黄连解毒汤有效成分浸出工艺的研究

本文以黄连解毒汤中有效成分小檗碱、黄芩甙、栀子甙为综合指标，用正交试验法（Ｌ８２＾７）研究了超声浸出的最佳工艺。     

黄连、黄芩药对提取物中黄芩苷和盐酸小檗碱药代动力学研究

目的:建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中黄芩苷和盐酸小檗碱,进行药代动力学研究。方法:以紫草酸为内标,采用Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸三乙胺(22∶78),流速1.0 mL·min-1,检测波长278 nm,进样体积20μL。结果:黄芩苷和盐酸小檗碱呈良好线性关系;回收率分别为82.1%~87.1%、80.1%~87.5%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。结论:为黄芩苷、盐酸小檗碱的药代动力学研究提供方法学依据。     

黄连、吴茱萸药对中盐酸小檗碱在急性胃溃疡模型大鼠体内的药代动力学研究

目的比较黄连-吴茱萸药对提取液中盐酸小檗碱在急性胃溃疡模型大鼠与正常大鼠体内的药代动力学差异,探讨病理状态对盐酸小檗碱体内过程的影响。方法分别灌胃给予正常大鼠和急性胃溃疡模型大鼠黄连-吴茱萸(6:1)药对提取液,采用高效液相色谱方法测定大鼠体内盐酸小檗碱的血浆浓度,色谱柱:Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(23∶12∶65),流速:1.0ml/min;检测波长:345nm;柱温:30℃。结果盐酸小檗碱在正常组的药代动力学参数:Cmax=0.064±0.01μg/ml;Tmax=(0.42±0.13)h;t1/2=(5.96±1.16)h;AUC0-t=(0.42±0.08)μg/(ml.h);AUC0-∞=(0.45±0.09)μg/(ml.h)。盐酸小檗碱在模型组的药代动力学参数:Cmax=(0.069±0.01)μg/ml;Tmax=(0.54±0.11)h;t1/2=(5.11±1.78)h;AUC0-t=(0.60±0.17)μg/(ml.h);AUC0-∞=(0.63±0.18)μg/(ml.h)。结论黄连-吴茱萸药对在乙醇致急性胃溃疡模型大鼠中吸收减慢,但是吸收量多,体内滞留时间稍延长。     

黄连解毒汤中栀子苷在正常及脑缺血大鼠体内药动学研究

目的 比较黄连解毒汤中栀子苷在正常和脑缺血大鼠体内的动力学过程。方法 正常大鼠及脑缺血大鼠 ig 黄连解毒汤后不同时间采血,用 HPLC 法测定栀子苷的血药浓度,3P87 软件拟合药动学参数。结果 脑缺血及正常大鼠栀子苷药动学符合一室模型。脑缺血及正常状态下大鼠 ig 黄连解毒汤后,栀子苷在脑缺血及正常状态下体内的 AUC 分别为 (15.819±5.228)、(11.395±3.111)μg?h?mL-1,t1/2 ke分别为(4.704±1.850)、(3.695±1.595) h,C max分别为 (2.135±0.202)、(1.677±0.621) μg/mL。结论 栀子苷在脑缺血状态下的血药浓度及吸收效果优于正常状态,在体内停留的时间较长,消除较慢,反映了黄连解毒汤临床对症治疗脑缺血疾病的合理性,体现了方证对应的思想。     

膜分离与树脂联用制备黄连解毒汤中药固体制剂的研究

目的考察膜与大孔吸附树脂联用技术精制黄连解毒汤的可行性。方法根据目标成分小檗碱、黄芩苷及栀子苷的不同性状特点,采用膜分离、大孔吸附树脂对黄连解毒汤进行精制。结果3批样品干浸膏得率及其小檗碱、黄芩苷、栀子苷含量的平均值为5.81%、11.79%、15.61%、13.05%。结论膜分离和大孔吸附树脂技术是中药复方的有效精制技术,可用于黄连解毒汤的精制。      

基于单抗的间接竞争ELISA检测黄连解毒汤中栀子苷在小鼠体内的代谢

目的：应用自主研制的栀子苷单克隆抗体建立的间接竞争ELISA（icELISA）法,检测黄连解毒汤灌胃给药后小鼠体内栀子苷的含量,分析药代动力学参数。方法：icELISA方法学验证;小鼠给药后分17个时间点取血,10μl／只,icELISA法检测栀子苷。结果：该方法的线性范围是1．17—37．5μg／ml,最低检测限0．14～0．45μg／ml,最低定量检测限1．17μg／ml;日内和日间精密度均≤10％;回收率96．38％-103．38％;栀子苷含药血浆样品室温放置12h稳定性好。本实验测得的栀子苷在小鼠体内的达峰时间和平均滞留时间与文献报道基本～致。结论：基于栀子苷单克隆抗体的icELISA法能够高通量、快速、准确检测生物样品中栀子苷,具有良好的应用前景。     

