自身抗体联合检测诊断系统性红斑狼疮的价值

目的通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患者的抗核抗体（ANA）及抗核抗体谱（ANAs）,评价自身抗体对SLE的诊断价值及临床意义。方法 SLE组、疾病对照组的所有患者血清标本均采用间接免疫荧光法检测ANA和免疫印迹法检测ANAs。结果 SLE组ANA、抗nRNP/Sm、Sm、SSA、Ro-52、CENP B、dsDNA、AnuA、Histone、rRNP检测阳性率均高于疾病对照组（P〈0.05）,抗CENP B检测阳性率低于疾病对照组（P〈0.05）。9种自身抗体的相关参数,ANA的敏感性最高,但特异性低,阳性似然比低。抗Sm、dsDNA、AnuA、rRNP的敏感性较低,但特异性高,阳性似然比大于8。阳性似然比大于8的4种自身抗体的互补关系,抗Sm阴性时抗dsDNA、AnuA、rRNP的阳性率为39.38%、33.75%、13.13%。但2项联合（AnuA＋dsDNA）、3项联合（AnuA＋dsDNA＋Sm）、4项联合（AnuA＋dsDNA＋Sm＋rRNP）检测时敏感性、阳性似然比和诊断准确性均高于单项ds2DNA（P〈0.05）,阴性似然比均低于单项dsDNA（P〈0.05）,而特异性无明显变化（P〉0.05）。结论抗dsD2NA、AnuA、抗Sm、抗rRNP是SLE诊断的标记性抗体,特异性高,但敏感性低,若联合检测可以避免因单项检测出现的漏诊,提高对SLE诊断的敏感性。     

系统性红斑狼疮自身抗体的检测及研究进展

系统性红斑狼疮自身抗体的检测及研究进展国雅君（包头钢铁公司职工医院）系统性自身免疫性疾病以由于体液免疫反应异常产生抗细胞内蛋白和核酸抗原的自身抗体为主要特点。自身抗体是根据与其发生特异性反应的特异核抗原如ＤＮＡ、组蛋白及许多核内、核仁内具有特定分子结...     

甘草酸对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用

目的 探讨甘草酸对MRL/lpr小鼠狼疮肾炎是否具有保护作用及其机制.方法 MRL/lpr狼疮小鼠随机分为MRL/lpr组、MRL/lpr+地塞米松(1.5 mg/kg)组,MRL/lpr+甘草酸(20 mg/kg)组,MRL/lpr+甘草酸(40 mg/kg)组,每组10只;野生型正常对照组C57BL/6小鼠10只.采用ELISA法检测各组小鼠血清中尿酸(UA)与肌酐(Cr)含量,各组小鼠血清及肾脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子水平;采用HE染色法检测肾脏病理改变;采用Western blot技术检测各组小鼠脾脏NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、p-NF-κB、NF-κB、p-IκBα、IκBα蛋白的表达.结果 甘草酸能显著降低血清尿酸、肌酐含量;减少血清及肾脏IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子表达,改善肾脏病理改变;并能显著抑制NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、p-NF-κB、p-IκBα表达.结论 甘草酸对MRL/lpr狼疮小鼠肾脏起到保护作用.     

芍药苷对MRL/lpr狼疮小鼠肺损伤的保护作用

目的 探讨芍药苷对MRL/lpr狼疮小鼠肺损伤的影响。 方法 将系统性红斑狼疮MRL/lpr小鼠随机分为MRL/lpr组、MRL/lpr+地塞米松 (1.5 mg/kg) 组,MRL/lpr+芍药苷(20 mg/kg)组,MRL/lpr+芍药苷 (40 mg/kg) 组, 每组10只,给药7 d;另取10只野生型C57BL/6小鼠作为正常对照组。第8天采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和血清炎症因子白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平;采用HE染色检测肺部病理改变,采用蛋白质免疫印迹（Western blot）技术检测各组小鼠肺组织中磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶（P-PI3K）、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（P-Akt）、磷酸化核因子κB p65(P-NF-κBp65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α（P-IκBα）蛋白的表达。 结果 芍药苷能显著降低血清MDA含量;提高血清SOD、CAT、GSH-PX水平,减少血清炎症因子水平,改善肺组织病理改变,并能显著抑制P-PI3K、P-Akt、P-NF-κBp65、P-IκBα蛋白表达。结论 芍药苷对MRL/lpr狼疮小鼠肺损伤起到保护作用。     

