基于Keap1-Nrf2/ARE轴防风提取物对间质性肺炎幼鼠肺纤维化及血管新生的抑制作用研究

目的：基于Keap1-Nrf2/ARE轴探讨防风提取物对间质性肺炎(IP)幼鼠肺纤维化及血管新生的作用及机制。方法：随机选取15只30日龄雄性Wistar大鼠作为假手术组,另外60只采用气管内滴注5 mg/kg博来霉素(BLM)诱导构建幼鼠IP模型,后随机分为模型组、强的松(0.2 mg/kg)组及防风提取物低(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组,每组各15只,灌胃给药,假手术组及模型组幼鼠灌胃相应体积生理盐水,连续14 d。HE及Masson染色观察分析各组幼鼠肺脏组织形态及肺纤维化程度;免疫组化技术检测血小板内皮细胞粘附分子(CD31)抗原阳性表达;比色分析法检测各组幼鼠肺组织MDA、SOD、GSH水平;ELISA法检测各组幼鼠血清VEGF、Ang-2含量;Western Blot法检测各组幼鼠肺组织中α-SMA、Keap1、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达。结果：与模型组比较,各给药组幼鼠肺组织结构较完整,肺泡间隔及肺泡壁较薄,炎性渗出减少,肺组织胶原沉积面积、纤维化程度及血管密度逐渐减小;肺组织中MDA含量,血清VEGF、Ang-2含量及α-SMA、Kea...     

槲皮素通过FXR信号通路对胆汁淤积幼鼠的治疗作用及其对MDR3、MRP2、OATP2表达的调控研究

目的 研究槲皮素通过法尼醇X受体(FXR)通路对胆汁淤积幼鼠的治疗作用及相关蛋白表达的调控.方法 60只幼鼠分为槲皮素低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg槲皮素灌胃),正常组、模型组等量2％二甲基亚砜(DMSO)溶液灌胃.比较各组血清谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)水平;HE染色观察肝组织病理变化,检测FXR、多药耐药蛋白3(MDR3)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)、有机阴离子转运多肽亚型2(OATP2)mRNA及蛋白表达.结果 第2、3、4周槲皮素低、中、高剂量组血清ALT、ALP、GGT水平低于模型组,3组依次降低(P＜0.05).HE染色模型组肝细胞变性及坏死,纤维组织增生,大量炎性细胞浸润;槲皮素3个剂量组脂肪变性数量减少,小胆管及汇管区纤维组织增生、炎性细胞浸润减轻.槲皮素低、中、高剂量组FXR、MDR3、MRP2、OATP2 mRNA及蛋白相对表达量高于模型组,3组依次升高(P＜0.05).结论 槲皮素可改善胆汁淤积幼鼠肝功能,减轻肝组织病理变化,推测与激活FXR信号通路,上调MDR3、MRP2、OATP2表达有关.     

槲皮素对肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和重构的影响

目的:研究槲皮素对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和肺动脉结构重建的调节作用。方法:成年雄性SD大鼠40只随机分为4组:正常对照组(对照组)、MCT诱导的肺动脉高压组(MCT组)、槲皮素预防组(预防组)和槲皮素治疗组(治疗组),每组10只。测量各组大鼠干预后平均肺动脉压力(mPAP);测定肺小动脉管壁厚度(WT)占动脉外径(ED)的百分比(WT%)及管壁面积(WA)占血管总面积的百分比(WA%);采用免疫组化和Western blot检测肺小动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和平滑肌细胞抗体(α-SMA)的表达。结果:野百合碱组50mg/kg,再以生理盐水2ml/d每日灌胃一次,共20天,与对照组(生理盐水,再以生理盐水2ml/d每日灌胃一次,共20天)、预防组(MCT 50mg/kg,同时给予槲皮素100mg/kg每日灌胃一次,共20天)和治疗组(MCT 50mg/kg饲养20天后,以槲皮素100mg/kg每日灌胃一次,共20天)相比,mPAP、WT%、WA%、PCNA阳性率显著升高及PCNA、α-SMA的表达显著增多。结论:槲皮素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压有预防和治疗作用,其机理可能是通过抑制肺血管中小动脉平滑肌细胞增殖,改善肺血管重构。     