二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内药代动力学研究

目的：研究二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内药代动力学的参数,以探讨病理状态中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内的变化规律。方法：以吴茱萸次碱为内标,采用HPLC法测定二妙丸在痛风大鼠体内的盐酸小檗碱含量,色谱柱Agilent C18（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（40∶60）（每100 mL含0.34 g磷酸二氢钾,含0.17 g十二烷基磺酸钠）;流速：1.0 mL/min;检测波长：349 nm;柱温：30℃。结果：二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠血浆中的线性范围为1.5~48.0μg/mL,提取回收率较好,日内日间精密度的RSD均小于10%,其主要的药动学参数：Tmax（h）为1.500,Cmax（mg/L）为3.546,MRT 0~24（h）为9.078,MRT 0~∞（h）为57.639。结论：二妙丸中盐酸小檗碱在痛风大鼠体内的药代动力学呈二室模型分布。     

黄柏中盐酸小檗碱的药代动力学研究

[目的]测定黄柏中有效成分盐酸小檗碱在大鼠体内的药代动力学参数.[方法]使用高效液相色谱(HPLC)检测黄柏中盐酸小檗碱在大鼠血浆中的血药浓度;并运用3p97程序对黄柏中盐酸小檗碱的药代动力学参数进行拟合.[结果]黄柏中盐酸小檗碱在大鼠体内药代动力学参数是:血药浓度曲线下面积(AUC)=774.3(mg·L)/min肾排泄速度常数(Ke)=7.285×10-3L/min,吸收速度常数(Ka)=4.166×1012L/min,吸收半衰期[T1/2(Ka)]=16.64min,肾排泄半衰期[T1/2(Ke)]=95.15 min,出风时间[T(peak)]=50.73 min,最大血药浓度[C(max)]=3.898 mg/L.[结论]黄柏中盐酸小檗碱在大鼠体内呈一室模型分布.     

黄连解毒汤的药动学-药效学相关性研究

目的 研究大鼠给予黄连解毒汤（HJD）、黄芩提取物及黄芩苷后,血清中黄芩苷和汉黄芩苷的经时变化及抗氧化作用的药动学-药效学（PK-PD）相关性。方法 以HPLC法同步监测血清黄芩苷、汉黄芩苷的水平,求算其血药浓度-时间曲线下面积（AUC）,并将含药血清抗氧化作用的效应-时间曲线下面积（AUE）与对应的AUC进行相关性分析。结果 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的lgAUC-AUE均呈近似“S”形曲线。结论 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的抗氧化作用与血清黄芩苷、汉黄芩苷水平呈正相关,黄芩苷可能是HJD及黄芩抗氧化作用的活性成分,汉黄芩苷也有一定的抗氧化作用。     

黄连解毒汤中小檗碱在脑缺血模型大鼠体内药动学与药效学相关性研究

目的 研究黄连解毒汤中小檗碱在脑缺血损伤模型大鼠体内的药动学过程及其与黄连解毒汤抗脑缺血作用的相关性。方法 实验分为假手术组和模型组,模型组以电凝法制备局灶性脑缺血模型。两组大鼠均ig给予黄连解毒汤（10.0 g/kg）,分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24 h眼眶取血,HPLC法测定小檗碱在大鼠血浆中的变化,绘制药-时曲线;测定模型组和假手术组大鼠给药后不同时间点血浆中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,结合小檗碱的药-时曲线和时-效曲线,比较相同剂量的黄连解毒汤给药后小檗碱在假手术组及模型组大鼠体内的药动学参数的差异以及模型组给药后的药效学指标变化,评价小檗碱在黄连解毒汤治疗脑缺血疾病中的作用。结果 小檗碱在模型组大鼠体内吸收迅速、代谢快、维持时间长,表现出其体内较强的循环性特点。与假手术组相比,局灶性脑缺血大鼠给予黄连解毒汤后,对小檗碱吸收充分,血中MDA水平显著降低,时-效曲线呈现双峰现象。造模后大鼠血清SOD活性降低,黄连解毒汤能提高SOD至正常水平,模型组大鼠的时-效曲线也出现双峰现象。结论 黄连解毒汤抗缺血性脑损伤作用可能与小檗碱在体内的水平有关,黄连解毒汤抗缺血性脑损伤作用与其升高SOD水平、降低MDA水平有关。     

