不动杆菌超广谱β-内酰胺酶特性研究

[目的]了解不动杆菌临床株所产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的一些特性。[方法]采用超声破碎法制备ESBLs粗提液，紫外分光光度法测定酶的底物特异性和抑制剂的抑酶作用，等电聚焦电泳法测定等电点。[结果]三株不动杆菌所产的ESBLS酶作用优先底物是青霉素类抗生素，对亚胺培南无水解作用，WA74株所产的酶对头孢菌素的相对水解率较低（〈50％）。棒酸、舒巴坦、他唑巴坦对WA31、WA52菌株所产的ESBLs有较强的抑制作用，对WA74 ESBLs抑制作用较弱，EDTA不能抑制3种酶的水解活性。3种β-内酰胺酶pI分别为7．3、8．4、6．1。[结论]鲍曼不动杆菌WA31、WA52产生的ESBLs属于A类Bush 2be群可能为TEM型，溶血不动杆菌WA74产生的ESBLs属于D类Bush 2d群。     

80株鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 了解常宁地区鲍曼不动杆菌感染现状及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况.方法 采用国产天地人半自动微生物鉴定系统对鲍曼不动杆菌进行鉴定,采用K-B琼脂纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌对20种抗菌药物的药敏情况,采用标准纸片扩散法确证试验检测ESBLs,并进行耐药性分析.结果 80株鲍曼不动杆菌中,痰及支气管分泌物最多,占77.50%;对所检测的20种抗生素耐药率大部分在50%以上,亚胺培南和美洛培南的耐药率较低,均为37.50%;检测出产ESBLs鲍曼不动杆菌31株,占全部菌株的38.75%;ESBLs阳性鲍曼不动杆菌对大部分抗生素的耐药率均显著高于ESBLs阴性菌株,差异有统计学意义(P<0.05).结论 常宁地区鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素耐药严重,ESBLs阳性鲍曼不动杆菌的耐药情况更为严重,这可能与本地区大量及不合理使用抗生素有关.通过药敏试验及ESBLs检测可防止院内感染的区域性流行和指导临床合理应用抗生素.     

新生儿下呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶菌耐药性分析

目的 分析重症监护病房(N1CU)患儿下呼吸道感染产超β-内酰胺酶细菌的耐药性。方法 采用K-B法及双纸片协同法．对从手工分离到的144株革兰阴性杆菌作ESBLs检测，比较亚胺培南(IPM)等11种抗菌药物的敏感性。结果 144株革兰阴性杆菌中产ESBLs菌66株占总数的45．8％，其中大肠埃希菌26株(39．4％)，肺炎克雷伯菌40株(60．6％)分别进行药敏试验显示亚胺培南对产ESBLs菌有较好抗菌作用(耐药率为0％)，而氨苄西西林(AMP)达100％。复方新诺明(SXT)及喹诺酮类抗菌药物对产与非产ESBLs菌作用无显著性差异。结论 新生儿重症监护病房下呼吸道感染菌产ESBLs．有增高趋势．应加强监测。     

G^-杆菌对超广谱β-内酰胺酶的耐药性及临床意义

[目的] 观察本院近期产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率和对18种抗菌药物的耐药性差别。[方法] 应用MICROSCAN AUTOSCAN-4和纸片筛查法及确证法对442株革兰阴性杆菌进行耐药性分析。[结果] 大肠埃希菌ESBLs阳性率27．8％，肺炎克雷伯菌45．1％。对18种抗菌药物的耐药性有规律性差别。[结论] 检测：ESBLs最好结合应用仪器法和纸片筛查及确证法。少数三代头胞可能在体外表现对ESBLs阳性菌株敏感，应报告耐药。     

超广谱β-内酰胺酶在多重耐药鲍曼不动杆菌中的作用

目的探讨超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在多重耐药鲍曼不动杆菌中的作用。方法收集该院2014年临床分离的158株鲍曼不动杆菌,采用纸片扩散法(K-B)测定其对临床常用20种抗菌药物的敏感性。采用PCR对其中100株多重耐药进行ESBLs基因扩增,通过序列分析明确基因型。结果鲍曼不动杆菌对多黏菌素B均敏感,对米诺环素、亚胺培南、头孢哌酮-舒巴坦和丁胺卡那霉素的耐药率分别为3.9%、45.8%、48.1%和39.1%,其余抗菌药物耐药率均大于50%。多重耐药菌株中,32株SHV-12型基因阳性,54株PER-1型基因阳性,16株TEM-1型基因阳性,有2株同时携带这3种基因,6株同时携带SHV-12和PER-1型基因。结论鲍曼不动杆菌耐药情况较严重,多重耐药与携带SHV-12、PER-1和TEM-1型基因相关。     