姜黄素对癫痫幼鼠学习记忆及神经元凋亡的影响

目的观察姜黄素对癫痫幼鼠的学习记忆及海马组织神经元凋亡的影响并探讨其机制。方法将50只21 d龄的SD幼鼠随机分正常组,模型组,姜黄素高(100 mg/kg)、姜黄素中(50 mg/kg)、姜黄素低(25 mg/kg)剂量组,姜黄素各组给予相应剂量姜黄素灌胃,连续2周。Morris水迷宫法检测乳鼠学习记忆能力、TUNEL法检测乳鼠海马神经元的凋亡、Western blotting法检测Cleaved-caspase-3蛋白的表达情况。结果与模型组大鼠比较,姜黄素高、中、低剂量组的学习记忆能力显著提高(P0.01);细胞凋亡情况显著改善(P0.01);且Cleaved-caspase-3蛋白的表达显著降低(P0.01)。结论姜黄素可能通过抑制Cleaved-caspase-3蛋白的表达,从而抑制癫痫幼鼠海马神经元的凋亡。     

苦参碱对假丝酵母菌阴道炎大鼠的药效及其局部免疫功能的影响

目的 研究苦参碱对假丝酵母菌阴道炎大鼠的药效及其局部免疫功能的影响.方法 40只大鼠建立假丝酵母菌阴道炎模型,并将其随机分为模型组、氟康唑组(100 mg/kg氟康唑)及苦参碱高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg苦参碱),每组8只,另取8只大鼠记作正常组,模型组和正常组灌胃等体积无菌生理盐水,每天1次,连...     

藤茶总黄酮对酒精性肝损伤小鼠的保护作用

目的 探究藤茶总黄酮对小鼠酒精性肝损伤的保护作用.方法 随机将50只小鼠随机分为空白组、模型组及藤茶总黄酮低、中、高(50、75、100mg/kg)给药组,每组10只,除正常组外,其余各组按16 ml/kg剂量灌胃56％白酒,每天1次,灌酒lh后各剂量组灌胃给药,正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水,连续给药21 d.对肝脏...     

半夏泻心汤及其不同拆方对抗生素诱导的菌群紊乱幼鼠结肠黏膜屏障的影响

目的 观察半夏泻心汤及其不同拆方对抗生素诱导的菌群紊乱幼鼠结肠黏膜屏障的影响。方法 70只SPF级雄性Balb/c幼鼠随机抽取10只作为空白组,其余幼鼠予混合抗生素灌胃诱导肠道菌群紊乱,连续灌胃14 d,将造模幼鼠随机分为模型组、阳性对照组、全方组、辛开组、苦降组及甘补组,每组10只。阳性对照组予双歧杆菌四联活菌片溶液0.68 g/kg灌胃,全方组、辛开组、苦降组及甘补组分别予9.1、3.19、1.82、4.1 g/kg半夏泻心汤全方及相应拆方组药液灌胃,空白组、模型组灌胃等体积生理盐水,连续14 d。末次灌胃后收集幼鼠粪便,采用16S rDNA测序分析肠道菌群结构。腹腔注射脂多糖(10 mg/kg)诱导炎症反应,ELISA检测粪便清蛋白含量,HE染色观察结肠黏膜形态,Western blot检测结肠组织紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达。结果 与空白组比较,模型组幼鼠肠道菌群结构明显改变,结肠绒毛结构发育落后、隐窝不明显、腺体萎缩,粪便清蛋白含量明显增加(P<0.01),Occludin和ZO-1蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,全方组和不同拆方组肠...     

合成冰片影响血脑屏障开放促槲皮素脑吸收的研究

目的:观察冰片对正常小鼠血脑屏障(blood brain barrier,BBB)开放性的影响及其促进槲皮素脑组织吸收的作用,为芳香开窍药的促BBB开放作用应用于脑部疾病的治疗提供依据。方法:小鼠随机分为单用槲皮素给药组、冰片加槲皮素组、P-糖蛋白抑制剂加槲皮素给药组、5-羟色胺抑制剂加槲皮素给药组等,空白组为对照,各组小鼠分别灌胃给予相应的药物3天后,断头取血和脑组织;采用高效液相色谱法测定小鼠血浆及脑组织中槲皮素含量。结果:与单用槲皮素给药组(50 mg/kg)相比较,冰片(200mg/kg)加槲皮素组(50 mg/kg)、P-糖蛋白抑制剂(56mg/kg)加槲皮素给药组(50 mg/kg)的脑组织槲皮素含量均显著升高(P<0.05),而5-羟色胺抑制剂(25mg/kg)加槲皮素给药组(50 mg/kg)的脑组织槲皮素含量显著下降(P<0.05);与单用槲皮素给药组(50 mg/kg)相比较,冰片(200mg/kg)加槲皮素组(50 mg/kg)、P-糖蛋白抑制剂(56mg/kg)加槲皮素给药组(50 mg/kg)槲的血浆药物浓度均显著下降(P<0.05)。结论:冰片对小鼠生理状态下的血脑屏障具有一定的开放效应,可能是该类药物通过影响P-糖蛋白与5-羟色胺的含量使血脑屏障细胞膜通透性增加从而促进药物吸收,其促血脑屏障开放的机制可能为芳香走窜、引药上行功效的药理基础之一。     

