人类脐带血管修复周围神经损伤的临床疗效观察

以人类新生儿脐带血管（ＨＵＶ）为桥接物移植修复陈旧性周围神经损伤１２例，缺损１．５￣７．０ｃｍ的神经１５条。术后随访２３￣４７个月。结果显示，所有病人均有明显的肢体功能恢复，尤以感觉功能的恢复较好；优良率达８３％。未见免疫排斥反应和其它副作用。表明ＨＣＶ能有效地引导神经再生。本法桥接缺损在３ｃｍ以内的神经损伤效果尤佳。     

犬活性同种主动脉－下腔静脉移植的动物实验

①目的观察犬活性同种主动脉（ＶＨＡ）－下腔静脉（ＩＶＣ）移植的长期通畅效果、组织变化及排异反应。②方法以ＶＨＡ行犬肾下ＩＶＣ间置移植术，长度３．０～４．０ｃｍ，术后未用抗凝及抗血小板药物，亦未建立远侧动静脉瘘。③结果全组５只犬术后均无腹水及下肢水肿发生。术后８０．８±１４．７ｄ处死动物切取移植ＶＨＡ观察，４例通畅，吻合口生长良好，内膜面光滑；１例吻合口重度狭窄，内径明显缩小，有明显纵行皱襞。５例均无血栓形成。光镜下通畅血管吻合口处及ＶＨＡ中段均形成光滑完整的内膜，与宿主ＩＶＣ内膜相延续，吻合口处内膜层较中段增厚略明显。内膜与中膜交界少数几处可见少量炎性细胞浸润。ＶＨＡ中膜细胞核减少或消失，弹性膜不同程度变性。④结论本组ＶＨＡ－ＩＶＣ移植通畅率高，排异反应较低，表明ＶＨＡ是一种有良好应用前途的大静脉替代材料     

混合脐血浆在人脐静脉内皮细胞培养中的应用

目的：观察混合脐血浆在人脐静脉内皮细胞（ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｖｅｉｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ，ＨＵＶＥＣ）培养中的作用。方法：在含２０％（体积分数）混合脐血浆的内皮细胞培养体系中进行ＨＵＶＥＣ的原代和传代培养，并对培养细胞进行纯度鉴定。同时用噻唑蓝试验观察不同体积分数的混合脐血浆对ＨＵＶＥＣ增殖活力的影响。结果：２０％（体积分数）的混合脐血浆对ＨＵＶＥＣ２有明显支持作用，该     

血清HBcAg检测与e系统意义的再研究

用商品试剂ＲＩＡ法检测５２１份乙肝患者血清ＨＢｃＡｇ，并与ＨＢｅＡｇ，抗ＨＢｅ及ＰＣＲＨＢＶＤＮＡ比较。结果表明ＨＢｃＡｇ的检出率：ＨＢｃＡｇ阳性组为８５．１２％；抗ＨＢｅ阳性组为８１．３６％，二者经统计学处理无显著差异。而ＰＣＲ检测两组ＨＢＶＤＮＡ阳性率依次为８８．８９％，４０．００％。提示：用ｅ系统衡量ＨＢＶ复制与否已不完全，应将ＨＢｃＡｇ与其它免疫学指标同时作常规测定。     

紫外线照射局部体表对体外血栓形成效应的研究

作以紫外（ＵＶ）（５０ｃｍ，剂量为２６１．１７ｍＪ／ｃｍ＾２，照射面积为１２０ｃｍ＾２）局部照射９名脑血栓恢复期患左侧臂部１次，结果ＵＶ照射后２ｈ时，体外血栓形成的长度及湿、干重均较ＵＶ照前明显地缩短或减轻（Ｐ均〈０．０１）；优球蛋白溶解时间较ＵＶ照前显地缩短（Ｐ〈０．０１）；体外血小板粘附率、最大聚集率和聚集坡度较ＵＶ照前均无显性差异。实验证明，ＵＶ局部照射不能影响血小板的粘附和聚集功能     

不同底物对HUVEC在血管内支架上粘附生长的影响

目的研究不同底物对人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）在支架上粘附及生长的影响。方法：分别用Ｆｉｂｒｉｎｅｃｔｉｎ、ｐｏｌｙＬｌｙｓｉｎｅ处理血管内支架后将其置入ＨＵＶＥＣ悬液,定时旋转血管内支架,使内皮细胞在支架上充分粘附。比较ＨＵＶＥＣ在底物处理的支架与裸支架上粘附率及生长状况的差异。结果：ＨＵＶＥＣ在裸支架、ｐｏｌｙＬｌｙｓｉｎｅ及Ｆｉｂｒｉｎｅｃｔｉｎ处理血管内支架上的粘附率分别为１９．９２％、３９．８２％、６４．９％,３者比较有统计学上的差异;ＨＵＶＥＣ在Ｆｉｂｒｉｎｅｃｔｉｎ处理的支架上的生长状况也优于其它两种情况。结论：底物Ｆｉｂｒｉｎｅｃｔｉｎ和ｐｏｌｙＬｌｙｓｉｎｅ处理能提高内皮细胞在支架上的粘附率。     