超广谱β-内酰胺酶检测方法的应用比较

目的通过对297株大肠埃希菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型检测,评价所用的两种筛选试验和两种确证试验。方法用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的纸片扩散法做筛选试验和确证试验,用西门子公司的NC31革兰阴性菌测试复合板做肉汤稀释法的筛选试验,用该公司的ESBLs确认板做肉汤稀释法的确证试验。结果两种筛选试验的结果一致率为98.7%,差异无统计学意义(χ2=0.25,P0.05)。两种确证试验的结果一致率为99.3%,差异无统计学意义(χ2=0.50,P0.05)。筛选试验和确证试验的一致率为90.9%,差异有统计学意义(χ2=25.04,P0.05)。结论在日常的ESBLs检测工作中,筛选试验不论用纸片扩散法还是用肉汤稀释法、确证试验不论用纸片扩散法还是用肉汤稀释法,所得结果均较为一致,两种筛选试验均可筛选出全部的ESBLs阳性菌,为了避免把一部分ESBLs阴性菌误认为阳性菌,必须对筛选试验阳性的菌株应进一步做确证试验。     

三维试验法检测鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶

为了解我院鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药原因,我们采用三维试验法对临床分离的菌株进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶检测。     

阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶检测方法探讨

[目的]探索建立阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测方法。[方法]使用五种底物的“双纸片协同试验”对47株阴沟肠杆菌进行ESBLs检测。底物距中心的距离分别采用20mm和25mm。[结果】在距离为20mm时,不同底物对ESBLs的检出率分别为头孢吡肟：38．3％,氨曲南：29．8％,头孢噻肟：23．4％,头孢他啶：21．3％及头孢曲松：19.1％。当距离改为25mm时,检出率依次为12．8％、6、4％、2．1％、0和0。[结论]阴沟肠杆菌ESBLs检测的最佳底物为头孢吡肟,底物和阿莫西林克拉维酸纸片间的距离应选择20mm。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏分析

目的了解本地区大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药情况.以利于对产ESBLs菌的监控和治疗.方法对本院分离出273株大肠埃希菌进行了ESBLs检测和对17种扰生素的耐药性测定.ESBLs检测采用VTIEK32全自动微生物分析仪,药敏试验采用K-B法. 结果273株大肠埃希菌中有53株产ESBLs,检出率为19.41%.结论产ESBLs大肠埃希菌不容忽视,而对产ESBLs大肠埃希菌感染的治疗,亚胺培南应考虑作为首选的药物.     

用Vitek-ESBL试验检测超广谱β-内酰胺酶的建议

目的 观察Vitek药敏试卡检测ESBL（超广谱β－丙酰胺酶）的准确性，探讨能弥补其不足的检测方法。方法 用Vitek-GNS-NT卡（试卡法）和纸片扩散法（扩散法），对从临床标本中分离的268株大肠埃菌和208株克雷伯菌属细菌进行ESBL检测，对结果存在差异的菌株再用琼脂稀释法（稀释法）检测，并增加2种其他参考方法。结果 476被检测菌中，有18株菌试卡法与扩散法和稀释法有差异。其中有15株菌试卡法检测ESBL阴性，扩散法和稀释法检测ESBL阳性，特点为，加棒酸（CA）的复合药物比单药的MIC虽降低3个以上对倍稀释度，但未降至0．μg/ml。有2株菌试卡法和稀释法ESBL阴性，扩散法可疑阳性；有1株菌试卡法ESBL阳性，扩散法和稀释法阴性。参考方法显示，除了试卡法单独阳性的那株菌外，其他17株菌都为既产ESBL又产AmpC酶的菌株。结论 用试卡法检测ESBL，可检出大多数产ESBL的细菌，但对同时产AmpC等其他高活性酶的菌株，会造成ESBL检测的假阴性。补救措施为：试卡法结果一代头孢耐药，而ESBL阴性的那部分菌，将Labreport（实验报告）窗调至Rawdatereport（原始资料报告）窗，观察CTX（头孢噻肟）、CTX／CA和CAZ（头孢他啶）、CAZ／CA孔的A值，只要其中有一对A值同时下降40％左右，宜采用纸片法重复ESBL的检测。     