SLE小鼠血清中自身抗体检测

目的 :比较LPSip所诱导的SLE模型小鼠血清中自身抗体的表达 ,获得死亡率较低的SLE模型 .方法 :BALB/c小鼠随机分组ipLPS或生理盐水 ,2 4h后取血清行间接免疫荧光法及可提取性核抗原 (ENA)多肽抗体免疫印迹法进行实验 .结果 :LPS 5mg·kg-1ip动物死亡率为 4 0 % ;2 .5mg·kg-1死亡率为 5 % ;1.2 5mg·kg-1无死亡 .ENA多肽抗体免疫印迹法 :LPS 5mg·kg-1ip动物可见阳性条带出现于 2 8/ 2 9,13.5ku多肽 ;15 ,16 .5 ,38ku多肽 ;5 2ku多肽及4 7/ 4 8,4 5ku多肽上 ,可判定为抗Sm ,抗Rib ,抗ssA和抗ssB抗体阳性 .与LPS 2 .5mg·kg-1ip组一致 .间接免疫荧光法 :LPS 5mg·kg-1ip与 2 .5mg·kg-1组动物血清中均能检测出核糖体 (Rib) p 蛋白抗体、Jo 1抗体和线粒体 (AMA)抗体阳性 ,荧光强度较强 .1.2 5mg·kg-1组无阳性结果 .结论 :LPS2 .5mg·kg-1ip能成功诱导SLE模型 ,且动物死亡率低     

TACI融合蛋白对MRL/lpr小鼠免疫功能的作用及其部分机制

目的 研究TACI融合蛋白(TACI-Ig)对系统性红斑狼疮转基因小鼠(MRL/lpr)的治疗作用及部分机制.方法 将MRL/lpr小鼠随机分为6组:模型组、TACI-Ig(3.75、7.5、15 mg/kg)治疗组、阳性对照药强的松组、阴性对照药Ig-Fc组,另选BALB/c小鼠作为正常对照组,除强的松组每日灌胃给药...     

自身抗体联合检测对系统性红斑狼疮的诊断价值分析

目的探讨自身抗体对诊断系统性红斑狼疮(SLE)的临床应用价值。方法对2011年5月～2012年5月在广州市花都区人民医院门诊及住院78例SLE患者,疾病对照组50例,正常对照组45例,均采用间接荧光免疫法测定ANA、抗ds-DNA,采用免疫印迹法测定抗可提取性核抗原抗体谱(抗-ENA),包括抗RNP、抗Sm、抗ssA、抗ssB、抗Jo-1、抗scl-70的检测。结果 78例SLE患者的ANA、抗ds-DNA、抗SSA、SSB、抗-sm的阳性率分别是93.4%、48.7%、32.1%、57.6%、26.9%。结论间接免疫荧光法测定ANA,抗ds-DNA有利于SLE的筛查和判断,多种自身抗体联合检测提高了对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断和鉴别,ANA、抗ds-DNA、抗ENA的联合检测可提高SLE患者的诊断和敏感性。     

系统性红斑狼疮患者自身抗体检测及临床意义

系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是一种自身免疫性疾病。虽病因未明，但ＳＬＥ的发生存在着机体免疫调节功能紊乱［１］。患者血清中可出现多种自身抗体，现已发现２０余种。为进一步探讨ＳＬＥ患者血清抗体的特征及与临床诊断的关系，本文对１６８例ＳＬＥ患者、７４例其他结缔...     

