心肌成纤维细胞在血管紧张素II致心脏间质纤维化中的作用

在心脏纤维化过程中 ,心肌成纤维细胞扮演着重要角色。血管紧张素 可增加心肌成纤维细胞合成 ,分泌整合素、骨桥素等粘附分子 ,从而诱导细胞外基质蛋白合成 ,促进间质纤维化     

血管紧张素Ⅱ对不同年龄大鼠的促心肌肥厚作用

目的　探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )在不同年龄SD大鼠致心肌肥厚作用的特点及机制。　方法　应用心肌细胞和心肌成纤维细胞体外培养 ,分别测定心肌细胞3 H 亮氨酸 (3 H leu)掺入和心肌成纤维细胞3 H 胸嘧啶脱氧核苷 (3 H TdR)掺入 ,观察AngⅡ对不同年龄SD大鼠心肌细胞蛋白合成和心肌成纤维细胞分裂增殖的影响及心肌成纤维细胞对心肌细胞蛋白合成的作用。　结果　 10 6mol/L的AngⅡ可使新生SD大鼠的心肌细胞3 H leu掺入明显增加 (P <0 0 5 )。加入心肌成纤维细胞培养上清液后 ,新生乳鼠心肌细胞3 H leu掺入增加更显著 (P <0 0 1) ,但不能增加 12月龄组心肌细胞3 H leu的掺入 ;10 6mol/LAngⅡ可使新生和 12月龄两组SD鼠心肌成纤维细胞3 H TdR掺入均显著增加 (P <0 0 1) ,Losartan可阻断上述AngⅡ的作用。　 结论　AngⅡ通过AngⅡ 1型受体 (AT1)受体对新生乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞具有直接促蛋白合成及细胞分裂作用 ,并可通过心肌成纤维细胞进一步促进心肌肥大。随年龄增长 ,AngⅡ主要影响心肌成纤维细胞分裂增殖 ,促进心肌间质纤维化     

增龄过程中心肌纤维化的发生机制及研究进展

心肌纤维化常伴随发生高血压、心肌梗死及心力衰竭等心血管疾病。研究发现 ,增龄过程也发生心肌纤维化 ,心肌纤维化是心脏老化的一个重要特征 ,可引起心肌结构紊乱、僵硬度增加、心脏顺应性降低、心律失常发生率增高 ,并可成为老年人慢性心功能不全难以逆转的原因之一。1　增龄所致心肌纤维化的特点1.1　 正常心脏胶原构成　心肌细胞负责心脏的泵功能 ,占据心肌结构的 2 / 3,然而其数量却不足心脏细胞总数的 1/ 3,非心肌细胞占多数 ,其中 90 %以上是成纤维细胞 ,另外还有少量的内皮细胞、血管平滑肌细胞及巨噬细胞等。成纤维细胞能够合成胶…     

激活素A和卵泡抑素对大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原沉积的影响

目的探讨激活素A(Activin A)和卵泡抑素(FS)对体外培养的原代大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原沉积的影响。方法取出生24 h内Wistar乳鼠心肌成纤维细胞进行体外培养,分别向培养液中加入Activin A或FS+Activin A。应用MTT法检测细胞增殖情况,应用化学比色法检测培养液上清羟脯氨酸含量,RT-PCR法检测培养细胞Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)mRNA表达。结果与对照组相比,不同浓度Ac-tivin A组心肌成纤维细胞的OD值及羟脯氨酸含量明显增高(P<0.05～0.01),Col-Ⅰ及Col-ⅢmRNA表达水平明显升高。不同浓度FS组可降低心肌成纤维细胞的OD值及羟脯氨酸含量(P<0.05～0.01),下调Col-Ⅰ及Col-ⅢmRNA表达水平。结论 Activin A能够促进心肌成纤维细胞增殖及胶原沉积,提示Activin A可能在心肌间质纤维化的发生发展中起重要作用,FS能够拮抗Activin A诱导的心肌间质纤维化。     

心肌成纤维细胞转分化与糖尿病心肌病的研究进展

糖尿病心肌病是一种以心肌结构和功能重构为特征的特异性心肌病,其发生不依赖于高血压、冠状动脉病变和其他心脏疾病。心肌纤维化是糖尿病心肌病发展末期的病理特征之一,是预后不良的有力证据。其中,心肌成纤维细胞转分化在糖尿病心肌病的心肌纤维化发展过程中可能起关键作用。心肌成纤维细胞转分化涉及多种复杂的纤维生成途径,共同激活成纤维细胞从而促进心肌纤维化。目前,心肌成纤维细胞转分化在糖尿病心肌病中的发生机制尚未被广泛认知,该文重点叙述了糖尿病心肌病心肌纤维化发展过程中心肌成纤维细胞转分化的分子机制。     