质粒介导的超广谱β-内酰胺酶的检测

由于 β 内酰胺酶 (ESBLs)类抗生素的广泛应用 ,耐药菌株不断增加 ,因此我们开展了超广谱 β 内酰胺酶的检测 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　标本来源　分离菌株为我院检验科 2 0 0 0年 1至 2月血、中段尿、痰、脓汁标本。1.2　培养基　Mueller Hinton琼脂。1.3　药敏纸片　北京天坛生物技术公司提供。1.4　接种　按标准片法的规定进行[1] 。初筛试验 :将菌液涂布于M N琼脂平板上贴上药敏试纸 ,头孢泊肟 10 μg或头孢他啶 30 μg或氨曲南 30 μg或头孢曲松 30 μg或头孢噻肟 30 μg(使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的灵敏度 )…     

三维试验法检测鲍曼不动杆菌产超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

为了解我院鲍曼不动杆菌对β 内酰胺类抗生素耐药原因,我们采用三维试验法对临床分离的菌株进行超广谱β 内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶检测。一、材料和方法1.菌株来源及鉴定　 60株菌株均分离自我院 2000年 6月~2002年 12月住院患者临床标本,分别为痰液 33份、创伤伤口分泌物 13份、烧伤创面分泌物 10份、气管切开口分泌物 2份、中段尿和血液各 1份,采用法国生物梅里埃公司API20NE鉴定菌种。标准菌株为大肠埃希菌(ATCC25922)和铜绿假单胞菌 (ATCC27853);肺炎克雷伯菌(ATCC700603) (产SHV 18型ESBLs)和阴沟肠杆菌(029M) (去阻…     

三种方法检测超广谱β—内酰胺酶的结果比较

比较三种文坛法检测广州地区１２家医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯各产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）敏感性,用纸片扩散初筛法,初筛出１６７株可疑产ＥＳＢＬｓ的菌株,然后进行纸片扩散确证法,双纸片协同法和浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ法）,结果有１４７株菌产ＥＳＢＬｓ（３２％大肠埃希菌的４２．６％克雷伯菌属ＥＳＢＬｓ菌性）,纸片扩散确下法和双纸片协同法检出率相似,但双纸片协同法的缺点的纸片中心间距不好控制,ＥｔｅｓｔＥＳＢＬ初筛试条检测ＥＳＢＬｓ有一定局限性,纸片扩散确证法适合临床常规测定。     

VITEK 2 Compact AST-GN13药敏条检测超广谱β-内酰胺酶试验结果的评价

目的了解VITEK 2 Compact检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和血培养中分离的奇异变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的可靠性。方法同时用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散确证法和VITEK 2 Compact仪器对临床标本分离的102株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和血培养中分离的奇异变形杆菌进行ESBLs检测。结果仪器法、确证法检测ESBLs菌株阳性率分别为52.9%、51.0%;仪器法检测ESBLs的灵敏度和特异性分别为98.2%、97.9%。结论 VITEK2Compact AST-GN13药敏条是检测ESBLs准确快速的检测方法 ,VITEK 2 Compact高级专家系统的ESBLs判定结果准确可靠。     

239株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的：检测超广谱β—内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)在革兰阴性杆菌中的表达及耐药特点，为临床积累经验。方法：应用双纸片协同试验和确证试验对239株革兰阴性杆菌进行ESBLs检测，同时分析药敏结果。结果：239株革兰阴性杆菌中ESBLs的检出率为20．5％(49／239)，其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、其他菌种的检出率分别为23．3％(21／90)、33．3％(8／24)、16．0％(20／125)。产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌株对青霉素类、第三代头抱菌素、β—内酰胺酶抑制药、β—内酰胺类、氨基糖苷类的耐药率分别为100％，57％～95％、19％～71％、0～90％、38％～90％，其中耐药率最低的为β—内酰胺类的亚胺培南-西司他丁(0)、β—内酰胺酶抑制药的哌拉西林-三唑巴坦(19％)和氨基糖香类的阿米卡星(38％)。结论：不仅大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌可产ESBLs，其他革兰阴性杆菌也可产ESBLs；对产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染的治疗可首选亚胺培南-西司他丁。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌药敏试验结果分析

