奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响

目的通过奥扎格雷钠的大鼠体内、外实验,观察奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响。方法对照组和奥扎格雷钠诱导组大鼠分别经口给予生理盐水和奥扎格雷钠1wk,HPLC法测定大鼠尿样及肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬的代谢率,观察奥扎格雷钠对CYP2D6活性的影响。结果①大鼠给予奥扎格雷钠(37mg·kg-1),其尿样中右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);②奥扎格雷钠诱导组大鼠肝微粒体中加入右美沙芬(0·324mmol·L-1),其右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);③奥扎格雷钠与CYP2D6特异性抑制剂西米替丁可明显降低右美沙芬的代谢率(P<0·01),并且奥扎格雷钠组其右美沙芬的代谢率低于西米替丁组(P<0·05);④奥扎格雷钠IC50=26·5μmol·L-1,西咪替丁IC50=86·3μmol·L-1,奥扎格雷钠诱导组肝微粒体Km=0·67mmol·L-1,Vmax=2·13nmol·min-1·g-1protein;对照组肝微粒体Km=0·29mmol·L-1,Vmax=0·91nmol·min-1·g-1protein;⑤体内和体外相应实验数据具有很好的相关性(r=0·9811)。结论奥扎格雷钠可诱导CYP2D6酶的活性。     

氧化苦参碱对大鼠CYP2D6酶的影响

目的 通过氧化苦参碱的大鼠体内、外实验,观察氧化苦参碱对大鼠CYP2D6 亚型酶的影响.方法 HPLC法测定大鼠尿液及肝微粒体中探针药物右美沙芬(DM)、代谢物去甲右美沙芬(DT)的含量.对照组和氧化苦参碱组大鼠分别经口给予生理盐水和氧化苦参碱两周,HPLC法测定大鼠尿样及肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬的代谢率,观察氧化苦参碱对CYP2D6活性的影响.并且通过特异性抑制剂确定在肝微粒体重组系统中氧化苦参碱对CYP2D6亚型的影响.结果 实验组大鼠给予氧化苦参碱(100mg/kg),其尿样中右美沙芬的代谢率与对照组相比没有明显差别(P>0.05);实验组大鼠肝微粒体中加入右美沙芬(0.324mmol/L),其右美沙芬的代谢率与对照组相比没有明显差别(P>0.05);氧化苦参碱没有明显降低右美沙芬的代谢率(P>0.05),而CYP2D6特异性抑制剂西米替丁却明显降低右美沙芬的代谢率(P<0.01).结论 氧化苦参碱对CYP2D6酶无明显影响.     

氨苄西林与双黄连注射液单用及配伍时对大鼠CYP2D6的影响

目的 通过氨苄西林和双黄连注射液的大鼠体内、外实验,观察两种药物分别给药及合用时对大鼠CYP2D6的影响。方法 对照组和实验组大鼠分别经尾静脉注射给予0.9%氯化钠溶液、双黄连注射液、氨苄西林、双黄连注射液联合氨苄西林,均给药1周。高效液相色谱法测定大鼠尿样及肝微粒体中CYP2D6探针药物右美沙芬的代谢率,观察氨苄西林、双黄连注射液分别单用及合用时对大鼠CYP2D6活性的影响。通过Western blot法测定其对大鼠肝微粒体CYP2D6蛋白表达的调控。结果 实验组大鼠分别给予双黄连注射液、氨苄西林及双黄连注射液配伍氨苄西林时,尿样中右美沙芬代谢率与对照组差异无显著性（P＞0.05）;实验组大鼠肝微粒体中加入右美沙芬（0.324 mmol&;#8226;L-1）,右美沙芬代谢率与对照组差异无显著性（P＞0.05）;各实验组与对照组CYP2D6蛋白表达差异无显著性。结论 双黄连注射液、氨苄西林单用和两药配伍使用均不影响CYP2D6酶的活性,与同时使用经CYP2D6代谢的其他药物不会产生相互作用。     