烧伤病人血清对培养脐静脉内皮细胞的影响

用培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）为模型，加入体表面烧伤面积３０％～５０％和７０％～９０％两组病人的血清，观察培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），前列环素（ＰＧＩ２）和一氧化氮（ＮＯ）的变化，并测定ＨＵＶＥ台，纤维状聚合体（Ｆ－ａｃｔｉｎ）含量和内皮素－１（ＥＴ－１）斑点杂交半定量，结果表明，加入烧伤血清后１ｈＥＴ－１ｍＲＮＡ量增加３倍并持续到１２ｈ，ＮＯ产量在３ｈ开始显著升高（Ｐ〈０．０５），持续     

静脉、带蒂骨骼肌和变性骨骼肌桥接神经缺损的实验研究

用静脉、带蒂肌和变性骨骼肌桥接７５只大鼠坐骨神经缺损１０ｍｍ．术后３０、６０天，先后检测腓肠肌、比目鱼肌肌肉收缩力、再生轴索恢复率、直径，及神经再生超微结构．术后６０天，静脉桥接组和变性骨骼肌桥接组均有良好功能恢复，两组间的各项数据差异均不显著，带蒂骨骼肌桥接组虽有部分功能恢复，但与其他两组比较，各项数据均有显著差异。作者认为静脉和变性骨骼肌可作为移植体修复短段神经缺损，带蒂骨骼肌不宜用于修复周围神经缺损。     

活性同种带瓣主动脉补片在法乐氏四联症右室流出道矫形中的应用

①目的评价同种带瓣主动脉（ＶＨＡ）用于法乐氏四联症（ＴＯＦ）右室流出道（ＲＶＯＴ）矫形的临床效果。②方法以保留无冠瓣及二尖瓣大瓣的ＶＨＡ行右室漏斗部、肺动脉瓣环和肺动脉干矫形２５例。关胸前测定各心腔压力并行彩色Ｄｏｐｐｌｅｒ心脏超声随访。③结果关胸前测压：ＶＨＡ组与对照组的右室与左室收缩压比值分别为０．５０±０．１６和０．６２±０．１４（ｔ＝２．５８０，Ｐ＜０．０２）；右室收缩压分别为６．５８±１．６９ｋＰａ和７．８９±２．４５ｋＰａ（ｔ＝２．１０３，Ｐ＜０．０５）；右室－肺动脉压力阶差为０．４３±０．３２ｋＰａ和３．３１±１．９５ｋＰａ（ｔ＝７．３１５，Ｐ＜０．００１）。ＶＨＡ组血液动力学效果明显优于对照组。ＶＨＡ组死亡１例（４％），余２４例随访０．６７～４．６７年，无远期死亡，心功能恢复优良，Ｄｏｐｐｌｅｒ超声随访显示术后肺动脉反流轻微，ＶＨＡ无失功及钙化。④结论本研究资料显示以带瓣ＶＨＡ行ＴＯＦ的ＲＶＯＴ重建，术后血液动力学效果优良，可以最大限度加宽ＲＶＯＴ，最大限度减轻肺动脉反流，是理想的重建材料     

全光谱紫外线照射对动脉血栓的效应

探讨紫外线对血栓的效应。方法：２６只健康成年犬被随机分为组，复制股动脉血栓模型后，ＵＶ＋尿激酶组和ＵＫ组即静脉０．１４×１０＾４Ｕ／ｍｉｎ点滴ＵＫ，同时ＵＶ＋Ｕ 行胸腹部ＵＶ８００ｃｍ＾２，４４７．７２ｍＪ／ｃｍ６２照射１次；ＵＶ组只同法照射ＵＶ，不用ＵＫ；对照组既不用ＵＫ也不照ＵＶ，观察各组血栓溶解情况。     

脐血移植治疗急性白血病的临床研究

目的　探讨同胞和非血缘关系脐血造血干细胞移植治疗急性白血病的疗效和相关并发症。方法　 4例急性白血病患者分别行同胞和非血缘关系脐血移植各 2例。预处理方案 :以BUCY为基础化疗方案。移植物抗宿主病(GVHD)的预防 :采用环孢素A和短程甲氨喋呤方案。脐血细胞回输 :输注脐血有核细胞中位数为 3 5 5× 10 7/kg(2 2 0× 10 7～ 4 86× 10 7/kg) ,CD34 细胞中位数为 2 80× 10 5/kg (0 93× 10 5～ 3 85× 10 5/kg)。结果　 4例患者脐血造血干细胞经DNA多态性分析证实植活。出现急性Ⅱ度和Ⅳ度GVHD各 1例 ,加强免疫抑制治疗后好转。 3例患者仍无病存活 ,生存时间分别为 36个月、 2 4个月、 2 0个月 ,1例患者移植后 7个月白血病复发。结论　脐血是造血干细胞的良好来源 ,脐血移植是治疗急性白血病的一种有效方法。     

