颈轻度不典型增生(cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ,CINⅠ)、30例宫颈中-重度不典型增生(...     

组织端粒酶活性与宫颈癌相关研究

目的为了了解宫颈组织端粒酶活性与宫颈癌的关系.方法在30例宫颈癌、72例宫颈CIN和16例正常宫颈新鲜组织中,端粒酶重复序列扩增法(TRAP)用于检测组织端酶活性.结果3组端粒酶活性阳性分别有22例,21例和1例(P＜0.01),平均端粒酶活性分别为1.362±0.768、0.4236±0.247和0.048±0.026(P＞0.01).结论组织端粒酶活性的异常表达与宫颈癌进展密切相关,且随病程的进展端粒酶平均活性程度逐渐升高.     

宫颈癌细胞增殖及凋亡与bcl-2表达的研究

本研究旨在探求宫颈癌变中细胞增殖和细胞凋亡的变化规律,以及凋亡出现频率与ｂｃｌ－２癌蛋白的关系。结果发现宫颈癌组织的增殖指数（ＰＩ）和凋亡指数（ＡＩ）明显高于正常宫颈组织和宫颈不典型增生组织（Ｐ＜０．０１）,而ＡＩ／ＰＩ显著低于两者（Ｐ＜０．０１）。ｂｃｌ－２癌蛋白常见于正常宫颈上皮和不典型增生上皮的基底细胞层,宫颈癌组织中其表达随临床期别升高呈下降趋势,ｂｃｌ－２阳性组的ＡＩ与阴性组无显著差异。证实宫颈癌变是细胞无限增殖,凋亡异常被抑制的结果。ｂｃｌ－２是宫颈癌变的早期特征,但不是调节细胞凋亡的唯一因素     

HPV-DNA负荷量与宫颈癌前病变及宫颈癌的相关性

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）DNA的负荷量与宫颈癌前病变及宫颈癌的相关性。方法 2005年4月-2007年3月于我院就诊的宫颈病变患者330例为研究对象,其中正常宫颈组织58例,CIN182例,宫颈鳞状细胞癌90例;所选病例行阴道镜下活检前均采用杂交捕获2代（HCⅡ）方法定量检测宫颈HPVDNA的含量,病毒负荷以RLU/CO表示。按HPV DNA含量分成5组,分别为：HPV〈1,1≤HPV≤100,101≤HPV≤500,501≤HPV≤1000,HPV〉1000。结果 1.高危型HPV DNA在宫颈正常组织中的检出率为32.76%,在CIN组中的检出率为67.58%,在宫颈鳞癌组中的检出率为97.78%,三组间比较有显著统计学意义（P〈0.001）。2.高危型HPV DNA检出率在CIN I组为47.46%,CIN Ⅱ组为57.38%,CIN Ⅲ组为95.16%,三组间比较有显著统计学意义（P〈0.001）。结论 HPV DNA检出率随宫颈病变的严重程度而增加;HPV DNA负荷量与宫颈病变的严重程度不完全相关。     

卵巢肿瘤组织中端粒酶活性的表达

目的分析端粒酶活性在卵巢肿瘤中的表达,探讨端粒酶活性作为卵巢肿瘤诊断肿瘤标记物的意义。方法取冰冻肿瘤组织,采用端粒重复序列扩增法（Telomeric Repeat Amplication Protocol）,结合银染,共测定了27例卵巢癌、5例良性卵巢肿瘤、22例卵巢癌癌旁组织以及12例正常卵巢组织中端粒酶活性,并分析其与组织分级、FIGO分期、病理类型以及有无转移的关系。PCR产物以采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,以出现特征性的6-bp间隔的特征性阶梯状条带为阳性。出现〉100bp的条带为强阳性,出现〈99bp的条带为中低阳性。结果本实验共对66份标本进行了检测,12例正常卵巢组织中,仅有2例表达端粒酶活性;5例卵巢良性肿瘤中,1例表达端粒酶弱阳性。27例卵巢恶性肿瘤标本中,有23例表达端粒酶活性（其中强阳性16例）;在检测的22例卵巢上皮癌的癌旁组织中,有12例表达端粒酶弱阳性。卵巢恶性肿瘤的端粒酶活性表达阳性率显著高于卵巢良性肿瘤（P=0.0090）和正常卵巢（P=0.0000）。Ⅰ-Ⅱ期患者端粒酶活性阳性率71%,Ⅲ-Ⅳ期患者端粒酶活性阳性率90%（P=0.269）。而强阳性率Ⅲ-Ⅳ期明显高于Ⅰ-Ⅱ期（P=0.009）。在肿瘤类型和组织学分级中,端粒酶阳性表达率均没有显著差异。结论在卵巢恶性肿瘤组织中端粒酶活性有较高的表达率;早期和晚期卵巢肿瘤组织中端粒酶活性阳性率没有明显差异,但晚期卵巢肿瘤组织中的端粒酶活性程度较高;端粒酶活性有可能作为早期诊断卵巢肿瘤的标记物之一,并可以作为卵巢肿瘤判断预后的指标。