血小板第4因子对小鼠骨髓造血细胞辐射损伤保护机理的研究

血小板第 4因子 (ＰＦ4)是一种肝素结合多肽 ,具有中和肝素、炎症的趋化、抑制血管形成和抑制巨核细胞生长的功能[1] ,属于造血生长负性调节因子。近年的研究表明 ,ＰＦ4能可逆的抑制造血干细胞、祖细胞的生长[2 ,3] ,并因此而保护骨髓造血干祖细胞免受细胞毒剂的损伤[4 ] 。目前 ,尚未见到ＰＦ4减少哺乳动物对辐射的敏感性、保护正常造血干祖细胞的报道。本实验旨在探讨ＰＦ4对急性辐射损伤小鼠骨髓细胞保护的作用机理。一、材料和方法1 实验动物 :ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 70只 ,雄性 ,体重 (19～ 2 1)ｇ ,鼠龄 10～ 12周 ,由本校实验动物中心提供…     

姬松茸多糖对放射损伤小鼠粒系造血及体内造血因子作用的实验研究

姬松茸系菌类植物 ,研究证实其多糖成分具有抗癌、滋补肝肾、增强机体免疫功能及促进正常造血干、祖细胞增殖的作用。笔者探讨了姬松茸多糖对放射损伤小鼠骨髓造血及体内造血因子的作用机理 ,为其抗放治疗提供实验依据。一、材料和方法1 实验动物 :ＢＡＬＢ ｃ小鼠 ,雌雄兼用 ,体重 18～ 2 4ｇ ,兰州生物制品研究所实验动物室提供 ,制备鼠肺条件培养液采用昆明种小鼠 ,体重 18～ 2 0ｇ ,兰州医学院实验动物室提供。2 药物及试剂 :由日本三重大学提供姬松茸 ,根据文献方法提取水溶性多糖 (ＡＢＰＳ) ,每克干品相当于 4 7ｇ生药。ＲＰＭＩ 16…     

实验动物房在GMP实施中的设计与要求

实验动物工作是药品生产和临床医学、基础医学科研中的重要环节 ,实验动物的质量是药品生产检测和新药研究的基础 ,我国在实施ＧＭＰ(即生产质量管理规范 )过程中非常重视实验动物的科学管理工作。1998年修订的《生产质量管理规范》第三十条明确规定的标准为 :“实验动物房应与其它区域严格分开 ,实验动物是否符合国家有关规定。”近几年又有《实验动物管理条例》(国家科委 2号令 )等许多法规先后颁布 ,部分省市也颁布了相应的标准 ,如黑龙江省科技厅颁布的《黑龙江省实验动物质量合格证管理方法》(黑科发 [1999]第 87号 )等。根据ＧＭＰ及…     

抗CD49d单克隆抗体与rhG-CSF动员的外周血干细胞移植重建小鼠造血功能的比较研究

为比较研究抗CD49d单克隆抗体和重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)动员的外周血干细胞对造血功能重建的影响 ,经放、化疗预处理的BALB/c小鼠分别接受经生理盐水(对照组 )、rhG CSF(实验 1组 )、抗CD49d单克隆抗体 (实验 2组 )动员的同系小鼠的外周血干细胞移植 ,观察受体小鼠的 4周存活率、外周血白细胞 (WBC)、骨髓有核细胞 (BMNC)、粒细胞巨噬细胞集落形成单位 (CFU GM)及脾集落形成单位 (CFU S)等指标。结果显示 ,实验 1、2组小鼠的 4周存活率、WBC、BMNC ,CFU GM和CFU S均明显高于对照组(P <0 0 1) ,实验 1、2组之间比较差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。提示抗CD49d单克隆抗体或rhG CSF均能动员小鼠外周血干细胞 ,并能重建同系小鼠的造血功能。     