槲皮素通过促进成骨分化治疗去势骨质疏松症大鼠的分子机制

目的:通过观察槲皮素对去势骨质疏松症大鼠成骨分化的影响,探讨其调控骨吸收与骨形成及其防治骨质疏松症的作用机制。方法:60只雌性SD大鼠随机分为6组,正常对照组(n=5)正常饲养,骨质疏松症模型组(n=50)行两侧卵巢摘除手术(全身骨密度检测下降25%)每天进行生理盐水灌胃,槲皮素治疗组分别给予槲皮素50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg灌胃治疗,阳性药物对照组(n=10)给予阿仑膦酸钠10 mg/kg灌胃治疗,10周后处死各组大鼠。检测各组大鼠全身骨密度(BMD),血清雌二醇(E2)、骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OC)、I型原胶原N-端前肽(PINP),抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、I型胶原交联C-末端肽(CTX)、Ca、P以及尿液Ca、P的含量;分别采用RT-q PCR和Western blot法检测BMP2和Smad4的表达水平。结果:与正常对照组比较,骨质疏松症组大鼠血液中CTX、TRACP-5b、OC、PINP和BALP的含量都显著上升,Ca、P和BMD显著降低;经槲皮素灌胃后上述现象均有改善效果,且具有剂量依赖性,BMP2和Smad4的基因和蛋白表达水平经槲皮素治疗后都有升高趋势,其中当槲皮素的剂量低于(50 mg/kg)时,以上改善效果均不明显;而槲皮素的剂量大于(100 mg/kg)时疗效具有统计学意义,在槲皮素的剂量达到(200 mg/kg)时治疗组疗效接近于正常对照组水平。结论:槲皮素能够有效促进成骨分化,并通过上调BMP2和Smad4的表达改善骨质疏松症。     

鹰嘴豆总皂苷对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及糖代谢的影响

目的 观察鹰嘴豆总皂苷( TSCA)对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及糖代谢的影响.方法 高糖高脂饲料喂养加链脲佐菌素腹腔注射(45 mg/kg)建立2型糖尿病大鼠模型.将造模成功的大鼠随机分为模型组(丙二醇灌胃,灌胃容积1mL/100 g)和2个鹰嘴豆总皂苷治疗组分别给100 mg/kg、300 mg/kg(以丙二醇为助溶剂灌胃给药,灌胃容积1 mL/100g)及二甲双胍组(二甲双胍100 mg/kg灌胃),另选8只大鼠作为正常对照组(丙二醇灌胃,灌胃容积1 mL/100 g),给药4周后,检测空腹血糖值(FPC)、空腹胰岛素(Fins)、并计算胰岛素抵抗指数,血清游离脂肪酸量、白介素-6(IL-6)、肝糖原(HG)、肌糖原(MG)量及糖代谢中关键酶己糖激酶(HK)活性.结果 与模型组相比,鹰嘴豆总皂苷各剂量组均可有效降低2型糖尿病大鼠的血糖(P＜0.01),改善胰岛素抵抗,显著降低血清白介素-6、游离脂肪酸量并增加骨骼肌中己糖激酶活性及肌、肝糖原的量.结论 鹰嘴豆总皂苷各剂量组可有效降低2型糖尿病大鼠空腹血糖并改善胰岛素抵抗.     