免疫吸附对系统性红斑狼疮自身抗体影响的研究

目的探讨免疫吸附对系统性红斑狼疮自身抗体的影响。方法14例患者均给予免疫吸附治疗,每次间隔3～5 d,连续3次。同时,患者既往应用药物激素及免疫抑制剂在免疫吸附治疗1次后,视病情逐渐减量。结果抗核抗体、抗ds-DNA抗体滴度均明显下降。结论免疫吸附可明显降低系统性红斑狼疮患者自身抗体滴度。     

静脉注射免疫球蛋白对MRL/lpr小鼠外周血NK细胞的影响

目的 研究静脉注射免疫球蛋白对MRL/lpr小鼠蛋白尿及外周血自然杀伤(NK)细胞的影响.方法 MRL/lpr小鼠随机分为免疫球蛋白治疗组(尾静脉注射丙种球蛋白4 μL/kg×5 d)和对照组(尾静脉注等量生理盐水).两组小鼠治疗前后分别进行24 h尿蛋白定量和血常规检测,流式细胞术检测外周血NK细胞数量.结果 与治疗前比较,治疗后免疫球蛋白治疗组MRL/lpr小鼠24 h尿蛋白定量明显减少(P<0.05),外周血NK细胞比例明显上升(P<0.05);而对照组MRL/lpr小鼠治疗前后24 h尿蛋白定量和外周血NK细胞比例无明显变化(P>0.05).结论 静脉注射免疫球蛋白可有效改善MRL/lpr小鼠的蛋白尿症状,其作用机制可能与增加外周血NK细胞数量有关.     

雷公藤甲素减轻MRL/lpr 狼疮小鼠肾损伤的作用机制研究

目的 研究雷公藤甲素（TPL） 减轻MRL/lpr狼疮小鼠肾损伤的作用及其机制。方法 选择雌性 C57BL/6正常小鼠作为对照组;将雌性MRL/lpr狼疮小鼠分为模型组、TPL组、JAK1 组、TPL+JAK1 组。给药 9 周后检测各组24 h 尿蛋白、血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN） 水平及血清IP-10、高迁移率族蛋白1 （HMGB1）的质量分数,肾脏IgG、C3的荧光强度、γ干扰素诱导蛋白10（IP-10）、HMGB1的质量分数、磷酸 化Janus激酶1（p-JAK1）、磷酸化信号传导及转录激活蛋白1（p-STAT1）的表达水平。结果 模型组小鼠24 h 尿蛋白、Scr、BUN 及IgG、C3 的免疫荧光强度、IP-10、HMGB1、p-JAK1、p-STAT1 均高于对照组（P < 0.05）;TPL组小鼠24 h尿蛋白、Scr、BUN及IgG、C3荧光强度、IP-10、HMGB1、p-JAK1、p-STAT1均低于 模型组（P <0.05）;TPL+JAK1 组小鼠24 h 尿蛋白、Scr、BUN 及IgG、C3 荧光强度、IP-10、HMGB1、p- JAK1、p-STAT1 均高于TPL 组（P <0.05）。结论 TPL 减轻MRL/lpr 狼疮小鼠肾损伤的分子机制可能是抑制 JAK1/TAT1通路介导的炎症反应。     

