盐酸戊乙奎醚对内毒素血症大鼠全身炎性反应的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚对内毒素血症大鼠血清TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS),肺组织NF-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)含量的影响. 方法 健康SD大鼠60只,采用随机数字表法分为5组(每组12只):对照组(C组)、内毒素组(LPS组)、LPS+低剂量盐酸戊乙奎醚组(P1组)、LPS+中剂量盐酸戊乙奎醚组(P2组)、LPS+高剂量盐酸戊乙奎醚组(P3组).LPS组腹腔注射内毒素8 mg/kg制备内毒素血症模型,C组给予等量生理盐水,P1组～P3组给予相应剂量的盐酸戊乙奎醚5 min后注射LPS,给药6h后处死动物取标本.采用ELISA检测血清TNF-α含量,采用比色法测血清iNOS活力,Western blot检测肺组织NF-κB p65含量,并观察肺组织病理学改变. 结果 与C组比较,LPS组、P1组、P2组、P3组血清TNF-α含量显著升高(P＜0.05),iNOS活力水平明显升高(P＜0.05),肺组织NF-κB p65表达明显增高(P＜0.05);与LPS组比较,P2组、P3组血清TNF-α、iNOS活力水平和肺组织NF-κB p65含量均下降(P＜0.05),而P1组TNF-α、iNOS活力和NF-κB p65表达水平,差异无统计学意义(P＞0.05);P2组、P3组间各指标表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);P2组、P3组肺组织病理学损伤程度明显轻于LPS组(P＜0.05). 结论 盐酸戊乙奎醚可能通过下调TNF-α、NF-κB p65的表达,减少iNOS活化来抑制内毒素休克大鼠全身炎症反应.     

盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时NF-κB活性的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时NF-κB活性的影响.方法 健康成年Wistar大鼠24只,体重200～250 g,雌雄不限,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、失血性休克致急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).S组仅行动、静脉穿刺,不制备急性肺损伤模型;ALI组和P组经右侧颈内动脉穿刺置管监测BP,左侧股动脉置管放血,通过放血和回输血液维持BP 35～45 mm Hg 1 h,然后回输全部失血及等同于失血量的生理盐水,制备急性肺损伤模型;P组于放血前即刻静脉注射盐酸戊乙奎醚2 mg/kg. 于模型制备成功后6 h,采集右侧股动脉血样行血气分析,采用ELISA法测定右心房血浆TNF-α浓度,计算肺湿干重比,采用免疫组织化学法检测右肺组织NF-κB p65的表达,光镜下观察肺组织病理学.结果 与S组比较,Au组和P组PaO2降低,PaCO2、肺湿干重比、TNF-α浓度升高,NF-κB p65表达上调(P<0.05);与ALI组相比,P组PaO2升高,PaCO2、肺湿干重比、TNF-α浓度降低,NF-κB p65表达下调(P<0.05).病理结果显示:P组肺组织损伤较ALI组明显减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过降低肺组织NF-κB的活性抑制炎性反应,从而减轻失血性休克诱发大鼠的急性肺损伤.     

盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB mRNA表达及SOD活性的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB mRNA表达及SOD活性的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,月龄2月,体重230～280 g,随机分为4组(n=8),对照组(C组)腹腔和尾静脉均注射生理盐水1 ml/kg;急性肺损伤组(ALI组):腹腔注射生理盐水1 ml/kg,30 min后经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;盐酸戊乙奎醚低剂量组(LP组)、高剂量组(HP组)分别腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.3和1 mg/kg,30 min后经尾静脉注射LPS 5 mg/kg.静脉注射生理盐水或LPS后6 h时,取肺组织,检测NF-κB mRNA的表达、TNF-α和MDA的含量和SOD活性,计算肺组织湿/干重比(W/D)及含水量,观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、LP组和HP组肺组织NF-κB mRNA表达上调,TNF-α及MDA含量升高,SOD活性降低,W/D和肺组织含水量升高(P＜0.05);与ALI组比较,LP组和HP组肺组织NF-κB mRNA表达下调,TNF-α及MDA含量降低,SOD活性升高,W/D和肺组织含水量降低(P＜0.05);与LP组比较,HP组肺组织NF-κB mRNA表达下调,TNF-α及MDA含量降低,SOD活性升高,W/D和肺组织含水量降低(P＜0.05).LP组和HP组肺组织病理学损伤较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制可能与下调肺组织NF-κB mRNA表达,降低肺局部炎性反应,增强机体抗氧化能力有关.     