32P近距离照射治疗小儿皮肤血管瘤的剂量率效应

食管癌或肺及纵隔恶性肿瘤患者在行常规放射治疗中 ,常常发生放射性食管炎 ,严重影响了患者的生活质量和生存 ,也给患者带来了新的痛苦。中药制剂对射线具有一定的防护作用[1 ] 。我们运用自制中药———顺食汤 ,在中国医学科学院肿瘤研究所放射生物研究室进行了防治放射性食管炎的动物实验 ,拟在证实顺食汤的放射防护作用 ,进一步指导临床应用。一、材料和方法1 实验动物 :ＢＡＬＢ Ｃ小白鼠 ,雌性 ,2 2～ 2 5ｇ。由中国医学科学院肿瘤研究所实验动物室提供 (动物合格证号为〈京动字〉8910ＭＯ47)。2 药物 :采用自制中药汤剂———顺食汤 …     

硫酸葡聚糖在人脐血移植SCID小鼠模型中的应用初探

硫酸葡聚糖 (ＤＳ)作为一种有效的造血干细胞动员剂已有很多研究报道 ,并可适于体内研究[1 ] 。人脐血移植ＳＣＩＤ小鼠是造血干细胞体内研究的较好模型 ,对受体的预处理可促进外源干细胞的植入[2 ] 。本实验在该动物模型及作者等先前分次移植[3] 的研究基础上 ,观察了ＤＳ作为预处理剂的作用。一、材料和方法1 1%ＤＳ制备[4] :取ＤＳ(含硫量小于 16 % ,相对分子质量1万以下 ,购自Ｓｉｇｍａ公司 )干粉制剂 5 0ｍｇ ,去离子水混匀 ,无菌过滤 ,经检验合格后 4℃保存备用。2 动物 :Ｃ Ｂ 17ＳＣＩＤ小鼠 ,6～ 8周龄 ,雌性 ,体重 (2 0±2 )ｇ,…     

抗凋亡细胞因子治疗急性放射病的实验研究进展

骨髓造血干细胞及各系造血祖细胞因其高度的增殖活性而成为辐射攻击的主要靶细胞,以往人们利用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等刺激残存定向造血干/祖细胞(HSPCs)增殖的造血因子作为急性辐射损伤(ARI)治疗研究的重点且卓有成效~([1]).随着科学的发展和研究的进一步深入,发现照射后造血细胞早期凋亡和坏死是导致体内造血干/祖细胞缺失的关键因素,不仅造血细胞而且非造血组织细胞在照射后都会发生凋亡~([2]).     

沐舒坦针剂治疗兔创伤性急性肺损伤的实验研究

目的　在兔创伤性肺损伤早期应用盐酸氨溴素 (沐舒坦 ) ,观察其对兔创伤性急性肺损伤的疗效并探讨其作用机制。方法　将实验动物 (新西兰兔 )随机分为 3组 :Ⅰ组 :对照组 (n =12 ) ;Ⅱ组 :常规剂量沐舒坦治疗组 ,静脉注射沐舒坦 5mg/kg(n =12 ) ;Ⅲ组 :大剂量沐舒坦组 ,静脉注射沐舒坦 15mg/kg (n=12 )。 3组动物均采用自行研制的BIM Ⅵ型生物撞击机撞击动物右侧胸壁致伤。分别于伤前和伤后 1、3、7小时记录动物的心率、呼吸频率的变化 ,并通过静脉插管抽血以测定血气、肿瘤坏死因子 -α(TNF α)、白细胞介素 - 1(IL 1)、IL 6、IL 8等指标 ,并进行肺组织的病理学检查。结果　实验动物肺损伤发生率达 10 0 %(36 / 36 )。对照组动物 (Ⅰ组 )伤后PaO2 明显低于Ⅱ组和Ⅲ组 (P <0 .0 5 ) ,PaCO2 明显高于Ⅱ组和Ⅲ组 (P <0 .0 5 )。Ⅱ、Ⅲ组间PaO2 、PaCO2 比较无显著性差异。Ⅱ、Ⅲ组外周血促炎因子TNF α及IL 1、IL 6、IL 8含量显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,Ⅲ组血浆炎性细胞因子水平低于Ⅱ组血浆炎性细胞因子水平 (P <0 .0 5 )。组织病理学检查 :Ⅱ、Ⅲ组动物肺组织水肿、灶性出血、肺不张等急性肺损伤的表现较Ⅰ组明显减轻 ,而Ⅲ组的上述急性肺损伤的表现相对Ⅱ组有所减轻。结论　创伤后早期静脉应用大剂     

