抗白细胞介素6单克隆抗体治疗延长小鼠同种心脏移植物存活时间的实验研究

目的 观察应用抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6 monoclonal antibody,anti-IL-6 mAb)对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用,并探讨其可能的作用机制.方法 建立小鼠颈部异位心脏移植模型.实验动物随机分为同系移植组、移植治疗组(每日注射3 g/L anti-IL-6 mAb 0.1 mL)和移植模型组(注射等量生理盐水).ELISA法检测受鼠移植术后第3、6 天外周血IL-6的表达水平,观察各组移植心脏存活时间,病理分析检测排斥反应程度,流式细胞术(FCM)检测各组受鼠脾脏及移植心脏中CD4+ CD25+调节性T细胞比例变化,RT-PCR检测移植心脏IL-6、IFN-γ、IL-17、RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平.结果 ①治疗组外周血IL-6表达水平较模型组明显降低(P<0.01);②治疗组移植心脏存活时间较模型组明显延长[(22.0±2.3)d vs(7.7±0.8)d,P<0.01],排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);③治疗组移植心脏中IFN-γ、IL-6、IL-17和RORγt mRNA表达水平较模型组显著下降(均P<0.05),脾脏及移植心脏中浸润的CD4+ CD25+调节性T细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显升高,与模型组比较差异有统计学意义(均P<0.05).结论 anti-IL-6 mAb治疗可抑制Th1、Th17型细胞因子的分泌,促进CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞产生,抑制单个核细胞浸润并有效延长小鼠同种移植心脏的存活时间.     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在足月分娩发动中的变化

目的 检测足月妊娠孕妇临产前后外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞、单个核细胞Foxp3 基因、蜕膜Foxp3基因及蛋白表达变化,探讨调节性T细胞与足月妊娠分娩发动的关系.方法 根据临产情况将足月妊娠孕妇48例分为足月未临产组(20例)及足月临产组(28例),并设正常未孕对照组(20例)用作外周血检测对照.收集各研究对象外周血及蜕膜组织.流式细胞术检测外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞含量,RT-PCR测定外周血单个核细胞及蜕膜Foxp3 基因表达,Western blot检测蜕膜Foxp3蛋白表达.结果 足月临产组与足月未临产组相比,外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞含量 [(3.58±0.78)% vs(7.26±1.07)%],外周血单个核细胞中Foxp3基因相对表达水平[(0.307±0.052)vs(0.602±0.088)],蜕膜Foxp3 基因及蛋白相对表达水平[(0.249±0.085)vs(0.556±0.09)]、[(0.280±0.078)vs(0.579±0.093)],差异均有统计学意义(P<0.01).结论 足月妊娠孕妇临产后CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞含量,Foxp3基因及蛋白表达下降,提示CD4+ CD25+ Foxp3+ 调节性T细胞可能与分娩发动有关.     

Foxp3基因及调节性T细胞在重症肌无力被动转移幼鼠发病中的作用机制

目的探讨Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3mRNA在重症肌无力被动转移模型(passive transferred myasthenia gravis,PTMG)发病中的作用机制。方法将16只幼年雌性C57BL/6小鼠随机分为2组:模型组和对照组,模型组经腹腔注射含1.0mg/kgmAb35的Ringer's液0.2ml建立PTMG模型,正常对照组注射不含mAb35的Ringer's液0.2ml。采用流式细胞技术检测小鼠脾细胞中CD4+CD25+T细胞及Foxp3+CD4+CD25+Tregs含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)分析2组小鼠脾细胞中Foxp3mRNA的表达,ELISA法检测2组小鼠血清白介素-2和干扰素-γ的水平。结果①模型组小鼠脾细胞中CD4+CD25+T细胞与CD4+T细胞含量的比例与对照组比较有统计学差异[(8.82±0.74)%vs(9.89±0.88)%,P<0.05];模型组Foxp3+CD4+CD25+Tregs与CD4+CD25+T细胞含量的比例与对照组比较显著降低[(6.83±1.18)%vs(8.38±0.76)%,P<0.01];脾细胞...     