盐酸戊乙奎醚对心脏瓣膜置换术患者CPB期间心肌NF-κB活性及血浆TNF-α水平的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚对心脏瓣膜置换术患者CPB期间心肌NF-κB活性及血浆TNF-α水平的影响.方法 择期CPB下行心脏瓣膜置换术的患者45例,性别不限,年龄18～64岁,体重指数20～22 kg/m~2,NYHA心功能分级Ⅱ或Ⅲ级,随机分为3组(n=15):对照组(C组)和不同剂量盐酸戊乙奎醚组(P_1组和P_2组).P_1组和P_2组于手术开始即刻由中心静脉分别注射盐酸戊乙奎醚0.05和0.1mg/kg,C组给予等容量生理盐水.于CPB开始前和CPB期间测定心肌NF-κB的活性和血浆TNF-α及心肌肌钙蛋白I(cTnI)的浓度,并观察心肌组织病理学结果.结果 与CPB开始前比较,三组CPB期间血浆TNF-α和cTnI的浓度升高,心肌NF-κB活性增强(P＜0.01);与C组比较,P_1组和P_2组CPB期间血浆TNF-α和cTnI的浓度降低,心肌NF-κB活性减弱(P＜0.01);P_1组和P_2组CPB期间血浆TNF-α、cTnI的浓度和心肌NF-κB活性比较差异无统计学意义(P＞0.05).P_1组和P_2组心肌病理学损伤较C组减轻.结论 CPB前静脉注射盐酸戊乙奎醚0.05、0.1 mg/kg可减轻心脏瓣膜置换术患者心肌再灌注损伤,其机制与抑制心肌NF-κB活性和血浆TNF-α浓度的升高,从而减轻炎性反应有关.     

异氟醚对大鼠全脑缺血再灌注时海马ICAM-1 mRNA和外周血中性粒细胞表面CD11b/CD18表达的影响

目的 探讨异氟醚对大鼠全脑缺血再灌注时海马组织ICAM-1 mRNA和外周血中性粒细胞表面CD11b/CD18表达的影响.方法 Wistar大鼠63只,随机分为3组(n=21):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和异氟醚组(Iso组).采用四血管阻断法制备全脑缺血再灌注模型.Iso组在四血管阻断过程中及再灌注早期吸入1.4%异氟醚.于再灌注6、24、72 h时,采集外周静脉血,采用流式细胞仪测定中性粒细胞表面CD11b/CD18和CD18的表达;RT-PCR法测定海马组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA和核因子κB(NF-κB)mRNA的表达.结果 与S组比较,I/R组再灌注6 h时CD11b/CD18和CD11b表达上调,再灌注24、72 h时ICAM-1 mRNA表达上调,I/R组和Iso组再灌注24 h时NF-κB mRNA表达上调(P＜0.05或0.01);与I/R组比较,Iso组再灌注6 h时CD11b表达下调,再灌注24 h时ICAM-1 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 异氟醚可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤,可能与其抑制海马ICAM-1 mRNA及外周血中性粒细胞表面CD11b/CD18的表达有关.     

