眼镜蛇毒细胞毒素对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用的研究

目的:探讨眼镜蛇毒细胞毒素(Cytotoxin,CTX)对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用昆明小鼠S180实体瘤模型,通过腹腔注射CTX,观察CTX对S180小鼠的肿瘤重量、亚显微结构、凋亡率和pro-caspase-3表达量的变化。结果:CTX对S180肿瘤细胞的生长表现出明显抑制作用。0.2、0.4、0.8mg/kgCTX剂量组的抑瘤率分别为23.8%、54.1%、63.2%;透射电子显微镜和流式细胞仪检测显示S180肿瘤细胞发生凋亡;免疫印迹结果显示pro-caspase-3蛋白表达降低,提示caspase-3被激活。结论:CTX通过诱导细胞凋亡来抑制S180肿瘤细胞的生长。     

眼镜蛇毒细胞毒素CTX-d诱导NB4细胞凋亡及其机制研究

目的探讨眼镜蛇毒细胞毒素CTX-d诱导NB细胞凋亡的机制。方法MTT法测定CTX-d体外细胞毒作用,电镜、流式细胞仪观察CTX-d对NB4细胞的诱导凋亡作用,流式细胞仪检测NB4细胞线粒体膜电位的变化,Western-blotting测定胞浆细胞色素C及caspase-9、caspase-3的变化。结果CTX-d作用NB4细胞6、12h的IC50分别为1.8、1.35μg/mL;CTX-d引起NB4细胞线粒体肿胀、核固缩等形态学改变;诱导NB4细胞出现亚G1期的凋亡峰,且有时效及量效关系;CTX-d(1.0μg/mL)作用0.5h,NB4细胞线粒体膜电位已开始下降,同时在胞浆中检测到细胞色素C,显示细胞色素C已由线粒体释放入胞浆;caspase-9酶原的量在CTX-d(1.0μg/mL)作用1h时开始下降,而活化的caspase-3片断在0.5h即检测到,表明除了通过caspase-9,CTX-d还可能通过其他途径激活caspase-3。结论CTX-d可通过降低线粒体膜电位、细胞色素C释放,激活caspase-9和caspase-3,从而诱导NB4细胞凋亡,还可能通过其他途径激活caspase-3,参与凋亡作用。     

眼镜蛇毒体外抗人类小涎腺腺样囊性癌细胞活性研究

目的：研究眼镜蛇毒（Cobra venom）体外抗人类小涎腺腺样囊性癌（NACC）细胞活性以及对细胞凋亡的影响。方法：以不同浓度的眼镜蛇毒作用于NACC细胞,应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法（ATP-TCA法）测定细胞的增殖状态;应用细胞形态学和流式细胞仪分析细胞凋亡。结果：实验显示眼镜蛇毒对体外培养的NACC有明显的抑制作用,与浓度和作用时间呈正比。用浓度2．0mg／L的眼镜蛇毒处理癌细胞48h后,试验组细胞凋亡率（52．4％）显著高于对照组（5．7％）。HE染色观察到眼镜蛇毒作用NACC细胞后其形态发生改变。结论：眼镜蛇毒能抑制NACC细胞增殖并诱导其凋亡。     

中华眼镜蛇毒心脏毒素—13对猪离体冠脉的作用

探讨中华眼镜蛇毒中分离纯化获得的心脏毒素－１３对离体冠脉血管平滑肌的作用和机制。用离子交换和凝胶过滤法从中华眼镜蛇毒中分离纯化出心脏毒素。以不同浓度ＣＴＸ－１３分别作用于猪冠脉环，观察记录其所诱发的血管环收缩。普萘洛尔，哌唑嗪和尼群地平分别与冠脉环预作用５ｍｉｎ，再分别给予不同浓度的ＣＴＸ－３，观察记录其收缩强度的变化。     