大鼠肝睾酮羟化酶体外诱导模型的建立

目的建立大鼠原代培养肝细胞微粒体睾酮羟化酶系列同工酶(CYP2A1,CYP2B1/2,CYP2C11,CYP3A1/2)的体外诱导模型。方法应用胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养;用苯巴比妥钠(PB,1mmol·L-1)、地塞米松(Dex,10μmol·L-1)和β-萘酚黄酮(β-NF,50μmol·L-1)诱导培养肝细胞72 h,提取肝细胞微粒体,进行其肝CYP总量、肝微粒体蛋白含量和睾酮羟化酶比活性的测定。另外采用体内诱导方法,SD大鼠分别给予PB 80mg·kg-1,Dex50mg·kg-1和β-NF80mg·kg-1,ip,每天1次,连续5d,停药24h后制备肝微粒体进行上述指标的测定。结果在体外和体内实验中,PB,Dex和β-NF对肝微粒体蛋白含量、CYP总量和睾酮羟化酶同工酶活性均具有较高的诱导效应。PB对肝CYP总量在体外的诱导效应高于体内,对睾酮不同位置羟化作用的诱导效应体内外无显著性差异;Dex和β-NF对肝CYP总量及睾酮不同位置羟化作用的诱导效应体内外无显著性差异。结论大鼠肝睾酮羟化酶体外诱导模型可替代体内实验,用于药物代谢、新药安全性评价及其他外源性化合物代谢和毒性研究。     

呋喃二烯对肝脏细胞色素P450酶不同亚型的影响

目的 考察呋喃二烯(furanodiene,FDE)对肝脏微粒体主要的细胞色素P450(CYP)酶活性的影响。方法 采用探针底物法,考察FDE在体外孵育体系中对大鼠和人肝微粒体CYP1A、CYP2A、CYP3A、CYP2C、CYP2D、CYP2E1的抑制作用,并计算相应的IC50值;采用微粒体体外“鸡尾酒”孵育法(cocktail法),考察大鼠经低、高剂量FDE(40 mg·kg^-1和160 mg·kg^-1)连续灌胃7 d,其肝微粒体主要CYP酶活性的变化。结果 FDE对大鼠肝微粒体CYP2D1和CYP2C6/7有较弱的抑制作用,其IC50分别为15.8和23.8 μmol·L^-1;对人肝微粒体CYP2C9也有较弱的抑制作用,IC50为26.1 μmol·L^-1。与对照组比较,大鼠灌胃40 mg·kg^-1 FDE,肝微粒体主要CYP酶活性无显著变化;灌胃160 mg·kg^-1后,肝微粒体CYP2E1活性为对照组的164%。结论 FDE对大鼠和人肝微粒体CYP主要亚型的抑制作用较弱;40 mg·kg^-1 FDE对大鼠肝微粒体主要CYP酶未显示明显诱导作用,160 mg·kg^-1 FDE对肝微粒体CYP2E1有一定的诱导作用。     

紫草羟基萘醌对大鼠肝微粒体CYP2D6的影响

目的研究紫草羟基萘醌（HNA）对大鼠肝微粒体CYP2D6的影响。方法 Wistar大鼠,♂,口服给予不同剂量的HNA（5,60 mg.kg-1.d-1）或等量的空白溶媒,连续给药2周后制备肝微粒体。以体外探针药物右美沙芬的代谢物右啡烷的生成速率来反映CYP2D6的活性,通过比较给药组与空白溶媒组酶活性的差异来评价HNA对大鼠肝微粒体CYP2D6的影响。结果建立了一种以右美沙芬为探针底物评价大鼠肝微粒体CYP2D6活性的方法。口服给予HNA两周后,两个剂量组大鼠的肝微粒体蛋白含量、细胞色素P450总量、b5含量以及CYP2D6的活性与空白溶媒组相比差异均无统计学意义。结论 5 mg.kg-1.d-1和60 mg.kg-1.d-1剂量的紫草羟基萘醌口服2周对Wistar大鼠肝微粒体CYP2D6的活性均无显著影响,没有明显的诱导或抑制作用。     

