白细胞中乙型肝炎病毒前C区变异株的感染及动态观察

目的 :探讨白细胞中HBV前C基因变异对肝功能的损害。方法 :用特异性引物聚合酶链反应 (3’BS -PCR) ,检测 10 1例慢性乙型肝炎患者。结果 :①白细胞中变异总检出率 34.6 % ;②白细胞中存在HBV前C基因变异时血清中的谷丙转氨酶 (ALT)普遍升高。结论 :①慢性乙型肝炎患者白细胞中不仅普遍存在HBVDNA ,同时还存在HBV突变株 ;②白细胞中的变异株感染可能与发病程度有关。     

乙型肝炎病毒前C区基因变异的研究

作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ｅ系统阳性的慢件乙型肝炎（乙肝）患者血清乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，筛选出乙肝ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性／乙肝ｅ抗体（抗—ＨＢｅ）阴性和ＨＢｅＡｇ阴性／抗—ＨＢｅ阳性各２０份ＰＣＲ阳性血清，分别用人工合成的ＨＢＶ前Ｃ区基因寡核苷酸探针Ｍ０（无突变），Ｍ１（１点突变），Ｍ２（２点突变）进行斑点杂交，结果发现ＨＢｅＡｇ阴性／抗—ＨＢｅ附性慢性乙肝患含有１７例（占８５％）在１８９６位核苷酸发生点突变，形成终止密码，其中１０例（占５０％）发生２点突变。选突变ＰＣＲ产物直接测序，同样证实点突变的存在。提示乙肝患含ＨＢｅＡｇ阳性自然转换为抗—ＨＢｅ阳性、并不一定是病毒复制减弱，而可能足ＨＢＶＤＮＡ前Ｃ区发生了基因变异。     

PCR-SSCP法检测乙型肝炎病毒前C区基因变异

为探索一种快速，简便检测乙型肝炎病毒（HBV）前C区基因变异的方法，用聚合酶链反应（PCR）技术扩增94例乙肝患者血清HBV前C区基因片段，阳性扩增产物用单链构象多态性（SSCP）法进行检测，对具有不同特征性电泳图谱的PCR产物再以直接测序法加以核定，以辨别不同图谱与野生株，变异株或野生株，变异株混合感染之间的关系。结果显示：有86例患者HBV前C区PCR扩增阳性，SSCP法检测发现有3种常见的特征性电泳图谱，测序后证实，它们分别代表了野生株，变异株（nt1896位G→A）及野生株，变异株混合感染的SSCP图谱；在某些变异株图谱中，尚可见其它位点也存在变异，其中以nt1899位G→A突变最为常见，提示：以PCR-SSCP技术检测HBV前C区变异具有敏感性高，特异性强，简单，快捷，价廉等优点，而且特别适用于大样本的筛检，因此有应用价值，值得推荐。     

乙型肝炎患者HBV前C区变异及临床意义

目的 研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区变异的临床意义。方法 应用错配ＰＣＲ限制片段长度多态性分析，检测ＨＢＶ前奁１８９６位突变，结果 ６２０例乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位变异２６４例变异率４２．５８％，在急性肝炎，慢性轻度，慢性中度，慢性重度，重型肝炎，肝硬化中，变异率分别为１２．５％，３５．０％，５５．９４％，４５．２６％，５４．７２％，４８．７６％，年龄，性别与变异无关，病程〉５年，中丙     

乙型肝炎病毒前C区基因突变及临床意义

<正> 乙型肝炎病毒(HBV)感染后临床表现复杂多样,多数表现为急性自限性肝炎,少数表现为暴发性肝衰,还有相当一部分向慢性化发展。在慢性HBV感染中,有的病情较缓和,有的发展迅猛,有的活动期与缓解期交替出现。同为HBV感染,为什么个体表现差异如此之大?以往认为是由机体免疫应答差异引起。但目前的研究认为HBV的基因突变与乙型肝炎(乙肝)     

