基质金属蛋白酶-2与胃癌的侵袭转移

细胞外基质和基底膜重塑是癌细胞侵袭转移过程中的关键环节,需借助于蛋白降解酶的表达和激活。基质蛋白酶主要有以下数种：丝氨酸蚩白酶类,包括血浆酶原激活剂;半胱氨酸蛋白酶类,包括组织蛋白酶D在内的溶酶体酶;金属蛋白酶类(metalloproteioases)。金属蛋白酶类在肿瘤侵袭过程中的作用近年来倍受关注,大量证据表明基质金属蛋白酶,特别是基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2．MMP-2)在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中起关键作用,临床研究表明,MMP-2活性和表达的增加与人类多种恶性肿瘤侵袭转移潜能及预后密切相关。     

膜型1基质金属蛋白酶在胃癌组织中的表达及意义

已有研究表明 ,膜型 1基质金属蛋白酶 (ｍｅｍｂｒａｎｅ ｔｙｐｅ 1ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,ＭＴ1 ＭＭＰ)在多种肿瘤组织中表达 ,且与它们的侵袭和转移相关[1] 。我们采用免疫组织化学方法检测胃癌组织中ＭＴ1 ＭＭＰ的表达 ,探讨其表达特点、组织定位及临床意义。资料与方法1.一般资料 :收集我院 1998年 1月至 1999年 10月胃癌标本 4 7例 ,男女比例为 1∶4 9,年龄 2 9～ 86岁 ,平均 5 7 6岁 ,肿瘤大小以其直径的中位数 5 5ｃｍ为界 ,每例均做常规病理检查。2 .免疫组织化学检测 :按美国Ｚｙｍｅｄ公司试剂盒Ｓ…     

胃癌淋巴结微转移与基质金属蛋白酶-2表达的关系

目的检测基质金属蛋白酶（MMP）-2在胃癌组织中的表达及探讨其与淋巴结微转移的关系。方法对30例胃癌共850枚淋巴结采用CK-20mRNA RT-PCR扩增检测微转移，采用免疫组织化学染色检测该30例胃癌组织中MMP-2的表达情况。结果70％的胃癌组织MMP-2表达阳性；MMP-2表达与浸润深度、淋巴结转移和分化程度密切相关（P〈0．05），但与性别、年龄、肿瘤位置、直径、Lauren分型及淋巴管侵犯无明显相关（P〉0．05）；14例77枚淋巴结检出微转移；85.7％检测出淋巴结微转移的癌组织MMP-2表达阳性，高于未检测出淋巴结微转移的癌组织的56.3％。结论MMP-2表达与胃癌侵袭、转移和分化程度密切相关。MMP-2表达阳性可能参与淋巴结微转移的发生。     

基质金属蛋白酶MMP9和MMP2与胃癌转移的关系

基质金属蛋白(ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,ＭＭＰ)家族成员中的ＭＭＰ9和ＭＭＰ2能有效的分解基底膜的主要成分ＩＶ型胶原蛋白[1],两者的过度表达与人类某些恶性肿瘤的转移密切相关[2,3]。本实验采用免疫组织化学方法对ＭＭＰ9和ＭＭＰ2在胃癌中的表达进行了研究,旨在探讨其与胃癌转移的相关性。一、材料与方法1.材料来源:随机选取1995～1997年我科手术切除的胃癌标本36例,其中男25例,女11例。年龄45～67岁,平均605岁。淋巴结转移组22例,无淋巴结转移组14例(经病理诊断证实)。按Ｌａｕｒｒｅｎ分型法分为:肠型20例,弥…     

血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-2在胃癌中的表达及其在浸润和转移中的作用

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在胃癌发展、浸润和转移中的作用。方法应用免疫组织化学法检测42例胃良性病变和52例胃癌组织中VEGF和MMP-2表达情况。结果VEGF随胃癌的发展阳性率逐渐增高(P<0.05),浸及浆膜层组VEGF阳性率显著高于未浸及浆膜层组(P<0.05);淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组(P<0.05);MMP-2随胃癌的发展阳性率逐渐增高(P<0.05),浸及浆膜层组MMP-2表达率高于未侵及浆膜组(P<0.05),淋巴结转移组MMP-2表达率显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)。VEGF和MMP-2表达关系密切(P<0.05)。结论VEGF和MMP-2均参与胃癌的发展、浸润和转移,可作为了解胃癌的生物学行为和判断预后的指标。     

胃癌中MMP-2表达与TNM分期和淋巴结转移的相关性研究

目的研究胃癌组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达与胃癌TNM分期和淋巴结转移的关系.方法用免疫组织化学半定量方法检测135例胃癌组织中MMP-2的表达,统计分析其与TNM分期等的相关性.结果MMP-2的表达与WHO、Lauren和Ming病理分型和淋巴结转移有相关性(P＜0.05),而与Borrmann病理分型、TNM分期中的远处转移(M)、癌组织浸润深度以及分化程度无相关性(P>0.05).本组中的早期胃癌28例,有9例表达MMP-2,其中7例伴有淋巴结转移,占早期胃癌伴淋巴结转移者8例中的87.5%.结论胃癌细胞表达MMP-2与肿瘤的浸润性生长方式和淋巴结转移密切相关;检测MMP-2可作为术前预测早期胃癌有无淋巴结转移和判断预后的辅助指标.     

