非诺贝特与大鼠急性缺血性损伤心肌的能量代谢

目的 探讨异丙肾上腺素(180)致大鼠急性心肌缺血性损伤中过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)配体非诺贝特与心肌能量代谢的关系.方法 健康纯系雄性Wistar大鼠90只随机分为3组,每组30只,即正常对照组、Iso损伤组(采用腹腔内注射Iso复制急性心肌缺血损伤的动物模型)和非诺贝特(FF)保护组(在预先给予FF的基础上复制Iso致急性心肌缺血损伤的动物模型).HE染色光镜下观察大鼠心肌形态学改变.检测脏器指数变化.铜显色法测定大鼠血清和心肌组织中游离脂肪酸含量.Western blot法测定大鼠心肌组织中PPARα的蛋白表达水平.结果 FF保护组和:Iso损伤组均可见心肌坏死,心脏指数显著高于对照组,血清和心肌组织中游离脂肪酸含量增高明显,同时PPARα在心肌组织中的表达水平也明显低于对照组.FF保护组与Iso损伤组比较,前者心肌病理改变轻,心肌坏死面积分别为(7.36±2.60)%和(10.00±3.00)%,组间比较P<0.01.FF保护组心脏指数低于Iso损伤组,分别为(4.03±0.10)和(4.32±0.11),组间比较P<0.01.FF保护组和Iso损伤组血清中游离脂肪酸含量分别为(736.53±70.30)、(939.53±69.51)μmol/L,心肌组织中游离脂肪酸含量分别为(116.28±14.03)、(140.59±19.34)μmol/L,前者均明显低于后者,组间比较P均<0.01.FF保护组心肌组织中PPARα表达水平高于Iso损伤组,分别为215.08±9.61和191.97±10.74,组间比较P<0.01.结论 在急性心肌缺血性损伤中,存在脂肪酸的利用障碍,即能量生成障碍,非诺贝特可以通过活化PPARα参与急性缺血性损伤心肌的能量代谢,对急性缺血性损伤心肌具有保护作用.     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对大鼠急性心肌损伤血管新生的作用

目的 观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)预处理对异丙肾上腺素(Iso)所致大鼠急性心肌损伤后新生血管密度的影响.方法 雄性、成年Wistar大鼠60只,体质量约190 g.按体质量将大鼠随机分成3组:对照组,GM-CSF预处理组(GM-CSF组),Iso损伤组,每组20只.GM-CSF组提前给予注射用人重组(rh)GM-CSF 5.0μg/kg,1次/d,尾静脉注射,连续3 d.在注射后的第3天,GM-CSF组和Iso损伤组同时给予Iso,按15.0 mg/kg腹腔注射,1次/d,连续3 d;对照组给予等量次生理盐水.注射后第10天.观察各组大鼠心肌损伤的病理改变和坏死灶面积;免疫组化方法测量、等大鼠心肌组织中新生血管密度指数:RT-PCR法检测大鼠心肌组织中多肽抗原(CD34)、血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF受体(KDR/flk-1)的表达.结果 大鼠心肌坏死面积组问比较差异有统计学意义(F=10.07,P<0.01),其中GM-CSF组[(37.37 ±12.98)%]明显少于Iso损伤组[(45.51±14.96)%,P<0.05].大鼠心肌组织中新生血管密度指数组间比较差异有统计学意义(F=25.54,P<0.05),其中GM-CSF组[(3980.05±477.22)个/mm2]显著高于Iso损伤组[(2605.93 ±361.49)个/mm2,P<0.01].大鼠心肌CD34、VEGF、KDR/flk-1 mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F值分别为17.83、4.29、4.10,P均<0.01);GM-CSF组[CD34(44.04±10.13).VEGF(49.40±11.59),KDR/flk-1(46.49 ±7.90)]均高于Iso损伤组[CD34(23.85±6.06),VEGF(31.80±8.05),KDR/flk-1(30.16±8.01).P均<0.01].大鼠心肌VEGF mRNA表达与其受体KDR/flk-1 mRNA表达呈正相关(r=0.725,R2=0.526,P<0.01).结论 GM-CSF预处理可增加大鼠心肌中新生血管密度.减轻Iso所致的大鼠心肌损伤.

