番茄红素对大鼠心肌梗死后心功能及心肌细胞凋亡的影响

目的:观察番茄红素对大鼠心肌梗死后心功能及心肌细胞凋亡的影响。方法:通过结扎大鼠冠状动脉前降支制备心肌梗死模型,分别给予番茄红素及生理盐水灌胃。28d后行心脏超声及血流动力学检测心功能,Tunel染色检测心肌细胞凋亡,Western blot法检测梗死周边Caspase-3蛋白表达。结果:心梗后,LVEF、FS、LVESP、-dP/dt、+dP/dt显著降低(P<0.05),LVEDD、LVESD、LVEDP显著升高(P<0.05),心肌细胞凋亡指数显著上升(P<0.05),梗死周边区Caspase-3蛋白表达水平显著上调。与心梗对照组相比,番茄红素治疗组LVEF、FS、LVESP、-dP/dt、+dP/dt显著升高(P<0.05),LVEDD、LVESD、LVEDP显著降低(P<0.05),心肌细胞凋亡指数显著下降(P<0.05),梗死周边区Caspase-3蛋白表达水平下调。结论:番茄红素可能通过抑制心梗后心肌细胞凋亡逆转心室重构,从而改善心功能。     

针对链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠合并心肌梗死模型指标的分析研究

【目的】在建立链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠心肌梗死模型的基础上,进行心脏梗死区和梗死周边区指标分析,探讨糖尿病合并心肌梗死的病理过程。【方法】选用C57/B6雄性小鼠,采用腹腔注射STZ(剂量为45mg·kg-1·d-1)法复制糖尿病模型,并在糖尿病模型造模成功第7周实施心肌梗死手术,结扎冠状动脉左前降支复制STZ诱导糖尿病合并心肌梗死模型。在术后检测心脏梗死区和梗死周边区指标改变,探讨糖尿病心肌梗死小鼠的病理过程。【结果】与心肌梗死组比较,在术后第4天,糖尿病心肌梗死组梗死周边区细胞凋亡显著增加(P0.01);第21天,糖尿病心肌梗死组的梗死周边区毛细血管密度显著减少(P0.01),梗死纤维化比例显著增加(P0.01);第49天,糖尿病心肌梗死组梗死面积显著增加(P0.01)。在术后第4天,糖尿病心肌梗死组梗死周边区氧化应激显著增加(P0.05)。【结论】对STZ诱导糖尿病合并心肌梗死模型小鼠进行心脏梗死区和梗死周边区指标分析,可为深入研究临床上糖尿病合并心肌梗死并发症的病理生理机制和治疗方案提供模型基础。     

心肌纤维化大鼠Intermedin1-53及其受体的变化

目的 在大鼠心肌梗死致心肌纤维化模型上观察Intermedin1-53及其受体的变化.方法 通过结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,4周后检测心功能,梗死区心肌组织的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,IMD1-53和心室肌降钙素受体样受体(CL)、受体活性修饰蛋白(RAMP)1/2/3的mRNA表达.结果 与假手术组比较模型组大鼠的心功能明显减低,检测梗死区心肌组织的Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白表达增加,心室肌IMD1-53、CL、RAMP1/2/3的mRNA水平分别上调75%(P＜0.01)、57%(P＜0.05)、61%(P＜0.01)、48%(P＜0.05)和80%(P＜0.05).结论 心肌纤维化大鼠的心肌IMD1-53及其受体明显上调,其变化可能参与心肌纤维化的发病过程.     

电刺激小脑顶核减少心肌梗死后大鼠心肌梗死面积

目的 探讨急性心肌梗死发生后再予以FNS是否对缺血心肌具有保护作用.方法 将大鼠随机分为4组:①AMI组,仅结扎左冠状动脉前降支(LAD);②FNS组,预先LAD结扎后予以FNS 1 h;③小脑顶核毁损组(FNL组),预先毁损小脑顶核5 d后再行LAD结扎,随后FNS 1 h;④假手术组.LAD结扎后24 h,应用RT-PCR法测定左心室梗死区IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达;应用化学法测定心肌梗死面积,以及心肌组织丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物岐化酶(SOD)活性.结果 与AMI组比较,FNS组心肌梗死面积显著减少(P<0.05),梗死区IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达亦显著减少(P<0.05).与假手术组比较,AMI组和FNL组梗死心肌MDA含量明显增加(P<0.01),而TAOC及SOD活性显著下降(P<0.01);与AMI组比较,FNS组大鼠梗死心肌MDA含量明显减少(P<0.05),TAOC及SOD活性显著增加(P<0.05).FNL组与AMI组间以上指标比较无统计学差异(P>0.05).结论 FNS可减少大鼠心肌梗死后的心肌损伤;这一保护作用机制,可能与其下调心肌梗死区IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达,调节氧化-抗氧化成分的平衡有关.     