MMP-2、MMP-9在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及其与预后的关系.方法：采用免疫组化方法检测54例GIST组织中的MMP-2、MMP-9的表达,分析与各病理参数的关系.结果：肿瘤组织中的MMP-2、MMP-9阳性率分别为85.2%、83.3%,并随着GIST恶性程度的增高,其表达均出现递增趋势,差异有显著性意义（P＜0.05）;与肿瘤良恶性、生长方式、肿瘤大小、肿瘤中心有无坏死亦有明显关系（P＜0.01）.单因素分析MMP-2、MMP-9阳性表达的患者有较高的5年生存率,多因素分析发现MMP-2、MMP-9共表达能独立预测患者的5年生存率.结论：MMP-2、MMP-9在GIST中的表达率可以作为判断GIST性质、恶性程度、转移及预后的客观指标.     

胃癌组织CD44v6、COX-2、MMP-2表达及其与淋巴结转移的关系

目的研究胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的表达及其与胃癌淋巴结转移的关系。方法用免疫组化方法检测胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的表达情况，并分析其表达与胃癌淋巴结转移的关系。结果60例胃癌组织中，CD44v6、COX-2和MMP-2表达阳性率分别为61．7％（37／60），55．0％（33／60）和73，3％（44／60）。胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的表达与淋巴结转移密切相关。结论胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的表达与胃癌淋巴结转移密切相关，提示CD44v6、COX-2、MMP-2可作为判断胃癌预后的指标。     

MMP-1和MMP-2在肝纤维化组织中的表达和意义

目的:探讨MMP-1和MMP-2在肝纤维化组织中的作用及其机制。方法:应用免疫组化法并用图像分析技术定量检测28例手术切除的肝纤维化组织标本中MMP-1和MMP-2的表达。结果:正常肝组织与肝纤维化组织MMP-1表达无显著性差异(P>0.05),而MMP-2的表达在肝纤维化组织中明显高于正常肝组织(P<0.01)。结论:MMP-1和MMP-2可能在肝纤维化的发生和发展中有重要作用。     

基质金属蛋白酶(MMP)9、MMP2 mRNA及基质金属蛋白酶抑制剂2 mRNA在人膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨膀胱移行细胞癌中基质金属蛋白酶（MMP）9、MMP2及基质金属蛋白酶抑制剂2（TIMP2）mRNA表达与膀胱肿瘤恶性程度和侵袭性之间的关系及其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测36例膀胱移行细胞癌及5例正常膀胱组织MMP9、MMP2、TIMP2mRNA的表达。结果MMP9、MMP2mRNA随着肿瘤分级分期的增高，表达明显增强[x^-值（MMP9）G1：1．218，G2：1．681，G3：1．811；T2～T4：1．840，Tis～T1：1．399；P〈0．01；（MMP2）G1：1．323，G2：1．694，G3：2．060；T2～T4：1．950，Tis-T1：1．505；P〈0．01]，且明显高于正常膀胱组织中的表达[互值（MMP9）0．455，（MMP2）0．461；P〈0．01]。TIMP2mRNA随肿瘤分级的增高而明显减少（x^-值：G1：1．489，G2：1．391，G3；0．580；P〈0．01）。结论（1）MMP9、MMP2mRNA的高表达与BTCC的恶性程度呈正相关；（2）TIMP2mRNA的表达与BTCC的恶性程度呈负相关。     

肝细胞肝癌中Wnt5a基因的表达及其临床意义

目的 探讨Wnt5a基因mRNA及其蛋白在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达规律及其临床意义.方法 应用实时定量RT-PCR方法 检测22例HCC癌和癌旁配对组织中Wnt5a基因mRNA表达,采用免疫组织化学(ABC)法检测76例Wnt5a蛋白的表达情况,结合病人的临床病理资料分析Wnt5a基因在HCC中的表达意义.结果 对比癌旁肝组织,68%(15/22)的肝癌组织Wnt5a基因mRNA呈上调表达(P=0.038);而80.3%(61/76)的HCC癌组织Wnt5a蛋白显示低或阴性表达(P<0.001),Wnt5a蛋白低表达与病人的性别、肿瘤的大小、肿瘤的分化程度、HBsAg、以及有无肝硬化无关(P>0.05),而与高的甲胎蛋白水平(AFP,P=0.020)和差的肿瘤分期有关(P<0.001).结论 Wnt5蛋白缺失表达是HCC进展中的频发事件,Wnt5a在HCC肿瘤发生过程中可能发挥肿瘤抑制基因活性,该蛋白极可能是一个有用的HCC预后不良指标.     