Abstract：

Objective To study the effect of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor(GM-CSF)on angiogenesis of rat with acute myocardial injury induced by isoproterenol(Iso). Methods A total of 60 adult male Wistar rats were randomly divided into 3 groups: normal control group, GM-CSF pretreatment group (GM-CSF group), and lso injury group, 20 rats in each group. GM-CSF group was administered recombinant human(rh)GM-CSF(5.0 μg/kg), through tail intravenous injection once a day for three days. Then the GM-CSF group and the Iso injury group were anesthetized by intraperitoneal injection of lso( 15.0 mg/kg) once a day for three days. The same dose of saline was administered in the same way to the control rats. Ten days after injection, pathological changes of myocardial damage and infarct area were examined by immunohistochemistry. The mRNA expression levels of polypeptide antigen (CD34), vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptor KDR/flk- 1 were measured by RT-PCR. Results The difference of myocardial necrosis area between groups was statistically significant(F=10.07, P < 0.01), in which GM-CSF group[(37.37 ± 12.98)%] was significantly less than Iso injury group[(45.51 ±14.96)%, P < 0.05]. The difference of myocardial neovascularization density index of rats between groups was statistically significant ( F = 25.54, P < 0.05 ), in which GM-CSF group [(3980.05 ± 477.22) No/mm2] was significantly higher than Iso injury group((2605.93±361.49)No/mm2,P<0.01).The differences of myocardial CD34,VEGF,KDR/flk-1 mRNA expression between groups were statistically significant(F=17.83,4.29,4.10,all P<0.01).Compared to Iso mjury group[CD34(23.85±6.06),VEGF(31.80±8.05),KDR/flk-1(30.16±8.01)]were higher in the GM-CSF group[CD34(44.04±10.13),VEGF(49A±11.59),and KDR/flk-1(46A9±7.90),all P<0.01].The expressions of myocardiM VEGF mRNA and its receptor KDR/flk-1 mRNA was positively correlated(r=0.725,R2=0.526,P<0.01).Conclusions GM-CSF prelreatmcnt increases the density ofnew blood vessels in myocardium,and reduces the Iso-induced myocardial injury in rats.     

葛根素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的干预作用

目的 观察葛根素对大鼠心肌缺血再灌注损伤后炎症反应的抑制作用并探讨其作用机制.方法 36只SD大鼠随机分成假手术组、模型组和葛根素处理组;采用左冠状动脉结扎法复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,于缺血开始及再灌注即刻由尾静脉注射葛根素20 mg/kg,缺血1 h,再灌注6 h后取血检测缺血再灌注后心肌髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和血清磷酸肌酸激酶(CK)含量,RT-PCR测定缺血再灌注后心肌胞间黏附分子-1(ICAM-1) mRNA含量.结果 葛根素组血清CK明显低于模型组(P<0.01),MPO和MDA的活性明显低于模型组(P<0.01),ICAM-1 mRNA含量较模型组低(P<0.01).结论 葛根素可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤后炎症反应,这可能是其发挥心肌保护机制之一.     

非诺贝特对心衰能量代谢的影响

目的探讨非诺贝特对异丙肾上腺素（ISO）诱导的大鼠慢性心力衰竭过程中对心肌能量代谢、心室重构的干预作用及相关机制。方法健康纯系雄性SD大鼠30只随机分为3组,每组10只,即正常对照组、ISO损伤组(采用腹腔内注射ISO 2.5 mg·kg^-1·d^-1共4周建立慢性心力衰竭动物模型)和非诺贝特（FF）保护组(预先给予FF100 mg·kg^-1·d^-1共4周的基础上腹腔内注射ISO 2.5mg·kg^-1·d^-1共4周)。左室射血分数、左室缩短分数用于评价心脏收缩、舒张功能,4周末分别用心脏超声检测各组大鼠左室舒张末内径（LVEDD）、左室收缩末内径（LVESD）、左室射血分数（LVEF）、左室缩短分数（FS）。心脏指数为心脏重量与体重之比,能反映心室重构后重量的变化,检测各组大鼠心脏指数的变化。ELISA法测定大鼠血清BNP含量。比色法测定大鼠血清和心肌组织中游离脂肪酸、乳酸、丙酮酸含量。Western blot法测定各组大鼠心肌组织中PPARoα、UCP2的蛋白表达水平。结果 FF保护组左心室舒张末径、收缩末径低于Iso损伤组,分别为（5.44±0.36）mm和（6.46±0.59）mm、（3.66±0.43）mm和（4.74±0.29）mm,组间比较P<0.05。FF保护组和Iso损伤组大鼠心脏指数、血清BNP显著高于对照组,血清和心肌组织中游离脂肪酸蓄积,心肌组织乳酸和丙酮酸含量明显增加,心肌组织PPARα蛋白较对照组表达减少,UCP2蛋白表达增加,组间比较P<0.01。FF保护组与Iso损伤组比较,FF保护组心脏指数、BNP低于Iso损伤组,组间比较P<0.01;血清及心肌组织中游离脂肪酸含量较ISO损伤组减少,组间比较P<0.01;心肌组织乳酸、丙酮酸含量及UCP2蛋白表达较ISO损伤组减少,组间比较P<0.05;而PPARoα蛋白表达较ISO损伤组增加,组间比较P<0.01。结论在慢性心衰的进展过程中,存在心肌脂肪酸的利用障碍以及线粒体     

