小檗碱抗小鼠脂多糖性肺损伤的作用机制

目的：探讨小檗碱(Ber)对抗脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法：雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、ALI组和Ber防治组，分别予以双蒸水、Ber(50 mg/kg)灌胃，1次/d，连续3 d，于实验第3 d灌胃后1 h，腹腔注射生理盐水或LPS (20 mg/kg)。测定各组12 h肺湿/干重比值(W/D)，肺泡灌洗液(BALF)中微量总蛋白含量、白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN)总数；观察肺组织病理改变及磷酸化胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)在肺组织中的表达。进一步用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中血栓素B₂(TXB₂)的含量，并测定肺组织丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果：ALI组，LPS 攻击后12 h肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC 及PMN总数显著高于对照组(P<0.05)；病理检查发现肺间质充血、水肿，大量炎性细胞浸润。免疫组织化学观察显示肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显增加；同时，BALF中TXB₂含量、肺组织MDA的含量显著高于对照组(P<0.05)。Ber防治组，肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC及PMN总数均明显低于ALI组；与ALI组比较，Ber防治组肺组织病理损伤明显减轻(P<0.05)；而且，肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显减少 (P<0.05)； BALF中TXB₂含量和肺组织MDA的含量显著低于ALI组。结论：抑制肺组织cPLA₂的磷酸化并对抗脂质过氧化损伤可能是Ber防治小鼠脂多糖性肺损伤的重要机制。     

丹参防治实验性急性肝损伤机制的研究

给Ｗｉｓｔａｒ 大鼠注射硫代乙酰胺、引发肠源性内毒素血症，血浆肿瘤坏死因子－α升主同，进一步介导肝损伤。给丹参煎剂后，发现血浆肿瘤坏死因子－α下，时血浆ＡＬＴ和肝损伤面积减少，与肝损伤组相比有显著性产。     

小檗碱抗肿瘤新生血管形成作用机制的研究

目的：研究小檗碱对bFGF活化人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响，探讨其对肿瘤新生血管形成作用的机制。方法：MTT法检测小檗碱对bFGF活化HUVEC的增殖作用；流式细胞仪检测用药后细胞周期的变化；激光共聚焦扫描显微镜下观察药物对细胞形态、细胞内钙的影响；流式细胞仪检测小檗碱对细胞凋亡的作用。结果：小檗碱能明显抑制bFGF活化的HUVEC增殖，且存在剂量依赖关系；使细胞在G0-G1期的比例明显增多；使细胞核浓缩、甚至裂解成碎块，同时使细胞内钙增多；并诱导活化HUVEC发生细胞凋亡。结论：小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC细胞周期阻滞在G0-G1期，抑制活化HUVEC的增殖：诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制，阻止新生血管形成，发挥其抗肿瘤作用。     

四毒清防治脂多糖性心肌损伤的机制研究

目的:观察中药复方四毒清对LPS引起的心肌损伤以及心肌TNFα和自由基生成的影响,探讨四毒清防治内毒素性心功能障碍的机制。 方法:将小鼠随机分成4组:对照组、LPS组、四毒清防治组和四毒清组,分别用蒸馏水和四毒清(0.2 mL/10 g)灌胃3 d,每天2次,最后1次灌胃后2 h,腹腔注射 LPS(30 mg/kg)或生理盐水(0.2 mL/10 g)。测定小鼠血浆肌酸激酶(CK)、心肌超氧化物歧化酶 (SOD)的活性以及心肌TNFα和丙二醛(MDA)的含量,并观察心肌组织结构和超微结构的改变。 结果:LPS注射后12 h和24 h,小鼠心肌组织出现明显水肿,肌原纤维肿胀、排列稀疏,心肌间质可见少数红细胞;电镜观察显示,心肌细胞核皱缩、染色质边集,部分肌丝断裂,线粒体肿胀。四毒清防治组小鼠心肌病理改变明显轻于LPS组;LPS组小鼠血浆 CK的活性和心肌TNFα含量明显高于对照组和四毒清防治组,心肌SOD活性明显低于四毒清防治组,而心肌 MDA的含量没有显著差别;四毒清组和对照组比较,除心肌MDA含量外,上述其它指标没有明显差别。结论:四毒清能减轻内毒素诱导的心肌损伤,其机制可能与四毒清抑制心肌TNFα生成有关。     

