1995～1997年辽宁,河南,河北省麻疹病毒流行株基因型分析

以反转录二步多聚酶链反应方法（ＲＴ－ＰＣＲ）直接测定麻疹病人唾液、尿液标本中的麻疹病毒（ＭＶ）血凝基因（Ｈ）、核衣壳基因（Ｎ）。以ＲＴ－ＰＣＲ产物纯化后进行ＭＶ４５０ｎｔＨ、２８２ｎｔＮ基因核苷酸片段测序分析,测序结果一致表明１９９５～１９９７年期间中国部分地区ＭＶ流行株存在２种基因型。其中一种基因型只发现１株,与ＥＤｗ５４株相同,另一种基因型占流行株的绝大多数（称新基因型）,与其它国家以前报道的ＭＶ流行株基因型的Ｎ基因最大差异为１５．４％,与ＥＤｗ５４、疫苗株相差８．８％;Ｈ基因最大差异是１０．８％     

戊型肝炎病毒核酸逆转录－套式聚合酶链反应法的建立及应用

应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）开放读框１（ＯＲＦ１）和开放读框２（ＯＲＦ２）区的两对寡核苷酸作为内外引物，建立了逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测ＨＥＶＲＮＡ的方法。用本法检测２只人工感染ＨＥＶ猕猴的１１份系列血清，发现该２只猕猴分别于感染后第六天和第九天ＨＥＶＲＮＡ阳转，并持续至感染后第十七天和第二十二天。检测４１份急性散发性戊型肝炎病人血清，ＨＥＶＲＮＡ阳性率为６８．３％（２８／４１），发病后１～１０天、１１～２０天和２１～３４天的血清ＨＥＶＲＮＡ阳性率分别为７２．７％（１６／２２）、７０．０％（７／１０）和５５．５％（５／９）。提示ＨＥＶ血症持续时间较短，随病程延长而下降     

聚合酶链反应检测血浆及外周血单个核细胞中HCV—RNA的意义

目的 为提高丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶ－ＲＮＡ）的率。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测２００例抗－ＨＣＶ阴性,ＡＬＴ反复异常,临床疑似丙型肝炎患的血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果 ５２例患血浆中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ,阳性率为２６％,７８例患ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ,阳性率为３９％,其中两同时双阳性有２２例,阳性率为１１％。结论 同步检测丙     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正,负链的…

选择ＨＣＶ基因组５＇非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患的血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负莲ＨＣＶ ＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦ     

聚合酶链反应法检测戊型肝炎病人粪便HEV—RNA

应用逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）法，对２６例散发性戊型肝炎（ＨＥ）患者发病后４～２８天收集的９１份粪便标本进行ＨＥＶＲＮＡ检测，并与同病期系列血清ＨＥＶＲＮＡ及ＡＬＴ水平作比较，以了解散发性ＨＥ患者的粪便排病毒规律。结果表明，患者粪便ＨＥＶＲＮＡ阳性率为４２．３％（１１／２６），与血清ＨＥＶＲＮＡ阳性率（５３．８％）相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。粪便ＨＥＶＲＮＡ检出率在发病头５天内为７５％（３／４），随后即与血清ＡＬＴ水平一样出现明显下降，于发病后１６～２０天降至１９．２％（５／２６），最长一例持续阳性至发病后２３天。上述结果提示，ＨＥ患者的粪便排病毒主要发生在疾病的急性期早期，将其隔离期定为病后３周可能比较合理。     

戊型肝炎病毒核酸逆转录—套式聚合酶链反应法的建立及应用

应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）开放读框１（ＯＲＦ１）和开放读框２（ＯＲＦ２）区的两对寡核苷酸作为内外引物，建立了逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测ＨＥＶＲＮＡ的方法，用本法检测２只人工感染ＨＥＶ猕猴的１１份系列血清，发现该２只猕猴地感染后第六天和第九天ＨＥＶＲＮＡ阳转，并持续至感染后第十七和第二十二天，检测４１例急性散发性戊型肝炎病人血清，ＨＥＶＲＮＡ阳性率为６８．３％（２８／４１），发病     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正、负链的检测

选择ＨＣＶ基因组５’非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患者的血清中正链ＨＣＶＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负链ＨＣＶＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ），进一步证实ＰＣＲ产物为ＨＣＶ特异性扩增产物，结果说明ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在或复制，即肝细胞并非ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。ＰＢＭＣ可能作为病毒长期滞留场所，使病毒感染持续存在，是丙型肝炎易发生慢性化的原因之一。     

