黏膜免疫系统及黏膜免疫佐剂的研究进展

目的 探讨黏膜免疫基本机理以及黏膜免疫佐剂在增强黏膜免疫效果方面的作用.方法 通过查找大量的国内外相关文献,分析归纳国内外目前研究现状.结果 通过黏膜接种疫苗可有效地诱导黏膜局部免疫及系统免疫应答,并产生相应的保护性抗体.黏膜免疫佐剂的应用能够增强免疫效果,不同的黏膜免疫佐剂其机理也各不相同,应用方法也有所不同.结论 通过黏膜接种疫苗可产生保护性抗体,不同的黏膜免疫佐剂的应用可增强黏膜免疫接种的效果.     

Flt3配体免疫佐剂作用的研究进展

Flt3配体(FL)是近年来发现的早期造血细胞生长因子，能在体内、体外扩增树突状细胞(DC)，特别对DCI亚群的扩增作用更为明显。大量的研究证实了FL能有效提高HIV、HCV、HBV和肿瘤疫苗的细胞免疫应答水平，展示了FL在治疗性疫苗中的应用前景；同时也发现FL不仅有单纯的免疫增强作用，其也能诱导免疫耐受，显示了FL生物学作用的多样性和复杂性。     

鞭毛蛋白与急性肺损伤研究进展

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是急性肺损伤(ALI)的严重阶段，脓毒症(sepsis)是其最多见的病因，虽然近年提出其发病机制的全身炎症反应失控学说，并认为内毒素(LPS)是脓毒症诱导ALI的始动性致病因素，但针对LPS及其激发产生的一些炎症介质等采取的对抗性措施，如应用特异性抗类脂A抗体、细胞因子单抗及可溶性受体等，虽有部分作用，     

鞭毛蛋白在实验性脓毒症性肺损伤中作用的初步探讨

目的 在脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠模型中观察鞭毛蛋白在其体内可能的致炎症肺损伤作用,及其抗血清可能的对抗炎症损伤的作用.方法 复制脓毒症大鼠模型(致伤组),用鞭毛蛋白抗血清对抗(治疗组),并设定对照组(除不结扎、不刺破、不切除盲肠外,其余处理同致伤组),于2、4、6、12、24、48h时,对比观察其动脉血氧分压(PaO2)、湿/干比值(W/D)、血清和肺泡灌洗液(BALF)中鞭毛蛋白和TNF-α含量的变化以及肺组织病理改变.结果 与对照组比较:在12、24、48h时,致伤组PaO2显著降低,而W/D显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);在6、12、24、48h时,致伤组鞭毛蛋白含量显著升高;在24、48h时,治疗组PaO2显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),而W/D显著升高(P<0.01).在12、24、48h时,致伤组TNF-α含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);在24、48h时,治疗组TNF-α含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).致伤组与治疗组比较:在12、24h时,致伤组PaO2显著低于治疗组,差异有统计学意义(P<0.01),而W/D和TNF-α含量显著高于治疗组,差异有统计学意义(P<0.01).镜下观察大鼠肺组织发现致伤组在12h后发生显著的病理变化,而治疗组在24h后才发生显著的病理变化.结论 鞭毛蛋白是脓毒症时导致大鼠肺炎症损伤的重要致伤因素.     

DNA疫苗免疫佐剂的研究进展

DNA疫苗是伴随着现代分子生物学技术的发展而发展起来的一种新型疫苗，它纯度高、特异性强，能诱导机体产生持久的体液免疫和细胞免疫，能够抗病毒、抗细菌、抗寄生虫感染，对自身免疫性疾病和过敏性疾病也有一定的疗效，它的快速发展给疫苗研究带来了新的变革。     

COVID-19鼻腔黏膜免疫疫苗的研究进展

呼吸道黏膜免疫系统是机体抵御感染的第一道防线,自2019年新型冠状病毒肺炎（corona virus disease 2019,COVID-19）发生以来,鼻腔黏膜免疫疫苗因具有诱导细胞、体液及黏膜三重免疫应答能力,已成为研究的热点。本文聚焦于新型冠状病毒,了解其结构及致病机制,并对鼻腔黏膜免疫机制进行简要介绍,概述鼻腔黏膜免疫疫苗种类及临床研究进展,以期为新型疫苗的研发提供理论参考,寻求预防治疗COVID-19的最佳方法与策略。     