再生障碍性贫血小鼠Foxp3的表达及意义

目的 探讨再生障碍性贫血(简称再障)小鼠外周血单个核细胞调节T细胞转录因子Foxp3的表达及其意义.方法 ①采用免疫介导(γ射线照射和淋巴细胞输入)的方法 建立再障小鼠模型.②RT-PCR方法 检测再障小鼠外周血单个核细胞Foxp3 mRNA的表达.③免疫组织化学方法 检测再障小鼠脾脏组织Foxp3蛋白水平的表达.结果 ①再障小鼠外周血单个核细胞Foxp3 mRNA的表达较正常小鼠降低(18.90±2.45 vs 57.27±5.71,P＜0.05).②Foxp3蛋白表达水平在再障小鼠脾脏中较正常小鼠低(19.2±10.0 vs 51.4±38.8,P＜0.05).结论 Foxp3在再障小鼠外周血中及脾脏组织中表达明显减少,提示Foxp3的表达降低可能参与再生障碍性贫血的免疫发病机制.     

支气管哮喘大鼠淋巴液CD4+CD25+Treg及其Th1/Th2失衡的实验研究

目的观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞、IL-4和IFN-γ在哮喘大鼠淋巴液与血液中的水平,探讨其与哮喘发病的关系。方法建立大鼠哮喘模型,收集激发后0、24、48 h淋巴液、血液中淋巴细胞,采用流式细胞术(FCM)检测淋巴液及血液中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率;采用ELISA方法检测血浆及淋巴液中IL-4和IFN-γ水平。结果哮喘组淋巴液和血液的CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率水平、血浆IL-4和IFN-γ浓度在各时间点均低于对照组(P<0.05);哮喘组淋巴液中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率水平、IL-4和IFN-γ浓度在不同时间点均高于血液水平(P<0.05)。结论哮喘大鼠淋巴液中存在CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量失调,且淋巴液中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平显著高于其血液水平;哮喘大鼠淋巴液中存在以Th2亢进为特征的Th1/Th2失衡,淋巴液中细胞因子水平对于反映哮喘炎症程度可能更早和更准确。     

肾综合征出血热患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞检测及其意义

目的 研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在肾综合征出血热(HRFS)患者外周血中的比例改变并探讨其在疾病进程中的意义.方法 选取27例HRFS患者,外周血用细胞内染色的流式细胞术及荧光定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3+表达,并与肾活检结果及肾功能进行相关分析.同时取19名正常健康体检者作为正常对照组.结果 HRFS患者各期CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例明显均低于正常对照组(低血压休克期:5.0%±1.2%,少尿期:3.1%±0.8%,多尿期:4.2%±0.9%,恢复期:5.0%±1.1%,正常对照组:6.5%±2.1%,均P<0.01);各期间CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例差异亦有统计学意义,以少尿期为最少(P<0.01).CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞比例与肾组织损害指数显著相关(r=0.51,P<0.01),但与蛋白尿程度及肾功能损害无显著相关(r=0.11,0.18;均P>0.05).HRFS患者少尿期外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平(503±64)明显低于正常对照组(3102±409)和其他期(低血压休克期:1805±291;多尿期:1869±320;恢复期:2697±420,均P<0.01).结论 HRFS患者CD4+CD25+Foxp3+T细胞明显减少,这群调节性T细胞可能参与了HRFS的病理进程.     

吡格列酮通过调控TGF-β信号通路和T细胞调节性免疫机制缓解ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化

目的 研究ApoE-/-小鼠体内吡格列酮(PIO)是否通过TGF-β信号通路和T细胞调节性免疫机制来发挥抗动脉粥样硬化的作用.方法 动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠模型连续8周每日灌胃给予PIO(日剂量20 mg/kg).免疫组化对动脉病变组织中TGF-β信号通路相关因子、IFN-γ+细胞及Foxp3+细胞的表达水平进行检测.体外研究中,用特异性抗原氧化低密度脂蛋白(oxLDL)刺激原代培养的ApoE-/-小鼠脾脏细胞,并与PIO或PIO+PPARγ阻断剂GW9662共同孵育.流式细胞术检测CD4+IFN-γ+细胞和CD4+CD25+Foxp3+细胞的水平.结果 PIO可通过提高TGFβ1(P<0.01),TGFβRII(P<0.05)和p-Smad3(P<0.05)的表达量、抑制Smad7(P<0.05)的表达量来缓解ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的病变程度.体外实验表明,PIO处理后原代小鼠脾细胞中IFN-γ的mRNA水平显著下调(P<0.05),而Foxp3的mRNA水平显著上调(P<0.05).流式细胞术表明PIO处理后CD4+IFN-γ+细胞(P<0.05)和CD4+CD25+Foxp3+细胞(P<0.05)的表达量明显上升,而PPARγ阻断剂GW9662可阻断PIO对两种细胞的调控作用.结论 PIO可能通过调控TGF-β/Smad信号通路及PPARγ介导的Th1/Treg细胞水平抑制ApoE-/-小鼠的动脉粥样硬化病变.     