黄连解毒汤药动学实验研究及数据挖掘技术的应用

[目的]寻找黄连解毒汤药动学实验研究的方法。[方法]查阅了近年来国内外学者在黄连解毒汤药动学方面的研究成果。以黄连解毒汤组成的单味药和全方指标性成分的定量分析、提取工艺对指标性成分的影响、药动学方面的研究为基础,论述了PK-PD结合模型及数据挖掘技术在中药复方物质基础研究和药动学研究中的重要性。[结论]黄连解毒汤药动学实验研究还需要进一步的深入研究,才能揭示该方的物质基础和作用机制。     

黄连解毒汤的镇痛、抗炎及体内抗肿瘤作用

目的：研究黄连解毒汤的镇痛、抗炎及体内抗肿瘤作用。方法：通过小鼠热板实验及耳肿胀实验研究黄连解毒汤的镇痛和抗炎作用;建立小鼠S180腹水瘤模型,观察黄连解毒汤对小鼠胸腺指数、脾脏指数和鼠S180癌细胞形态的影响,并测定荷瘤小鼠生存率。结果：黄连解毒汤高、中、低剂量组的痛阈及耳廓肿胀率与对照组比较差异有显著性（P〈0．01）;高剂量组脾脏、胸腺指数与对照组相比有所降低,差异有显著性（P〈0．05或0．01）;细胞形态学观察显示黄连解毒汤高、中剂量组S180癌细胞变形严重;黄连解毒汤各剂量组小鼠生存率明显高于对照组。结论：黄连解毒汤具有显著的镇痛、抗炎活性,体内对鼠S180小鼠移植瘤有一定的抗肿瘤活性,可延长荷瘤小鼠寿命。     

黄连解毒汤有效部位对多发性脑梗塞大鼠脂质过氧化损伤的影响

目的探讨黄连解毒汤有效部位对多发性脑梗塞(MCI)大鼠脂质过氧化损伤的保护作用.方法采用同种大鼠无菌自然干燥血凝块颈总动脉注射建立MCI模型,观察黄连解毒汤有效部位对MCI大鼠脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽S转移酶(GSH-ST)、过氧化氢酶(CAT)的影响;结果黄连解毒汤有效部位可提高模型动物脑匀浆SOD、Cu-ZnSOD、CAT、GSH-PX和GSH-ST活性;提高GSH含量,降低MDA、LD含量与LDH活性(P＜0.05,P＜0.01).结论黄连解毒汤有效部位对多发脑梗塞大鼠脑脂质过氧化损伤有显著保护作用.     

RP-HPLC和TLCS测定黄连解毒汤有效部位中藏红花酸含量的方法研究

目的　建立黄连解毒汤有效部位中藏红花酸的含量测定方法。方法　采用高效液相色谱法(HPLC)及薄层色谱扫描法 (TLCS)。HPLC法 :YWG C18色谱柱 ;流动相 :甲醇—水—冰乙酸 ;检测波长 :4 2 3nm。薄层色谱扫描法 :硅胶G薄层板 ;展开剂 :氯仿—甲醇—甲酸 ;反射法锯齿扫描 ,入射波长 :4 10nm ;参比波长 :5 6 0nm。结果　HPLC法平均回收率为 10 1 6 8% ,RSD =1 16 % (n =5 ) ;TLCS法平均回收率为 98 5 4% ,RSD =0 83% (n =5 )。结论　两种方法测定结果基本一致 ,且操作简便、准确 ,均可作为黄连解毒汤有效部位的质量控制方法。     

黄连解毒汤有效部位对培养大鼠皮层神经元谷氨酸损伤的保护作用

目的观察黄连解毒汤有效部位对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用.方法体外培养新生大鼠皮层神经细胞,加入谷氨酸观察谷氨酸对神经细胞的兴奋毒性及黄连解毒汤有效部位的保护作用.结果黄连解毒汤有效部位305 mg/kg能明显增高模型细胞的活性;610、305、153 mg/kg能显著降低模型细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,降低MDA生成;305、153 mg/kg可减少NO生成,610 mg/kg还可提高SOD活性.结论黄连解毒汤有效部位对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性具有显著的保护作用,其机制可能与降低NO含量、抗过氧化作用有关.     