尼扎替丁对大鼠CYP1A2亚型的影响

目的通过尼扎替丁的大鼠体内、外实验,观察尼扎替丁对大鼠CYP1A2亚型的影响。方法通过HPLC法测定全血中咖啡因的代谢率,观测尼扎替丁对大鼠CYP1A2活性的影响;通过W estern b lot法测定尼扎替丁对大鼠肝微粒体CYP1A2蛋白表达的调控;通过HPLC法测定肝微粒体重组系统对乙酰氨基酚的含量,确定尼扎替丁对大鼠肝微粒体CYP1A2亚型的作用。结果实验组中给予大鼠不同浓度的尼扎替丁(14、27、54 mg.kg-1),其咖啡因代谢率为29.6%±12.5%、32.4%±13.4%、37.5%±15.0%,对照组为26.9%±11.9%,各剂量组及对照组间差异均无显著性(P>0.05);实验各剂量组与对照组的CYP1A2蛋白表达差异无显著性;肝微粒体体外重组系统中,实验组各浓度尼扎替丁对CYP1A2没有抑制作用,CYP1A2的活性>100%;对照组α-萘黄酮有明显的抑制作用,IC50=0.0306μmol.L-1。结论体内、外实验结果均表明尼扎替丁对大鼠CYP1A2没有抑制作用。     

黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D、CYP2C亚酶活性影响的实验研究

目的通过体内和体外实验研究黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D、CYP2C亚酶的活性影响。方法建立体外"cocktail"反应体系,利用LC/MS/MS法测定酶代谢产物,计算黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9和CYP2C19亚酶活性的影响;大鼠随机分为对照组和实验组,不同浓度黄芪颗粒和黄芪注射液连续灌胃10 d,制备肝微粒体并进行"cocktail"反应,评价两种药物体内对大鼠CYP1A2、CYP2D1、CYP2C6和CYP2C11亚酶活性影响。结果在体外"cocktail"实验中,黄芪颗粒和黄芪注射液明显地抑制了CYP2D6、CYP2C19和CYP1A2亚酶活性,而二者对于CYP2C9亚酶活性无影响。在大鼠灌胃给药实验中,黄芪颗粒在剂量32、160和800 mg.kg-1.d-1提高CYP1A2亚酶活性2.13、3.23和2.20倍,黄芪注射液在剂量0.16、0.8、4 g.kg-1.d-1提高CYP1A2亚酶活性1.65、2.26和2.89倍,而二者均未诱导CYP2D1、CYP2C6和CYP2C11亚酶活性增加。结论黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP2D6、CYP2C19活性有抑制作用,对大鼠CYP1A2活性有诱导作用。     

混合探针底物法测定五味子成分对大鼠肝脏细胞色素P450同工酶的影响

研究大鼠多次口服五味子成分和体外对肝脏细胞色素P450酶(CYP450)6种同工酶的影响。采用超速离心法制备正常及多次口服五味子醇/水提物的大鼠肝微粒体并与探针药进行体外温孵,应用液相色谱?串联质谱分析方法测定CYP450的6种同工酶特异性探针底物非那西丁(CYP1A2)、右美沙芬(CYP2D2)、双氯芬酸钠(CYP2C6)、美芬妥英(CYP2C11)、氯唑沙宗(CYP2E1)、咪达唑仑(CYP3A1/2)在大鼠肝微粒体的代谢产物生成(对乙酰氨基酚、右啡烷、4-羟基双氯芬酸钠、4-羟基美芬妥英、6-羟基氯唑沙宗、1-羟基咪达唑仑)以反映各CYP450同工酶活性。五味子醇提物(28～120μg.mL-1)体外对大鼠肝微粒体CYP450的6个同工酶均有不同程度的抑制作用。大鼠多次口服五味子醇提物(1.5 g.kg-1,qd×7d)对肝脏CYP3A1/2和CYP2E1有显著诱导作用,对CYP2D2和CYP2C11有明显抑制作用,而对CYP2C6和CYP1A2无明显影响。五味子水提物(100～500μg.mL-1)体外对大鼠肝脏CYP450同工酶亦有抑制作用;体内多次给药(1.5 g.kg-1,qd×7d)对肝脏CY...     