戊乙奎醚预先给药对大鼠急性肺损伤时NF-κB的影响

目的 探讨戊乙奎醚预先给药对大鼠急性肺损伤(ALI)时NF-κB的影响.方法 雄性SD大鼠35只,体重210～280 g,随机分为5组(n=7):对照组(C组)、ALI组和低、中、高剂量戊乙奎醚组(P1-3组).采用经尾静脉注射内毒素5 mg/kg的方法建立大鼠ALI模型.C组和ALI组经腹腔注射生理盐水0.5 ml,P1～3组分别经腹腔注射戊乙奎醚0.03、0.1和3 mg/kg,30 min后ALI组、P1～3组制备AU模型,C组不制备模型.于静脉注射LPS后4 h时,行血气分析,计算氧合指数;称量肺组织湿重(W)、干重(D),计算W/D;采用比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;采用RT-PCR法测定肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达水平;采用ELISA法测定肺组织TNF-α和IL-1β的含量;采用非放射性EMSA法测定肺组织NF-κB活性;采用免疫组织化学法测定肺组织NF-κB的表达水平.结果 与C组比较,其余各组氧合指数降低,肺组织W/D和MPO活性、TNF-α,IL-1β含量及其相应mRNA表达水平、NF-κB活性和表达水平均升高(P<0.05或0.01);与ALI组比较,P1～3组氧合指数升高,肺组织W/D和MPO活性降低,TNF-α、IL-1β含量及其相应mRNA表达水平降低,NF-κB活性和表达水平降低(P<0.05);P1～3组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 戊乙奎醚预先给药减轻大鼠急性肺损伤的机制可能与抑制NF-κB的活化,下调NF-κB的表达,降低肺组织炎性反应有关.     

盐酸戊乙奎醚对大鼠失血性休克致急性肺损伤肺组织CD40和CD40L表达的影响

目的观察盐酸戊乙奎醚对大鼠失血性休克致急性肺损伤肺组织CD40和CD40L表达的影响,探讨盐酸戊乙奎醚的肺保护作用机制及对预后的影响。方法选取健康成年大鼠40只,随机均分为对照组(S组),失血性休克模型组(A组),P1组、P2组、P3组分别于放血前即刻、放血完成后即刻、再灌注前即刻给予盐酸戊乙奎醚2mg/kg。除S组外其他组动物制作失血性休克再灌注急性肺损伤模型。采用免疫组织化学检测肺组织CD40、CD40L的表达,采用ELISA法检测血浆TNF-α、IL-10含量,用HE染色观察肺组织的病理改变。结果 A组肺组织明显增大,肺叶表面有散在的大小不等的红色斑点,切面可见粉红色液体渗出,镜下见肺泡壁增厚,肺间质水肿,肺泡腔内有大量的红细胞渗出及中性粒细胞浸润,病理形态证实急性肺损伤模型建立成功。P1组、P2组和P3组肺组织的炎症病理改变较A组减轻,炎性细胞浸润减少,S组肺组织形态正常。A组、P1组、P2组和P3组W/D明显大于、CD40和CD40L表达明显高于S组(P0.05)。而P1组、P2组和P3组W/D明显小于、CD40和CD40L表达明显低于A组(P0.05)。P1组、P2组W/D明显小于、CD40和CD40L表达明显低于P3组(P0.05),P1组、P2组差异无统计学意义。A组、P1组、P2组和P3组TNF-α、IL-10含量明显高于S组(P0.05),P1组、P2组和P3组TNF-α、IL-10含量明显低于A组(P0.05),P1和P2组TNF-α、IL-10含量明显低于P3组(P0.05),P1组和P2组差异无统计学意义。结论盐酸戊乙奎醚抑制大鼠失血性休克复苏肺组织CD40、CD40L的表达,进一步降低TNF-α、IL-10的合成和表达,从而减轻肺损伤,具有一定的肺保护作用。并且,早期给予盐酸戊乙奎醚对预后改善明显。     