血管紧张素Ⅱ及氯沙坦对糖尿病大鼠心肌成纤维细胞α1(Ⅰ)前胶原mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)及其1型受体阻断剂氯沙坦对糖尿病动物模型心肌成纤维细胞α1(Ⅰ)前胶原mRNA和蛋白表达的作用。方法 用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型，饲养12周后分离心肌成纤维细胞进行原代培养。分别将一定浓度的ATⅡ(10^-9～10^-7mmol／L)，和ATⅡ10^-7 mmol／L加上不同浓度ATⅡ受体阻滞剂氯沙坦(10^-7～10^-5mmol／L)加入细胞培养液中刺激48h，分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹方法检测大鼠心肌成纤维细胞α1(I)前胶原的mRNA及蛋白表达。结果体外成功地培养糖尿病心肌成纤维细胞，并经免疫组化染色结果证实。经ATⅡ刺激48h后，α1(Ⅰ)前胶原mRNA和蛋白表达量明显增高，增高程度与ATⅡ浓度呈正比；加入氯沙坦后，前胶原mRNA和蛋白表达量较单用ATⅡ组下降，也呈浓度依赖性。结论 ATⅡ可促进糖尿病大鼠心肌成纤维细胞的胶原合成，可能在糖尿病大鼠心肌纤维化倾向中起重要作用，该作用可能主要通过ATⅡ1型受体介导完成。     

过氧化体增殖物激活型受体α在血管紧张素Ⅱ诱导的心脏细胞外基质重构中的抑制作用及机制

目的探讨体外条件下过氧化体增殖物激活型受体α激动剂苯扎贝特对血管紧张素Ⅱ促心肌纤维化的抑制作用及活性氧在其中的作用。方法新生Wistar大鼠的原代心肌成纤维细胞培养,以血管紧张素Ⅱ(10-7mol/L)刺激模拟体外心肌纤维化,用过氧化体增殖物激活型受体α激动剂苯扎贝特(10-5mol/L)作用于细胞,用MTT比色法检测心肌成纤维细胞的增殖情况,采用逆转录聚合酶链反应检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和基质金属蛋白酶2mRNA的表达,用2’,7’二氯荧光黄双乙酸盐荧光染色法检测心肌成纤维细胞内活性氧的水平。结果血管紧张素Ⅱ明显促进心肌成纤维细胞增殖,但苯扎贝特不能抑制血管紧张素Ⅱ的促增殖作用。血管紧张素Ⅱ刺激后12h,心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达增加,基质金属蛋白酶2表达降低;预先用苯扎贝特干预30 min可以抑制血管紧张素Ⅱ的作用,过氧化体增殖物激活型受体α特异性拮抗剂MK886可以抑制苯扎贝特的作用。血管紧张素Ⅱ增加心肌成纤维细胞内活性氧的生成,苯扎贝特能够抑制血管紧张素Ⅱ的促活性氧作用,MK886可以阻断苯扎贝特的作用。结论过氧化体增殖物激活型受体α通路的激活能够抑制血管紧张素Ⅱ的促心肌纤维化作用,其作用可能是通过抑制活性氧生成来实现的。     

心脏肌成纤维细胞活化的力学调控

在心肌修复或纤维化过程中,以成纤维细胞为主的多种前体细胞向心脏肌成纤维细胞(CMFs)活化,合成大量细胞外基质成分,并持续存在于心肌瘢痕中。CMFs活化除了受促纤维化因子的调控外,还受力学因素的影响。ECM刚度增加及循环应变的改变能促进CMFs活化推动心肌纤维化持续进展。通过调控CMFs对机械应力的敏感性来抑制CMFs活化的方法有可能成为心肌纤维化治疗的新选择。     

血管紧张素ⅡⅠ型受体反义寡核苷酸逆转心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的实验研究

目的 :用血管紧张素 （Ang ） 型受体 （AT1 R）反义寡核苷酸 （AS- ODN）体外逆转心肌成纤维细胞增殖及胶原合成。方法 :将培养的乳鼠心肌成纤维细胞分为正常组、Ang 组、AT1 R- AS- ODN组 ,观察 Ang 及 AT1 R-AS- ODN对心肌成纤维细胞 c- jun基因表达、成纤维细胞增殖、3H- Proline掺入率的影响。结果 :Ang 可刺激心肌成纤维细胞增殖、c- jun基因表达增多、3H - Proline掺入率增加。 AT1 R- AS- ODN能逆转 Ang 的上述作用。结论 :AT1 R- AS- ODN能有效逆转 Ang 诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成。     

银杏叶提取物对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞纤维化的干预作用

目的研究银杏叶提取物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞纤维化的干预作用。方法体外培养心肌成纤维细胞,加入10-7mol AngⅡ模拟大鼠心肌纤维化体外模型。ELISA检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β(TGF-β)含量。结果银杏叶提取物可明显降低AngⅡ引起的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原分泌增加,并能降低CTGF、TGF-β表达。结论银杏叶提取物可改善AngⅡ引起的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌增加,其机制可能与CTGF、TGF-β有关。     