Wnt5a基因在骨关节炎中作用机制的研究进展

骨关节炎（osteoarthritis, OA）是由于关节软骨退变丢失导致的一种临床常见慢性退行性疾病,给患者及国家带来沉重医疗负担,对其机制深入研究有利于临床加强对OA的治疗。近年研究发现,无翅型MMTV整合位点家族成员5A（Wnt5a）基因在OA的发病及进展中有重要作用,其可以影响OA的独立发病因素如衰老、代谢所致肥胖、创伤等参与OA的发病,并可以通过经典（Wnt/β-catenin）及非经典（Wnt/Ca2+和Wnt/Planar polarity等）Wnt通路参与OA的调控。本文就Wnt5a基因在OA中的作用及机制作一综述,为相关研究提供便利。     

Wnt5a在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的：探讨Wnt5a在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达及意义。 方法：收集术后病理确诊为PTC的患者石蜡标本47例,包括癌组织及癌旁组织,以及手术切除的PTC新鲜标本及其癌旁组织10例。分别采用免疫组化法及real-time PCR检测Wnt5a在PTC及癌旁组织中的表达。 结果：47例患者的石蜡标本中,PTC及癌旁组织中,Wnt5a在PTC组织的阳性表达率为68.09%（32/47）,在癌旁甲状腺组织为6.38%（3/47）,两者间差异有统计学意义（P<0.01）;统计分析显示,Wnt5a的表达与患者的性别及年龄无关（均P>0.05）,而与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移有关（P<0.05或P<0.01）。10例手术标本检测显示,PTC中Wnt5a mRNA的表达明显高于其的癌旁甲状腺组织（6.43±1.38 vs. 1.12±0.59,P<0.01）。 结论：PTC组织中Wnt5a表达水平增高,这可能对PTC的发生和发展有着重要的作用。     

胃癌原发灶中上皮间质转化相关因子和CD133的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的研究上皮间质转化（EMT）相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与胃癌患者临床病理特征、预后及胃癌肿瘤起始细胞表面标志物CD133表达的关系。方法利用Western blot方法检测50例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中EMT相关因子及CD133蛋白的定位及定量表达,分析EMT相关因子及CD133蛋白表达与胃癌患者的临床病理学指标的关系,Spearman等级相关分析EMT相关因子和CD133表达的关系,Kaplan-Meier方法分析EMT相关因子及CD133表达与胃癌患者生存的关系。结果①胃癌组织中Snail、N-cadherin及CD133蛋白表达相对灰度值明显高于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达（Snail：0.599±0.114比0.259±0.108,P=0.020;N-cadherin：0.754±0.154比0.329±0.134,P=0.001;CD133：0.635±0.119比0.485±0.116,P=0.029）,E-cadherin蛋白表达相对灰度值明显低于其在癌旁正常胃黏膜组织中的表达（0.378±0.123比0.752±0.156,P=0.003）。②Snail蛋白、N-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达明显高于无血管浸润、淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移及肿瘤直径〈5 cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）,而E-cadherin蛋白表达平均相对灰度值在有血管浸润、淋巴管浸润、N3淋巴结转移及Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达显著低于无血管浸润、淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移及Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）,CD133蛋白表达平均相对灰度值在有淋巴管浸润、N3淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表达显著高于无淋巴管浸润、N0～N2淋巴结转移、肿瘤直径〈5 cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P〈0.05）。③Snail、N-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达分别均呈正相关（rs=0.278,P=0.048;rs=0.406,P=0.003）,而E-cadherin蛋白表达与CD133蛋白表达呈负相关（rs=-0.504,P=0.000）。④Snail、N-cadherin及CD133蛋白低表达组的生存时间明显长于其高表达者（P〈0.05）,联合EMT相关因子和CD133蛋白表达能够最有效预测患者生存。结论EMT与胃癌肿瘤起始细胞特性之间存在明显相关,并且两者与胃癌的高侵袭的临床病理特征相关,联合EMT相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin与CD133能够最有效预测胃癌患者的预后。     

Wnt7a regulates high autophagic and inflammatory response of epidermis in high-glucose environment