PPARγ上调大鼠心肌细胞中miR-148b表达不依赖于转录水平

目的:探讨PPARγ是否能上调大鼠心肌细胞中miR-148b表达,以及PPARγ上调miR-148b表达是否依赖于转录水平。方法:利用吡格列酮刺激大鼠H9C2心肌细胞PPARγ激动,应用GW9662特异性拮抗大鼠心肌细胞PPARγ激动。采用Real-time PCR法检测大鼠H9C2心肌细胞中miR-148b表达水平;利用生物信息学方法分析miR-148b启动子区域的PPARγ结合位点;应用染色质免疫共沉淀法(ChIP)验证PPARγ是否与miR-148b启动子结合。结果:吡格列酮剂量依赖性上调miR-148b表达(P<0.01);吡格列酮上调miRs-148b表达后,给予PPARγ特异性拮抗剂GW9662,上调的miR-148b表达降至对照水平(P<0.01);生物信息学预测miR-148b启动子区域存在PPARγ的两个结合位点;应用ChIP实验验证转录因子PPARγ不能与miR-148b启动子区域的两个预测结合位点结合。结论:PPARγ上调大鼠心肌细胞中miR-148b表达,但调控不依赖于转录水平。     

人参皂苷Rg1对急性心肌梗死大鼠血管新生的作用

目的:研究人参皂苷Rg1对急性心肌梗死(AMI)大鼠血管新生的影响及其机制。方法:建立Wistar大鼠急性心肌梗死模型,分假手术组、急性心肌梗死对照组、人参皂苷Rg1低剂量治疗组(1mg/kg)和高剂量治疗组(5mg/kg),于术后3,7,10,14d测定血清心肌酶、心肌梗死面积、梗死区微血管密度,RT-PCR法检测梗死区心肌组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。结果:心肌梗死组织中各时段假手术组的微血管密度、VEGFmRNA表达均低于手术各组(P<0.01);治疗组心肌酶及心肌梗死面积明显降低(P<0.05),梗死区血管生成数量稳定持续增加,与对照组有显著差异(P<0.01);心肌梗死后VEGFmRNA表达随缺血时间的延长(3,7,10d组)有增高趋势,治疗组明显升高(P<0.01),14d时VEGFmRNA的增长出现停止或下降。结论:严重缺血急性期可刺激心肌组织产生大量的VEGF起自我保护作用,人参皂苷Rg1增加其表达,并可刺激心肌梗死区的血管生成。     

基于Notch信号筛选调控心肌纤维化的miRNA

目的筛选调控心肌纤维化的Notch信号相关miRNA。方法分离和培养SD大鼠原代心脏成纤维细胞(CFs),采用转化生长因子-β1(TGF-β1)建立心肌纤维化模型,γ-分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitor,DAPT)抑制Notch信号通路,miRNAs快速检测试剂盒检测miRNA的表达,筛选处理前后差异表达的miRNA。miR-21、miR-23b、miR-140反向序列抑制剂抑制部分差异表达的miRNA,利用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测CFs增殖,实时荧光定量PCR检测波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达。结果通过抑制Notch信号通路筛选出14个可能调控心肌纤维化的Notch信号相关miRNA,其中上调2个,下调12个。miR-21、miR-23b抑制剂可明显抑制CFs增殖(P<0.05),提高Vimentin表达(RQ=2.52、1.86,均P<0.001),降低α-SMA表达(RQ=0.50、0.74,均P<0.001)。结论 miR-21和miR-23b能够特异性促进心肌纤维化。     