肿瘤坏死因子在肝损伤中的作用及机理

肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-αTNF—α）是由单核巨噬细胞产生的一种具有广泛生物学活性的多肽介质。它一方面参与机体的免疫防御机能，另一方面则介导休克、炎症反应及组织损伤等病理过程。近年研究发现［1，2］：暴发性肝衰竭病人血清中TNF－α含量明显增高，尤其是合并感染及内毒素（enaotox－in，ET）血症者更高，并且其含量高低与预后相关，故认为TNF-a与暴发性肝衰竭时肝细胞坏死有关。本文就TNF－α在肝损伤中的作用及其机理作一简要综述。一、TNF-α为ET致肝损害的重要介质：关于ET与肝损害关系的研究已持续多…     

小檗碱的药动学

本文综述了小檗碱(Ber)在人、兔、狗、大鼠、小鼠体内的药动学资料。肠胃道对Ber有相当量的吸收,达峰所需时间较短,在体内分布快和广,且在多数组织器官内的药物浓度高于血药浓度,可通过血-胎盘屏障。由于Ber在胆汁内有高浓度分布,似乎存在着肝肠循环。Ber在人体内滞留时间较长。Ber先被脱亚甲基或脱甲基,随后形成硫酸酯排出体外。Beriv主要从尿排出,Berig主要由粪便排出。     

脂多糖诱导地鼠肺泡巨噬细胞中一氧化氮对TNF—α的调节作用

对地鼠肺进行灌洗,利用灌洗液分离纯化出肺泡巨噬细胞（ＡＭ）,并进行培养。脂多糖（ＬＰＳ）刺激后,分 别加入一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂和一氧化氮（ＮＯ）供体,观察ＮＯ和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的变化,探讨ＮＯ 对ＴＮＦ－α的作用关系。结果显示：ＬＰＳ刺激ＡＭ使ＮＯ和ＴＮＦ－α含量均增加（Ｐ＜０．０１）,特异性ｉＮＯＳ抑制剂使活化 的ＡＭ分泌产生ＴＮＦ－α上调,ＮＯ供体可显著抑制ＴＮＦ－α的释放。不同的ＮＯ抑制剂和ＮＯ供体使ＮＯ和ＴＮＦ－α含 量变化不同。提示 ＮＯ和 ＴＮＦ－α是 ＡＭ分泌的炎症细胞因子, ＮＯ对 ＴＮＦ－α存在着调节作用。     

小檗碱对LPS诱导神经元损伤的作用机制研究

为探究小檗碱(berberine, Ber)对LPS诱导的神经元损伤及腺苷一磷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase, AMPK)-mTOR-p70核糖体蛋白S6激酶(ribosomaiprotein S6 kinase, S6K)信号通路的影响,MTT法筛选最佳的Ber处理HT22神经元浓度。将HT22细胞分为NC组、LPS组、Ber+LPS组和AMPK抑制剂Compound C(Com.C)+Ber+LPS组。FACS检测HT22细胞凋亡率;qRT-PCR法检测HT22细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量;DCFH-DA荧光探针检测HT22细胞中活性氧类(reactive oxygen species, ROS)含量;TBA法、比色法和WST-1法分别检测HT22细胞中丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的含量;Weste...     

小檗碱对大鼠全脑缺血后海马的保护作用

本研究室以往曾发现小檗碱具有预防脑缺血短期（７ｄ）再灌流海马ＣＡ１迟发性神经元坏死（ＤＮＤ）的作用。本研究采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ－Ｂｒｉｅｒｌｅｙ四血管阻塞（４ＶＯ）致大鼠全脑缺血模型，观察了小檗碱对脑缺血（２ｍｉｎ）长期再灌流后海马的影响，并对脑缺血经短、长期再灌流对照及用药组大鼠进行了Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫学习记忆能力检测。结果显示，小檗碱能有效的保护海马ＣＡ１区锥体细胞免于脑缺血后ＤＮＤ，经长期（３个月）再灌流后这种保护作用依然存在，细胞密度为１６８个／ｍｍ，占正常８０．５％；对脑缺血经长期再灌流引起的海马ＣＡ２、ＣＡ３、ＣＡ４继发性神经无死亡也有明显的对抗作用。脑缺血短期（１０ｄ）再灌流后，大鼠表现为明显的学习障碍，潜伏期延长，但经多次训练后，大鼠在原平台象限泳距比其它非平台象限都显著长，表明尚有良好的空间记忆能力；脑缺血经长期再灌流后，其空间学习障碍加重、记忆能力也受到严重影响。而用药组缺血大鼠无论短期或长期再灌流后，均保存了良好的空间学习、记忆能力。表明脑缺血经长期再灌流后，海马的形态和学习、记忆能力比短期再灌时将进一步受损害，而小檗碱不但对短期再灌流有保护作用，对长期再灌流的进一步损害也有明显的?     