螺内酯抑制心肌成纤维细胞增殖的实验研究

目的:研究螺内酯对培养的心肌成纤维细胞增殖的作用,揭示螺内酯抑制心肌纤维化的可能机制。方法:进行新西兰白兔心脏心肌成纤维细胞的培养;测定细胞计数,细胞活性(WST-1分解)和DNA合成(BrdU掺入),并以流式细胞仪测定细胞周期等以表示细胞增殖。结果:不同浓度的螺内酯(2.5×10-7~5×10-5mol/L)分别作用1、3、7 d后,心肌成纤维细胞的数量明显减少,并呈剂量-时间-效应(P<0.01)。细胞经不同浓度螺内酯(2.5×10-7~5×10-5mol/L)作用1 d后,DNA合成、活细胞代谢活性和细胞周期的DNA合成期(S) DNA合成后期(G2) 分裂期(M)的百分比明显减少(P<0.01)。结论:螺内酯可能通过抑制心肌成纤维细胞的增殖而抑制心肌纤维化。     

RNA干扰选择性下调心肌成纤维细胞结缔组织生长因子

目的研究RNA干扰技术能否选择性下调乳鼠心肌成纤维细胞结缔组织生长因子（CTGF）及其诱导的下游纤维化成分的表达。方法利用差速贴壁法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞。用携带U6启动子和CTGF特异性短发夹RNA（shRNA）编码序列的质粒载体CTGF-shRNA，及含非特异性shRNA编码序列的对照质粒CTGF-con以lipofectamine ^TM2000为载体转染原代培养的乳鼠心肌成纤维细胞。加入含G418的DMEM培养液培养一月筛选后获得稳定转染的细胞。通过半定量RT-PCR检测细胞内转化生长因子（TGF-β1），CTGF及其下游纤维化成分纤维连接蛋白（FN）的表达，Western-blot法检测细胞内CTGF及其下游纤维化成分纤维连接蛋白（FN）的表达。结果CTGF在心肌成纤维细胞中有基础表达，并在转化生长因子β1（TGF-β1）刺激下其含量增加，CTGF-shRNA使心肌成纤维细胞CTGF的mRNA和蛋白质的表达分别降低65％和78％，FN的mRNA和蛋白质的表达分别降低81％和63％，而TGF-β1mRNA的表达上调32％。转染对照质粒组较空白对照组与脂质体组CTGF，FN表达量差异无统计学意义。结论RNA干扰技术能选择性下调乳鼠心肌成纤维细胞CTGF及下游纤维化成分FN的表达，进一步为拮抗心肌纤维化的基因治疗提供了依据。     

Yes相关蛋白在血管紧张素Ⅱ诱导的心肌纤维化中的作用及机制研究

目的 探讨Yes相关蛋白(YAP)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌纤维化中的作用及其机制.方法 C57/B6小鼠30只,随机分为观察组、盐水组和模型组[腹腔注射Ang Ⅱ 1.5 mg/(kg·d)]4周,构建心肌纤维化模型,每组10只.将出生1～3 d SD乳鼠,差速贴壁法提取原代心肌成纤维细胞(CF),随机分...     

心肌成纤维细胞的特性和调节

心肌成纤维细胞在心脏中是数量最大的细胞,它们通过维持细胞外基质平衡在受损或衰竭心脏中纤维化心肌重塑发挥重要作用。它既调节正常的心脏功能,也参与高血压病、心肌梗死和心力衰竭等的不良心肌重塑。综述心肌成纤维细胞的特性,包括起源、机械电特性、细胞外基质代谢中的作用,以及正常和病理状态下心肌成纤维细胞对环境刺激的功能反应和分泌生物活性因子的能力,并总结以心肌成纤维细胞为靶细胞调节心肌纤维化的研究现状。     

心肌纤维化的发病机制及治疗进展

心肌纤维化是多种心脏疾病的共同病理特征。其发病机制有：肌成纤维细胞介导的细胞外基质重塑、心肌胶原纤维成分比例失衡、细胞因子及炎症介质活化、肾素血管紧张素醛固酮系统（renin-angiotensin aldosterone system，RASS）过度激活以及microRNA的调控。目前抗心肌纤维化的治疗主要有RASS相关药物、他汀类、信号通路抑制剂、钙通道阻滞剂、基因治疗以及中医药辅助治疗。     