脂联素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察脂联素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制.方法 32只8周龄雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、地尔硫革组和脂联素组,每组8只.(1)假手术组:只穿线,旷置90 min.(2)缺血再灌注组:先阻断血流30 min,再灌注60 min.(3)地尔硫(革)组和脂联素组:先阻断血流30 min,于再灌注开始时,从鼠尾静脉分别注射地尔硫(革)(3.5 μg·g~(-1)min~(-1))或脂联素(60 ng·g~(-1)·min~(-1)),注射2 min,再灌注60 min.各模型组于再灌注60 min后处死大鼠.测定心肌组织一氧化氮(NO),心肌组织半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)活性,心肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的含量,同时用透射电镜观察大鼠心肌线粒体结构.结果 (1)缺血再灌注组心肌组织中Caspase 3活性显著高于假手术组[(168.50±30.08)μmol/L比(53.25±11.41)μmol/L,P<0.01],AMPK活性、PPARγ含量均显著低于假手术组[(0.74±0.59)IU/ml比(25.63±4.61)IU/ml,P<0.01;0.1894比0.7949,P<0.01],心肌组织中NO含量显著低于假手术组[(6.359±1.355)μmol/L比(10.396±1.901)μmol.L,P<0.01].(2)脂联素组心肌组织中Caspase 3活性显著低于缺血再灌注组[(88.75±6.92)μmol/L比(168.50±30.08)μmol/L,P<0.01],AMPK活性、PPARγ含量均显著高于缺血再灌注组[(27.22 ±4.76)IU/ml比(0.74±0.59)IU/ml,P<0.01;0.8613比0.1894,P<0.01],心肌组织中NO含量显著高于缺血再灌注组[(15.755±1.045)μmol/L比(6.359±1.355)μmol/L,P<0.01].脂联素可保护急性心肌缺血再灌注过程中大鼠心肌细胞线粒体结构的完整性,上述作用优于地尔硫(革).结论 脂联素对缺血再灌注造成的心肌损伤有一定的保护作用,机制可能与其增加心肌细胞AMPK、PPARγ表达,以及抗心肌细胞凋亡作用有关.     

非诺贝特对大鼠心肌损伤保护作用的实验观察

目的探讨非诺贝特对异丙基肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血性损伤的保护作用。方法应用异丙基肾上腺素复制大鼠急性心肌缺血性损伤的动物模型,Wister大鼠随机分为3组,正常对照组、模型组(Iso)、非诺贝特保护组(FF),观察非诺贝特对大鼠心肌的形态学,血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶(CK,LDH)以及一氧化氮(NO)的影响。结果非诺贝特能对抗异丙基肾上腺素所致的大鼠急性心肌缺血性损伤,可使其病理损伤性改变减轻,抑制CK和LDH的释放,增加NO的产生。结论非诺贝特对异丙基肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血性损伤具有保护作用。     