BMMSCs输注对MRL/lpr狼疮鼠血液系统的影响

目的：研究同种异体骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSCs）输注对MRL/lpr狼疮鼠造血的影响,为BMMSCs输注治疗系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）的血液系统损伤提供依据。方法：分离培养C57BL/6小鼠的BMMSCs并对MRL/lpr狼疮鼠进行静脉输注,同时以PBS为对照。分为对照（C57BL/6）组、狼疮鼠（MRL/lpr）组、BMMSCs输注组1（MRL/lpr鼠12周注射BMMSCs）、PBS 对照组1（MRL/lpr鼠12周注射PBS）、BMMSCs输注组2（MRL/lpr鼠12、16周两次注射BMMSCs）、PBS 对照组2（MRL/lpr鼠12、16周两次注射PBS）。在20周末取小鼠的外周血进行血细胞计数,后4组取骨髓及脾脏进行流式细胞术和甲基纤维素半固体集落形成试验（CFU）检测分析输注组和对照组骨髓及脾脏各系细胞比例。结果：与C57BL/6小鼠相比,狼疮鼠外周血红细胞计数［（9.3 ± 0.8）×1012个/L vs.（10.5 ± 0.8）×1012个/L,n=5,P < 0.001］、血红蛋白［（138.1 ± 11.6）g/L vs.（156.4 ± 11.0）g/L,n=5,P < 0.001］和血小板计数［（695.3 ± 136.2）×109个/L vs.（844.1 ± 180.8）×109个/L,n=5,P<0.05］降低,与PBS对照组相比,BMMSCs输注组MRL/lpr狼疮鼠血小板数量改善［（795.0 ± 75.7）×109个/L vs.（593.4 ± 123.4）×109个/L,n=5,P < 0.05］,骨髓中干细胞（n=5,P < 0.001）和成熟T细胞比例减少（n=5,P < 0.05）,髓系比例增加（n=5,P < 0.01）,pre?B数量有所改善（n=5,P < 0.05）,脾脏内干细胞比例上升（n=5,P < 0.05）,成熟T细胞比例下降（n=5,P < 0.05）。结论：BMMSCs输注对狼疮鼠外周血、骨髓及脾脏不同系造血细胞有影响,其对狼疮鼠的血液系统损伤有治疗意义。     

MRL/Ipr小鼠肾组织胸腺和活化调节趋化因子表达检测

目的 研究胸腺和活化调节趋化因子(TARC)在红斑狼疮小鼠肾组织中的表达与作用.方法 16周龄MRI/lpr小鼠和BALB/c小鼠各4只,比较两组小鼠24 h尿蛋白,并用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)技术和蛋白印迹的方法检测两组小鼠肾组织中TARC mRNA及蛋白表达情况.结果 MRL/lpr小鼠24 h尿蛋白高于BALB/c小鼠(P＜0.05);MRL/lpr小鼠肾组织TARC mRNA表达较BALB/c小鼠明显升高(P＜0.05);MRL/lpr小鼠肾组织中可检测出TARC蛋白条带,而BALB/c小鼠肾脏组织中未能测得.结论 TARC在红斑狼疮小鼠肾脏组织中表达增高,并可能参与介导小鼠狼疮性肾炎的发病.     

MRL/lpr小鼠肾组织胸腺和活化调节趋化因子表达检测

目的研究胸腺和活化调节趋化因子(TARC)在红斑狼疮小鼠肾组织中的表达与作用。方法16周龄MRL/lpr小鼠和BALB/c小鼠各4只,比较两组小鼠24h尿蛋白,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术和蛋白印迹的方法检测两组小鼠肾组织中TARC mRNA及蛋白表达情况。结果MRL/lpr小鼠24h尿蛋白高于BALB/c小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠肾组织TARC mRNA表达较BALB/c小鼠明显升高(P<0.05);MRL/lpr小鼠肾组织中可检测出TARC蛋白条带,而BALB/c小鼠肾脏组织中未能测得。结论TARC在红斑狼疮小鼠肾脏组织中表达增高,并可能参与介导小鼠狼疮性肾炎的发病。     