川崎病患者血中CD4~+CD25~+调节性T细胞与血清IL-4、IFN-γ水平关系

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞在川崎病(KD)发病机制中的作用。方法 KD组患儿32例;对照组30例中分为两组:非KD发热组15例为急性呼吸道感染的发热患儿,健康组15例为健康体检患儿。KD患儿分别于静注丙种球蛋白(IVIG)前和IVIG治疗后热退2~3天取外周血,用流式细胞仪测定CD4+CD25+调节性T细胞比例,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平并分析其关系。结果急性期KD患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例[(4.40±1.31)%]与非KD发热组[(6.37±1.99)%]和健康对照组[(7.45±3.18)%]相比均明显降低(P<0.01),而IVIG治疗后热退2~3天,CD4+CD25+调节性T细胞比例[(6.88±2.50)%]明显升高,接近于正常水平。同时在KD急性期,血清IFN-γ、IL-4水平均明显升高,在IVIG治疗后热退2~3天无明显下降。且在KD急性期血清IFN-γ、IL-4水平与CD4+CD25+调节性T细胞比例成负相关性(r=-0.838,P<0.01)。在静注IVIG后热退2~3天,血清IFN-γ、IL-4水平与CD4+CD25+调节性T细胞比例无明显相关性(r分别为-0.04和-0.072,P>0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过对体内Th1和Th2细胞的调控参与了KD的发病机制。     

寻常型天疱疮患者外周血调节性T淋巴细胞数量及Foxp3基因表达

目的 研究寻常型天疱疮(PV)患者外周血调节性T淋巴细胞(Treg),即CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞的数量及其Foxp3mRNA的表达水平,探讨其在PV发病机制中的作用.方法 收集15例PV患者(PV组)和15名健康人(对照组)外周抗凝静脉血,分离外周血单个核细胞.分别用FITC标记抗CIM单抗,APC标记抗CD25单抗,PE标记抗Foxp3单抗,流式细胞仪检测分析PV患者外周血Treg在CD4+ T细胞中的百分率及CD4+ T细胞在淋巴细胞中的百分率;荧光定量PCR检测外周血单个核细胞Foxp3 mRNA表达情况.结果 PV组外周血Treg在CD4+ T细胞中百分率为(6.99±1.86)%,CD4+ T细胞在淋巴细胞中的百分率为(32.78±8.33)%,对照组分别为(7.95±1.68)%和(33.45±7.32)%,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);荧光定量PCR检测结果显示,PV组与对照组Foxp3 mRNA相对表达量分别为8.80±5.53和8.47±5.46,两组比较无显著差异(P＞0.05).结论 调节性T细胞可能不直接参与PV的发生.     

复方黄芪口服液联合化疗药物抗肿瘤效应机制研究

[目的]研究复方黄芪口服液联合化疗药物抗肿瘤效应及作用机制,为复方黄芪口服液抗肿瘤免疫疗法和临床应用提供依据。[方法]构建H22荷瘤小鼠模型,随机分为荷瘤模型组、复方黄芪口服液组、环磷酰胺组和联合用药组。给药16 d后,分离肿瘤组织,评价抗肿瘤效应;血细胞分析仪测定外周血白细胞、中性粒细胞和单核细胞数量;四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测荷瘤小鼠淋巴细胞增殖功能;流式细胞术检测脾淋巴细胞Ⅰ型辅助性T细胞（CD4+IFN-γ+T细胞）和调节性T细胞（CD4+Foxp3+Treg细胞）表达水平。[结果]与单用环磷酰胺相比,复方黄芪口服液联合环磷酰胺对肿瘤抑制率无明显影响,能够显著提高荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力,差异有统计学意义（P<0.01）;复方黄芪口服液联合环磷酰胺进行干预后,可增加白细胞和中性粒细胞数量（P<0.01或P<0.05）,上调CD4+IFN-γ+T细胞比例,下调具有免疫抑制作用的CD4+Foxp3+Treg细胞表达。[结论]复方黄芪口服液联合化疗药物具有显著抗肿瘤免疫效应,其机制可能与促进Th1细胞反应和下调Treg细胞表达,从而提高机体的抗肿瘤免疫功能有...     