中华眼镜蛇（Naja naja atra）毒细胞毒素对动物急性及长期毒性研究

目的探讨中华眼镜蛇毒中分离纯化的细胞毒素（ＣｈｉｎｅｓｅＣｏｂｒｏＶｅｎｏｍ－Ｃｙｔｏｔｏｘｉｎ，ＣＶ－ＣＴＸ）对动物急性及长期毒性的作用。方法急性毒性：小鼠５０只，尾静脉一次注入不同剂量的ＣＶ－ＣＴＸ注射液，观察７ｄ内死亡率。犬５只，戊巴比妥钠静脉麻醉后，分别静脉恒速注入不同剂量的ＣＶ－ＣＴＸ，观察５ｈ内血压、心电图及呼吸的变化。长期毒性：大鼠１６０只分别腹腔注射生理盐水２０ｍｌ、ＣＶ－ＣＴＸ２５０，５００，１０００μｇ／ｋｇ·ｄ－１，连续４０ｄ。结果（１）小鼠急性ＬＤ５０及其９５％可信限为１１５８．７（１０７０～１２５４．６）μｇ／ｋｇ，中毒症状呈匍伏、毛松、懒动直到心跳停止，解剖未见重要脏器（心、肺、肝、脾、肾）明显变化。（２）犬静脉恒速注入１００μｇ／ｋｇ间隔１ｈ，共５次，呼吸、血压、心电图未见明显变化，一次超过５００μｇ／ｋｇ，可使心律不齐而停搏，呼吸停止。（３）大鼠长期毒性实验，３个剂量组，连续用药４０ｄ，无一死亡，肝、肾功能及血液生化均无明显影响。病理检查高剂量组部分动物肝脏中度浊肿及水样变性和散在点状坏死，肺有散在性出血；中剂量组肝脏轻度浊肿，偶伴有水样变性，个别动物有小点状坏死，肺有点状出     

广西眼镜蛇毒细胞毒素对人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞的抑制作用研究

目的：研究广西眼镜蛇毒细胞毒不对体外培养的人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞株的抑制作用。方法：通过SephadexG-50,GM-Sepharose,CL-6B柱层析从广西眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素,应用四素氮唑蓝（MTT）法测定其对人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞株的体外细胞毒作用及其最效关系,并与粗毒的抑瘤作用进行比较,结果：从广西眼镜蛇毒中分离到一种细胞毒素（CTX CM－5）,其对体外培养的人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞株的抑制作用呈明显的剂量依赖关系。抑制率随剂是增加而呈迅速上升培养的人卵巢 细胞和宫颈癌细胞株具有较强的抑制作用。     

MTT法检测卵巢癌化疗敏感性

目的 应用噻唑蓝（MTT）法检测卵巢癌对常用抗癌药物的敏感性，并分析其临床意义。方法卵巢癌标本52例。用MTT法将癌细胞悬液与17种抗癌药反应，计算各种抗癌药抑制率，推断药物敏感性，同时就其相关因素进行分析。结景卵巢癌的不同个体和类型对化疗药物的敏感性各不相同。药物敏感性与肿瘤分期和分级有关。本组患者的生存率较以往无药敏试验的患者明显提高。结论采用MTT法进行抗癌药物敏感性试验，可以选择有活性的化疗药物对卵巢癌患者进行有效的个体化治疗。     

CD3AK细胞对人肺癌细胞株的细胞毒作用

目的研究ＣＤ３ＡＫ细胞对人肺癌细胞株的细胞毒作用。方法应用抗ＣＤ３单克隆抗体及重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）刺激培养ＣＤ３ＡＫ细胞,体外实验研究ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖及对人肺癌细胞株Ａ５４９、ＳＰＣ－Ａ１细胞的杀伤能力。结果刺激培养４ｄ,ＣＤ３ＡＫ细胞增殖及杀伤能力与ＬＡＫ细胞无差异;培养８ｄ,ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖及杀伤能力明显优于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１）;培养１６ｄＣＤ３ＡＫ细胞仍见增殖,且杀伤作用保持在５０％以上。结论ＣＤ３ＡＫ中细胞作为一种新的肿瘤过继性免疫治疗效应细胞具有潜在的临床应用价值。     

蛇毒对人及小鼠传代细胞的杀伤作用

本文应用体外微量培养方法,测定9种蛇毒(眼镜王蛇、眼镜蛇、金环蛇、银环蛇、青环海蛇、蝮蛇、尖吻蝮,竹叶青及圆斑蝰)对4株人体肿瘤细胞系(鼻咽癌、肝癌、子宫颈癌及胃癌)和2株小鼠传代细咆(骨髓瘤细胞及小鼠肥大细胞)的杀伤作用和抑制生长作用。结果表明眼镜蛇毒对肿瘤细胞的杀伤作用最强。胃癌及鼻咽癌细胞株对多种蛇毒呈现较高的敏感性。     

