汉坦病毒分离、传代和应用：1987—1994年总结

１９８７年我们从广安县一例肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者腹膜渗出细胞分离出汉坦病毒（ＨＶ）ＧＨ７１６。这株病毒为ＨＶ属的Ｉ型病毒，即抗原型别属野鼠型。以后，我们引进了国际Ｉ型代表毒株７６－１８８和Ⅱ型毒株Ｒ２２。１９８７－１９９４年，我们用这３株病毒感染非洲绿猴肾细胞（ＶｅｒｏＥ６），制备了ＨＶ抗原（ＨＶＡｇ）片。另外，从疫区ＨＶ＋鼠制备了ＨＶＡｇ＋鼠肺抗原片。这些抗原片用于ＨＦＲＳ研究、临床患者确诊、疑似病例的鉴别诊断和人群ＨＶ感染的血清流行病学监测，提高了ＨＦＲＳ的科学研究和防治水平。     

汉坦病毒分离,传代和应用

１９８７年我们从广安县一例肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者腹膜渗出细胞分离出汉坦病毒（ＨＶ）ＧＨ７１６。这株病毒为ＨＶ属的Ｉ型病毒，即抗原型别属野鼠型。以后，我们引进了国际Ｉ型代表毒株７６－１１８和Ⅱ型毒株Ｒ２２。１９８７－１９９４年的８年中，我们用这３株病毒感染非洲绿猴肾细胞（Ｖｅｒｏ Ｅ６），制备了１８８张ＨＶ抗原（ＨＶＡｇ）片。另外，从疫区ＨＶ＾＋鼠制备了ＨＶＡｇ＾＋鼠肺抗原片２２２张。上述两     

HFRS病毒Z37株在绿猴肾传代细胞的病变作用和传代适应

[目的]研究肾综合征出血热（HFRS）病毒39疫苗株在绿猴肾传代细胞（vero,vero-E6)上的病变和传代适应增殖情况,为应用vero细胞研制出血热疫苗提供科学依据。[方法]将肾综合征出血热疫苗株Z37适应在绿猴肾传代细胞（vero,vero-E6)上,对细胞进行细胞病变（CPE）的动态观察,并于不同的时间取样,测定病毒滴度,比较静置培养、转瓶培养滴度的差异情况。[结果]Z37株不使vero-E6细胞产生病变,用HEPES诱导,3d可见明显病变现象。Z37株不使vero细胞产生病变,用HEPES诱导病变现象未获成功,Z37株在vero细胞中可高滴度繁殖,滴度达到10^7/ml,转瓶培养病毒滴度略高于静置培养。[结论]应用vero细胞研制HFRS疫苗是可行的。     

流行性出血热病毒持续感染细胞的建立

目前已知流行性出血热病毒(EHFV)对原代细胞敏感,如长爪沙鼠肾原代细胞,金黄地鼠肾原代细胞等,对传代细胞敏感的如如非洲绿河猴肾细胞(Vero-E_6。),人胚肺癌细胞(A_(549))等,但未见EHFV在传代细胞上呈持续感染状态,现将EHFV浙37株在地鼠肾传代细胞(BHK)上连续传代的结果报道如下。     

体外培养人胚肾小球系膜细胞在肾综合征出血热病毒作用下的形态 …

肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）Ａ０株攻击经肌动蛋白抗体、抗Ｄｅｓｍｉｎ抗体、抗ⅢⅤ因子抗体和抗角蛋白抗体鉴定的人胚肾小球系膜细胞（ＭＳＣ），病毒滴度（ＥＬＩＳＡ）可达１６，免疫荧光＋＋，低于对照细胞ＶｅｖｏＥ６。染毒后的细胞，胞核退缩，多层膜性闭状物大量增生，提示ＭＳＣ在ＨＦＲＳＶ作用下转化为肾小球球旁细胞。     

肾综合征出血热病毒持续感染细胞的建立

已经发现多种细胞或细胞株对HFRSV有敏感性,如绿猴肾传代细胞(Vero-E6),人肺癌传代细胞(A549,人胚肺二倍体细胞(2BS)及大白鼠肺原代细胞,长爪沙鼠肾原代细胞,地鼠肾原代细胞等,但未见HFRSV在地鼠肾传代细胞(BHK 21)上呈持续感染状态,现将HFRSV浙37株病毒在BHK21细胞上连续传代的结果报道如下.\     

非逆转录RNA病毒的DNA形式

逆转录病毒由于编码逆转录酶,在感染的宿主细胞中很容易检测到病毒ＤＮＡ,同时病毒ＤＮＡ也能整合到宿主基因组中,但令人惊奇的是在淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）,丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）和丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）等非逆转录ＲＮＡ病毒感染的宿主细胞中也能检测到病毒ＤＮＡ,这种ＤＮＡ形式甚至在还存在于宿主细胞的基因组中。本文这方面的有关研究情况作了综述。     

随机扩增多态DNA指纹技术的研究及在检测医院感染中的应用

目的 探讨医院感染常见病原菌的基因鉴定及分型方法,了解其分子流行病学情况。方法 优化随机扩增多态ＤＮＡ指纹技术（ＲＡＰＤ）的实验条件,利用ＲＡＰＤ技术成功地检测了儿科病房呼吸道合肥病毒（ＲＳＶ）、脑外科病房铜绿单胞菌（ＰＡ）及血液病房白色念珠菌（ＣＡ）的医院感染。同时进行了ＲＳＶ分离、ＰＡ菌和ＣＡ菌培养。结果 构建了金黄色葡萄球菌（ＳＡ）、志贺菌（ＳＢ）、大肠埃希菌（ＥＣ）、肠炎沙门菌（Ｓａｌｍ（     

肾综合征出血热ELISA诊断抗原的制备

为研制肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）ＩｇＭ ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒，本文改进了ＨＦＲＳ抗原的制备方法，即将感染出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）的全细胞破碎添加以硫柳汞、牛血清、ＥＤＴＡ等配制的防腐保护剂，制备ＥＬＩＳＡ液相抗原。经不同温度、不同时间热稳定性试验，结果表明：抗原加保护剂经３７℃１个月，４℃９个月，－１５℃１２个月存放后，仍满足ＥＬＩＳＡ诊断抗原滴度要求。     

莪术油对呼吸道合胞病毒性肺炎的治疗作用

用呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染棉鼠和小白鼠，制作 ＲＳＶ肺炎模型，用莪术油混悬剂腹腔注射，观察疗效。「方法」用１００倍半数感染剂量（ＴＣＩＤ５０）ＲＳＶ感染棉鼠和小白鼠，从感染当天开始用０．５％莪术油腹腔注射治疗，注射第５天、第１０天解剖动物观察肺组织光学病理和超微病理的改变。用ＲＳＶ感染体外培养的Ｈｅｐ－２传代细胞株，用０．５％，莪术油抑制ＲＳＶ病毒，计算其治疗指数。「结果」０．５％莪术油可以有