Cytoprotection by interleukin-6 against liver injury induced by lipopolysaccharide

The role of interleukin (IL)-6 in inflammatory injury remains controversial. The present study elucidated the role of IL-6 in liver damage during severe inflammation induced by intraperitoneal administration of lipopolysaccharide (LPS; 1 mg/kg) using IL-6 null (-/-) mice and corresponding wild-type (WT) mice. Histological study showed that LPS treatment caused more severe liver injury with centrilobular vacuolation of hepatocytes and neutrophilic infiltration in the liver of IL-6 (-/-) mice; in contrast, neutrophilic infiltration and mild vacuolar change of hepatocytes were found in the liver of LPS-treated WT mice. Protein levels of proinflammatory molecules, such as IL-1beta, macrophage inflammatory protein-1alpha, and macrophage chemoattractant protein-1, in the livers were significantly greater in IL-6 (-/-) mice than in WT mice after LPS challenge. These results directly indicate that IL-6 is protective against liver injury induced by bacterial endotoxin, at least partly, via the modulation of proinflammatory cytokines and chemokines.     

Mechanisms underlying acute protection from cardiac ischemia-reperfusion injury

Mitochondria play an important role in cell death and cardioprotection. During ischemia, when ATP is progressively depleted, ion pumps cannot function resulting in a rise in calcium (Ca(2+)), which further accelerates ATP depletion. The rise in Ca(2+) during ischemia and reperfusion leads to mitochondrial Ca(2+) accumulation, particularly during reperfusion when oxygen is reintroduced. Reintroduction of oxygen allows generation of ATP; however, damage to the electron transport chain results in increased mitochondrial generation of reactive oxygen species (ROS). Mitochondrial Ca(2+) overload and increased ROS can result in opening of the mitochondrial permeability transition pore, which further compromises cellular energetics. The resultant low ATP and altered ion homeostasis result in rupture of the plasma membrane and cell death. Mitochondria have long been proposed as central players in cell death, since the mitochondria are central to synthesis of both ATP and ROS and since mitochondrial and cytosolic Ca(2+) overload are key components of cell death. Many cardioprotective mechanisms converge on the mitochondria to reduce cell death. Reducing Ca(2+) overload and reducing ROS have both been reported to reduce ischemic injury. Preconditioning activates a number of signaling pathways that reduce Ca(2+) overload and reduce activation of the mitochondrial permeability transition pore. The mitochondrial targets of cardioprotective signals are discussed in detail.     

亚精胺减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的　观察亚精胺（spermidine）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）的影响。 方法　采用5 mg/kg的LPS经气管滴注,建立ALI小鼠模型。用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;观察亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并检测髓过氧化物酶（MPO）的水平;qPCR检测ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达;ELISA检测ALI小鼠BALF中sTREM-1的蛋白水平。 结果　亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;减少蛋白渗出和中性粒细胞浸润;降低ALI小鼠肺内炎症放大受体TREM-1的表达。 结论　亚精胺能减少炎症细胞浸润,抑制炎症因子表达,从而减轻LPS诱导的ALI,其机制可能与亚精胺可抑制ALI小鼠肺组织TREM-1表达有关。     