用RT—PCR法分析合肥地区HCV基因型

应用逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对合肥地区的１９５例病人的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ检测及基因型分析。结果显示，８０例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本中，７０例（８７．５％）为Ⅱ／１ｂ型ＨＣＶ感染，７例（８．８％）为Ⅲ／２ａ型，３例（３．７％）为Ⅱ和Ⅲ型混合感染，未发现Ⅰ／１ａ和Ⅳ／２ｂ型ＨＣＶ感染。     

HDV感染与HCC家庭聚集性关系研究

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术研究ＨＤＶ感染与ＨＣＣ家庭聚集性关系。结果发现，肝癌高发户成员和非癌户成员的ＨＤＶ－ＲＮＡ阳性率分别为２３．６％（１３／５５）和９．１％（５／５５），两组阳性率有显著差别（Ｐ＝０．０４０１）。提示ＤＨＶ的感染与ＨＣＣ家庭聚集性有密切相关。     

献血员中庚型肝炎病毒血清流行病学

目的 研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在献血员中的感染状况。方法 采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测５９７名献血员（包括职业献血员２９７例和无偿献血员３００例）和７２１例正常人群血清标本。结果 职业献血员无偿献血员、正常人群抗－ＨＧＶ阳性率分别为２．６９％（８／２９７）、０．３３％（１／３００）,０．７０％（５／７２１）,抗ＨＧＶ阳必 上ＲＮＡ阳性率分别为７５％     

庚型肝炎病毒母婴传播的研究

目的 了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在普通孕产妇群体中的感染情况和母婴传播的情况。方法 血中抗－ＨＣＶ采用ＥＬＩＳＡ法检测,ＨＧＶＲＮＡ采用ＲＴ－ＰＣＲ法检测。结果 在８４８名普通孕产妇中,抗－ＨＧＶ阳性者４６名,阳性率为５．４２％;在４６名抗－ＨＧＶ阳性孕产妇中,ＨＧＶＲＮＡ阳性者５名,符合率为１０．８６％,在５名ＨＧＶＲＮＡ阳性孕产妇中,其新生儿ＨＧＶＲＮＡ阳性者２名,传播率为４０％。结论 ＨＧＶ     

柯萨奇B组病毒感染与扩张型心肌病发病关系的研究

为探讨柯萨奇Ｂ组病毒（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ ｇｒｏｕｐ Ｂ，ＣＢＶ）与扩张型心肌病（ｄｉｌａｔｅｄ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ，ＤＣＭ）发病的关系，应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检查３９例扩张型心肌病患者（ＤＣＭ组）外周血中ＣＢＶ－ＲＮＡ、血清中ＣＢＶ－ＩｇＭ。结果表明，ＤＣＭ组中血ＣＢＶ－ＣＢＶ－ＲＮＡ、血清中ＣＢＶ－ＩｇＭ。结果表明，ＤＣＭ组     

广西85例肝癌患者庚型肝炎病毒感染的血清学研究

对肝癌高发区的８５例患者血清采用套式ＰＣＲ方法检测认型肝炎病毒核糖核酸（ＨＧＶ－ＲＮＡ），并用相同方法检测了ＨＣＶ－ＲＮＡ；ＨＢＶ－ＤＮＡ则采用单次ＰＣＲ检测，阴性者再用套式ＰＣＲ证实。结果提示：８５例肝癌患者中，１１例患者可检出ＨＧＶＲＮＡ，占和的１２．９％，而ＨＣＶ－ＲＮＡ，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者分别为１５例及６８例，占１７．６％和８０％。初步证明文本部分肝癌病人血清中存在ＧＶ感染，作者认为：Ｈ     

庚型肝炎病毒母婴传播的研究

用ＥＬＩＳＡ法对１１０名健康孕产妇进行血清抗－ＨＧＶ测定,阳性和可颖阳性者再用ＲＴ－ＰＣＲ检测血清ＨＧＶ ＲＮＡ,并对ＨＧＶ ＲＮＡ阳性孕产妇的新生儿脐血和婴儿血进行ＨＧＶ ＲＮＡ检测。结果 １１０名孕产中有７人（６．３６％）抗－ＨＧＶ阳性８人可疑阳性。其中４人被检测到ＨＧＶ ＲＮＡ,阳性率２６．６６％（４／１５）。她们所产的４名婴儿中２人血清ＨＧＶ ＲＮＡ阳性。提示ＨＧＶ的母婴传播率为５０％（２     