脐血造血干细胞移植的研究进展

造血干细胞移植(hemopoietic stem cell transplantation,HSCT)是通过异体或自体的造血干细胞(HsC)植入受者体内,而使受者获得造血和免疫功能重建的方法.随着实验血液学、临床血液学和移植免疫学的不断发展,特别是人类白细胞抗原(HLA)配型技术的发展,使HSCT技术逐渐成熟并广泛应用,成为治愈某些恶性血液病的重要方法.脐带血作为Hsc的来源之一,已成功应用于临床,并有望在今后的生物学治疗和基因治疗中发挥重要的作用.本文就近年来有关脐带血HSCT移植的研究进展作一综述.     

Long-term outcomes in adults with leukemia treated with transplantation of two unrelated umbilical cord blood units

Background  Wide application of umbilical cord blood transplantation (UCBT) in adult patients is limited by low cell-dose available in one umbilical cord blood (UCB) unit. The aim of this study was to investigate the safety and long-term outcomes of UCBT from unrelated donors in adult and adolescent patients with leukemia.

Methods  Thirteen patients with leukemia received double-unit UCBT with human leukocyte antigen (HLA) mismatched at 0–2 loci. We analyzed the engraftment, graft-versus-host disease (GVHD) and survival.

Results  Twelve evaluable patients (92.3%) had neutrophil and platelet engraftment at a median of 21 days (range, 16–38 days) and 34 days (range, 25–51 days), respectively. At day 30, engraftment was derived from one donor in 8 patients (66.7%, 95% CI 40.0%–93.4%), and from both donors in 4 patients (33.3%, 95% CI 6.7%–60.0%) with 1 unit predominated. Unit with larger nucleated cell (NC) dose would predominate in engraftment (P=0.039), whereas CD34⁺ cell dose or HLA-match failed to demonstrate any relationship with unit predominance. Only one patient developed grade II acute graft-versus-host disease (aGVHD). Chronic GVHD (cGVHD) was observed in 2 of 11 patients who survived more than 100 days, and both were limited. The median follow-up after transplantation for the 13 patients was 45 months (range 1.5–121.0 months) and 72 months (range 41.0–121.0 months) for the 8 alive and with full donor chimerism. The 5-year cumulative disease free survival (DFS) was (61.5±13.5)%. Of the 13 patients, 5 patients died in 1 year and 1-year transplantation related mortality (TRM) was 23.1% (95% CI 0.2%–46.0%).

Conclusion  Double-unit UCBT from unrelated donors with HLA-mismatched at 0–2 loci may overcome the cell-dose barrier and be feasible for adults and adolescents with leukemia.

     

Optimal time for human umbilical cord blood cell transplantation in rats with myocardial infarction

Background Cell therapy for cardiac regeneration is still under investigation. To date there have been a limited number of studies describing the optimal time for cell injection. The present study aimed to examine the optimal time for human umbilical cord blood cells （HUCBCs） transplantation after myocardial infarction （MI）. Methods The animals underwent MI by ligation of the left anterior descending coronary artery and received an intravenous injection of equal volumes of HUCBCs or phosphate buffered saline at days 1, 5, 10 and 30 after MI. HUCBCs were detected by immunostaining against human human leucocyte antigen （HLA）. Cardiac function, histological analysis and measurement of vascular endothelial growth factor （VEGF） were performed 4 weeks after cell transplantation. Results HUCBCs transplantation could improve cardiac function in rats that received transplantation at 5 and 10 days after MI. The best benefit was achieved in rats that received cells at 10-day after MI. Survival of engrafted HUCBCs, angiogenesis and VEGF expression were more obvious in the 10-day transplantation group than in the other transplantation groups. No evidence of cardiomyocyte regeneration was detected in any transplanted rats. Conclusions HUCBCs transplantation could improve cardiac function in rats that received HUCBCs at days 5 and 10 after MI with the optimal time for transplantation being 10 days post MI. Angiogenesis, but not cardiomyocyte regeneration, played a key role in the cardiac function improvement.     

