人感染猪链球菌病的病原分离与PCR方法的快速检测

目的研究人感染猪链球菌的生物学特征，并建立一种快速、特异且敏感的检测方法。方法将疑似猪链球菌感染患者的血液进行增菌培养，对所分离的病原菌进行染色形态观察、API 32 Strep生化鉴定；同时从该疑似患者血液（抗凝血）中提取DNA为模板，并合成引物检测猪链球菌特异性16SrRNA基因片段、2型猪链球菌特异性荚膜多糖编码基因片段cps2J、溶菌酶释放相关蛋白编码基因片段mrp、细胞外蛋白因子编码基因片段ef。结果PCR扩增结果证实是猪链球菌2型，而从血液中分离的病原菌，经API 32 Strep生化鉴定，也证实为猪链球菌2型。结论人感染猪链球菌的病原学及PCR检测符合猪链球菌2型，同时该PCR反应体系是一种检测和鉴定猪链球菌2型的快速、特异且敏感的方法。     

聚合酶链式反应诊断2型猪链球菌

目的从分子水平鉴定四川省2005年不明原因疾病病原菌的属、种、型及毒力基因,为诊断和治疗提供科学依据。方法聚合酶链式反应(PCR)检测链球菌属特异性基因(TUF)、猪链球菌种特异性基因(Species)、2型和毒力特异性基因(CPS2J)以及毒力基因溶菌酶释放相关蛋白基因(MRP)和溶血素基因(SLY);同时与VITEK2等全自动生化鉴定仪鉴定结果进行比对。结果所试103份标本中,98份均具有所检测的5个基因,确定为猪链球菌2型;另5份标本排除猪链球菌可能。73株纯培养细菌用VITEK2全自动生化鉴定仪鉴定有68株菌被鉴定为猪链球菌2型,3株菌被鉴定为猪链球菌1型,2株菌不能鉴定。结论2005年四川省不明原因疾病疫情为猪链球菌2型感染人造成。PCR检测5个特异基因鉴定猪链球菌2型,其结果优于VITEK2全自动生化鉴定仪。     

重庆市人感染猪链球菌病的病原分离与鉴定

目的：分离和鉴定猪链球菌，为疫情的确定、预防及控制提供理论依据。方法：用血琼脂、生化反应及PCR对疑似猪链球菌感染病例、接触者和病死猪的血液、脑脊液及脏器等共30份标本进行分离培养和鉴定，阳性菌株进行药敏试验。结果：从病人脑脊液和血液中检出猪链球菌2型菌株2份。经PCR方法检测菌株，含有猪链球菌种特异性基因16SrtLNA（SPE基因），猪链球菌荚膜多糖编码基因（CPS2A基因），猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因（MRP基因）。药敏试验表明，猪链球菌2型对四环素耐药，对左旋氟沙星、氨苄西林、青霉素、阿齐霉素、头孢吡肟、头孢肟、万古霉素等敏感。结论：猪链球菌2型是引起此次人类感染疫情的病原微生物。     

江西省2006年人感染猪链球菌病监测分析

目的了解人群、猪群感染猪链球菌Ⅱ型的情况。方法对可疑病例进行实验室诊断；在景德镇、崇仁县监测点采集猪扁桃体标本270份，鼻拭子标本257份利用选择性培养基培养分离菌株，对可疑菌落进行生化、血清学鉴定和PCR检测，开展猪链球菌Ⅱ型感染状况监测。结果全省全年发现1例人间病例，职业为屠夫，发病前3d宰杀过来自外省的病猪，宰杀过程中手部有伤口。在监测点采集的猪扁桃体和鼻拭子标本检测未发现猪链球菌Ⅱ型。结论2006年江西省发现1例因宰杀外地病猪引起的人感染猪链球菌病例；监测点未发现生猪感染猪链球菌Ⅱ型。     

宁波市首例人感染猪链球菌2型的实验室鉴定

目的:对首例人感染猪链球菌2型菌株进行鉴定,了解病原学及毒力。方法:将疑似猪链球菌感染患者血液、脑脊液进行增菌培养,对所分离的病原菌进行染色形态观察、APIStrep20生化鉴定;合成引物检测菌株的16SrRNA、cps2J、mrp、ef、sly、gapdh基因片段;制作cps2J、mrp、ef、sly长片段产物,进行基因序列测定。结果:从患者血液和脑脊液中分离的病原菌,经API20Strep生化鉴定编码为4641453,确认为猪链球菌2型,16SrRNA扩增结果进一步证实该菌为猪链球菌2型,基因测序结果与Genebank中注册05ZYH33的猪链球菌2型序列同源性在99%以上。结论:根据流行病学调查、临床表现和实验室鉴定结果,本起人感染猪链球菌的病原为猪链球菌2型,带有多种毒力基因其分子生物学特征典型。     

