儿童急性白血病形态学免疫学和细胞遗传学的分型诊断

目的：准确地进行儿童急性白血病（AL）的诊断分型,提高初诊患儿的诊断符合率。方法：采用形态学、免疫学和细胞遗传学（MIC）相结合的诊断方法,分析了110例初诊为AL的患儿。结果：形态学与MIC分型诊断符合率为88．2％;急性淋巴细胞性白血病（ALL）免疫分型诊断符合率为92．2％;而急性髓细胞性白血病（AML）仅为62．9％。8／35例AML表达淋系抗原（1y^ -AML),12／59例ALL表达髓系抗原（My^ -AML);11／110例为杂合性白血病。染色体核型异常检出率为63．6％。t(8;21）易位见于（13／21例）M2;t(7;11）易位见于12例M2;t（15;17）易位见于（2／5例）M3;t（9;22）和t（4;11）易位见于（8／64例）ALL。结论：运用MIC诊断分型方法能提高儿童AL的诊断率,为AL个体化治疗和评估预后提供信息。     

白血病骨髓细胞ras癌基因产物P21蛋白的免疫组化检测

用LSAB（Labelled streptavidin biotin method）免疫组化法对30例白血病骨髓细胞进行了P_（21）蛋白免疫组化检测。其中急性粒细胞性白血病（AML）14例,9例阳性,阳性率57.14%。急性淋巴细胞性白血病（ALL）11例,1例阳性,阳性率9.09%。1例慢性粒细胞性白血病（CML）为阴性。2例CML急变期（CML BP）,1例为阳性。2例慢性淋巴细胞性白血病急变期（CLL BP）均为阳性。结果显示AML的P_（21）蛋白表达率较高。将AML与ALL进行统计学分析,P=0.03,提示表达率与白血病类型有明显相关性。     

肺耐药蛋白在急性白血病中的表达及意义

目的 探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞肺耐药蛋白（LRP）的表达及意义。方法 采用LRP单克隆抗体、流式细胞技术分别测定15例单纯缺铁性贫血患者（对照组）和65例AL患者（AL组）LRP的表达率。结果 LRP的表达率在初治和复发／难治急性淋巴细胞白血病（ALL）患者分别高于初治和复发／难治急性髓细胞白血病（AML）患者（P均〈0．05）；AML中M5亚型表达率高于M3亚型（P〈0．05）。初治及复发／难治LRP（＋）者缓解率明显低于LRP（-）者（P〈0．05）。结论 LRP的表达与AL患者临床预后密切相关，化疗前检测LRP表达率有助于个体化治疗和预测疗效。     

初治急性白血病患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白基因表达与预后的关系

目的 探讨肺耐药蛋白（1rp)基因和多药耐药相关蛋白（mrp)基因表达与初治急性白血病（AL）患者化疗效果的关系。方法 用逆转聚合酶链反应方法检测58例初治AL患者骨髓单个核细胞中lrp和mrp的mRNA的表达。结果 初治急性淋巴细胞白血病（ALL）患者lrp和mrp阳性表达率分别为15．0％和40．0％, 初治急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者lrp和mrp阳性表达率分别为15．8％和42．1％;在ALL和ANLL组,lrp和mrp基因阳性与阴性患者的首次完全缓解（CR）经统计学分析,差异无显著性（P＞0．05）,而lrp和mrp基因双阳性与双阴性患者的首次CR经统计学分析,差异有显著性（P＜0．05）;lrp和mrp基因两者无相关性。结论 lrp和mrp单独作为预测初治AL患者化疗效果的敏感性较差,而两者联合检测则是预示原发耐药的良好指标。     