鼻黏膜免疫佐剂提高疫苗免疫效应的作用机制及进展

大量研究表明,通过鼻黏膜免疫的疫苗可诱导机体生成免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA),有望成为疫苗的有效作用途径之一.但单独使用疫苗鼻黏膜免疫后不会在鼻腔中诱导强IgA产生,需要添加免疫佐剂激活先天免疫应答,增强抗原特异性IgA产生和细胞应答.目前应用的鼻黏膜免疫佐剂种类繁多,但佐剂促进免疫应答的具...     

疫苗佐剂的研究进展

新一代疫苗,尤其是重组蛋白或DNA,比传统疫苗反应性弱,免疫原性也小.因此,迫切需要开展和改进疫苗佐剂.根据佐剂的主要作用机制可以将其分为两大类疫苗输送系统及免疫刺激性佐剂.疫苗输送系统通常为微粒,功能主要是使相关抗原进入抗原提呈细胞.免疫刺激佐剂主要由病原体衍生,模拟病原体相关分子模式,激活先天免疫系统的细胞.更多有效的佐剂的发现促进了对于癌症和慢性感染性疾病的预防和治疗性疫苗的发展.此外,新佐剂的发展也使疫苗经粘膜应用成为可能.     

空肠弯曲菌鞭毛蛋白的提取与鉴定

用制备ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分离空肠弯曲菌Ｓ１３１株的菌体蛋白。在ＫＣｌ“染色”背景下，切下６５．４７Ｋｕ蛋白带，经电泳洗脱和浓缩获得的蛋白液，免疫印迹证实为均一鞭毛蛋白。另用亚硝基胍诱导使空肠弯曲菌Ｓ１３１有动力株突变为无动力株，电镜下突变株鞭毛消失，但ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱上仍有６５．４７Ｋｕ鞭毛蛋白区带。提示，这种鞭毛突变可能发生在蛋白质装配阶段。     

空肠弯曲菌鞭毛蛋白的提取与鉴定

用制备性ＳＤＳ丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分离空肠弯曲菌Ｓ１３１株的菌体蛋白。在ＫＣｌ“染色背景下，切下６５．４７Ｋｕ蛋白带，经电泳洗脱和浓缩获得的蛋白液，免疫印迹证实为均一鞭毛蛋白．另用亚硝基胍诱导使空肠弯曲菌Ｓ１３１有动力株突变为无动力株，电镜下突变株鞭毛消失，但ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱上仍有６５．４７Ｋｕ鞭毛蛋白区带。提示，这种鞭毛突变可能发生在蛋白质装配阶段。     

STAg和霍乱毒素滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织细胞免疫应答

目的研究可溶性速殖子抗原(solubletachyzoiteantigen,STAg)和霍乱毒素(choleratoxin,CT)佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后鼻相关淋巴组织(nasal-associatedlymphoidtissue,NALT)的免疫效应及持续时间。方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以免疫原性好的STAg(20μg/只)为抗原,CT(1μg/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻。滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死6只小鼠。分离NALT的淋巴细胞,计数并涂片,用免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测其CD4 、CD8 T细胞亚群水平。结果小鼠免疫后,NALT淋巴细胞第1、2、6、8、12(P<0.05)周显著增生,可持续至免疫后第12周;CD4 T细胞第1周至第6周(P<0.05)持续显著增高,CD8 T细胞在第1周至第4周持续增高(P<0.01),CD4 /CD8 比值第2、3周显著降低(P<0.05)。结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠能够有效诱导NALT的免疫效应,并可持续较长时间。     