黄连解毒汤对治疗高脂血症大鼠血脂代谢的研究

目的 探究黄连解毒汤对高脂血症大鼠的脂类代谢及抗脂质过氧化作用的影响。方法 将SD大鼠随机分组,分为正常对照组、模型组、辛伐他汀组、黄连解毒汤低、中、高剂量,每组16只,除正常对照组以外,其它组大鼠连续喂养8周高脂饲料建立高脂血症模型。模型建立后测定大鼠血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和三酰甘油(TAG)水平,测定血清中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果 与模型组相比,黄连解毒汤高、中、低剂量组能降低大鼠血清TC、TG、LDL-C、MDA含量,显著提高HDL-C含量和提高SOD、GSH-Px活性。结论 黄连解毒汤能够降低高脂血症大鼠血脂,提高机体抗脂质过氧化,高剂量组效果更佳。     

凉膈散与黄连解毒汤对2型糖尿病小鼠血糖、血脂及胰岛素水平的影响

目的：观察凉膈散与黄连解毒汤对2型糖尿病小鼠的血糖、血脂及胰岛素水平的影响。方法：用高糖高脂饲料加小剂量STZ制备2型糖尿病小鼠模型;分别设空白组、对照组、凉膈散组、黄连解毒汤组、曲格列酮组;测定治疗前后小鼠血清血糖、甘油三酯、总胆固醇及血清胰岛素。结果：凉膈散与黄连解毒汤均能显著降低2型糖尿病小鼠的血糖、血清胰岛素以及血甘油三酯和总胆固醇。结论：清热解毒剂凉膈散与黄连解毒汤可以干预2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗。     

RP-HPLC法同时测定龙泽熊胆胶囊中龙胆苦苷、盐酸小檗碱和黄芩苷含量

目的：建立同时测定龙泽熊胆胶囊中3种成分的方法。方法采用DIKMA Platisil ODS色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温30℃,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,采用梯度洗脱,检测波长275 nm,流速1 ml/min。结果龙胆苦苷、盐酸小檗碱和黄芩苷的线性范围分别为0.019～0.38μg（r=0.9999）、0.15～3.00μg（r=1.0000）和0.078～1.56μg（r=0.9997）,平均回收率98.97%～101.30%。结论龙泽熊胆胶囊的质量控制可采用本方法。     

恩替卡韦对大鼠体内黄芪汤药动学的影响

目的:阐明恩替卡韦(entecavir,ETV)对黄芪汤(Huangqi Decoction,HQD)中多成分的药代动力学影响。方法:SD大鼠随机分为黄芪汤(HQD)组,恩替卡韦与黄芪汤同时给药(ETV-HQD)组,恩替卡韦与黄芪汤间隔2 h先后给药(ETV-2h-HQD)组,每组8只。各组予以相应药物处理,给药剂量为恩替卡韦60μg/kg,黄芪汤1.2 g/kg,每日灌胃1次,连续1周。末次给药前及给药后不同时间点采血,采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中14种成分的浓度动态变化,计算药代动力学参数。结果:与HQD组相比,ETV-HQD组的甘草酸和甘草次酸C_(max)和AUC降低(P0.05);而ETV-2h-HQD组甘草酸和甘草次酸C_(max)和AUC与HQD组接近,且黄芪甲苷和毛蕊异黄酮的C_(max)、毛蕊异黄酮苷和甘草苷的C_(max)及AUC和芒柄花苷的AUC高于HQD组(P0.05)。结论:恩替卡韦与黄芪汤同时服用可减少有效成分的暴露,但恩替卡韦药与黄芪汤间隔2h先后给药能增加部分有效成分的暴露,呈现有利的相互作用。     

桂枝汤和黄连解毒汤对 GK 大鼠心肌炎症因子及基膜影响的差异研究

目的：观察桂枝汤及黄连解毒汤对自发性糖尿病大鼠（GK 大鼠）心肌基膜厚度、心肌核因子-κB（NF -κB）、Ⅳ型胶原表达的作用,探讨有关炎症损伤的机制。方法以 Wistar 大鼠10只作为正常对照组,40只 GK 大鼠随机分为 GK 对照组、二甲双胍组、黄连解毒汤组、桂枝汤组,分别以相应药物灌胃给药12周,检测各组血糖、NF -κB、Ⅳ型胶原阳性表达程度及基膜厚度。结果 GK大鼠血糖升高,NF -κB 阳性表达增强,Ⅳ型胶原蛋白表达增强,基底膜厚度增加。二甲双胍、黄连解毒汤均可降低 GK 大鼠血糖（P ﹤0.01）。黄连解毒汤和桂枝汤均能降低 NF -κB 及Ⅳ型胶原蛋白表达、降低基底膜厚度与 GK 大鼠对照组比较差异有统计学意义（P ﹤0.01,P ﹤0.05）。在抑制 NF -κB阳性表达方面,桂枝汤和黄连解毒汤疗效无统计学意义。在抑制Ⅳ型胶原蛋白表达、降低基底膜厚度方面,桂枝汤作用强于黄连解毒汤（P ﹤0.01,P ﹤0.05）。结论桂枝汤和黄连解毒汤均可以抑制 NF-κB 阳性表达,抑制Ⅳ型胶原蛋白表达,降低基膜厚度,且桂枝汤优于黄连解毒汤,显示了其调和营卫治法的独特作用。