急性白血病患者WT1基因的表达及其与预后的关系

用RT-PCR方法检测WT1基因。79例急性白血病(AL)患者共检出WT1阳性29例,总阳性率36.71％。其中ALL组18例、AML组61例WT1基因阳性率分别33.3％和37.7％,P>0.05。正常对照组20例无1例WT1阳性。经化疗,29例WT1阳性者CR11例(37.93％),50例阴性者CR46例(92.00％),P<     

survivin基因及增殖细胞核抗原与急性白血病关系的研究

目的 探讨增殖细胞核抗原（PCNA）、survivin基因与急性白血病（AL）的关系：方法收集2003—2004年浙江大学医学院附属第一医院住院AL患者的资料，采用免疫组化方法检测PCNA和RT—PCR方法检测survivin在AL在治疗前后以及与正常对照组的比较：结果初发AL患者与正常对照组的PCNA和survivin的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。AL在治疗前与治疗缓解后其PCNA的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。survivin高表达的急性髓细胞白血病（AML）缓解率低，但是急性淋巴细胞白血病（ALL）的缓解率与survivin表达无关。结论 PCNA和survivin在白血病中均高表达，与白血病的发生及发展有一定的联系，PCNA与survivin互补，可作为判断急性白血病的疗效和预后指标。     

髓系抗原、P-糖蛋白和CD34抗原在急性淋巴细胞白血病中的表达及其意义

目的　探讨急性淋巴细胞白血病 (ALL)的髓系抗原、P 糖蛋白 (P gp)和CD3 4 表达特点及其与预后的关系。方法　采用间接免疫荧光法标记流式细胞仪 (FCM )检测 84例初治ALL患者的免疫表型。结果　ALL髓系抗原阳性率为 17.8% ,其中CD13 阳性最常见。CD3 4 表达阳性率为45 .3 % ,与髓系抗原表达和治疗缓解率无显著相关性。髓系抗原阳性组病例 (My ALL)肝脾肿大明显 ,白细胞总数增高显著 ,完全缓解 (CR)率明显低于阴性组病例 (P <0 .0 1)。P gp阳性表达率为 3 2 .1% ,P gp表达阳性与My ALL化疗效果有相关性。结论　My ALL细胞对于常规诱导缓解方案不敏感 ,选择兼顾ALL AML的方案可提高治疗效果。P gp高度表达与低CR率有密切关系     

人胎盘型谷胱甘肽S转移酶在人脑胶质瘤中的表达及意义

利用异硫氰酸荧光素标记的GST－π抗体和流式细胞技术检测GST－π在脑胶质瘤中的表达,以正常脑组织作为对照,结果显示GST－π在正常脑组织中无阳性表达,但在胶质瘤中呈过度表达,随肿瘤恶性程度增高,临床分期向晚期发展,GST－π表达阳性率增高（χ^2检验,P＜0．05）,表达水平亦增高（秩和检验,P＜0．01）,且GST－π表达阳性胶质瘤患者的平均年龄高于阴性者（t检验,P＜0．05）,在复发与原发胶质瘤中的差异尚无统计学显著性,认为检测GST－π表达可为胶质瘤患者的预后判断及治疗方案选择提供依据。     

1998～2007年潍坊市人民医院血液科急性白血病患者发病情况分析

目的 探讨近年来本地区急性白血病（AL）发病特点,为临床预防及诊治提供依据。方法回顾性分析潍坊市人民医院血液科1998—2007年收治的620例初治AL患者的资料,分析AL的发病情况。结论AL住院人数呈逐年增加趋势,AML：ALL为3．13：1,男：女为1．17：1,AML和ALL比值随年龄增长逐渐增加,部分患者有伴发疾病。结论本地区AL住院人数呈逐年增加趋势,男性多于女性,以农民为主,AML较ALL多见,治疗相关性AL（TRL）及其他疾病相关性AL有一定发病率;临床应进行针对性预防及诊治。     