亚精胺减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的　观察亚精胺（spermidine）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）的影响。 方法　采用5 mg/kg的LPS经气管滴注,建立ALI小鼠模型。用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;观察亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并检测髓过氧化物酶（MPO）的水平;qPCR检测ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达;ELISA检测ALI小鼠BALF中sTREM-1的蛋白水平。 结果　亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;减少蛋白渗出和中性粒细胞浸润;降低ALI小鼠肺内炎症放大受体TREM-1的表达。 结论　亚精胺能减少炎症细胞浸润,抑制炎症因子表达,从而减轻LPS诱导的ALI,其机制可能与亚精胺可抑制ALI小鼠肺组织TREM-1表达有关。     

甘氨酸对小鼠心肌缺血性损伤的防治作用研究

目的:探讨甘氨酸(GLY)对心肌缺血性损伤的防治作用。方法:预先给予昆明种小鼠20%GLY0.025mL/g灌胃,每日2次,1周后腹腔注射垂体后叶素20U/kg诱导急性心肌缺血;观察心电图的变化及心肌组织一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量。结果:①GLY明显减少缺血心脏的心电图J点的变化幅度;②GLY显著增加心肌组织NOS、SOD的活性,而使心肌组织MDA含量显著降低。结论:GLY有预防缺血性损伤,保护心脏的作用,其机制可能与增加NOS、SOD活性和减少MDA含量有关。     

淫羊藿苷对ConA诱导的小鼠肝脏损伤保护机理的研究

目的:利用刀豆蛋白A(ConA)诱导建立小鼠肝炎模型,观察淫羊藿苷对该损伤模型保护作用的细胞免疫学和分子免疫学机制。方法:采用C57BL/6雄性小鼠,随机分为淫羊藿苷+ConA组、生理盐水+ConA组、淫羊藿苷+生理盐水组。小鼠尾静脉注射ConA,建立T细胞介导的免疫性肝脏损伤模型;采用转氨酶试剂盒测定各组小鼠血液中转氨酶含量;组织病理学观察实验小鼠肝脏组织和肝细胞坏死变化;采用ELISA试剂盒测定血清中炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α含量;流式细胞术观察注射ConA后肝脏淋巴细胞的活化变化。结果:与ConA对照组相比,淫羊藿苷干预组小鼠血液中ALT和AST水平明显降低,P<0.01;IFN-γ、TNF-α含量明显降低,P<0.05;H&E染色可见淫羊藿苷干预组小鼠肝细胞核完整,未见炎性细胞的浸润,而ConA对照组小鼠肝细胞核固缩,部分核膜破裂,肝组织内有炎症细胞和红细胞浸润;流式细胞技术发现淫羊藿苷可明显延缓由ConA引起的肝脏NKT细胞的活化,减弱T细胞的浸润。结论:淫羊藿苷对ConA诱导的小鼠肝脏损伤有明显的保护作用,其机理可能与淫羊藿苷降低血液中IFN-γ、TNF-α表达及影响肝脏NKT细胞的活化有关。     

丹酚酸B对脂多糖诱导许旺细胞损伤的保护作用机制

背景：丹酚酸B是中药丹参的有效单体成分,近年已被证实有保护神经、促进神经损伤恢复的作用,但其机制尚未清楚。 目的：探讨丹酚酸B对脊髓损伤大鼠许旺细胞的保护机制。 方法：实验分为正常组、模型组、10 μmol/L甲强龙组、丹酚酸B组(0.1,1,10,100 μmol/L)。除正常组外,其他3组建立脂多糖诱导建立许旺细胞损伤模型,后2组进行对应的药物干预。以此观察丹酚酸B对脊髓损伤大鼠许旺细胞生长曲线、增殖活性、β-catenin和核因子κB蛋白与基因的表达情况。 结果与结论：干预48,72,96 h,模型组细胞活性与正常组比较显著减低(P < 0.01),与模型组比较,干预72,96 h,丹酚酸B组(10 μmol/L)细胞活性较模型组显著升高(P < 0.05)。干预72 h时,与模型组比较,甲强龙组和丹酚酸B组许旺细胞核因子κB mRNA和蛋白表达显著降低(P < 0.01),丹酚酸B组β-catenin mRNA和蛋白表达显著升高(P < 0.05)。说明丹酚酸B能够改善脂多糖刺激的大鼠许旺细胞活性损伤;同时抑制脂多糖诱导的大鼠许旺细胞核因子κB基因和蛋白的表达,促进β-catenin基因和蛋白的表达,这可能是其许旺细胞保护作用机制之一。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程