乙型肝炎病毒免疫逃避株表面抗原决定簇编码区的序列分析

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物直接测序，在国内首次发现１例持续高滴度乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和抗一ＨＢｓ共存者携带的乙型肝炎病毒ＤＮＡ第５３２位碱基Ａ被Ｇ取代，推导其“ａ”决定簇中第１２６位苏氨酸被丙氨酸取代，提示该株“ａ”决定簇第一个结构环疏水性增加，由此可能导致其抗原性改变，而诱发免疫逃避株形成。     

乙型肝炎患者HBV前C区变异及临床意义

目的研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区变异的临床意义。方法应用错配ＰＣＲ限制片段长度多态性分析,检测ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位突变。结果６２０例乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位变异２６４例,变异率４２．５８％。在急性肝炎、慢性轻度、慢性中度、慢性重度、重型肝炎、肝硬化中,变异率分别为１２．５％、３５．０％、５５．９４％、４５．２６％、５４．７２％、４８．７６％。年龄、性别与变异无关,病程＞５年、谷丙转氨酶（ＡＬＴ）异常、抗ＨＢｅ（＋）者变异率均明显增高。结论ＨＢＶ前Ｃ区变异与肝病严重性有一定关系。     

肝癌组织内乙型肝炎病毒基因组前C区终止密码的发现

用聚合酶链反应(PCR)在3例乙型肝炎病毒(HBV)C基因阳性的原发性肝癌(HCC)组织中扩增和克隆了HBV C基因片段(部分前C区和全部C区),获得了重组质粒pHBC_1,pHBC_2,pHBC_3。将重组质粒中HBV C基因亚克隆至M_(13)DNA序列测定系统,用双脱氧法测定了HBV C基因片段的核苷酸序列。在2例HCC中,发现前C区第1898位核苷酸点突变,结果形成了终止密码。在3例HCC中,C区也发现有核苷酸点突变,其中部分可致编码氨基酸改变。     

Detection of pre－C region mutants of hepatitis B virus from HBeAg negative patients in Xi＇an area of China

Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｐｒｅ－ＣｒｅｇｉｏｎｍｕｔａｎｔｓｏｆｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓｆｒｏｍＨＢｅＡｇｎｅｇａｔｉｖｅｐａｔｉｅｎｔｓｉｎＸｉ＇ａｎａｒｅａｏｆＣｈｉｎａＨａｎＪｉｅ（韩捷）；ＹａｎＹａｎ（阎岩）；ＤｉｎｇＺｈｅｎｒｕｏ（丁振...     

e抗原阴性重症乙型肝炎患者HBV前C区热点变异研究

目的　研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法　采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限 制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８ 例、慢性重肝２４例）及４４例慢性乙型肝炎患者的Ｔ１８６２、Ａ１８９６变异情况。结果　急性重肝的Ａ１８９６、Ｔ１８６２变异分别 为６６．７％（４／６）、０（０／６）;亚急性重肝４２．１％（１６／３８）、１５．８％（６／３８）;慢性重肝 ２５．０％（６／２４）、１６．７％（４／２４）;慢性肝炎 ４５．５％（２０／４４）、２．３％（１／４４）。重症乙型肝炎组与慢性肝炎组比较Ｔ１８６２变异率有显著差异（Ｐ＜０．０１）,Ａ１８９６变异率无显 著差异（Ｐ>０．０５）。结论　提示Ｔ１８６２变异与乙型肝炎的重症化密切相关。而Ａ１８９６变异与乙型肝炎重症化进程是否有 关还不能确定。     

乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒DNA的检测及临床意义

目的：研究乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ检测的临床意义。方法：用聚合酶链反应技术检测６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ。结果：６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率分别为４３．３％，４５％；同时检测血清中ＨＢｅＡｇ，其阳性率为２８．２％；外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检测率与血清乙肝病毒ＤＮＡ具有一致性；急性肝炎患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率为２０％，慢性肝炎和肝炎肝硬变分别为５６．７％，４０％，外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检出率在急性肝炎和慢性肝炎之间有显著差异。结论：外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的存在与乙型肝炎的慢性化有关     