早期分化抗原在急性白血病中的表达及其意义

目的　探讨CD3 4 、CD90 及CD13 3 在急性白血病 (AL)中的表达及其意义。方法　采用三色直接免疫荧光法测定 76例AL患者白血病细胞膜上CD3 4 、CD90 及CD13 3 抗原的表达 ,半定量RT PCR方法测定CD13 3 mRNA的表达。结果　 (1)AL患者的CD3 4 及CD13 3 表达高于正常对照组(46 37%、0 4 7% )、(2 1 93%、0 2 9% ) ,P值均 <0 0 1;但CD90 的表达二者间差异无统计学意义(0 5 1%、0 2 5 % ) ,P >0 0 5 ;AL、对照组的CD13 3 抗原表达均与CD13 3 mRNA表达相一致。 (2 )急性淋巴细胞白血病 (ALL)的CD90 阳性率高于急性髓细胞白血病 (AML) (P <0 0 5 ) ,B ALL的CD3 4 阳性率高于T ALL(P <0 0 5 )。AML中M4的CD13 3 阳性率最高 (P <0 0 1)。 (3)CD3 4 及CD13 3 阳性组AL的HLA DR阳性率显著高于阴性组 (79 1%、32 0 % ;82 8%、4 6 2 % ) ,P值均 <0 0 1;CD 3 4 AML的CD13 3 阳性率高于阴性组 (P <0 0 1) ,但两组之间CD90 阳性率差异无统计学意义。 (4)CD3 4 、CD90 及CD13 3 表达与AL的细胞或分子遗传学异常等临床预后因素无明显关系。 (5 )CD3 4 、CD90 及CD13 3 阳性组的完全缓解率及总反应率低于阴性组 ,但仅有CD3 4 /CD13 3 双阳性组完全缓解率低于双阴性组差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论     

胃粘膜肠上皮化生CST—π的表达及其与H.pylori相关性研究

目的：探讨GST－π在胃癌发生过程中表达，及在肠化阶段在GST－π为代表的人体对致癌物解毒系统与H.pylori致毒作用间的相互作用。方法：利用S－P法对219例胃粘膜活检标本进行GST－π单克隆抗体的检测；利用HID－AbpH2.5-PAS粘蛋白组化学技术对171例肠化粘膜进行分型；利用HE及H.pylori-DNA PCR及ELISA方法对正常胃粘膜和肠化粘膜进行H.pylori的检测。对80例H.pylori阳性患进行H.pyrori根除治疗三个月后进行H.pylori、GST－π的检测。结果：正常胃粘膜未见GST－π的表达，肠化粘膜GST－π阳性率为69．5％，胃癌GST－π阳性率为44．4％，高于正常胃粘膜（P＜0．01），低于肠化粘膜（P＜0．05）。H.pylori阴性组SGT－π阳性率高于H.pylori阳性组（P＜0．05）。H.pylori根除治疗后，根除组GST－π表达高于未根除组（P＜0．05）。结论：正常胃粘膜→肠化粘膜→胃癌组织GST－π表达由无→高→低，GST－π弱阳性或阴性的Ⅲ型肠化与胃癌关系密切；肠化粘膜中GST－π弱阳性或阴性表达如合并H.pylori感染，胃癌发生的危险性增加，提示在肠化阶段H.pylori的致毒作用与机体对致癌物的解毒作用彼此相互拮抗。     

MDR1在急性髓系白血病中的表达及其与预后的关系

目的检测初诊未治急性髓系白血病（AML）患者化疗前后骨髓单个核细胞多药耐药基因1（MDR1）的表达水平,探讨MDR1的表达对AML预后的评价作用。方法采用直接免疫荧光标记单抗流式细胞仪检测40例AML患者化疗前后血清及对照组血清MDR1的表达。结果实验组通透性糖蛋白（P．gP）阳性者的完全缓解（CR）率及CR持续时间均低于P—gp阴性者（P均〈0．01）;与对照组比较,实验组治疗前及治疗后未缓解患者P-gP均升高,治疗后未缓解者高于治疗前（P均〈0．01）;在各型白血病中,M3的P—gP表达最低,与其他亚型比较有统计学差异（P〈0．05）。性别、年龄、骨髓中白血病细胞比例对P-gP水平没有明显影响。结论P-gP可作为AML的独立预后因素。     

急性髓系白血病患者中期因子基因表达与化疗耐药及预后的关系

目的：探讨中期因子（Midkine，MK）与急性髓系白血病（AML）患者预后的关系。方法：采用半定量逆转录一聚合酶链反应方法检测65例初治及复发AML患者、15例缓解期患者及15例正常人骨髓单个核细胞（MNCs）MK、mdr-1、bcl-2mRNA的表达，并采用蛋白印迹（Westernblot）法检测20例AML患者和5例正常人MNCs孵育24h后，培养基中MK的蛋白表达。结果：65例初治及复发AML患者中25例MK基因表达阳性，15例正常人MK基因表达均阴性。MK基因表达阳性患者的完全缓解（CR）率明显低于表达阴性者（分别为63．16％和93．55％，P〈0．05）；MK基因表达阳性患者的复发率（100％）明显高于表达阴性者（40．00％），P〈0．05。MK与bcl-2基因表达呈正相关（r=0．556，P〈O．01）。结论：AML患者白血病细胞可以产生MK，且MK阳性率的高低与AML病期相关，MK过度表达可能导致临床化疗耐药，是影响AML患者近期预后的重要因素之一。     