猪链球菌四川资阳分离株特征分析

目的了解猪链球菌四川资阳分离株的生物学特征。方法以血平板分离培养获得分离株,用猪链球菌分型血清进行分型,用VITEK2compact微生物鉴定系统进行生化鉴定,PCR技术检测猪链球菌荚膜多糖基因(CPS2J)、溶菌酶释放蛋白基因(MRP)和溶血素基因(SLY),用K-B纸片法进行药物敏感性分析。结果从患者中分离到34株猪链球菌,从病死猪中分离到8株猪链球菌,血清分型均为血清2型,VITEK2compact微生物鉴定系统生化鉴定也为猪链球菌2型,均具有CPS2J、MRP、SLY毒力基因,42株菌对青霉素G、阿莫西林、奥恪门丁、头孢曲松、头孢他啶、氯霉素、氧氟沙星、环丙沙星、红霉素、克林霉素、万古霉素均敏感,对吡哌酸、四环素、庆大霉素、链霉素、阿米卡星、复方磺胺甲恶唑、氨曲南、呋喃唑酮、呋喃妥因均耐药。结论人源株和猪源株均为猪链球菌2型,血清鉴定与生化鉴定结果一致,致病力强,菌株耐药谱非常相似。     

云南省首例人感染猪链球菌病的病原学分析

目的 对猪链球菌菌株进行鉴定,了解其病原学特征.方法 对菌株进行了菌落形态、生化鉴定、血清凝集、PCR 检测、16S rRNA 细菌种属鉴定、PFGE 检测和MLST 分型.结果 菌落形态、生化鉴定、血清凝集、16S rRNA 细菌种属鉴定,证明此菌株为猪链球菌2 型;经PCR 检测16SrRNA 和毒力基因均为阳性;PFGE 检测结果表明此株菌同3 株参考菌株相似性很低;MLST 分型属于高致病性ST1 型.结论 此次分离到菌株的为云南省首例人感染的猪链球菌2 型,是强毒力株.     

四川省人感染猪链球菌病的病原分离与鉴定

目的分离和鉴定猪链球菌,为诊断和治疗提供科学依据。方法用无选择性的血琼脂平板对患者血液、脑脊液、尸检组织和病死猪内脏进行分离培养,并对分离到的细菌进行染色形态观察;用PCR技术检测猪链球菌种基因、荚膜多糖编码基因、溶菌酶释放相关蛋白基因和溶血素基因;用VITEK2compact微生物生化鉴定仪定型。结果从4例患者血液、2例患者脑脊液、2例患者尸检组织和7例病死猪中分离到27株链球菌,经鉴定27株菌均为猪链球菌2型,猪链球菌种基因和猪链球菌三种毒力基因阳性。结论此次疫情为猪链球菌2型引起。     

安徽省一例人感染猪链球菌病例的病原学特征分析

目的通过对安徽省一例人感染猪链球菌患者血液标本分离的菌株进行鉴定分型,了解菌株的分子特征。方法采用Vitek2 compact全自动细菌鉴定仪对分离菌株进行生化鉴定,玻片凝集法进行血清型鉴定,PCR法检测菌株5种毒力基因和多位点序列分型(MLST),PubMLST数据库获得ST型别。结果分离菌株经生化和血清型鉴定,确定为猪链球菌2型,毒力基因cps2J、sly、ef、gadph的PCR检测结果均为阳性,mrp检测结果为阴性,MLST为ST7型。结论分离病原菌为cps2J+/sly+/ef+/gadph+/mrp-ST7型猪链球菌2型,该型别人源猪链球菌在安徽省属首次报道,具有较强毒力,疫源地应加强防控,防止病例的再次出现。     