盐酸戊乙奎醚在大鼠急性重症胰腺炎相关肺损伤中的作用

目的探讨盐酸戊乙奎醚在大鼠急性重症胰腺炎相关肺损伤(PALI)中的作用及对缺氧诱导因子(HIF)-1α相关炎症因子表达的影响。方法 40只健康雄性成年SD大鼠,应用随机数字法分为三组:假手术组(S组,n=8)、PALI模型组(ALI组,n=16)、盐酸戊乙奎醚+PALI模型组(P组,n=16)。ALI组和P组采用4%牛磺胆酸钠1ml/kg逆行性胰胆管注射法建立大鼠PALI模型。P组在建立模型后即刻给予大鼠腹腔内注射盐酸戊乙奎醚,S组和ALI组经腹腔注射等量生理盐水。造模后12h处死大鼠,取肺组织称重后计算肺湿干重比(W/D),光镜下观察胰腺及肺组织病理学评分,ELISA法测定肺组织HIF-1α、IL-1β、IL-6蛋白含量和血清胰淀粉酶含量,Western blot检测肺组织TLR4、NF-κB p65蛋白含量。结果 ALI组和P组大鼠的胰腺组织均存在广泛的中性粒细胞浸润、腺泡出血坏死和脂肪坏死。与S组比较,ALI组与P组胰腺病理评分、肺损伤评分、肺W/D明显升高,胰淀粉酶含量明显降低(P0.01);与ALI组比较,P组肺损伤评分、肺W/D明显降低(P0.05)。与S组比较,ALI组和P组大鼠肺组织HIF-1α、IL-1β、IL-6含量明显升高,肺组织TLR4、NF-κB p65含量明显升高(P0.01);与ALI组比较,P组肺组织HIF-1α、IL-1β、IL-6含量明显降低,TLR4、NF-κB p65蛋白含量明显降低(P0.05)。结论盐酸戊乙奎醚在不改变急性重症胰腺炎的胰腺组织损伤的情况下能够显著减轻急性重症胰腺炎相关肺损伤,机制可能与抑制HIF-1α等相关炎性因子的表达相关。     

盐酸戊乙奎醚对体外循环致大鼠急性肺损伤的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚对体外循环(CPB)致大鼠急性肺损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠40只,4～6月龄,体重330～420 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=10):假手术组(S组)仅进行动脉和静脉穿刺置管;急性肺损伤组(ALI组)、低剂量盐酸戊乙奎醚组(PL组)和高剂量盐酸戊乙奎醚组(PH组)建立CPB模型;PL组和PH组分别在预冲液中加入盐酸戊乙奎醚0.6和2.0 mg/kg,ALI组加入等容量生理盐水,进行CPB1h.于CPB前和CPB结束后2h采集动脉血样,进行血气分析;于CPB结束后2h时采集上腔静脉血样,测定血浆TNF-α和IL-6的浓度;取肺组织测定含水量、MDA含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性,光镜下观察病理学改变.结果 与S组比较,ALI组、PL组和PH组CPB结束后2h时PaO2降低,肺组织含水量、MDA含量和血浆TNF-α和IL-6的浓度升高,肺组织GSH-px活性降低(P＜0.05);与ALI组比较,PL组和PH组CPB结束后2h时PaO2升高,肺组织含水量、MDA含量和血浆TNF-α和IL-6的浓度降低,肺组织GSH-px活性升高(P＜0.05),病理学损伤减轻;与PL组比较,PH组CPB结束后2h时PaO2升高,肺组织含水量、MDA含量和血浆TNF-α和IL-6的浓度降低,肺组织GSH-px活性升高(P＜0.05),病理学损伤减轻更明显.结论 盐酸戊乙奎醚0.6和2.0 mg/kg可减轻CPB致大鼠急性肺损伤,且与剂量有关,其机制与抑制脂质过氧化反应和炎性反应有关.     

安氟醚、异氟醚对大鼠肺组织NF-κB和血浆TNF-α的影响

目的比较安氟醚、异氟醚对大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)和血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法选用72只SD大鼠随机均分为安氟醚组(E组)和异氟醚组(I组)。两种麻醉药吸入浓度均为1.0 MAC。分别于麻醉前(T1)、麻醉诱导后即刻(T2)、麻醉2 h(T3)、4 h(T4)、6 h(T5)和停药2 h(T6)各处死6只大鼠,开胸取肺组织并经左心室取血5 ml。光镜下观察肺组织病理形态的改变。结果两组在T4时可见少量中性粒细胞及肺巨噬细胞渗出,其后明显增多,可见肺毛细血管轻度扩张、充血及肺间质水肿。与T1时比较,E组在T4~T6时肺组织NF-κB的含量增加(P<0.05),I组在T4、T5时增加(P<0.05)。T4~T6时,E组肺组织NF-κB的含量和血浆TNF-α的浓度均明显高于I组(P<0.05)。与T1时比较,两组TNF-α在T2时降低(P<0.05),其后增加(P<0.05)。结论吸入安氟醚、异氟醚后血浆TNF-α的含量增加,尤以吸入安氟醚更为明显。其作用机制可能与吸入安氟醚、异氟醚后肺组织NF-κB的表达增强有关。