霍乱毒素佐剂联合弓形虫ESA鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染作用

目的 观察霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂和弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染作用。方法 6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为3组,每组20只。分别用PBS 20μl、ESA 20μg或CT 1.0μg+ESA 20μg每只滴鼻免疫2次,间隔2周。末次免疫后14 d,用4×104个弓形虫速殖子每只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康及死亡情况。速殖子攻击后30 d,计数肝、脑组织内弓形虫速殖子。结果 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠的健康状况明显好于PBS组和ESA组,存活率(95%)也显著高于PBS组(55%)。与PBS组相比,CT+ESA组肝和脑组织内速殖子数分别减少了80.19%(P0.001)和78.24%(P0.005)。CT作为佐剂联合ESA滴鼻免疫小鼠诱导了高水平的黏膜免疫应答和系统免疫应答。结论 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答可有效抵抗弓形虫速殖子攻击。     

弓形虫可溶性速殖子抗原和霍乱毒素滴鼻免疫小鼠诱导的鼻通道细胞免疫应答

目的研究弓形虫可溶性速殖子抗原(solubletachyzoiteantigen,STAg)和霍乱毒素(choleratoxin,CT)佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后鼻通道(nasalcavity,NC)的免疫效应及持续时间。方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以STAg(20!g/只)为抗原,CT(1!g/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻。滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死6只小鼠。分离NC的淋巴细胞,计数并涂片,用免疫细胞化学法检测其CD4 T、CD8 T细胞亚群水平。结果小鼠免疫后,NC淋巴细胞第1周至第10周持续显著增生(P<0.05);NC中CD4 T细胞水平第1周至第8周持续显著增高(P<0.05),CD8 T细胞在第1、2、3周(P<0.05)显著增高,持续至免疫后第3周,CD4 /CD8 比值无明显变化。结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导NC的免疫应答,并可持续较长时间。     

Intranasal Immunization Using CTA1-DD as a Mucosal Adjuvant for an Inactivated Influenza Vaccine

Objective To evaluate the effect of intranasal immunization with CTA1-DD as mucosal adjuvant combined with H3N2 split vaccine. Methods Mice were immunized intranasally with PBS(negative control), or H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) alone, or CTA1-DD(5 μg/mouse) alone, or H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) plus CTA1-DD(5 μg/mouse). Positive control mice were immunized intramuscularly with H3N2 split vaccine(3 μg/mouse) and alum adjuvant. All the mice were immunized twice, two weeks apart. Then sera and mucosal lavages were collected. The specific HI titers, IgM, IgG, IgA, and IgG subtypes were examined by ELISA. IFN-γ and IL-4 were test by ELISpot. In addition, two weeks after the last immunization, surivival after H3N2 virus lethal challenge was measured. Results H3N2 split vaccine formulated with CTA1-DD could elicit higher Ig M, Ig G and hemagglutination inhibition titers in sera. Furthermore, using CTA1-DD as adjuvant significantly improved mucosal secretory Ig A titers in bronchoalveolar lavages and vaginal lavages. Meanwhile this mucosal adjuvant could enhance Th-1-type responses and induce protective hemagglutination inhibition titers. Notably, the addition of CTA1-DD to split vaccine provided 100% protection against lethal infection by the H3N2 virus. Conclusion CTA1-DD could promote mucosal, humoral and cell-mediated immune responses, which supports the further development of CTA1-DD as a mucosal adjuvant for mucosal vaccines.     

STAg和霍乱毒素不同程序滴鼻免疫小鼠诱导抗弓形虫作用

目的观察弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂不同程序滴鼻免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染能力,确定STAg和CT滴鼻免疫的最佳程序。方法BALB/c小鼠随机分为3组:1次、2次和3次免疫组,用20 μg STAg 1 μg CT/只分别滴鼻免疫1次,2次或3次,前2次间隔2周,末次间隔1周。末次免疫后第14天,用4×104个速殖子/只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康及死亡情况,攻击后第30天处死,ELISA法检测血清IgG和粪便IgA,计数肝、脑组织内弓形虫速殖子,分离并计数派伊尔结(Peyer′spatches,PP)和脾淋巴细胞数。结果2次和3次免疫组小鼠存活率明显高于1次免疫组(P<0.05),肝、脑组织内虫荷显著低于1次免疫组(P<0.001),血清IgG和粪便IgA高于1次免疫组,PP和脾淋巴细胞数无显著性变化。结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫2次或3次能有效诱导小鼠抗弓形虫感染。     

卵巢癌辅助化疗的研究进展

目前卵巢癌的标准治疗方案是以手术为主,同时辅以术后化疗,手术的目的是尽可能切除肿瘤灶实现满意肿瘤细胞减灭术.当患者出现明显症状时,疾病大多已处于晚期,多数患者无法实行满意肿瘤细胞减灭术;辅助化疗结合间隔手术作为晚期卵巢癌患者的替代治疗方案具有较好的应用前景.本文综述了卵巢癌辅助化疗的研究进展.     