同种异基因脐血输注诱导受者对供者免疫耐受

①目的 观察输注同种异基因脐血的新生猪成年期是否对供者产生免疫耐受。②方法 异基因新生小猪随机配对,将供者脐血输注给刚出生的受者,成年后用供者淋巴细胞做供受双方淋巴细胞毒试验（CDC试验）,脐血输注的实验组与未做脐血输注的对照组比较。③结果 实验组与对照组比较差异有显著性（χ^2=7．62,P〈0．01）。④结论 新生猪同种异基因脐血输注能诱导受者对供者产生免疫耐受。     

脐血间质干细胞移植后梗死心肌细胞的凋亡及意义

目的探讨脐血间质干细胞移植对梗死心肌残存心肌细胞凋亡的影响。方法无菌条件下采集成年杂种妊娠犬脐血,体外分离、纯化、培养、扩增脐血间质干细胞,经5-氮杂胞苷(5-aza)体外诱导向肌源性细胞分化,DAPI荧光标记,经左冠状动脉前降支灌注移植入成年杂种犬急性心肌梗死模型区域,2、4、8周取心肌标本,采用HE染色及TUNEL法检测犬心肌梗死模型中脐血间质干细胞移植后心肌细胞的凋亡情况。结果免疫组化法检测结果表明,培养的细胞为脐血间质干细胞,在5-aza诱导作用下可向肌源性细胞定向分化,2、4、8周后在移植区域观察到带荧光的心肌纤维和细胞核,排列方向与残留心肌组织基本一致,荧光标记的肌纤维相互连接。经TUNEL法检测可见在脐血间质干细胞移植组和对照组心肌梗死区域均有凋亡的心肌细胞分布,但移植组凋亡细胞明显低于非移植组;HE染色有相似的阳性率,阳性细胞多具有凋亡的形态特征。结论脐血间质干细胞移植梗死心肌除能形成心肌再生外,尚能减少心肌梗死后梗死区域的心肌细胞凋亡,达到延缓心室重构的目的。应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡有较强的实用性。     

MN基因型定型在异基因脐血干细胞移植植活证据检测中的应用

目的探讨异基因脐血干细胞移植植活证据检测中简单易行的方法。方法取供者和受者移植前及移植后15、300d的标本,抽提DNA。根据已发表的基因序列设计合成两对引物,采用PCR-SSP方法检测MN血型基因型。结果供者为NN型,受者移植前为MM型,移植后15 d为MN型(嵌合型),移植后300 d为NN型(供者型)。NN基因在移植植活证据中作为供者的标记物在受者体内发现。结论采用MN血型基因型检测作为植活证据,可以对异基因脐血干细胞移植进行早期监控,且标本量小,较其他方法更加敏感。     

人脐血干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的实验研究

目的利用人脐带血干细胞移植治疗大鼠心肌梗死,探索治疗心肌梗死的新方法。方法将清洁级Wistar大鼠50只,随机分为3组：A组（心梗对照组）10只;B组（脐带血注射组）20只;C组（人脐带血干细胞移植组）20只。成功建立心肌梗死模型30min后,C组于缺血区心肌组织注射人脐带血干细胞50μl,B组注射脐带血50μl．4周后行心功能和病理学检测,并进行比较。结果C组大鼠的左室前壁厚度、左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室短轴缩短率及左室射血分数较A组和B组有明显改善,各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）;其毛细血管密度明显增加。结论人脐带血干细胞移植治疗可改善心肌梗死大鼠的心功能。     

人脐血源基质细胞移植促进裸鼠造血损伤修复的实验研究

目的 观察人脐血源基质细胞 (hUCBSCs)移植对裸鼠造血损伤的修复效果.方法 6.5Gy辐照裸鼠后,分别从尾静脉输入1×105个人脐血源基质细胞及生理盐水,分别于移植 1、 3、 5、 7、 10、 14、 21d观察裸鼠血象、骨髓象以及不同时相点CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg动态变化.结果 HUCBSCs移植组裸鼠在血象、骨髓象恢复时间、不同时相点骨髓CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg等方面与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HUCBSCs移植具有促进裸鼠造血损伤修复的作用.     

人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化的疗效观察

目的 观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)治疗失代偿期肝硬化患者的疗效.方法 24例肝硬化失代偿期患者,经HUC-MSCs移植,于移植前、移植后1、2、4、8、12周检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBiL)、凝血酶原时间(PT)和白蛋白(ALB)平.于移植前、移植后8、12周分别行CT检查,观察临床症状改善情况及不良反应.结果 移植后2周各项肝功能指标无显著变化(P>0.05);移植后4周,ALT由(106±18)IU/L降至(82±12)IU/L,AST由(121±23)IU/L至(87±14)IU/L,较移植前明显改善(P<0.05),其余指标无明显改善;移植后8周各项肝功能指标均有改善(P<0.05).12周有显著改善(P<0.01).临床症状随时间进展逐步改善且无不良反应.肝脏最大横截面积改善(P<0.05),但肝脏CT值无显著变化(P>0.05).结论 HUC-MSCs移植可显著改善失代偿期肝硬化患者肝功能及临床症状,并能促进肝脏修复.