银杏叶提取物对细胞色素P450酶CYP1A2实验研究

目的　研究银杏叶提取物对大鼠细胞色素P450酶CYP1A2活性的影响。方法　银杏叶提取物10, 100mg·kg-1 2个剂量,分别经1, 5, 10天灌胃处理大鼠,以未经处理者为对照组,测定CYP1A2的酶活性。同剂量灌胃处理10天后,再单次灌胃盐酸普萘洛尔10mg·kg-1,测定普萘洛尔和N-去异丙基普萘洛尔在大鼠体内的血药浓度。结果　银杏叶提取物处理后,大鼠肝微粒体的CYP1A2酶活性显著升高,且能显著降低普萘洛尔在大鼠体内的AUC和Cmax,使N-去异丙基普萘洛尔的AUC和Cmax显著升高。结论　银杏叶提取物能显著诱导大鼠CYP1A2的酶活性,并显著影响普萘洛尔及其代谢物在大鼠体内的血药浓度。故银杏叶提取物可能影响与之同时服用、经CYP1A2代谢的药物临床疗效。     

青蒿素类药物对大鼠肝内组成型雄烷受体和CYP2B的诱导作用

目的探讨青蒿素(ART)和双氢青蒿素(DHA)对大鼠肝内组成型雄烷受体(CAR)和细胞色素P450s(CYP450s)的诱导作用。方法 SD大鼠随机分为8组:口服ART诱导组(80mg·kg-1·d-1);口服DHA诱导组(10mg·kg-1·d-1);口服溶剂对照组;静脉注射ART诱导组(16mg·kg-1·d-1);静脉推注DHA诱导组(5mg·kg-1·d-1);静脉推注溶剂(ART)对照组;静脉推注溶剂(DHA)对照组;空白对照组。连续给药5d,第6天处死大鼠,取肝组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测各组大鼠肝内核受体和CYP450s mRNA水平。结果相比溶剂对照组和空白对照组,口服ART诱导组大鼠CAR和CYP2B1 mRNA水平显著增加(P<0.01),口服DHA诱导组中CYP2B1 mRNA水平显著增加(P<0.01),而静脉推注ART和DHA诱导组大鼠CAR及CYP450s mRNA水平与对照组间差异无统计学意义。结论多剂量口服青蒿素类药物很可能激活核受体CAR,进而上调CYP2B mRNA水平,从而增加自身代谢。而多剂量静脉注射ART和DHA对核受体CAR及CYP450s mRNA水平均没有影响,说明青蒿素类药物对于CYP450s的诱导作用基于首过代谢。     

赶黄草提取物对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用研究

目的:研究赶黄草提取物对酒精性脂肪肝的保护作用。方法:以1.5%的硫酸亚铁饲料进行饲养,应用灌胃乙醇法复制酒精性脂肪肝大鼠模型,复制模型6周后停止灌胃乙醇。实验分为7组,即正常对照,模型,槲皮素高、低剂量(50、25mg·kg-1),硫普罗宁(50mg·kg-1)和赶黄草提取物高、低剂量(4000、2000mg·kg-1)组。灌胃给药,每天1次,连续6周。计算肝脏系数;对大鼠肝脏行油红O染色,进行病理学检查;检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量。结果:灌胃酒精6周后大鼠形成酒精性脂肪肝。与模型组比较,赶黄草提取物高、低剂量组大鼠肝脏脂肪变明显改善,大鼠血清中ALT、AST、TC、TG均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:赶黄草对大鼠酒精性脂肪肝具有保护作用。     