GM—CSF和rhBM—2m对小鼠急性放射损伤治疗作用的对？…

目的　研究和比较重组人骨形成蛋白 (rhBMP 2m)、GM CSF对照射后小鼠造血损伤的修复作用。方法　rhBMP 2m用分子生物学方法由大肠杆菌中获得 ;该实验中rhBMP 2m对照射后动物的影响 ,通过观察动物的 30天活存率表示。结果　照射对照组小鼠的 30天活存率为 0 ,平均活存天数为 (9 1± 2 2 )d ;GM SCF治疗组小鼠的 30天活存率为 2 0 0 % ,平均活存天数为 (1 1 5±1 9)d ,rhBMP 2m治疗组小鼠的 30天活存数为 4 ,活存率为 40 % ,平均活存天数为 (1 3 2± 6 1 )d。结果显示GM CSF和rhBMP 2m均能提高受照小鼠的活存率 ,并延长活存时间 ,而且后者优于前者(P <0 0 5)。结论　rhBMP 2m对小鼠急性放射损伤具有治疗作用 ,初步观察其优于GM CSF     

二味康口服液对荷瘤小鼠放疗的增效及损伤防护作用

二味康口服液 (以下简称二味康 )由刺五加、黄芪等组成 ,具有扶正固本 ,益气健脾等功效 ,该制剂主要用于提高患者免疫力及对肿瘤疾患的辅助治疗。笔者研究了该药对放疗的增效及放射损伤的保护作用。一、材料和方法 :①药物和试剂 :二味康由华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部提供 ,1ｍｌ药液含生药 2 2ｇ。刀豆蛋白Ａ(ＣｏｎＡ)、脂多糖 (ＬＰＳ)、噻唑蓝 (ＭＴＴ)均为ＧＩＢ ＣＯ产品。②动物 :昆明种雄性小鼠 ,鼠龄 6～ 8周 ,体重 18～2 2ｇ,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供 ;艾氏腹水癌小鼠 1只 ,由华中科技大学同济医…     

天宝口服液抗肿瘤作用

天宝口服液是近年来我们在传统医药开发中研制的中药抗肿瘤制剂。动物实验和临床研究结果表明 ,该制剂疗效可靠 ,能明显改善肿瘤病人的临床症状。本文研究了天宝口服液的抗肿瘤作用及机理。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　动物 :Ｂａｌｂ/Ｃ小鼠 ,体重 2 0± 2ｇ ,雌雄各半 (第四军医大学动物中心提供 )。1.1.2　天宝口服液 (解放军第 32 3医院研制 ) :由西洋参、黄芪、生牡蛎、海藻、全蝎、山慈菇、僵蚕、大黄、黄连、甘草等 19味中药材提取加工制成。1.1.3　肿瘤细胞系 :ＥＭＴ - 6 (乳腺癌 )、Ｈ2 2 (肝癌 )和Ｂｔ32 5(人胶质瘤细胞 )均来…     

重组人骨形成蛋白-2成熟肽对急性放射病小鼠股骨造血间质功能的影响

造血干细胞的增殖、分化不仅依赖于干细胞本身 ,而且依赖于造血微环境即造血间质结构和功能的完善。我们[1 ]曾报道重组人骨形成蛋白 2成熟肽 (ｒｈＢＭＰ 2ｍ)对受照小鼠造血损伤有治疗作用 ,但它究竟是作用于造血干细胞或是作用于造血间质细胞或两者兼而有之未见报道。笔者研究目的是利用皮下移植股骨法[2 ] 观察骨形成蛋白 (ＢＭＰ)对受照小鼠股骨造血干细胞和造血间质细胞功能的影响。一、材料和方法1 材料(1)动物 :ＢＡＬＢ ｃ小鼠 ,雄性 ,日龄 75ｄ ,体重 2 1～ 2 3ｇ。(2 )ｒｈＢＭＰ 2ｍ :ｒｈＢＭＰ 2ｍ是从Ｅｃｏｌｉ表达制备的 1…     