鹿龙再生汤对再障小鼠外周血单个核细胞及脾teff细胞T-bet和GATA-3基因表达的影响

目的 探讨鹿龙再生汤对再生障碍性贫血(简称再障)模型小鼠外周血单个核细胞以及脾CD4+CD25-细胞(teff细胞)中T-bet、GATA-3基因表达的影响.方法 通过IFN-γ腹腔注射加白消安灌胃的方法建造40只再障小鼠模型,分别予同体积的生理盐水、一般浓度、5倍浓度和10倍浓度的鹿龙再生汤进行灌胃治疗,分别归为再障组、再障小剂量组、再障中剂量组和再障大剂量组(n=10);另取40只正常小鼠按上述方法进行分组处理,分别归为正常组、正常小剂量组、正常中剂量组和正常大剂量组(n=10).通过骨髓活检病理学检查观察用药后各组小鼠的骨髓造血变化,免疫磁珠分选各组小鼠脾teff细胞,利用RT-PCR技术检测各组小鼠外周血单个核细胞以及脾teff细胞T-bet、GATA-3基因mRNA的表达情况.结果 (1)与再障组相比,再障中剂量组和再障大剂量组小鼠的骨髓造血有所恢复,尤其是再障大剂量组.(2)再障大剂量组小鼠的外周血单个核细胞以及脾teff细胞T-bet基因mRNA的表达、T-bet/GATA-3的比值较再障组均明显下降(P＜0.05),而GATA-3基因mRNA的表达明显上调(P＜0.05).结论 大剂量鹿龙再生汤可改善再障小鼠骨髓造血功能,可能是通过调节再障小鼠外周血单个核细胞及脾teff细胞的T-bet、GATA-3基因的表达来实现.     

PCOS合并甲状腺抗体阳性患者外周血T细胞亚型和CD4+CD25+调节性T细胞研究

目的分析多囊卵巢综合征（PCOS）合并甲状腺抗体阳性患者外周血T细胞亚型分布情况和CD4+CD25+调节性T细胞数量及功能,探讨患者的机体免疫状态。方法选取PCOS患者、PCOS合并甲状腺抗体阳性患者、甲状腺抗体阳性患者及身体健康的女性体检者（正常对照）各50例,采用免疫发光法检测甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）和胰岛素（INS）水平,全自动生化分析仪检测空腹血糖,爱威全自动粪便分析仪检测粪球杆菌比;流式细胞术检测外周血T细胞亚型分布及CD4+CD25+调节性T细胞比例;采用实时荧光定量PCR检测Th1、Th2的效应因子IFN-γ、IL-4以及反映CD4+CD25+调节性T细胞功能的叉状头/翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）mRNA表达情况;Pearson法分析Foxp3mRNA表达水平与其它指标的相关性。结果与正常对照组相比,甲状腺抗体阳性组患者除粪便球杆菌比升高外（P＜0.05）,BMI、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、LH/FSH、T均无统计学差异（均P＞0.05）。与甲状腺抗体阳性组相比,PCOS组及PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者的BMI、HOMA-IR、LH/FSH及T均升高（均P＜0.05）,而PCOS组粪便球杆菌比降低（P＜0.05）。与PCOS组相比,PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者BMI、HOMA-IR、LH/FSH及粪便球杆菌比均升高（均P＜0.05）。与正常对照组相比,甲状腺抗体阳性组、PCOS组和PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者的CD4+T细胞比例及CD4+T细胞/CD8+T细胞比例均升高（均P＜0.05）,CD8+T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞比例均降低（均P＜0.05）;与PCOS组相比,PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者CD4+T细胞比例及CD4+T细胞/CD8+T细胞比例升高,CD8+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞比例降低（均P＜0.05）。与正常对照组相比,甲状腺抗体阳性组、PCOS组及PCOS合并甲状腺抗体阳性组患者IFN-γmRNA和Foxp3mRNA表达均下调（均P＜0.05）,IL-4mRNA表达均上调（均P＜0.05）。与PCOS组相比,PCOS合并甲状腺抗体阳性组IFN-γmRNA和Foxp3mRNA表达下调,IL-4mRNA表达上调（均P＜0.05）。PCOS合并甲状腺抗体阳性患者Foxp3mRNA表达水平与HOMA-IR、BMI、LH/FSH、CD4/CD8和IL-4均呈负相关（均P＜0.05）,而与IFN-γ呈正相关（P＜0.05）。结论T细胞亚群分布失衡和CD4+CD25+调节性T细胞功能降低可能是PCOS合并甲状腺抗体阳性患者发病的重要环节,而肠道菌群失调可能是发病的危险因素。     