姜黄素与格列本脲联用对2型糖尿病大鼠糖代谢的影响及其机制

目的：探讨姜黄素（Cur）与格列本脲（Gli）联用对2型糖尿病大鼠糖代谢的影响及其机制.方法：复制大鼠2型糖尿病模型,观察Cur（100 mg·kg^-1·d^-1 ig） ×5 d单用及与Gli（1 mg·kg-·d^-1ig） ×5 d联合应用对2型糖尿病大鼠空腹血糖、血浆胰岛素、胰岛素敏感性指数、肝糖原、肝毒性相关指标以及CYP3A活性的影响.结果：Cur能进一步增强Gli的降糖作用,应用Cur后比单用Gli进一步降低空腹血糖（22％至69％）,上调胰岛素及肝糖原水平（49％、19％至126％、81％）.Cur可显著下调肝损伤指标,对肝脏具有保护作用.Cur单用或与Gli联用均显著抑制CYP3A活性.结论：Cur可使Gli降糖效应增强,其机制可能与其抑制Gli代谢酶-CYP3A活性,使Gli代谢延缓,致使其降糖效应增强有关.     

黄芪注射液对格列美脲在大鼠体内药动学的影响

目的:研究黄芪注射液对格列美脲在大鼠体内药动学的影响。方法:将大鼠随机分为对照组和联合用药组,对照组单独灌胃100mg·kg-1的格列美脲混悬液,联合用药组静脉注射8mL·kg-1黄芪注射液5min后灌胃100mg·kg-1的格列美脲混悬液。不同时间点于股动脉采集血样,经高效液相色谱法测定格列美脲的血药浓度,用DAS 2.0软件计算药动学参数后进行统计学分析。结果:对照组t1/2β、AUC分别为(44.58±2.97)h、(10.91±2.67)mg·h·L-1,联合用药组t1/2β、AUC分别为(65.67±5.37)h、(15.14±4.35)mg·h·L-1。结论:黄芪注射液对格列美脲的药动学有显著性影响。     

芹菜根提取物对D-氨基半乳糖所致急性肝损伤的保护作用研究

目的:研究芹菜根提取物对D-氨基半乳糖所致大鼠急性肝损伤的影响。方法:50只Wister大鼠随机分为5组,即正常对照(等容生理盐水)、模型对照(等容生理盐水)、联苯双酯(0.2mg.kg-1)和芹菜根提取物高、低剂量(3、1.5g.kg-1)组。ig给药,每天1次,连续7d。ig结束,除正常对照组ip等容生理盐水外,其余各组ipD-氨基半乳糖(0.5mg.kg-1)。测定大鼠血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:芹菜根提取物能显著降低半乳糖所致大鼠血清AST、ALT活性及肝组织MDA含量的升高,并升高肝组织SOD的活性。结论:芹菜根提取物对D-氨基半乳糖所致的大鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。     

因宁片对甲亢性肝损害模型大鼠肝脏细胞色素P450基因表达的影响

目的:研究因宁片对甲亢性肝损害模型大鼠肝脏细胞色素P450(CYP450)基因表达的影响。方法:采用L-甲状腺激素钠灌胃以复制甲亢性肝损害大鼠模型。实验分为6组,即空白对照、模型、甲亢灵和因宁片高、中、低剂量(2.4、1.2、0.6g.kg-1)组。通过实时荧光定量聚合酶联反应(PCR)方法检测因宁片对肝组织内CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2基因表达的影响。结果:与模型组比较,因宁片高、中剂量组大鼠肝脏CYP2E1的表达显著减弱(P<0.05),CYP1A2和CYP3A2的表达无明显改变(P>0.05)。结论:因宁片能下调甲亢大鼠肝脏CYP2E1基因的表达,这可能是因宁片治疗甲亢性肝损害的分子作用机制之一。     