白藜芦醇预处理对体外大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察白藜芦醇预处理对体外大鼠缺血再灌注心肌损伤的保护作用及其作用机制。方法:利用Langendorff灌注系统,建立体外大鼠心肌常温全心心肌缺血30min再灌注120min损伤模型。将56只雄性SD大鼠随机分为4组(每组14只):缺血再灌注损伤(IRI)组、白藜芦醇组、Nω硝基L精氨酸甲酯(LNAME)组、氨基胍(AG)组。检测各组的心功能、心肌一氧化氮合酶(NOS)同工酶(NOSi)活性、一氧化氮(NO)的含量、丙二醛的含量、心肌梗死面积以及心肌细胞凋亡指数。结果:与IRI组相比,白藜芦醇组左室发展压(LVDP)、左室压力上升和下降最大变化速率(±dp/dtmax)明显改善(P<0.05或0.01);心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数、心肌丙二醛含量显著降低(P<0.01);心肌NOSi活性和NO含量显著升高(P<0.01)。LNAME组和AG组LVDP和±dp/dtmax显著低于白藜芦醇组(P<0.05或P<0.01);心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数、心肌丙二醛含量显著升高(P<0.01);心肌NOSi活性和NO含量显著降低(P<0.01)。结论:白藜芦醇对体外大鼠IRI具有保护作用,其机制可通过提高心肌NOSi活性,促进NO产生而介导的。     

异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤肥大时骨架蛋白的变化及意义

目的复制异丙肾上腺素(isoproteronol,Iso)致大鼠心肌损伤及肥大模型,观察细胞骨架蛋白微管蛋白(tubulin)、结蛋白(desmin)变化特点,探讨心肌支持蛋白在心肌肥厚过程中的关系和变化规律,为抑制心室肥厚的发生和发展提供实验依据。方法①将雄性Wistar大白鼠随机分成对照组和损伤肥大组(Iso组)。Iso组皮下多点注射中等剂量Iso,建立大鼠损伤、代偿性肥厚模型。②光镜观察心肌组织的病理变化。③RT-PCR法检测tubulin、desminmRAN表达。④免疫组化法检测tubulin、desmin蛋白表达。结果光镜下Iso组心肌组织有明显的损伤肥大及纤维化,tubulinmRNA(0.9252±0.3765)和desminmRNA(1.2453±0.5326)表达与对照组(0.6846±0.2372)和(0.7142±0.1416)比较明显升高,差异有统计学意义(t=2.3258,P<0.05;t=4.0972,P<0.01)。Iso组tubulin(0.75±0.32)和desmin(0.85±0.29)蛋白表达与对照组(0.56±0.25)和(0.64±0.31)比较,差异也有统计学意义(t=2.5627,P<0.05;t=2.7544,P<0.01)。结论Iso致大鼠心肌损伤肥大时,tubulin、desmin无论在蛋白水平,还是在基因水平都增加,提示异丙基肾上腺素对大鼠心肌tubulin、desmin蛋白水平和基因水平的影响是平行、一致的。     

吡咯列酮对雨蛙肽诱导急性胰腺炎氧化应激过程的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ激动剂吡咯列酮在雨蛙肽诱导大鼠急性胰腺炎中对氧化应激产物的影响及保护作用.方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组、雨蛙肽+不同剂量吡咯列酮组、雨蛙肽组、雨蛙肽+吡咯列酮+GW9662组.每组6只.急性胰腺炎造模30 min后处死大鼠,光镜下观察胰腺组织病理学变化,测定各组大鼠胰腺组织质量与体重比,比色法检测胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)及组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量.结果 与对照组比较,雨蛙肽组胰腺组织水肿严重胰腺净重/体重(0.0072比0.0042)],MPO活性、MDA、NOS及iNOS含量升高(P＜0.01).与雨蛙肽组比较,吡咯列酮20 mg/kg及40 mg/kg组胰腺损伤减轻,胰腺净重/体重、MPO活性、MDA和NOS及iNOS含量降低(P＜0.05);与吡咯列酮40 mg/kg组比较,PPARγ拮抗剂GW9662逆转了吡咯列酮的保护作用(P＜0.05).结论 在雨蛙肽诱导的大鼠急性胰腺炎发病中,胰腺腺泡细胞的氧化应激损伤起了重要的作用,PPARγ激动剂吡咯列酮预先干预,通过降低氧化应激过程,对雨蛙肽诱导的大鼠急性胰腺炎有一定的保护作用.     