麻疹疫苗及加佐剂经滴鼻免疫小鼠的抗体应答

目的：观察麻疹减毒活疫苗和灭活疫苗经滴鼻免疫小鼠后的抗体应答。方法：用活的或灭活麻疹疫苗及分别加明胶、植物血凝素(PHA)的疫苗滴鼻免疫小鼠，于末次免疫后10d取血清、唾液、呼吸道分泌物，用间接ELISA法检测特异性IgG，IgA抗体水平，并与皮下注射组及对照组进行比较。结果：各滴鼻组小鼠血清及呼吸道分泌物中均产生一定水平的特异性IgG及In抗体，皮下注射组小鼠呼吸道分泌物中未产生特异性IgA抗体；加明胶后的免疫效果优于加PHA的。结论：麻疹疫苗滴鼻免疫小鼠后可诱导全身及局部抗体应答，明胶可增强其免疫效果，而麻疹疫苗皮下注射免疫小鼠未能诱导局部抗体应答。     

不同佐剂的复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用

目的比较IFN-γ和蜂胶作为佐剂鼻内免疫小鼠抗弓形虫攻击的能力,探索两种佐剂联合应用的效果。方法将5～6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4个组,每组15只,分别用20μg可溶性速殖子抗原(STAg)、20μgSTAg+40μg蜂胶、20μgSTAg+1000UIFN-γ或20μgSTAg+40μg蜂胶+1000UIFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔14d。末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击,逐日观察小鼠存活情况。攻击后第43天处死全部存活小鼠,计算胸腺、脾指数,计数脑、肝组织速殖子。结果STAg+IFN-γ组、STAg+蜂胶+IFN-γ组胸腺、脾指数显著高于STAg组(P<0.05);组织内速殖子虫荷显著降低(P<0.01),STAg+IFN-γ组小鼠脑、肝组织减虫率分别为57.00%和79.06%;STAg+蜂胶+IFN-γ组小鼠脑、肝减虫率分别为68.30%和79.06%。STAg+蜂胶组小鼠胸腺、脾指数有升高趋势,组织内速殖子虫荷降低,但与STAg组比较差异无统计学意义。结论在抗弓形虫感染中,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ的佐剂效果优于蜂胶,IFN-γ、蜂胶+IFN-γ辅助...     

不同佐剂的弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的黏膜免疫应答

目的比较IFN-γ、蜂胶佐剂以及两种佐剂混合鼻内免疫辅助可溶性速殖子抗原(STAg)增强机体黏膜免疫应答的水平,探讨两种佐剂联合应用的免疫效果。方法将5～6周龄雌性BALB/c小鼠60只随机分为4组(各15只):20μgSTAg,20μgSTAg 40μg蜂胶,20μgSTAg 1000UIFN-γ或20μgSTAg 40μg蜂胶 1000UIFN-,γ均溶于总体积为20lμ的PBS中,滴鼻免疫(10lμ/鼻孔),免疫2次,间隔14d。末次免疫后第10天用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击。攻击后第43天处死全部存活小鼠,比较各组小鼠肠黏膜小肠上皮内淋巴细胞(IEL)、PP结T淋巴细胞数;检测小鼠粪便、鼻咽冲洗液、肺冲洗液、阴道冲洗液中弓形虫特异性sIgA含量。结果各佐剂组小鼠IEL、PP结T淋巴细胞数显著高于STAg组,黏膜sIgA含量显著高于STAg组;蜂胶 IFN-γ联合组小鼠黏膜免疫应答水平高于单独佐剂组,其中显著高于蜂胶组(P<0.05)。结论IFN-γ作为弓形虫黏膜疫苗佐剂的效应优于蜂胶,IFN-γ 蜂胶作为复合黏膜佐剂鼻内免疫效果优于两者单独应用。