CD4＋CD25＋调节性T细胞及其相关基因Foxp3在非小细胞肺癌患者外周血中的变化

目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)数量变化及其相关基因Foxp3 mRNA的表达改变.探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用.方法:采用流式细胞术检测患者外周血中CD4%D25+调节性T细胞数量变化:采用半定量RT-PCR方法检测肺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA的表达水平.选取30名非肿瘤患者作为对照.结果:肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量明显高于正常组(P＜0.05);Foxp3 mRNA在肺鳞癌和肺腺癌患者外周血PBMC中的表达明显增强(P＜0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在肺癌免疫耐受中发挥重要作用.     

体外分化的CD4+CD25+调节性T细胞可减轻小鼠皮肤移植急性排斥反应

目的 利用转化生长因子-β 1(TGF-β 1)体外诱导CD4 +CD25 -T细胞分化为CD4 +CD25 +调节性T细胞,通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制.方法 分选获取CD4 +CD25 -T细胞,根据诱导条件不同分为3组:对照组、无TGF-β 1刺激组和TGF-β 1组.检测CD4 +CD25 +T细胞比例,并用RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达水平.建立小鼠皮肤移植模型,于0、1、2、3 d输注上述细胞,观察皮肤移植物存活时间,并检测移植物的病理改变和受鼠外周淋巴细胞的增殖能力.结果 TGF-β 1组中CD4 +CD25 +T细胞比例与无TGF-β 1刺激组相近,但高表达Foxp3 mRNA(P ＜0.05).将培养的细胞输注给受鼠后发现,输注无TGF-β 1刺激组细胞的受鼠其移植物平均存活时间(mean survival time,MST)为(7.3±1.6)d,低于对照组(P ＜0.05);而输注TGF-β 1组细胞小鼠MST为(24.1±2.5)d,较对照组和无TGF-β 1刺激组明显延长(P ＜0.05).病理检测亦显示TGF-β 1组受鼠移植物结构完整,无明显淋巴细胞浸润.用Alamar Blue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示,TGF-β 1组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制,低于对照组.进一步检测外周血中IL-4和IFN-γ的表达水平,结果显示TGF-β 1组小鼠体内IL-4和IFN-γ均明显低于对照组和无TGF-β 1刺激组.结论 TGF-β 1可诱导CD4 +CD25 -T细胞分化为CD4 +CD25 +调节性T细胞,将诱导后的调节性T细胞进行过继输注可延长小鼠皮肤移植物存活时间.     

IL-10表达对小鼠脾脏CD4+T细胞亚群相关细胞因子的影响

目的 研究应用T细胞特异性慢病毒过表达白细胞介素10(IL-10)或siRNA片段抑制IL-10后对小鼠脾脏CD4⁺T细胞亚群的影响。方法 磁珠分选试剂分离小鼠初始CD4⁺T细胞,通过IL-10过表达特异性慢病毒侵染CD4⁺T细胞,应用qRT-PCR检测IFN-γ、IL-4、IL-17A、Foxp3的mRNA表达量,应用流式细胞术分别检测IFN-γ、IL-4、IL-17A、Foxp3在CD4⁺T细胞中的分泌比率。应用siRNA干扰片段抑制IL-10,应用qRT-PCR检测IFN-γ、IL-4、IL-17A、Foxp3的mRNA表达量,应用流式细胞术分别检测IFN-γ、IL-4、IL-17A、Foxp3在CD4⁺T细胞中的分泌比率。结果 过表达IL-10后,IFN-γ、IL-4、IL-17A mRNA水平明显下降(P<0.05),Foxp3 mRNA表达明显上升(P<0.05);IFN-γ、IL-4、IL-17A分泌量均明显降低(P<0.05),Foxp3分泌量...     

慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征患者外周血CD4+CD25+T调节细胞功能检测及意义

目的 探讨慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(chronic abacterial prostatitis/chronic pelvic pain syndrome,CAP/CPPS)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量和功能的变化及其临床意义.方法 对45例CAP/CPPS患者和18名正常人采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+,CD4+CD25highT淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率,RT-PCR检测Foxp3mRNA表达,ELISA法检测TGF-β1水平.结果 CAP/CPPS患者外周血CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);CAP/CPPSⅢA、ⅢB组患者外周血单个核细胞(PBMC)中Foxp3mRNA表达水平[(0.69±0.23)、(0.44±0.18)]较对照组(1.37±0.19)明显降低(P=0.035,P=0.014);CAP/CPPSⅢA、ⅢB组患者血清中TGF-β1水平[(18.09±10.45)pg/ml、(14.06±6.22)pg/ml]较对照组[(27.01±13.29)pg/ml]降低(P=0.041,P=0.024).结论 外周血CD44CD25+调节性T细胞数量与CAP/CPPS的发病无明显关联,CD4+CD25+调节性T细胞功能障碍可能参与CAP/CPPS发病机制;Foxp3基因与TGF-β1在CAP/CPPS的发病过程中起重要作用.     

哈萨克族食管癌外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与TGF-β1、IL-10的相关性研究

目的探讨哈萨克族食管癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+regulatory Tcells,Treg)的变化,及与转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平的相关性。方法采用流式细胞术检测40例食管癌患者及26例健康体检者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的比例;采用ELISA法检测血清中TGF-β1、IL-10表达水平。结果哈萨克族食管癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例、TGF-β1和IL-10表达水平分别为(7.50±1.94)%、(46.41±11.12)μg/ml、(48.10±13.49)pg/ml,高于对照组(5.04±0.92)%、(35.21±7.46)μg/ml、(33.78±7.31)pg/ml(P<0.05)。TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者与Ⅲ~Ⅳ期者Treg细胞比例及TGF-β1、IL-10表达水平差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1、IL-10表达水平与CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例明显相关(P<0.01)。结论检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比例对于判断食管癌的病期有一定价值。TGF-β1、IL-10的表达水平明显升高,可能参与Treg细胞对机体的免疫负调节机制。     

再生障碍性贫血小鼠T-bet表达及骨髓巨噬细胞对其表达的影响

目的 探讨再生障碍性贫血(简称再障)小鼠外周血单个核细胞Th1细胞转录因子T-bet的表达及骨髓巨噬细胞对正常小鼠外周血单个核细胞T-bet的影响. 方法 ①免疫介导(γ射线照射和淋巴细胞输入)的方法 建立再障小鼠模型.②RT-PCR方法 检测再障小鼠外周血单个核细胞上T-bet mRNA的表达.③正常小鼠外周血单个核细胞分别经再障小鼠骨髓基质细胞培养上清和小鼠骨髓型正常巨噬细胞株Ana-1培养上清刺激后,用RT-PCR方法 检测T-bet mRNA的表达. 结果 ①再障小鼠外周血单个核细胞T-bet mRNA的表达(1.49±0.18)较正常对照组(1.03±0.06)增高(P<0.05);②正常小鼠外周血单个核细胞分别经再障小鼠骨髓基质细胞培养上清和Ana-1细胞株培养上清刺激后,T-bet mRNA的表达分别为1.29±0.03和1.54±0.03,均较正常对照组(1.03±0.06)增高(均P<0.05). 结论 结果 提示巨噬细胞可能通过增加T-bet的表达参与再生障碍性贫血的免疫发病机制.     

格雷夫斯病患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及尿碘的检测及临床意义

目的:探讨格雷夫斯病(GD)患者外周血中的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比例以及尿碘水平.方法:选取2016年4月至2016年10月我院确诊但未治疗的GD患者与健康受检者各40例,以流式细胞术测定CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞,以砷铈催化分光光度法测定尿碘.结果:观察组患者CD4+CD25+Foxp3+Treg在CD4+CD25+T细胞以及CD4+T细胞中所占比例明显低于对照组(P<0.05),尿碘检测水平相比对照组受检者显著提高(P<0.05).结论:GD患者外周血中的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞相比健康人群明显减少而尿碘明显升高,提示CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与碘可能参与GD的发生与发展.