急性白血病细胞G-CSF、GM-CSF受体的检测及其临床意义

目的：研究急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞表面粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）与粒-巨噬细胞集落刺激因子受体（GMCSFR）的表达规律。观察重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）在AL中应用的临床疗效。方法：采用流式细胞术检测15例正常对照和86例AL患者G-CSFR、GM—CSFR的表达率。观察rhG-CSF的应用对AL治疗的影响。结果：急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者G-CSFR、GM—CSFR的表达率明显高于急性淋巴细胞白血病（ALL）（P〈0．01），均低于对照组。AL患者G-CSFR与GMCSFR表达率无相关性（rs=0．127，P〉0．20）；ANLL患者，G-CSFR表达率与CD13、MPO表达率呈正相关（P〈0．01），与CD33表达率呈负相关（P〈0．01），GM-CSFR表达率与HLA-DR表达率呈正相关（P〈0．01）。ALL患者。GM—CSFR的表达率与CD19的表达率呈正相关（P〈0．01）。应用rhG-CSF能减少AL患者中性粒细胞缺乏及发热的天数，但对缓解率无影响。结论：G-CSFR、GM—CSFR．的表达率在ANLL与ALL中有差异，两者的表达无相关性，在化疗过程中及化疗后应用rhG-CSF对AL的缓解率无显著影响。     

慢性髓细胞白血病急变期形态学及免疫学和细胞遗传学特征研究

目的：探讨慢性髓细胞白血病急变期（CML－BC）的形态学、免疫表型和细胞遗传学法及流式细胞仪进行细胞免疫分型,细胞遗传滂采用直接法或短期培养法制备染色体标本,采用R显带技术进行核型分析。结果：免疫分型结果显示：急变为急性髓细胞白血病（AML）23例占74．2％;急性淋巴细胞白血病（ALL）5例占16．1％,均为B系ALL,其中4例同时伴有髓系表达;急性未分化细胞白血病1例,B系和髓系急性混合细胞白血病（AMLL）2例。31例CML－BC中21例（67．7％）的急变患者CD34^ ,其中4／5（80．0％）ALL,15／23（65。2％）,2／2AMLL均为CD34^ 。AML急变患者中具有CD7和CD34共表达者为8／23（占34．8％）。细胞遗传学分析表明,14／27（51．9％）和急变期患者出现Ph染色体以外的附加核型异常,其中有＋8（3／14）,＋Ph(3/14),i(17q)(2/14),Y染色体丢失（1／14）及复杂易位5／14）。结论：CML－BC是一干细胞疾病,原始细胞分化阻滞在早期阶段,故预后差。MIC分型在CML－BC诊断,预后判断及指导治疗方面均有重要价值。     

凋亡抑制蛋白survivin在白血病细胞中的表达及其意义

目的探讨白血病原代细胞中凋亡抑制蛋白survivin基因的表达情况,及其与疗效的关系.方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测45例白血病患者和10例健康人骨髓中survivin的表达水平,并给与合适的方式化疗,评判疗效.结果白血病细胞中survivin mRNA 阳性率为68.9%（31/45）.急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞中survivin mRNA表达阳性率为73.3%,较急性髓系白血病（AML）的63.6%稍高;慢性粒细胞白血病（CML）患者中survivin mRNA 表达率很高,可达80.0%,慢性淋巴细胞白血病（CLL）中则为66.7%,但均高于正常对照组的20.0%（P＜0.05）.在22例AML患者中,survivin mRNA表达阴性者接受2个疗程化疗后缓解率（CR）87.5%,明显高于表达阳性患者的64.3%.在15例ALL患者中也有类似的结果,CR分别为100%和81.8%.CML患者中,survivin mRNA阳性的4例中有2例两年内发生急变;CLL患者病情均较稳定.结论survivin基因在白血病细胞中有较高的表达,并与疗效及预后有密切的关系.     