平喘方对哮喘小鼠NF-κB信号通路的调控及对TLR4 mRNA和蛋白表达的影响

目的研究平喘方通过调节核因子-K B(NF-K B)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体4(TLR4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组15只。除空白组外,其余组均采用先卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝凝胶[AI(OH)3]腹腔注射致敏,采用OVA雾化激发的方法来建立哮喘模型。地塞米松组、平喘方组分别予0.075 mg/mL地塞米松溶液、5.33 g/mL平喘方灌胃治疗1周,空白组、模型组给予等量生理盐水灌胃。末次给药24 h后,采用HE、Masson染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,Western Blot观察肺组织中NF-κB亚单位(p65)、NF-κB的抑制蛋白(IκBα)、TLR4、髓样分化因子(MyD88)蛋白表达,RT-PCR法观察p65、IκBα、TLR4、MyD88 mRNA水平。结果HE及Masson染色可见模型组小鼠肺组织明显炎症细胞浸润,上皮基底膜增厚,胶原纤维增多,平喘方组小鼠肺部炎性细胞浸润明显减轻,胶原纤维面积减小;与空白组比较,模型组小鼠BALF中IL-6、TNF-α浓度,肺组织中p65、MyD88蛋白表达及mRNA水平,气管中TLR4mRNA及蛋白表达水平均升高(均P<0.01),IκBα蛋白表达及mRNA水平降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组和平喘方组BALF中IL-6、TNF-α浓度均降低,MyD88、p65、TLR4蛋白表达及mRNA水平下调(P<0.01,P<0.05),地塞米松组IκBα蛋白表达及mRNA水平升高(均P<0.01),平喘方组IκBαmRNA水平升高(P<0.01),IκBα蛋白表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。与地塞米松组比较,平喘方组BALF中IL-6、TNF-α因子水平、p65 mRNA水平、TLR4 mRNA水平、MyD88蛋白表达及mRNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),p65及TLR4蛋白表达升高(P<0.05)。结论平喘方对OVA诱导哮喘小鼠的气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低TLR4及MyD88活性,调控NF-κB信号通路有关。     

汉黄芩素对流感病毒感染肺泡巨噬细胞NF-κB核转位及表达的影响及机制

目的:探讨汉黄芩素对流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞( NR8383)中核转录因子-κB(NF-κB)核转位、表达的影响及与Toll样受体7(TLR7)介导的髓样分化因子88( MyD88)依赖性信号通路的关系.方法:流感病毒感染NR8383细胞1h后,加入含汉黄芩素的培养基(终质量浓度0.016 g · L-1),药物作用后6,12,24 h,RT-PCR检测TLR7,MyD88,NF-kB p65mRNA水平;4,6,24 h时,免疫组化法检测NF-κB p65核转位情况,并做半定量分析;24 h时,Western blot检测NF-κB p65表达水平.结果:汉黄芩素降低了流感病毒感染NR8383细胞后TLR7,MyD88,NF-κB p65 mRNA水平(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05),抑制了流感病毒感染后NF-κB p65的核转位及表达(P＜0.01).结论:汉黄芩素通过抑制TLR7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB p65的核转位及表达,从而减轻流感感染中的炎症反应.     

电针调节小胶质细胞TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善小鼠脑缺血再灌注损伤炎性反应的实验研究

目的 探讨电针对小鼠缺血性脑卒中急性期炎性反应及TLR4信号通路的影响,为电针治疗脑缺血的炎性反应提供更为深入的理论依据.方法 将C57 BL/6 N小鼠按体重随机分为假手术组、模型组及电针组,每组24只.除假手术组外,模型组及电针组小鼠均行右侧大脑中动脉闭塞术,并在30 min后拔除线栓实现再灌注.电针组小鼠手术清醒...     

基于TLR2/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路探讨藏族药短穗兔耳草提取物抗慢性酒精性肝损伤大鼠的作用机制

目的:通过酒精灌胃8周建立大鼠慢性酒精性肝损伤模型,研究藏族药短穗兔耳草提取物对Toll样受体(TLR2/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)和NOD样受体蛋白3(NALP3)信号通路的影响,探讨其提取物抗慢性酒精性肝损伤的作用机制。方法:60只SD雄性大鼠随机分成正常组、模型组、联苯双酯组(0.1 g·kg^-1)及短穗兔耳草低、中、高剂量组(0.5,1,2 g·kg^-1),每日上午各给药组按10 m L·kg^-1给予相应的药物,下午梯度乙醇灌胃法给予56度白酒灌胃,连续8周后,取血,测定各组大鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),甘油三酯(TC),总胆固醇(TG)及肝脏谷胱甘肽(GSH)水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏中TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3蛋白的表达;苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理学形态改变。结果:与正常组比较,模型组血清中AST,ALT,TC,TG,IL-1β水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,藏族药短穗兔耳草各剂量组能降低血清AST,ALT,TC,TG,IL-1β水平,其中高剂量组的效果尤为显著(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组肝匀浆中GSH水平下降;模型组肝组织中TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3蛋白水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,藏族药短穗兔耳草各剂量组能降低肝脏中GSH水平以及TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3的蛋白表达(P<0.05,P<0.01);肝脏病理切片表明,藏族药短穗兔耳草能改善大鼠肝组织病理变化。结论:藏族药短穗兔耳草对酒精诱导的慢性酒精性肝损伤大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与TLR/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路有关。     