丙型肝炎病毒NS5B区基因的扩增、克隆及序列分析

目的 对丙型肝炎病毒(HCV)NSSB区基因克隆并测序，研究其变异状况。方法 从HCV RNA阳性血清中抽提病毒RNA，利用巢式RT-PCR对NS5B区基因进行扩增，将扩增获得的靶cDNA克隆至P^KPL-3a质粒载体中，并以内引物为测序引物进行序列测定分析。结果 构建了已克隆HCVNS5B区基因的重组质粒KHC5—1；序列分析表明，与HCV-BDS株同源性最高，属于主要流行于我国的HCV 1b基因亚型。结论 证实了在NS5B区，与RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)活性密切相关的基元结构Gly-Asp-Asp及其相邻序列的同源性非常高。     

慢性乙型肝炎患者196例病毒基因分型与临床的关系

目的探讨西安市中心医院感染科诊治的慢性乙肝患者血清中HBV基因型的分布状况及HBV基因型与临床特征的关系。方法采用巢式PCR法对196例慢性HBV患者的血清进行病毒基因型检测,并分析HBV基因型与患者临床特征的关系。结果 196例慢性HBV患者的基因分型结果为C型138例(70.4%)、B型40例(20.4%)、B/C混合型18例(9.2%),基因型的分布在性别上无统计学差异;各基因型在无症状携带者、慢性乙肝、肝硬化、肝癌中的分布差异也无统计学意义(P>0.05);C型感染者血清HBeAg阳性率(75.2%)高于B型感染者(14.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。各基因型患者在HBV-DNA载量和ALT水平上无统计学差异(P>0.05)。结论西安市中心医院感染科诊治的HBV患者的基因型以C型和B型为主;基因C型患者血清HBeAg阳性率高于B型;基因C型患者与B型相比在肝脏炎症程度、HBV-DNA载量方面无显著差异;基因B型和C型患者临床特点相似。     

哈尔滨地区肝炎患者血清中HBV DNA基因型分析

目的 分析哈尔滨地区乙型肝炎患者HBV基因型的分布情况.方法 采用基因型特异性引物巢式聚合酶链式反应法对96例肝炎患者血清中HBV DNA基因型进行分析.结果 96例肝炎患者中92例HBV DNA检测阳性,其中80例患者属于C基因型,占87.0%.2例为B基因型,占2.2%.10例未检出型别.结论 在哈尔滨地区HBV感染同时存在B和C基因型,以C基因型为主,且可能存在其他型别或发生基因突变.     

慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变的临床研究

采用聚合酶链反应（PCR）及单链构象多态分析（SSCP）银染技术检测了32例HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者及乙肝病毒携带者的前C区基因变异。结果表明有前C区基因突变株感染者8例，突变株感染者检出率为25．0％；突变株的检出率以慢性乙肝重度最高，其次是慢性乙肝中度、轻度患者，乙肝病毒携带者最低；抗－HBe阳性患者前C区突变株检出率高于HBeAg阳性患者。提示HBV前C区突变与病情轻重及e系统血清标志有关。     

一种新发现的乙型肝炎病毒基因变异，C基因启动子nt1726—1730聚集变异及基可能的临床意义

目的：研究乙型肝炎病毒（HBV）C基因启动子（CP）变异与无症状慢性HBV携带者（AsC）肝炎发作及慢性乙肝病情严重性的关系。方法：通过PCR及其产物直接测序,检测4例AsC、27例慢性乙肝和3例慢性重型乙肝病人血清的HBVCP和前C／C基因序列,并定量检测病人血清的HBVDNA。结果：（1）CP主要变异除核苷酸（nt）17621764双变异（1762A→和1764G→A）外,还存在nt1726－1730聚集变异（1726A→C、1727A→T、1730G→G）。（2）11例首次急性发作的慢性乙肝病人中（既往均有AsC史）,8例出现CP聚集变异。而5例隐匿起病的慢性乙肝病人和4例AsC无一例出现该变异,且1例在AsC状态时无CP变异,肝炎发作时出现CP聚集变异。（3）CP聚集变异合并CP双变异的乙肝病人,临床上或表现为重型肝炎或迅速进展为活动性肝硬变,HBVDNA水平高滴度,HBVDNA（斑点法）阳性,HBeAg/抗HBe转换。结论：CP聚集变异与AsC肝炎急性发作有关;CP聚集变异与CP双变异同时存在,使慢性乙肝病人病情加重。