2014—2022年湖南省病人来源猪链球菌2型鉴定及毒力基因分析

目的 了解2014—2022年湖南省人感染猪链球菌病病人分离株型别分布与毒力基因携带情况,为人感染猪链球菌病的防控提供依据。方法 收集2014—2022年湖南省人感染猪链球菌病临床分离株,通过传统生化反应和聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测猪链球菌种特异性基因16S rRNA,同时用PCR对2型血清型鉴定基因(兼荚膜多糖毒力基因)cps2J和7种毒力基因进行扩增,用毛细管电泳检测扩增产物,分析病人来源猪链球菌的型别与毒力基因携带情况。结果 2014—2022年湖南省38株人感染猪链球菌病临床分离株中,1株为羊链球菌,32株为猪链球菌2型,5株生化鉴定为2型的菌株经分子分型鉴定为猪链球菌其他型别。32株猪链球菌2型菌株中,46.88%的菌株携带全部8种毒力基因,40.63%的菌株携带除mrp外的7种毒力基因。携带cps2J、fbps、ef、gdh、orf2、gapdh 6种毒力基因与携带cps2J、sly、gdh、orf2、gapdh 5种毒力基因的菌株均占3.13%,6.25%的菌株携带cps2J、gdh、orf2、gapdh 4种毒力基因...     

人—猪链球菌感染性综合征的流行病学研究

目的：研究人－猪链球菌感染暴发事件的病因、流行因素，为治疗、控制及预防提供科学依据。方法：观察26例原因不明的“急性感染中毒性出血性休克综合征”，进行了个案调查和1：4病例对照研究，以及分离培养病原、菌种鉴定等。用PCR指纹图技术分析人源与猪源猪同源性。结果：此次江苏如皋市及相邻地区发生的人链球菌感染性综合征暴发疫情，是因当地猪链球菌病流行，人与病死直接接触引起，其相对危险度为40．89。从患者的血液和脑脊液分离到的链球菌，经生化、菌全脂肪酸分析、血清凝集等系统为猪链球菌Ⅱ型。经流行病学调查证实，此起疾病为感染性疾病，人与人之间未见传染性。与接触病、死猪有关。随机引物PCR技术分析显示，人源与猪源菌株系同源。结论：本起疾病的病原体为猪链球菌Ⅱ型，感染来源来直接接触病、死猪。     

一例人感染猪链球菌病流行病及病原学调查

目的通过对衢州市衢江区一例人感染猪链球菌病病人进行流行病学调查,实验室检测包括对分离株进行病原学及分子生物学鉴定,为疫情预测和制定防治措施提供依据。方法将患者脑脊液进行增菌培养,并对分离的菌株进行涂片染色形态观察、rapid ID 32STREP试条生化鉴定、PCR技术检测分离株的种属特异性基因、毒力基因。结果从患者的脑脊液中分离出病原菌,经rapid ID 32 STREP试条鉴定为猪链球菌Ⅱ型,并从该分离株检测到种属特异性基16SrRNA及EF、Cps2J毒力基因,MRP毒力基因未检出。结论该患者是由SS2引起的,需要相关部门加大对猪链球菌病的防控力度。     

1株猪源性链球菌的分离鉴定及药敏试验

目的报告2005年春季吉林省某猪场Ⅱ型猪链球菌感染猪群的徽生钧学检查和药物敏感试验结果。方法从病、死猪中分离猪链球菌疑似菌株，采用革兰染色镜检、生化反应和特异性诊断血清玻片凝集等方法．鉴定菌株并进行药物敏感试验。结果分离的疑似菌株经鉴定为Ⅱ型猪链球菌；分离株对氨苄西林、利福平、万古霉素、头孢拉定、罗红霉素等5种抗生素敏感，对庆大霉素等6种抗生素耐药。结论采取饲养环境和饲料消毒、发病猪隔离、氨苄西林和利福平配合治疗等措施，有效地控制了疫情，未发生人的感染。     

能力验证活动中两种不同链球菌的鉴别诊断

目的 通过能力验证活动提高鉴别诊断化脓性链球菌和猪链球菌2型的实验室检验能力.方法 根据国标处理盲样,分纯菌株后根据革兰染色镜检结果用API20 STREP生化鉴定卡鉴别诊断.结果 两份能力验证考核盲样分别检出化脓性链球菌和猪链球菌2型.结论 结合血平板溶血试验、链激酶试验和革兰染色镜检结果用API20 STREP生化鉴定卡能快速、准确鉴定化脓性链球菌和2型猪链球菌.     