天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠TLR4/NF-κB信号通路影响的研究

目的:探讨天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠的脑保护作用及其作用机制。方法:72只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、天麻素组、Toll样受体4 (TLR4)激活剂脂多糖(LPS)组、天麻素+LPS组,每组12只。采用腹腔注射毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型。双抗体夹心酶联免疫法检测大鼠血清和海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)水平,TUNEL染色法检测海马组织细胞凋亡数,Western blot分别检测海马组织活化半胱氨酸基天冬氨酸酶-3 (CleavedCaspase-3)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、兔抗大鼠p-核因子-κB亚基p65亲和肽(p-NF-κBp65)和磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκB-α)表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠脑电频率显著降低(P<0.05),波幅显著升高(P<0.05);血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显升高(P<0.05);IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、天麻素组和天麻素+LPS大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05),血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显降低(P<0.05),IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著升高(P<0.05);LPS组大鼠脑电频率、血清及海马组织IL-10水平、Bcl-2蛋白显著降低(P<0.05),血清与海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65和p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。与LPS组比较,天麻素+LPS组大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05);血清及海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65蛋白表达均明显降低(P<0.05),IL-10水平、Bcl-2及p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:天麻素可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠发挥脑保护作用。     

艾灸对类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB信号通路的影响

目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠关节滑膜组织Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核转录因子-κB(TLR 4-MyD 88-NF-κB)信号通路的影响,进一步探讨艾灸治疗RA的作用机制。方法 :40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和药物组,每组10只。采用风、寒、湿环境因素结合弗氏完全佐剂的方法复制RA模型。艾灸组以艾条悬灸大鼠"足三里""肾俞"穴,每天1次,连续治疗15d。药物组以雷公藤溶液灌胃(8.75mL/kg),每天1次,共15d。观察关节滑膜组织病理形态学变化,放射免疫法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)含量,实时荧光定量PCR方法检测滑膜组织TLR 4、MyD 88、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)mRNA的表达,免疫组化方法检测NF-κB p 65的表达。结果:与正常组比较,模型组滑膜组织有明显的病理改变,大量单核细胞及淋巴细胞等炎性细胞浸润,滑膜表面不整齐,滑膜增生变厚;与模型组比较,艾灸组和药物组均能明显缓解炎性细胞对滑膜的浸润,改善滑膜细胞增生反应。与正常组比较,模型组血清TNF-α、IL-1含量升高(P0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均升高(P0.01);与模型组比较,艾灸组和药物组血清中TNF-α、IL-1含量降低(P0.01),滑膜TLR 4mRNA、MyD 88mRNA、TRAF-6mRNA及NF-κB p 65表达均降低(P0.01,P0.05)。结论:艾灸具有调节细胞因子的作用,其机制可能与艾灸抑制滑膜组织TLR 4-MyD 88-NF-κB信号通路的异常激活有关。     

芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺炎症损伤的作用

目的 观察芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺炎症损伤及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响.方法 48只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、硒酵母组(36μg/kg)及芪箭消瘿方低(1.8 g/kg)、中(3.6 g/kg)、高(7.2 g/kg)剂量组,每组8只.采用高碘水喂养联合皮下注射猪...     

化脂复肝颗粒通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3减轻Kupffer细胞炎症改善非酒精性脂肪性肝病机制研究