信号传导和转录激活因子3及其蛋白抑制剂在狼疮小鼠肾组织中的表达

目的探讨信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其蛋白抑制剂(PIAS3)在MRL/lpr狼疮小鼠肾组织中的表达。方法以18周龄雌性MRL/lpr小鼠作为狼疮肾炎组,相同周龄的BALB/C小鼠作为正常对照组。分别取两组小鼠肾组织,应用荧光定量RT-PCR法检测STAT3和PIAS3 mRNA的表达,采用Western blot和免疫组织化学方法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3的蛋白表达,同时检测小鼠实验室指标以及肾脏组织病理的表现。结果 MRL/lpr小鼠尿蛋白、血尿素氮、血肌酐均高于BALB/C小鼠(P<0.05)。MRL/lpr小鼠肾脏组织病理主要表现为肾小球系膜细胞增生,肾小管间质炎症细胞浸润,而BALB/C小鼠肾小球、肾小管无异常。MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均较BALB/C小鼠升高(P<0.05),其PIAS3mRNA表达则较BALB/C小鼠明显降低(P<0.01),而两组小鼠STAT3总蛋白的表达无明显差别。结论 MRL/lpr小鼠肾组织STAT3 mRNA和p-STAT3蛋白的表达均高于对照组,而其PIAS3 mRNA表达低于对照组。     

地塞米松对MRL/lpr狼疮小鼠认知功能的保护作用

目的：探讨地塞米松对MRL/lpr狼疮小鼠认知功能的影响。方法：MRL/lpr狼疮小鼠随机分为MRL/lpr 组、MRL/lpr+地塞米松(1.5 mg/kg)组,每组10只;野生型正常对照组C57BL/6小鼠10只。采用 Morris水迷宫观察 各组小鼠认知功能和行为。检测各组小鼠血清、海马组织中炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介 素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)含量;检测各组小鼠海马组织中磷脂酰 肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/核因子-κB p65(nuclear factor-kappabinding p65,NF-κB p65)相关蛋白P-PI3K,P-Akt和磷酸化核转录因子κB抑制蛋白a(phospho-inhibitor of nuclear factor kappa Ba,P-IκBa)及P-NF-κB p65的表达。免疫组织化学法观察各组小鼠海马区P-NF-κB p65阳性表达。结果：地塞米松能缓 解MRL/lpr狼疮小鼠认知功能障碍,降低血清及海马组织IL-6,IL-1β,TNF-α的表达;抑制 P-PI3K,P-Akt,P-IκBa和 P-NF-κB p65的表达。结论：地塞米松可能通过降低MRL/lpr狼疮小鼠海马区TNF-α和IL-1β水平,从而对其认知功能起 保护作用。     

不同体质MRL/lpr狼疮鼠病情程度及卵巢激素水平的变化

目的:区分MRL/lpr狼疮鼠体质,并观察不同周龄狼疮鼠病情程度及卵巢激素水平变化。方法:将12周龄MRL/lpr小鼠按体质分为寒体组、热体组、常体组,各组分别随机分为A组和B组,每组10只。A组于12周龄时(发病前期)取材;B组于20周龄时(发病高峰期)取材。通过ELISA、放射免疫等检测方法,分别检测24 h尿蛋白、外周血ds-DNA及卵巢激素水平。结果:12周龄时,不同体质MRL/lpr狼疮小鼠24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体、卵巢孕酮(P)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平差异无统计学意义(P0.05),肾脏病理切片HE染色已显示出轻度损害。20周龄时,寒体组24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体、卵巢E2水平均低于常体组(P0.05),卵巢T、P、LH、FSH无体质差异(P0.05),肾脏病理切片HE染色显示出较为明显的肾脏病变,且寒体组肾损害表现较常体组及热体组轻微。与12周龄比较,20周龄常体组及热体组小鼠24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体水平均明显升高(P0.01),寒体组小鼠24 h蛋白尿程度、外周血抗ds DNA抗体水平变化无统计学意义(P0.05),不同体质组卵巢E2、T、LH、FSH均明显升高(P0.01),但P变化差异无统计学意义(P0.05)。结论:MRL/lpr狼疮鼠存在明显的体质差异;在发病高峰期,不同体质小鼠的发病程度及卵巢E2水平存在差别。