Egr-1启动子基因调控FLT3配基基因表达的实验研究

目的　探索辐射诱导基因调控元件启动的造血生长因子表达及其对造血的保护作用。方法　本实验将携带Egr 1调控序列的FLT3配基 (FL)和EGFP基因双顺反子载体 (Egr EF)转染骨髓基质细胞系HFCL ,采用流式细胞仪、RT PCR、ELISA及细胞增殖法等观察细胞受照后Egr 1调控元件诱导的FL表达及促进造血细胞的增殖作用。 结果　在转染细胞HFCL/EF细胞中证实有外源性基因的整合和表达 ,在 2 5Gy辐射后 16h的细胞培养上清液中表明FL含量较照射前明显增高 ((P <0 0 1) ,) ;辐射后 10dHFCL/EF培养上清液对CD34 造血祖细胞的作用较辐射前具有明显的扩增作用 ((P <0 0 1) ,)。结论　在辐射后Egr 1启动子调控的FL基因表达明显增高并具有保护造血作用。     

腹腔开放伤并海水浸泡血气酸碱有关指标的变化分析

目的　研究腹腔开放伤后海水浸泡对机体动脉血气的影响。方法　 2 1只犬致伤后随机分为对照组 (n=7)、等渗盐水浸泡组 (n=7)和海水浸泡组 (n=7)。对照组为单纯腹外伤 ,后两组动物致伤后腹部分别浸入等渗盐水、海水中 ,观察各组动物动脉血气、血浆渗透压及肿瘤坏死因子 (TNF)水平的变化。结果　对照组和等渗盐水浸泡组致伤前后动脉血气、血浆渗透压及 TNF变化不明显 ;海水浸泡组致伤后 6 0 min始血 p H、Pa O2 及 BE水平均较对照组和等渗盐水浸泡组显著降低 (P<0 .0 5 ) ,而血浆渗透压与 TNF水平则显著升高 (P<0 .0 1) ;致伤后 12 0 min始海水浸泡组 Pa CO2 均较对照组和等渗盐水浸泡组显著升高 (P<0 .0 1)。结论　腹腔海水浸泡可引起机体出现低氧血症、高碳酸血症及酸中毒。     

几种大动物骨髓穿刺的方法与体会

高功率微波武器、电磁脉冲武器和中子武器是当今迅速发展的高新技术武器之一。高功率微波、电磁脉冲等电磁辐射及中子、γ、Ｘ等射线均会引起骨髓造血组织的损伤。为了深入研究其损伤的病变规律和机制 ,常需在不同动物、不同时相动态抽取骨髓组织进行研究。不同动物因其各部位骨骼髓腔造血丰度和解剖结构的差异 ,骨髓穿刺的部位和技巧需视动物种系而有所不同。本文报告猴、狗和家兔 3种不同动物抽取骨髓的体会及注意事项。1　穿刺针的准备我们使用的骨髓穿刺针一般为 14～ 18号胸骨穿刺针。使用前应注意针芯与针要配套 ,消毒备用。2　骨髓穿…     

热带海区海难落水幸存者发病情况分析

目的　探讨热带海区海难落水人员的发病情况及其致病机制。方法　对 2 0 0 1年第 10号热带风暴“天兔”引起的海难落水部分幸存者 2 2例的落海及漂浮情况、主要症状、体征、辅助检查结果和诊断进行回顾性研究。结果　本组 2 2例落水后海水浸泡时间 (2 6 .9± 5 .3) h,轻微外伤发生率 10 0 %(2 2 / 2 2 ) ,被海洋生物袭击发生率 2 2 .7% (5 / 2 2 )。主要病变为体力衰竭 2 2 / 2 2例 (10 0 % ) ,睡眠剥夺 2 2 /2 2例 (10 0 % ) ,中～重度脱水 2 2 / 2 2例 (10 0 % ) ,血液浓缩 2 2 / 2 2例 (10 0 % ) ,休克 1/ 2 2例 (4.5 % ) ,皮肤伤口感染 2 2 / 2 2例 (10 0 % ) ,骨折 1/ 2 2例 (4.5 % ) ,代谢性酸中毒 19/ 19例 (10 0 % ) ,氮质血症 19/ 19例(10 0 % ) ,应激性溃疡 12 / 18例 (6 6 .7% )。结论　热带海区海难落水人员在海上漂浮期间的主要致病原因为缺食缺水、睡眠剥夺、过度体力消耗、长期海水浸泡和应激 ,其他致病原因尚有感染、机械损伤和海洋生物损伤等。     