阿帕替尼对大鼠肝微粒体细胞色素P_(450)3A1酶活性的影响研究

目的:研究阿帕替尼对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP)3A1酶活性的影响。方法:取SD大鼠随机分为空白对照组、地塞米松组(100mg·kg-1)和阿帕替尼高、中、低剂量组(100、50、25mg·kg-1),每组5只,灌胃给予相应药物,每日1次,除地塞米松组连续给药3d外,其余各组连续给药14d,采用高效液相色谱-紫外检测法,以睾酮为探针,测定睾酮经大鼠肝微粒体温孵后转化的代谢产物6β-羟基睾酮(6β-OHT)的生成速率,以评价各组CYP3A1酶活性。结果:空白对照组、地塞米松组和阿帕替尼高、中、低剂量组6β-OHT的生成速率分别为(3.41±0.39)、(23.36±1.76)、(4.25±0.48)、(3.82±0.40)、(3.48±0.74)nmo·lmg-1·min-1,与地塞米松组比较,阿帕替尼各剂量组6β-OHT的生成速率均明显降低(P<0.01)。结论:阿帕替尼对大鼠肝细胞CYP3A1酶活性无诱导作用。     

克拉霉素对兰索拉唑及其代谢产物在大鼠体内药动学特征的影响

目的研究克拉霉素对兰索拉唑及其代谢产物5-羟基兰索拉唑和兰索拉唑砜药动学特征的影响。方法 24只大鼠随机分为4组,分别十二指肠给予兰索拉唑(8 mg·kg^-1)+生理盐水、兰索拉唑(8 mg·kg^-1)+酮康唑(5 mg·kg^-1)、兰索拉唑(8 mg·kg^-1)+反苯环丙胺(5 mg·kg^-1)、兰索拉唑(8 mg·kg^-1)+克拉霉素(8 mg·kg^-1)。于给药后不同时间点采集血样,用LC-MS/MS法测定药物浓度。通过对兰索拉唑及5-羟基兰索拉唑和兰索拉唑砜血药浓度的测定,计算大鼠体内药动学参数。以5-羟基兰索拉唑、兰索拉唑砜与兰索拉唑AUC_0→4h的比值分别作为原药经CYP2C19和CYP3A4代谢程度的指标,研究克拉霉素对兰索拉唑代谢的影响。结果克拉霉素显著增加兰索拉唑的AUC_0→4h、MRT和t_1/2,显著降低其CLz。克拉霉素显著降低兰索拉唑砜与兰索拉唑AUC_0→4h的比值,从0.63±0.17降至0.15±0.09（P<0.05）,兰索拉唑砜的ρ_max显著降低,MRT和t_1/2显著延长。克拉霉素对5-羟基兰索拉唑的药动学参数无明显影响。结论克拉霉素在大鼠体内对兰索拉唑CYP3A4主导的磺化代谢抑制作用明显,可明显增加兰索拉唑的生物利用度,对临床治疗消化性溃疡有积极意义。     

茶多酚对兰索拉唑及其代谢产物在大鼠体内药动学的影响

目的:研究茶多酚对兰索拉唑及其代谢产物5-羟基兰索拉唑和兰索拉唑砜在大鼠体内药动学的影响.方法:16只SD雄性大鼠随机分为单独用药组和联合用药组,前14 d联合用药组灌胃给予茶多酚400 mg·kg-1,单独用药组灌胃给予等体积生理盐水,qd.第15天两组给予兰索拉唑8 mg·kg-1,给药后不同时间点采取血样,LC-MC/MS法测定兰索拉唑及其代谢产物血药浓度,用DAS2.0软件分析其药动学参数,以考察茶多酚对兰索拉唑代谢的影响.结果:茶多酚(400 mg·kg-1·d-1)显著降低兰索拉唑(8 mg·kg-1)的AUC(0-4)、Cmax和t1/2Z(P<0.05),显著升高5-羟基兰索拉唑与兰索拉唑的AUC(0-4)比值R1(P<0.05),但对兰索拉唑砜的药动学无显著影响(P>0.05).结论:茶多酚能够显著降低兰索拉唑在大鼠体内的口服生物利用度,其原因可能与茶多酚诱导CYP2C19有关.