缬沙坦对大鼠心肌梗死后MMP-9和TIMP-1mRNA表达的影响

目的探讨缬沙坦对大鼠心肌梗死后基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1)表达的影响。方法将冠状动脉前降支结扎后24 h的SD大鼠随机分为心梗组(A组)和心梗 缬沙坦组(B组);假手术大鼠分为假手术组(C组)和假手术 缬沙坦组(D组)。灌胃4周后,各组存活动物数分别为A组7只,B组8只,C组9只,D组9只。测量各组大鼠体重、心脏重量,采用逆转录-聚合酶链反应测定梗死区及非梗死区心肌MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果A组的心脏重量/体重比值(心/体比)与C、D组比较显著增加(P<0.05);B组的心/体比与A组相比明显减低(P<0.05),与C、D组比较无明显差异(P>0.05)。A、B组梗死区和非梗死区MMP-9mRNA的表达较C、D组明显增高(P<0.05);B组梗死区和非梗死区MMP-9mRNA的表达较A组相应区域明显降低(P<0.05)。A、B组梗死区及非梗死区TIMP-1mRNA的表达与C、D组相比,明显增高(P<0.01),B组梗死区和非梗死区TIMP-1mRNA的表达较A组相应区域明显增高(P<0.05)。A组梗死区和非梗死区MMP-9/TIMP-1mRNA比值与C、D组相比,明显增高(P<0.05);B组梗死区和非梗死区MMP-9/TIMP-1mRNA比值较A组相应区域明显降低(P<0.05)。结论心肌梗死后,大鼠心肌内MMP-9和TIMP-1mRNA表达增加,共同参与心室重塑。经缬沙坦处理后,大鼠心肌内MMP-9mRNA表达减少;TIMP-1mRNA的表达升高;MMP-9/TIMP-1mRNA比值降低与抑制心肌重构有关。     

初探奥美沙坦减少大鼠心肌梗死后室性心律失常的机制

目的评估血管紧张素受体拮抗剂奥美沙坦对心肌梗死后大鼠室性心律失常发生发展及对心肌梗死区连接蛋白43的表达变化的影响。方法 60只大鼠分为假手术组(Sham组)20只,急性心肌梗死模型组(MI组)20只和急性心肌梗死+奥美沙坦组(OM组)20只。超声心动图评价大鼠心脏功能,应用程序性电刺激检测大鼠室性心律失常发生情况,并测定各组大鼠心肌梗死边缘区和非梗死区连接蛋白43的m RNA及蛋白表达。结果与MI组相比,奥美沙坦可以改善心功能(t=1.85,P0.01),减少心梗后室性心律失常的发生率(t=1.59,P0.05);OM组心肌梗死边缘区和非梗死区连接蛋白43的m RNA表达量高于MI组(t=1.48,1.52,P0.05),而其蛋白的表达量也在梗死边缘区高于MI组(t=1.45,P0.05)。结论奥美沙坦可以改善心肌梗死后大鼠心功能,减少室性心律失常的发生率,这些可能都与奥美沙坦上调梗死边缘区和非梗死区连接蛋白43的表达有关。     

实脾固肾化瘀方对阿霉素肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的探讨实脾固肾化瘀方对阿霉素(ADR)肾纤维化大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的影响。方法研究于2016年8—12月在上海中医药大学附属曙光医院肾病研究所进行,40只雄性SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、实脾固肾化瘀方组、福辛普利钠组等4组,每组10只。除正常对照组外,其余3组大鼠均采用尾静脉注射ADR(4mg/kg)法制成肾纤维化大鼠模型。造模成功后实脾固肾化瘀方组予以实脾固肾化瘀方浸膏(43g/kg);福辛普利钠组予以福辛普利钠溶液(2mg/kg);模型组和正常对照组予以生理盐水。实验结束后,留取全部大鼠24 h尿量、血清及肾脏组织,观察各组大鼠肾脏病理变化及肾组织TGF-β1、Smad2及Smad7表达的变化。结果 Masson染色发现,正常对照组大鼠肾组织形态结构正常,未见肾小管、间质纤维化及炎细胞浸润等异常改变。肾间质胶原纤维微弱表达,胶原纤维呈蓝色,肌纤维及红细胞呈红色。模型组大鼠肾组织出现明显的病理损害,实脾固肾化瘀方组、福辛普利钠组大鼠肾组织病理损害明显减轻,且实脾固肾化瘀方组大鼠肾组织病理改善比福辛普利钠组更明显。免疫组化染色并对其灰度值测定后发现,模型组肾组织TGF-β1、Smad2表达较正常对照组明显上调(P<0.01),实脾固肾化瘀方组大鼠肾组织TGF-β1及Smad2表达较模型组明显下调(P<0.01),Smad7表达明显上调(P<0.01),与福辛普利钠组相比,实脾固肾化瘀方组大鼠肾组织TGF-β1、Smad2表达差异无统计学意义(P>0.05),而Smad7表达则明显上调(P<0.05)。结论实脾固肾化瘀方可能通过下调TGF-β1及Smad2表达、上调Smad7表达,干预TGF-β1/Smads信号通路,从而发挥改善ADR肾病大鼠肾纤维化、保护肾功能的作用。