瑞舒伐他汀对大鼠肥厚心肌组织PPARγ和NF-kB蛋白表达的影响

目的 探讨瑞舒伐他汀对异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)诱导心肌肥厚大鼠心肌组织PPARγ和NF-kB表达的影响及其抑制心肌肥厚,改善心功能的机制.方法 40只雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、瑞舒伐他汀组和卡托普利组,每组10只.除正常对照组外,各组背部皮下注射Iso建立心肌肥厚模型.模型制备成功后,瑞舒伐他汀组灌胃给予瑞舒伐他汀4mg· kg-1·d-1,卡托普利组灌胃给予卡托普利50mg· kg-1 ·d-1,其余两组灌胃给予等体积生理盐水.4w末,分别测定各组大鼠左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力上升及下降最大速率(±dp/dt max);测定大鼠体重(BW)、心脏重量(HW)及左心室重量(LVW),计算心脏重量指数(HWI)及左心室重量指数(LVWI);应用病理学方法观察心肌组织形态学改变;Western印迹法测定心肌组织PPARγ和NF-kB亚基p65蛋白表达.结果 模型组大鼠LVEDP、HWI、LVWI 明显高于正常对照组(P＜0.01),LVSP和±dp/dt max明显降低(P＜0.01);模型组PPARγ表达明显低于正常对照组(P＜0.01),p65表达明显升高(P＜0.01);瑞舒伐他汀组和卡托普利组PPARγ表达明显高于模型组(P＜0.01),p65表达明显降低(P＜0.01);瑞舒伐他汀组和卡托普利组比较,上述指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 瑞舒伐他汀抑制心肌肥厚,改善心功能,其机制与增加PPARγ表达,降低p65表达有关.     

大鼠内毒素性急性肝损伤后肝细胞凋亡与炎性因子的表达

目的 探讨脂多糖诱导D-氨基半乳糖胺致敏大鼠急性肝损伤肝细胞凋亡、炎性因子表达情况及其发生机制.方法 56只大鼠分为0 h对照组与1、2、4、6、24和48 h脂多糖+D-氨基半乳糖胺处理组.在相应时间点处死大鼠后收集肝组织及血清,肝组织苏木精-伊红染色后光学显微镜下观察ELISA法检测血清细胞因子表达;反转录(RT)-PCR法检测TNF-α、IL-β、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和p53基因表达;收集24 h肝组织用底物显色法检测Caspase-3、8、9,12活性.组间比较用方差分析.结果 经药物处理后,肝组织出现碎片状坏死、大量炎性细胞浸润等表现,从6 h开始,24 h和48 h显著加重.血清TNF-α浓度在1 h处理组为(727.8±261.3)ng/L,显著高于对照组及其他处理组(F=49.82,P<0.01),2 h处理组为(156.4±52.2)ng/L,显著低于1 h组,但高于对照组(F:30.23,P<0.01);血清IL-β浓度逐渐上升,24 h处理组最高,为(360.5±121.6)ng/L(F=18.61,P<0.01).24 h处理组肝组织Caspase-3、8、9、12活性明显高于对照组(F=84.96,P<0.01).iNOS基因在对照组无表达,药物作用后6 h达最高,24 h和48 h则显著下降(F=34.07,P<0.01);p53基因在24 h和48 h处理组表达明显增高(F=37.43,P<0.01);TNF-α和IL-1β基因表达均较对照组升高(F=2.94,P<0.05),其峰值均出现在1 h处理组.结论 小剂量脂多糖可诱导D-氨基半乳糖胺致敏大鼠发生急性肝损伤;Caspase-3、8、9、12活性明显增强是其特征性改变之一;肝损伤的发生与TNF-α、iNOS和p53基因早期高水平表达有密切关系.     

黄连解毒汤对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察黄连解毒汤对在体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用SD大鼠心肌缺血再灌注模型(I/R),将56只SD大鼠随机等分为7组:假手术组、心肌缺血再灌注组、溶剂(%CMC-Na)对照组、黄连解毒汤(HLJDT)低剂量组、HLJDT中剂量组、HLJDT高剂量组,复方丹参组.连续给药7 d,末次给药24 h后,复制大鼠心肌I/R损伤模型.测定血清肌酸激酶(CK)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-1β水平,测量心肌梗死范围,取心肌组织检测 NF-κB.结果 与假手术组比较,缺血再灌注组血清TNF-α、IL-1β、CK水平明显增高(P<0.05),梗死范围明显增加(P<0.05),且NF-κB表达明显增高(P<0.05);实验组较缺血再灌注对照组的TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB水平明显降低,梗死范围明显降低(P<0.05).结论 黄连解毒汤显著缩小心肌梗死面积,降低心肌酶,减少心肌细胞内TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB蛋白的表达,发挥对缺血再灌注心肌的保护作用.     