四物汤对实验动物甘油三酯和胆固酯的影响

四物汤可降低正常动物的甘油三酯和胆固醇已有报道 [1 ] 。本文观察四物汤煎液和醇提液对实验小白鼠模型甘油三酯和胆固醇的影响 ,现报告如下。1　材料与方法1 .1　材料1 .1 .1　制剂　 (1 )四物汤煎液 :当归、熟地、白芍、川芎 (购自大连市药材公司 )取等量按常规煎煮 2次 ,混合 ,浓缩为1 0 0 %和 5 0 %煎液。 (2 )四物汤醇提液 :取上述煎液浓缩 ,加3倍量 95 %乙醇沉淀、提取回收乙醇后用蒸馏水配成1 0 0 % ,5 0 %醇提液。1 .1 .2　动物与饲料　 (1 )动物 :昆明种小鼠 (购自大连医科大学实验动物室 ) ,体重 2 0～ 2 4g,雌雄不拘。 (2 )饲料…     

神经生长因子对大鼠坐骨神经损伤后腰髓前角神经元的影响

周围神经损伤后再生能力如何 ,目前文献报道较多。多数学者认为 ,周围神经是可以再生的 ,但原因尚不清楚。笔者用硅胶管坐骨神经再生室模型探讨坐骨神经前角神经元及髓鞘碱性蛋白(ｍｙｅｌｉｎｂａｓｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＭＢＰ)的变化。一、材料与方法1.动物分组 :大鼠 3 0只 (第三军医大学实验动物中心 ) ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ,随机分成 3组 ,每组 10只。Ⅰ组 :等渗盐水组 ,注射等渗盐水 2 0 μｌ;Ⅱ组 :神经营养因子 (ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＮＧＦ)组 ,硅胶管内给予ＮＧＦ 10 0ｎｇ 2 0 μｌ;Ⅲ组 :在Ⅱ组基础上每日患肢…     

益气活血方对放射损伤骨髓基质细胞生长的影响

骨髓基质细胞在调节造血细胞的增生和分化中起活性作用 ,是造血诱导微环境的主要组成成分[1 ] ,放射诱导造血功能障碍的主要机理是基质细胞的损伤[2 ] 。本研究观察不同类型中药对放射损伤后小鼠骨髓基质细胞体外集落 (ＣＦＵ-Ｆ)形成能力的影响。一、材料和方法 :1 动物　清洁级昆明小鼠 2 0 0只 ,雌雄各 1 0 0只 ,体重2 5～ 30 ｇ ,随机分成治疗组及照射对照组 ,各组均为 40只。2 药物　按健脾益气、补肝肾、活血化瘀、益气活血治疗原则分别组成ａ、ｂ、ｃ、ｄ方剂。各方药物组成如下 :ａ 黄芪 30ｇ、山药 1 5ｇ、太子参 30 ｇ、茯苓、…     

胚胎期受辐射对子鼠造血基质细胞功能的影响

目的　研究胚胎期 2 0Gy137Csγ射线照射后对子鼠造血基质细胞的远期影响。方法　建立胚胎期受辐射小鼠模型 ;以细胞计数检测股骨骨髓有核细胞 (BMNCs)数 ;用免疫组化ABC法检测基质细胞粒单系集落刺激因子 (GM CSF)和干细胞因子 (SCF)的表达 ;用体外小鼠骨髓细胞培养法以粒单细胞系祖细胞集落形成单位 (CFU GM )为指标观察基质细胞对正常骨髓造血的支持功能。结果　胚胎期受辐射小鼠BMNCs数明显低于正常小鼠 (P <0 0 1) ,其骨髓基质细胞生长因子GM CSF和SCF的表达均高于正常小鼠 (P <0 0 5 ) ,同时 ,胚胎期受辐射小鼠骨髓基质细胞对正常骨髓造血的支持能力也高于正常小鼠 (P <0 0 5 )。结论　 2 0Gy137Csγ射线对发育中的小鼠胚胎的造血基质细胞产生了明显影响。