醛固酮促进血管紧张素Ⅱ诱导大鼠心脏成纤维细胞合成胶原

为探讨醛固酮对大鼠心脏成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 1型受体表达的影响及醛固酮对血管紧张素Ⅱ促进心脏成纤维细胞胶原代谢效应的影响 ,采用3 H 脯氨酸掺入法对体外分离培养的心脏成纤维细胞分别检测醛固酮、血管紧张素Ⅱ以及二者共同作用后对心脏成纤维细胞胶原合成量的影响 ;分别利用放射配体结合实验和半定量逆转录—聚合酶链反应测定经醛固酮处理后细胞血管紧张素Ⅱ 1型受体及其mRNA的表达水平 ,并比较其与对照组间的差异。结果发现血管紧张素Ⅱ (10 -7mol/L)可使心脏成纤维细胞胶原合成量显著增加 (P <0 .0 1) ,醛固酮对心脏成纤维细胞的胶原合成无影响 ,但醛固酮可明显地增强血管紧张素Ⅱ促进心脏成纤维细胞胶原合成的效应 ;经醛固酮 (10 -7mol/L)处理的心脏成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 1型受体的表达与对照组比较明显升高 (2倍 ) ,细胞血管紧张素Ⅱ 1型受体mRNA的水平也较对照组显著增加 (1.5倍 )。结果说明醛固酮虽然不能通过直接作用影响心脏成纤维细胞的胶原代谢 ,但它可以通过上调心脏成纤维细胞血管紧张素Ⅱ 1型受体的表达来增强血管紧张素Ⅱ致心脏成纤维细胞胶原合成增多的效应     

心肌间质细胞在心肌纤维化中的作用

在心肌纤维化的形成过程中,往往有一些间质效应细胞发挥着关键作用。这些细胞虽然不一定能直接合成和分泌胶原,但他们的激活,已成为胶质生成细胞的重要来源。涉及心肌胶原代谢调控的间质细胞主要有成纤维细胞、肌成纤维细胞、平滑肌细胞、内皮细胞、周细胞等。     

心肌梗死后心脏修复与心肌细胞再生的研究进展

心肌梗死后组织缺血缺氧,坏死,导致一个多相的修复过程,受损的组织由成纤维细胞和肌成纤维细胞产生纤维瘢痕所取代。非梗死的心室壁反应性重塑,包括间质和血管周围纤维化,导致心室壁几何、生物力学、生化等发生改变。虽然最初的修复性纤维化对防止心室壁破裂至关重要,但是过度的纤维化反应导致心功能进行性损害,最终导致心功能衰竭。近年来研究表明,心脏具有可塑性,恢复受损心脏功能,促进梗死心肌修复是心血管疾病治疗的重要目标。为此,人们不断探索新的治疗手段,再生治疗给心肌梗死治疗带来了新的希望,本文对目前心肌梗死的修复性及反应心肌纤维化的机制进行总结,探讨诱导成纤维细胞和肌成纤维细胞转化为心肌细胞,以及心肌细胞再生的潜力,对目前现有和未来抑制心肌纤维化治疗策略进行综述。     

自发性高血压大鼠血清脂联素水平及其对心肌胶原合成影响的研究

目的 观察自发性高血压大鼠（SHR）血清脂联素浓度及脂联素受体在大鼠心脏组织的分布,并观察脂联素对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞（CFbs）Ⅰ型胶原合成的影响,以评价脂联素在高血压心肌纤维化中的作用。方法 酶联免疫吸附实验法（ELISA）检测大鼠血清脂联素浓度;实时定量PCR法检测大鼠心脏脂联素受体;消化法培养CFbs;蛋白免疫印迹（Western Blot）检测Ⅰ型胶原蛋白。结果SHR血清脂联素浓度及其受体在心脏的分布随周龄增加而降低,脂联素能部分抑制AngⅡ诱导的CFbsⅠ型胶原的合成。结论 血清脂联素浓度与高血压发生发展有关,脂联素能部分抑制心肌纤维化。     

益气活血中药对血管紧张素Ⅱ致培养乳鼠心脏间质成纤维细胞增殖的影响

目的通过研究益气活血药对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致心脏成纤维细胞增殖的影响,寻找能抑制血管紧张素Ⅱ所致心脏成纤维细胞增殖的益气活血中药.方法通过在培养乳鼠心脏成纤维细胞增殖加入血管紧张素Ⅱ,观察细胞直径和细胞数;在此基础上,进行益气活血中药对血管紧张素Ⅱ致培养乳鼠心脏成纤维细胞增殖实验药理学的研究.结果 Losartan、丹参素和川芎嗪大、中、小剂量组可显著抑制AngⅡ增加心肌成纤维细胞数量的作用,对心肌成纤维细胞直径无明显影响,说明Losartan、丹参素和川芎嗪抑制心肌成纤维细胞的增殖,且呈一定的量效关系,而益气药党参和黄芪无此作用.结论活血药丹参素、川芎嗪可抑制AngⅡ引起的心脏成纤维细胞增殖并呈一定的量效关系;益气药党参、黄芪在本研究中未发现有此抑制作用.