罗格列酮抑制肝星状细胞活化的作用机制研究

目的 探讨罗格列酮对大鼠肝星状细胞生物学特性的影响是否是通过PPARγ起作用.方法 设立10 μmol/L罗格列酮组、GW9662加10 μmol/L罗格列酮组、对照组、GW9662组.采用RT-PCR方法检测PPARγ及Ⅰ型前胶原mRNA表达;用Western blot法检测PPARγ及Ⅰ型胶原蛋白表达;电泳迁移分析法(EMSA)检测PPARγ蛋白的结合活性;用免疫细胞化学方法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的变化.结果 10 μmol/L罗格列酮组PPARγ mRNA及蛋白表达显著高于其他各组(P<0.01),Ⅰ型前胶原mRNA及蛋白表达明显低于其他各组(P<0.01);10 μmol/L罗格列酮组PPARγ蛋白结合活性最强,α-SMA表达明显低于其他组(P<0.05).结论 罗格列酮对大鼠肝星状细胞的影响是通过PPARγ起作用的.     

瑞舒伐他汀对大鼠肥厚心肌组织PPARγ和NF-κB蛋白表达的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)诱导心肌肥厚大鼠心肌组织PPARγ和NF-κB表达的影响及其抑制心肌肥厚,改善心功能的机制。方法 40只雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、瑞舒伐他汀组和卡托普利组,每组10只。除正常对照组外,各组背部皮下注射Iso建立心肌肥厚模型。模型制备成功后,瑞舒伐他汀组灌胃给予瑞舒伐他汀4 mg.kg-1.d-1,卡托普利组灌胃给予卡托普利50 mg.kg-1.d-1,其余两组灌胃给予等体积生理盐水。4 w末,分别测定各组大鼠左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力上升及下降最大速率(±dp/dt max);测定大鼠体重(BW)、心脏重量(HW)及左心室重量(LVW),计算心脏重量指数(HWI)及左心室重量指数(LVWI);应用病理学方法观察心肌组织形态学改变;Western印迹法测定心肌组织PPARγ和NF-κB亚基p65蛋白表达。结果模型组大鼠LVEDP、HWI、LVWI明显高于正常对照组(P<0.01),LVSP和±dp/dt max明显降低(P<0.01);模型组PPARγ表达明显低于正常对照组(P<0.01),p65表达明显升高(P<0.01);瑞舒伐他汀组和卡托普利组PPARγ表达明显高于模型组(P<0.01),p65表达明显降低(P<0.01);瑞舒伐他汀组和卡托普利组比较,上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论瑞舒伐他汀抑制心肌肥厚,改善心功能,其机制与增加PPARγ表达,降低p65表达有关。     

短期应用辛伐他汀对大鼠缺血再灌注后心肌无复流的影响及其潜在机制

目的 探讨辛伐他汀对缺血再灌注后心肌无复流的影响及其潜在机制.方法 雄性Wistar大鼠48只,随机分为假手术组、对照组及辛伐他汀组.对照组及辛伐他汀组结扎左冠状动脉建立大鼠心肌无复流模型,假手术组仅开胸不结扎冠状动脉.术后进行缺血范围(RA/LVA)、无复流范围(NA/RA)及梗死范围(MIA/RA)评估,测定心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,一氧化氮(NO)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)含量,并用免疫组织化学法测定心肌组织及微血管核因子(NF)-кB p65阳性指数.结果 在缺血范围差异无统计学意义的条件下,辛伐他汀组无复流范围显著小于对照组(34.10±7.05比52.09±6.89,P<0.01),梗死范围也小于对照组(78.80±7.60比90.13±5.72,P<0.05).对照组及辛伐他汀组心肌组织iNOS活性、NO含量、MPO活性及MDA含量均高于假手术组,对照组eNOS活性显著低于假手术组(P均<0.05),辛伐他汀组eNOS活性与假手术组比较差异无统计学意义.辛伐他汀组心肌组织iNOS活性、NO含量、MPO活性及MDA含量均低于对照组(5.02±1.64比9.19±2.89,586.21±126.97比744.49±137.53,257.72±93.43比384.10±40.68,72.10±18.56比111.84±38.58,P均<0.05),eNOS活性显著高于对照组(7.08±1.74比3.72±0.98,P<0.01).对照组及辛伐他汀组左心室游离壁梗死周边心肌细胞及微动脉NF-кB p65阳性指数均显著高于假手术组,辛伐他汀组低于对照组(21.59±10.5比34.32±9.55,27.27±13.19比44.91±15.06,P均<0.05).结论 辛伐他汀可以改善缺血再灌注后心肌无复流,其可能机制是通过改善内皮功能,抑制炎症反应,进而抑制中性粒细胞的激活浸润,减少活性氧簇的生成,最终减轻无复流.     