应用非放射性探针检测HCMV感染的研究

应用地高辛配基标记ＨＣＭＶＤＮＡＪ片断为探针,采用斑点杂交试验检测唾液及尿液中ＨＣＭＶＤＮＡ。此方法的最低检测阈值为０．５ｐｇ,与ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２、ＲｕＶ、ＤＮＡ无交叉反应。检测１７例患儿的唾液和尿液ＨＣＭＶＤＮＡ,其阳性率分别为５０％和１７．６％,唾液中ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率显著高于尿液;检测１３６对正常母婴配对唾液标本,ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率分别为４６．３％和９．６％,其相应血清用ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体,阳性率分别为２．２％和０％。此结果提示,同时检测唾液中病毒ＤＮＡ及血清中ＩｇＭ抗体,对临床及流行病学筛检试验判断是否有激活感染及感染的早、晚期有重要意义。     

戊型肝炎患者病毒血症的研究

为了更全面地了解戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）的感染过程，从ＨＥＶ开放读框１（ＯＲＦ１）区设计两对寡核苷酸引物，建立逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ），对６２例戊型肝炎患者发病后５３１份血清进行ＨＥＶＲＮＡ检测。结果显示，阳性患者占７１％。全程随访３２例患者２８８份系列血清，发现阳性２４例（７５％），其阳性率随病程延长而下降，平均持续时间为发病后２０．６天。观察４４例血清ＨＥＶＲＮＡ阳性患者，有３６例（８１．８％）在血清转氨酶和总胆红素水平开始回落时仍呈阳性；３９例（８８．６％）同时检测到抗－ＨＥＶ。ＨＥＶ血症的阳性率及阳性持续时间与血清转氨酶、总胆红素及抗体应答水平无直接相关     

三种献血员人群庚型肝炎病毒检测研究

为了解献血员中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染状况,并探讨感染的危险因素。方法采用ＥＬＩＳＡ法和ＲＴ－ＰＣＲ技术,对泰安市１８９名无偿献血员、４０４名职业献血员和１６９名单采血浆血员进行了病毒抗体和病毒核酸的检测。结果三种献血人群抗－ＨＧＶ阳性率分别为１．５９％（３／１８９）、０．９９％（４／４０４）和５．３３％（９／１６９）;ＨＧＶ ＲＮＡ阳性率分别为０、０．２５％（１／４０４）和２．３７％（４／１６     

保定地区肾综合征出血热病人血清PCR分型及核苷酸序？…

为明确保定肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）疫区的型别采用ＲＴ－ＰＣＲ方法,检测急性期ＨＦＲＳ病人血清的汉坦病毒（ＨＶ）ＲＮＡ,并进行分型及部分核苷酸序列的测定,并与国内外ＨＶ的代表株进行比较。结果３１份急性期病人血清经ＲＴ－ＰＣＲ分型,２４份为汉城型（ＳＥＯ型）,２份为汉滩型（ＨＴＮ型）,并测得ＳＥＯ型Ｃ３株Ｍ基因（位于１９８５－２３１４位）,ＨＴＮ型ＬＢＹ株Ｍ基因（位于１９９６－２３１４位）核苷酸序列     

一步法提取RNA反转录－多聚酶链反应检测汉坦病毒RNA

用反转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测汉坦病毒（Ｈａｎｔａｖｉｒｕｓ）的基因ＲＮＡ，同时与细胞分离病毒的敏感性进行比较。用异硫氰酸胍－载体吸附法，一步提取汉坦病毒ＲＮＡ。将脑腔接种汉坦病毒频临死亡的乳鼠脑制成１０％的悬液，并系列稀释，从１０（－１）到１０（－１２）的１２梯度。结果表明，该引物能够扩增出汉坦病毒Ｈ８２０５株的ＲＮＡ，说明汉坦病毒Ｈ８２０５株与７６－１１８株在Ｍ片段上具有共同的保守序列。ＲＴ－ＰＣＲ可以检测出４．６４×１０（－３）ＴＣＬＤ（５０）／ｍｌ的病毒，而用Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞只能分离检测出４．６４×１０（－２）ＴＣＬＤ（５０）／ｍｌ，所以ＲＴ－ＰＣＲ检测病毒比细胞分离检测病毒敏感。     

一起戊型肝炎暴发的流行病学调查

１９９４年４月２７日至５月１５日，驻天津某部队学院发生一起戊型肝炎暴发，罹患率６．８７％。病例均为男性，年龄２０￣２４岁，症状普遍较轻。血清学检测发现，２４名病例全部抗－ＨＡＶＩｇＧ阳性，其中２３人抗－ＨＥＶ阳性，ＨＣＶ，ＣＭＶ，ＥＢＶ感染标志和ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｃＩｇＭ均为阴性。用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了３例病人血清和９例病人粪便的ＨＥＶ ＲＮＡ，１份血清和３份粪便标本呈阳性反应，证实这起肝炎暴