广西人感染猪链球菌病的病原学及分子生物学鉴定分析

目的:用细菌分离培养和分子生物学方法鉴定猪链球菌,为确定疫情、及时治疗及控制提供依据.方法:疑似患者血液、脑脊液,死亡患者的肝、脾、肾等尸检组织进行分离培养、API 20 Strep生化鉴定、药敏试验及PCR检测.结果:从11份血液、4份脑脊液标本中分离出5株猪链球菌,API 20 Strep生化鉴定为猪链球菌Ⅱ型;经PCR检测5株菌均具有猪链球菌种特异性基因16St‘RNA(spe)基因、猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J)和猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因(mrp),1例死亡患者尸检组织标本和2例患者(1例为死亡病例)的脑脊液标本,具有猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J),脾脏组织和1份脑脊液标本具有猪链球菌溶菌酶释放相关蛋白编码基因(mrp),全部确定为猪链球菌2型,并携带强毒力基因.药敏试验表明,猪链球菌2型对万古霉素、氯霉素、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松、克林霉素敏感.结论:广西6起疫情均为人感染猪链球菌2型所致.     

人感染猪链球菌病知识介绍

人感染猪链球菌病是由猪链球菌感染人而引起的人畜共患疾病，对人类健康造成严重威胁。2005年，四川省发生了人感染猪链球菌病疫情，导致38人死亡。为了提高我国人感染猪链球菌病的认识水平，实现人感染猪链球菌病早期预防、早期诊断．我们节选了中华医学会组织编写的《人感染猪链球菌病诊疗方案》的部分内容．给读者以指导。     

公卫：人感染猪链球菌病

人感染猪链球菌病是由猪链球菌引起的人兽共患病。链球菌可导致人和多种动物感染而发病。由于链球菌的血清群繁多，其感染宿主和致病力也不尽相同，因此所引起的人和动物的疾病也多种多样：猪链球菌不仅可引起猪的急性败血症、脑膜炎、关节炎及急性死亡，还可以导致人的感染发病和死亡。     

广州市2006—2021年人感染链球菌病流行特征分析

目的 分析广州市人感染猪链球菌病流行病学特征，为有针对性开展人感染猪链球菌病防控工作提供依据。方法 开展流行病学个案调查，采集病例的脑脊液或血液标本进行细菌培养与分离、生化鉴定、血清分型和PCR检测。结果 2006年至2021年，广州市共累计报告75例人感染猪链球菌病例，其中，本地病例46例，输入病例29例。报告了1例死亡病例，病死率为1.33%。以夏秋季多发，占比74.67%，病例年龄分布中位数为58（47，66）岁，患者以男性为主，男女比例为3.17[DK]∶1；发病人群的职业分布为来自屠宰场或从事猪肉零售相关工作、离退人员、家务及待业、农民、餐饮食品业、工人；职业和生活接触暴露占56.00%，暴露前手部有伤口病例占28.57%；猪链球菌的血清型以2型为主，占比76.60%。结论 广州市人感染猪链球菌的防控形势较为严峻，需完善联防联控机制，加强与动物防疫部门的交流与协作，提高疾病的监测预警能力。     

2005—2018年福建省人感染猪链球菌分离株特征分析

目的 探讨2005—2018年福建省分离到的猪链球菌的分子流行病学特征。方法 通过对2005—2018年疫情分离的猪链球菌菌株进行相关常规分离培养、生化鉴定及药物敏感实验、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry, MALDI-TOF MS）及聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测猪链球菌相关的16S rRNA基因和部分毒力基因荚膜多糖（capsularpolysaccharide2J,cps2J）、溶菌酶释放蛋白（muramidase-releasedprotein,mrp）、溶血素（suilysin,sly）、胞外因子（extracellular protein factor,ef），同时检测猪链球菌7个管家基因（aro A、cpn60、dpr、gki、mut S、rec A、thr A）分析菌株相关的多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST）型别。结果 10株菌株经...     

人—猪链球菌感染性综合征的病原分离与鉴定

目的：分离和鉴定猪链球菌,为诊断和治疗提供科学依据。方法：用3种增菌液和7种培养基对病人血液,脑脊液培养和病死猪的内脏培养,并对分离到的病原体进行染色形态观察,API Strep20生化及其它生化试验,血清凝集试验,结果：从4例病人血液,1例脑脊液和7例病死猪中分离到12株病原菌,经鉴定9株编码为0641453,2株为0640453,1株为1641453,12株菌均与猪链球菌2型血清凝集,结论：12株细菌均为猪链球菌2型。