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is an important reason to cause chronic wound healing or even amputation to patients. A common characteristic of T2DM is the presence of hyperglycemia. Autophagy, a cellular pathway which related to protein and organelle degradation, is relevant to many types of cellular homeostasis change and human diseases including diabetes. However, the relationship between high glucose and autophagy in keratinocytes remains unclear. Previously in our research, wnt7a was proved to accelerate healing process by promoting angiogenesis and ameliorating local inflammation, while little is known about its role in epithelial cells, namely keratinocytes. We hypothesized that reduced expression of wnt7a may contribute to the increment of autophagy. We then compared the expression of autophagic markers such as nlrp3, LC3A/B and bip by high glucose-cultured HaCaT cells, with or without wnt7a treatment. Then we examined the expression levels of TNF-α, TLR-4 and p62 to assess inflammatory statement. High glucose induced a significant increasement in the expression of both autophagic markers and inflammatory markers and these elevated protein levels were reversed after the use of wnt7a. Therefore, these results showed that wnt7a regulates overwhelmed autophagy and inflammation promoted under high glucose condition.     

巨噬细胞过表达Wnt5a对其炎性反应及共培养体系中MSCs成软骨分化的影响研究

目的 :通过构建和比较经Wnt5a基因修饰的巨噬细胞分别与骨髓干细胞(MSCs)2D单层贴壁与骨髓液跨小室共培养模型,旨在探索Wnt5a信号通过调控巨噬细胞炎症反应对MSCs成软骨分化产生的影响。方法:自2015年9月至2018年12月收集6例重度膝关节骨关节炎拟行全膝关节置换术者的巨噬细胞、MSCs和骨髓液,其中男2例,女4例;年龄58～71岁。膝关节囊滑膜组织常规消化取得单细胞,经反复贴壁并行Ficoll液密度梯度离心和抗CD14抗体流式细胞术测定巨噬细胞纯度。将上述经鉴定的巨噬细胞置于IFN-γ联合TNF-α刺激48 h后,再使用重组腺相关病毒(rAAV)-lacZ或Wnt5a转染24 h,分别与MSCs 2D单层贴壁或骨髓液构建跨小室共培养模型,采用HE染色、软骨特殊染色、X-gal染色、抗Wnt5a、抗Ⅱ和X型胶原免疫组化染色对细胞形态与增殖能力、病毒转染效率和成软骨分化能力等进行检测。结果:抗CD68免疫组化显示骨关节炎患者滑膜组织巨噬细胞明显增多。抗CD14流式细胞术证实经分离的滑膜巨噬细胞纯度为90.31%,IFN-γ联合TNF-α刺激后发现上清液中单核细胞趋化素蛋白-1(MCP-1)水平明显升高,提示巨噬细胞被激活;rAAV-lacZ转染3 d后,X-gal染色发现其能有效转染巨噬细胞,效率高达97.50%,且至少持续21 d;rAAV-Wnt5a转染巨噬细胞后通过刺激其Wnt5a的表达,而增加两种模型中的Wnt5a表达,抑制MCP-1的分泌,两种模型中Wnt5a组MCP-1表达量分别为14.76和61.51 pg/ml;此外,rAAV-Wnt5a转染后能促进细胞增殖及成软骨分化、软骨基质合成。结论:在巨噬细胞与MSCs 2D单层贴壁或骨髓液跨小室共培养条件下,r AAV介导的Wnt5a过表达能通过影响巨噬细胞炎症反应而促进软骨稳态的维持以及MSCs成软骨分化,巨噬细胞可能通过Wnt5a信号影响软骨稳态与MSCs成软骨分化。     

Mice Lacking Wnt9a or Wnt4 Are Prone to Develop Spontaneous Osteoarthritis With Age and Display Alteration in Either the Trabecular or Cortical Bone Compartment

Osteoarthritis (OA) is a common degenerative disease of the joint, with a complex multifactorial not yet fully understood etiology. Over the past years, the Wnt signaling pathway has been implicated in osteoarthritis. In a recent genomewide association study (GWAS), the chromosomal location on chromosome 1, linked to the Wnt3a-Wnt9a gene locus, was identified as the most significant locus associated with a thumb osteoarthritis endophenotype. Previously, it was shown that WNT9a is involved in maintaining synovial cell identity in the elbow joint during embryogenesis. Here, we report that the conditional loss of Wnt9a in the Prx1-Cre expressing limb mesenchyme or Prg4-CreER expressing cells predispositions the mice to develop spontaneous OA-like changes with age. In addition, the trabecular bone volume is altered in these mice. Similarly, mice with a conditional loss of Wnt4 in the limb mesenchyme are also more prone to develop spontaneously OA-like joint alterations with age. These mice display additional alterations in their cortical bone. The combined loss of Wnt9a and Wnt4 increased the likelihood of the mice developing osteoarthritis-like changes and enhanced disease severity in the affected mice. © 2022 The Authors. Journal of Bone and Mineral Research published by Wiley Periodicals LLC on behalf of American Society for Bone and Mineral Research (ASBMR).