小檗胺对大鼠离体心脏缺血—再灌注损伤的保护作用

采用Langendorff离体大鼠心脏灌流模型,研究了小檗胺(BA)对心肌缺血—再灌注损伤的保护作用。离体心脏全心缺血40min后再灌注时,心功能明显低下,发生严重心律失常及心肌组织内超氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降(从对照组的102.7±10.0μg/g下降到76.8±10.5μg/g,P<0.01)。BA 1μmol/L明显促进再灌注后冠脉流量(P<0.05)和心肌收缩幅度(P<0.01)的恢复,并抑制静息张力的升高(P<0.01).此外,BA还能有效地阻止心室颤动的发生,防止心肌SOD活性下降(P<0.01)。我们推测BA是通过清除自由基和保护SOD活性而起到抗再灌注损伤作用的。我们的结果表明,BA能对抗心肌缺血一再灌注损伤。     

大鼠心肌损伤对环磷酸腺苷信号转导相关基因表达的影响

目的 观察大鼠心肌损伤后心肌组织环磷酸腺苷(cAMP)信号转导系统相关基因表达的变化及与心室重构、心功能变化的关系.方法雄性Wistar大鼠28只,体质量220～250 g.将大鼠按体质量随机分为急性心肌损伤组(AMD,n=10)、慢性心肌损伤组(CMD,n=9)和对照组(n=9).AMD和CMD组大鼠开胸,结扎左前降支,建立急性心肌损伤动物模型;对照组开胸后不做结扎.在术后24 h,处死AMD和对照组大鼠,CMD组大鼠8周后处死,大鼠处死前进行心脏超声和血流动力学检查.TUNEL法检测行心肌细胞凋亡,放射免疫法测量心肌组织中环磷酸腺苷(cAMP)水平,实时定量(RT)-PCR法测定受损心肌周围组织中诱导性cAMP早期阻遏物(ICER)mRNA、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)mRNA、磷酸二酯酶3A(PDE3A)mRNA和bcl-2mRNA表达.结果心脏超声和血流动力学显示,AMD、CMD、对照组左心室舒张末内径(LVEDD)、舒张末压(LVEDP),左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、下降速率(-dp/dtmax),左心室收缩压(LVSP)、射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)组间比较差异有统计学意义(F值分别为285.9、196.8、83.2、80.4、54.9、196.6、95.2,P均＜0.01).其中AMD和CMD组,LVEDD[(7.03±0.28)、(8.20±0.27)mm]和LVEDP[(11.19±2.89)、(19.76±3.34)mmHg]明显高于对照组[(5.05±030)mm、(-5.62±3.01)mmHg,P均＜0.01];左室内压+dp/dtmax [(2964±449)、(2214±434)mmHg/s]和-dp/dtmax[(-2617±441)、(-1891±424)mmHg/s]、左室LVSP[(94.19±4.03)、(85.85±6.39)mmHg]、EF[(41.6±5.9)%、(35.9±4.1)%]和FS[(36.9±4.6)%、(23.1±4.9)%]均显著低于对照组[(4759±406)mmHg/s、(-4327±388)mmHg/s、(116.29±8.25)mmHg、(80.9±5.6)%、(53.1±4.3)%,P均＜0.01];与AMD组相比,CMD组上述改变更显著(P＜0.05或＜0.01).心肌凋亡指数、cAMP、ICER、CREB、PDE3A、bcl-2 mRNA表达,组问比较差异有统计学意义(F值分别为172.5、141.0、540.8、246.8、165.1、563.9,P均＜0.01).其中AMD和CMD组心肌凋亡指数[(32.8±4.2)%、(18.4±3.9)‰]和cAMP[(9.95±0.30)、(5.60±0.25)nmol/kg]明显高于对照组[(3.9±1.7)‰、(2.48±0.29)nmol/kg,P均＜0.01],CMD组低于AMD组(P＜0.01);ICER、CREB mRNA表达,AMD(1.434±0.093、5.70±0.50)和CMD组(0.942±0.076、2.64±0.51)明显高于对照组(0.154±0.063、1.08±0.35,P均＜0.01),AMD组高于CMD组(P＜0.01);PDE3A mRNA表达,AMD和CMD组(48.98±8.14、16.68±8.46)明显低于对照组(105.94±12.61,P均＜0.01),CMD组低于AMD组(P均＜0.01);bcl-2 mRNA表达AMD组(4.55±0.27)高于对照组(2.18±0.30,P＜0.01),CMD组(0.35±0.15)明显减少(P均＜0.01).结论慢性心肌损伤较急性心肌损伤心室重构更明显,cAMP信号转导系统过度激活后形成ICER和cAMP的自循环,致使ICER mRN升高,PDE3A mRN减少,可能是心肌损伤后心室重构和心力衰竭发生发展的原因之一.     