Ca^2＋对PHA促淋巴细胞分裂作用的影响

以小鼠脾淋巴细胞为实验材料,采用MTT微量自动比色法判断细胞分裂状况,观察PHA的促淋巴细胞分裂作用时Ca~(2 )的影响。结果发现:加Ca~(2 )的最大刺激组的光密度(OD)值比对照组提高了35.4％,Ca~(2 )的最大刺激浓度为4％葡萄糖酸钙.结果表明Ca~(2 )有增强PHA的有丝分裂原作用,并且存在明显的量—效关系。     

加温结合化疗对人胃癌细胞株的影响

通过检测MKN28人胃癌细胞株~3H-胸腺嘧啶核苷掺人情况,在体外实验研究加温和抗癌药物顺氨氯铂、5-氟脲嘧啶之间的协同作用。结果表明(1)顺氨氯铂的细胞杀伤作用具有温度-药物浓度依赖性;(2)5-氟脲嘧啶合并加温未见有显著协同作用,反见削弱其抗肿瘤效应;(3)单纯加温与合并应用中等剂量的顺氨氯铂或5-氟脲嘧啶的比较中发现,效果最佳的为加温加顺氨氯铂,其次是单纯加温;(4)加温加顺氨氯铂、5-氟脲嘧啶组合治疗效果最佳。为临床应用治疗胃癌的腹腔广泛转移提供了理论依据。     

青蒿酯钠抗人肝癌（BEL—7402）与诱导凋亡

应用体内外抑瘤实验、细胞形态学观察、流式细胞仪、Westernblot实验进行检测和观察，探讨青蒿酯钠抗肿瘤作用及机制。结果表明，青蒿酯钠对人肝癌有体内、外抗肿瘤作用；诱导人肝癌细胞凋亡，可能是其抗肿瘤作用机制之一；诱导体外人肝癌细胞凋亡通过P53非依赖性途径。     

四甲基偶氮唑盐比色法测定白细胞介素-2活性及淋巴细胞增殖反应

用改良MTT(四甲基偶氮唑盐)比色法检测白细胞介素-2(IL-2)活性和淋巴细胞转化反应,并与~3H-dT掺入法相比较。结果表明,改良MTT比色法具有简单、快速、敏感的优点,不仅适用于检测IL-2,同时也可用于淋巴细胞转换试验。在与~3H-dT掺入法平行试验时发现,两者平行相关(相关系数均>0.90)。本法无需接触同位素,便于推广应用。     

雷公藤内酯对人胃癌细胞株FGC_(85)杀伤作用的光镜和电镜观察

本文应用核苷掺入技术及电镜观察首次证实雷公藤内酯对人胃癌细胞株 FGC_(85)的杀伤作用。用药早期,细胞数,分裂指数及 DNA,RNA 合成无明显变化,但出现核仁脱粒及核仁破碎等变化;晚期,电镜观察发现细胞以凋落方式死亡,药物主要作用于间期细胞,其杀伤机构的始动环节可能与核酸代谢障碍无关。     

抗癌药莪棱舌草Ⅰ号诱导人肝癌细胞凋亡的研究

用流式细胞光度术检测细胞凋亡 ,运用细胞化学方法检测凋亡相关基因蛋白的表达 ,以及用Westernblot ting分析研究抗癌药莪棱舌草Ⅰ号对人肝癌细胞 (772 1细胞 )凋亡的诱导作用。结果表明药物能够诱导 772 1细胞发生凋亡 ,凋亡率可达 4 0 % ;药物作用可以使细胞中凋亡抑制基因bc1 2表达减少 ,凋亡促进基因Bax表达增加。提示诱导肿瘤细胞凋亡可能是莪棱舌草Ⅰ号抑制肝癌细胞的机制之一     

芦荟大黄素体外抑制人舌癌及肺癌肿瘤细胞生长的初步研究

目的观察芦荟大黄素在体外对人舌癌细胞株Tca 8113及肺癌细胞株YTMLC肿瘤细胞的生长抑制作用．方法不同浓度的药物作用于培养的肿瘤细胞，应用MTT法和光学显微镜观察药物对细胞的生长抑制作用．结果随着药物作用浓度升高，细胞增殖随之下降，且该抑制作用具有一定的浓度-时间-效应关系，在芦荟大黄素浓度为10mg／L时抑制作用最为显著．结论芦荟大黄素在体外可以对人舌癌细胞株Tca 8113和肺癌细胞株YTMLC肿瘤细胞产生生长抑制作用．