目的:探讨化脂复肝颗粒在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中对Kupffer细胞(KCs)TLR4/MyD88/NF-κB/NLRP3信号通路的影响。方法:将分离培养的KCs随机分为空白组、LPS干预组、LPS+空白血清组、LPS+化脂复肝组、高糖+对照组、高糖+LPS干预组、高糖+LPS+空白血清组、高糖+LPS+化脂复肝组,LPS干预浓度为100 ng/ml,高糖干预为于KCs培养基中另加入葡萄糖30 mmol/L。用CCK-8法检测各组KCs增殖情况; 酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组KCs培养基上清液中促炎因子TNF-α、IL-1β的含量; 反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组KCs中TLR4、MyD88、NLRP3、Caspase-1、NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的基因表达情况。结果:CCK-8检测显示,空白及高糖培养对照组KCs细胞不断增殖,长势良好; LPS+化脂复肝组与高糖+LPS+化脂复肝组KCs缓慢增殖,非高糖组KCs均较含高糖组KCs增殖速率更快; 而LPS或高糖+LPS诱导模型组及各加空白血清组KCs于第6小时开始出现凋亡,含高糖组KCs均较非高糖组KCs凋亡速率更快。非高糖各组与含高糖各组中促炎因子TNF-α、IL-1β含量以及炎症相关基因(TLR4、MyD88、NLRP3、Caspase-1、NF-κB/p-65、TNF-α、IL-1β、IL-18)表达水平均呈相同变化趋势,且含高糖各组上述促炎因子及炎症相关基因表达水平均较非高糖组高。以非高糖组为例,LPS诱导模型组和LPS+空白血清组的促炎因子TNF-α与IL-1β含量均显著高于对照组(P<0.05),炎症相关基因TLR4、MyD88等的mRNA表达水平也均显著高于对照组(P<0.05),而LPS诱导模型组与LPS+空白血清组间上述各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05); 与LPS诱导模型组或LPS+空白血清组比较,LPS+化脂复肝组促炎因子TNF-α与IL-1β含量均显著降低(P<0.05),炎症相关基因TLR4、MyD88等的mRNA表达水平也均显著降低(P<0.05)。结论:化脂复肝颗粒含药血清可改善KCs活力,有效减轻KCs炎症反应,减少KCs细胞焦亡的发生,具有显著的抗炎、抗氧化损伤及保肝作用,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65/NLRP3信号通路的激活相关。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-kB信号通路影响

目的探讨艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-kB信号通路的影响。方法30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组10只。模型组和艾灸组大鼠于左后肢足趾皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)制备佐剂性关节炎(AA)模型;造模成功后,艾灸组取左侧足三里施灸;正常组和模型组仅常规饲养,不做任何干预。3组均于15 d后用足趾容积测量仪测量大鼠左后肢足趾容积。用苏木精-伊红(HE)染色观察左后肢足趾关节滑膜组织形态,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠左后肢足趾关节滑膜组织白细胞介素(IL)-1b和肿瘤坏死因子(TNF)-a的浓度。用荧光定量PCR法(RT-q PCR)检测左后肢足趾关节滑膜组织Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-kB信号通路中髓样分化因子(Myd)88、TLR4、NF-kB p65、NF-kB抑制因子a(IkBa)、IkB激酶复合物b(IkKb)的m RNA表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠足趾容积显著升高(P<0.01),滑膜细胞出现增生,组织中可见大量炎细胞浸润,滑膜表面细胞排列不整齐,滑膜组织IL-1b和TNF-a浓度升高(P<0.01),而且Myd88、TLR4、NF-kB p65、IkBa、IkKb的m RNA表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组大鼠足趾容积和滑膜组织上述各项指标水平均明显降低(P<0.01)。结论艾灸能够通过抑制TLR4/NF-kB信号通路降低AA模型大鼠滑膜炎症反应,缓解足趾肿胀。     

茯苓多糖提取物调控CYP2E1及NF-κB炎症通路改善小鼠酒精性肝病

建立酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)模型,研究茯苓多糖(Poria cocos polysaccharides,PCP)提取物对ALD小鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)及核因子κB(NF-κB)炎症信号通路的影响,探讨其对ALD的保护作用及机制。60只SPF级雄性C57BL/6N小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组(联苯双酯200 mg·kg^-1)、茯苓多糖低剂量组(50 mg·kg^-1)、茯苓多糖高剂量组(200 mg·kg^-1),建立Gao-binge模型并给药。观察肝脏形态及病理学变化,计算脏器指数,检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,试剂盒分别测定小鼠肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,ELISA法检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,免疫荧光染色观察巨噬细胞激活情况,Western blot分析主要代谢酶CYP2E1及Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达。与模型组相比,PCP给药组可显著改善肝组织病理损伤情况。免疫荧光结果显示,与模型组相比,给药组肝组织炎性巨噬细胞数量减少,并且各给药剂量组ALT、AST、MDA、IL-6、TNF-α的含量显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.01)。茯苓多糖提取物对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用,其机制可能是调控代谢酶CYP2E1的表达和抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路,减轻氧化应激和炎症损伤,抑制ALD的发展。