目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌分离株的耐药特点,为临床用药提供数据。方法收集我院临床分离的确证为产ESBLs的大肠埃希菌151株,应用聚合酶链反应(PCR)检测产ESBLs株质粒的CTX-M基因。采用NCCLS推荐的琼脂稀释法测定11种抗生素对所有产酶株的最低抑菌浓度(MIC),并对结果进行分析。结果PCR结果显示,151株产ESBLs大肠埃希菌中CTX-M阳性为139株。在139株产CTX-M大肠埃希菌中,亚胺培南的抗菌活性最强,敏感率为100%,MIC90为0·25μg/ml;其次为阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦,敏感率分别为92·1%和90·6%;头孢西丁对其也有一定的抗菌活性,敏感率为64·7%;环丙沙星和氨苄西林/舒巴坦抗菌活性非常低,敏感率分别为20·9%和0。结论本地区临床分离的大肠埃希菌所产的ESBLs大多为CTX-M型,亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦对产CTX-M型ESBLs菌有很好的抗菌活性,氨苄西林/舒巴坦对其几乎没有抗菌作用。     

EDTA纸片增效试验检测鲍曼不动杆菌金属β-内酰胺酶

目的探讨金属β-内酰胺酶(MBL)检测方法,为临床合理选择抗菌药物提供确切的依据。方法收集104株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(CRAB),以乙二胺四乙酸(EDTA)纸片增效法检测MBL表型,并与聚合酶链反应(PCR)检测MBL基因结果进行比较。结果应用PCR方法,在104株受试菌中检出MBL基因阳性菌21株;EDTA纸片增效法检测出24株阳性菌株,对比PCR实验结果,该方法的敏感度95.2%,特异度95.1%。结论 EDTA纸片增效法检测鲍曼不动杆菌的MBL方法简便、结果可靠、成本低廉,适合于基层医院临床微生物学实验室对产MBL鲍曼不动杆菌的初步鉴定。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及其药敏试验结果分析

由于 β 内酰胺酶类抗生素的广泛应用及不合理使用 ,耐药菌株迅速增加 ,尤其产超广谱 β 内酰胺酶(ESBLs)细菌引起的耐药问题更为严重。为了解本院ESBLs细菌的检出及耐药情况 ,我们对从住院患者的细菌送检标本中分离得到的 15 2株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌进行了ESBLs检测 ,并对其进行药敏试验 ,结果报告如下。1　材料与方法1.1　菌株来源　 2 0 0 1年 7月至 2 0 0 2年 6月从本院住院患者临床细菌标本中分离的菌株 ,其中大肠埃希菌 10 6株 ,肺炎克雷伯菌 4 6株。分离的菌株在半固体琼脂中保存。1.2　菌株鉴定　用ATB细菌分析系统 (法…     

肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶的检测

为了解临床分离菌株超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的产生情况及不同方法、不同指示剂的敏感性,我们对收集的肠杆菌科细菌195株进行研究.用双纸片协同试验检测耐氨苄西林的肠杆菌科细菌195株,产ESBL 55株,阳性率为28.2%.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和肠杆菌属细菌是主要的产酶菌.选其中40株用三相试验检测,仅检出33株,三相试验对ESBL的检出率低于双纸片协同试验.在头孢曲松、氨曲南、头孢他啶和头孢噻肟四种抗生素中,头孢曲松筛选ESBL的检出率最高,头孢他啶的检出率最低.常规药物敏感试验的耐药标准和NCCLS关于ESBL的筛选标准(1999)在判断ESBL上存在很大差别,提示临床微生物工作者,为避免可疑ESBL的漏检,应使用NCCLS的新标准对ESBL进行初筛.在常用抗生素20种中,亚胺培南对产ESBL细菌的抗菌效果最好(敏感率为100%),其次为头孢西丁.β-内酰胺抗生素+酶抑制剂(复方氨苄西林、复方阿莫西林和复方替卡西林)的作用效果不好.