大鼠急性心肌损伤与CT-1 mRNA相关性的实验观察

目的研究心肌营养素1(cardiotrophin-1,CT-1)在异丙基肾上腺素(isoprenaline,Iso)致大鼠急性心肌损伤中的保护作用。方法将Wistar雄性大白鼠随机分为3组:对照组、Iso组和Iso PD98059组,光镜观察心肌组织的病理变化,生化方法检测心肌酶,用RT-PCR方法检测心肌组织CT-1mRNA的表达。结果光镜下Iso PD98059组心肌病理损伤程度较Iso组重,且CT-1mRNA表达水平及心肌酶活性明显升高(P<0.05)。结论CT-1具有心肌保护作用,可能与减轻心肌细胞坏死的程度有关。     

大鼠缺血再灌注心肌基质金属蛋白酶不同时程的表达

目的:探讨大鼠心肌缺血再灌注不同时间点基质金属蛋白酶(MMP)-1,2,9的表达及其意义。方法:建立大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型,采用免疫组化法检测心肌组织中MMP-1,2,9的表达,以四通道电生理仪检测心功能,比色法测定血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和髓过氧化物酶(MPO)活性。结果:与假手术组相比缺血再灌注组心功能明显降低,CK、LDH和MPO活性显著增高,呈明显的时间依赖性,于再灌注2 h达到峰值(P<0.01)。缺血再灌注后大鼠心肌中MMP-1的表达水平明显高于假手术组和缺血组(P<0.05),以再灌注1 h最为明显(P<0.01),且与心功能的改变呈负相关(r=-0.503~-0.748,P均<0.01);MMP-2没有表达;MMP-9的表达于再灌注1 h开始增强,再灌注2 h达到高峰(P<0.01),与心功能呈负相关(r=-0.732~-0.855,P均<0.01)。结论:MMPs可能参与心肌缺血再灌注损伤过程。     

红景天酪醇对老年大鼠心肌缺血缺氧型冠心病的影响

目的探讨红景天酪醇对老年大鼠心肌缺血缺氧型冠心病的作用。方法取30只老年大鼠随机分为正常对照组、模型组与给药组,每组10只,采用高脂饮食联合用药的方法,正常对照组喂养基础饲料,模型组与给药组喂养高脂饲料,连续5 w。腹腔注射4%异丙肾上腺素(Iso)5 ml/kg,在通过装有钠石灰缺氧再给氧的装置制造大鼠心肌缺血缺氧冠心病模型,红景天酪醇灌胃给药1 h后,记录心功能,检测血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸磷酸激酶(CK)及心肌髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量。结果给药组心电图变化较模型组明显改善,LDH和CK水平明显下降,心肌MPO和MDA含量明显降低(均P<0.05)。结论红景天酪醇对老年大鼠心肌缺血缺氧损伤有保护作用。