粒细胞集落刺激因子受体在急性白血病中的表达及临床意义

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)受体在急性白血病(AL)中的表达及临床意义。方法:选用G-CSF受体单抗,采用流式细胞技术检测G-CSF受体在AL中的表达情况。同时制备骨髓单个核细胞(MNC)悬液,并分别加入不同浓度的G-CSF(10μg/L,15μg/L,20μg/L,25μg/L),培养24、48、72h后计数MNC数。结果:G-CSF受体的表达率:急性髓系白血病(AML)初诊为(76.5±12.8)%,急性淋巴细胞白血病(ALL)初诊为(6.12±1.98)%,二者比较P<0.05。骨髓MNC培养24、48、72h后的计数在初诊AML随着G-CSF浓度的增加有上升趋势;在缓解的AML及初诊、缓解的ALL则无此变化。结论:G-CSF受体主要表达于AML细胞,并促进其增殖,不表达于ALL细胞,不促进其增殖。     

急性髓系白血病H-ras表达和点突变─流式细胞术和聚合酶链反应比较研究

目的：了解急性髓系白血病细胞H－rasP21表达与点突变的相关性，以及免疫组化法的临床实用价值。方法：用流式细胞术（FCM）分析67例初治急性髓系白血病（AML）H－rasp21表达；对所有P21阳性和部分P21阴性者作聚合酶链反应（PCR），观察H－ras15位密码子点突变。结果：67例AMLFCMP21阳性者45例（67．2％），P21阴性者22例（32．8％）。P21阳性45例中高表达者22例（48．9％），16例（72．7％）检出H－ras15位密码子点突变，11例（50％）完全缓解（CR）。10例P21阴性和23例P21＋低表达均无H－ras15位密码子点突变，CR率分别为77．2％和87．2％。结论：FCMP21高表达者常有H－ras15位密码子点突变，CR低，H－ras点突变与免疫组化P21＋高表达相关良好，提示AML转归不良。     

p15蛋白表达及其基因甲基化对急性白血病预后的影响

观察53例急性白血病患者(观察组,其中ALL22例,AML31例;完全缓解者16例,初治者23例,复发者14例)。骨髓单个核细胞p15蛋白表达情况及p15基因甲基化情况,并与5例缺铁性贫血患者进行比较,随访治疗效果及其预后。p15蛋白阳性表达率为ALL 31.8%,AML 29.0%;p15基因甲基化阳性率为ALL59.1%,AML 58.1%,明显高于对照组(均呈阴性),P均<0.01。阳性率完全缓解者>初发者>复发者;p15甲基化完全缓解者<初发者<复发者。相关分析显示p15蛋白与p15基因甲基化呈明显负相关,二者与疗效均有相关性。认为p15基因甲基化与p15蛋白失活关系密切;p15蛋白表达及p15基因甲基化情况可预测急性白血病的疗效及预后。     

交叉表达淋系和髓系相关抗原的急性白血病的生物学及临床特征研究

目的：探讨交叉表达淋系和髓系相关抗原的急性白血病患者的生物学与临床特征及预后。方法：用流式细胞术检测白血病细胞的免疫表型，根据FAB亚型和免疫标记将病例分为6组；CD7表达阳性的急性髓细胞性白血病（CD7^ AML）、CD7表达阴性的伴淋系相关抗原的急性髓细胞性白血病（CD7^-Ly^ AML）、不伴淋系相关抗原的急性髓细胞性白血病（Ly^-AML）、伴髓系相关抗原的急性淋巴细胞性白血病（My^ ALL）、不伴髓系相关抗原的急性淋巴细胞性白血病（My^-ALL）和急性杂翕生白血病（HAL）。结果：CD7^ AML组的白细胞数高于Ly^-AML组及CD7^-Ly^ AML组，诱导缓解率（16.7％）低于Ly^-AML组（71.4％），有显著差异；CD7^-Ly^ AML组与Ly^-AML组分别比较，发病年龄较高，白细胞数较高，贫血较明显，平均缓解期及平均生存期较短。结论：CD7^ AML及CD7^-Ly^ AML具有不同的临床特征，预后较差，可以看作一个独特的临床亚型。HAL与My^ ALL相比较，具有不同的临床特征，应该区别对待。