KLF6在肝细胞癌中的表达及在肝癌细胞系中对增殖和凋亡的影响

目的 检测抑癌基因KLF6在人肝细胞癌中的表达情况,探讨KLF6在肝癌细胞系中对细胞增殖及凋亡的影响.方法 分别用荧光定量PCR、RT-PCR 和Western blot 、免疫组织化学方法检测肝细胞癌、癌旁组织及正常肝组织中KL F6 基因mRNA 及蛋白水平的表达情况.构建KLF-6基因的真核表达质粒,用MTT法检...     

DLC-1基因表达与肝细胞癌复发转移的关系

目的已报道人类染色体8p缺失可能与肝癌转移有关,本文应用实时定量聚合酶链反应(RQ- PCR)研究位于8p的DLC-1基因mRNA表达与肝细胞癌侵袭转移的关系。方法收集51例复旦大学中山医院外科手术切除的肝细胞癌(HCC)及癌旁正常组织标本,根据临床病理学指标,分为高低侵袭性两组,用RQ-PCR对不同侵袭性HCC之间的DLC-1基因表达进行分析。对不同侵袭转移潜能MHCC97-L、MHCC97-H、HCCLM3、Hep3B及HepG2肝癌细胞系用同样方法分析DLC-1基因的表达差异。结果非转移细胞系Hep3B和HepG2与转移细胞系MHCC97-L、MHCC97-H和HCCLM3之间DLC—1基因表达差异有统计学意义(P相似文献   

LZTS1蛋白在肝组织及HepG2细胞中的表达

目的探讨LZTS1蛋白在正常肝、肝细胞癌组织及癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织中的表达,以及在人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法选择我院正常人肝组织、原发性肝细胞癌和癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织标本共50例,采用免疫组化方法检测不同肝组织样本中LZTS1蛋白,光镜下观察LZTSI阳性细胞表达定位和分布,按表达面积和表达强度半定量计分。同时培养HepG2人肝癌细胞系,免疫印迹和细胞免疫组化方法检测HepG2细胞中内源性LZTS1的表达,并以正常肝细胞L02为对照。SPSS统计分析各组间的表达差异。结果LZTSI蛋白在正常胆管上皮胞浆中表达。肝细胞包膜和胞浆中均表达,且阳性细胞呈规律性分布。LZTS1蛋白在肝细胞癌组织中14／20例（70％）表达强阳性,5／20例（25％）中等表达;癌旁肝硬化结节中10／17例（58．8％）强阳性表达,6／17（35．3％）例中等阳性表达;慢性肝纤维化组织中1／3（33．3％）例弱阳性,2／3例（66．7％）中等阳性。20例HCC组织中有17例为HBV—HCC,其中13例（76．5％）LZTSI蛋白呈强阳性表达。结论LZTS1蛋白主要表达于正常胆管上皮和肝细胞胞浆,且在肝腺泡中呈规律性分布。在肝癌、肝硬化组织和HepG2细胞中表达增高。     

甘露糖受体在肝细胞癌中的表达及意义

目的:观察甘露糖受体(mannose receptor,M R)在肝细胞癌组织/肝癌细胞系中的表达,探讨其与肝细胞癌发生、发展及恶性程度的关系.方法:应用免疫组织化学检测50例肝细胞癌组织及癌旁组织、10例正常肝组织中MR的表达,免疫荧光法、Western blot法检测肝癌细胞系、肝细胞系中MR的表达.结果:免疫组织化学染色:肝细胞癌组织中M R的表达水平明显高于癌旁组织及正常肝组织(86%vs 76%,30%,P0.05).免疫荧光:MR在肝癌细胞系BEL-7402、Hep G2和人肝细胞系HL-7702中均有表达.在肝癌细胞系BEL-7402、Hep G2上有很强的MR表达,在肝细胞系HL-7702上MR的表达分布明显较少.Western blot法:MR在肝癌细胞系Hep G2、BEL-7402和人肝细胞系HL-7702上均有表达,肝癌细胞BEL-7402中MR的表达水平明显高于肝癌细胞Hep G2(P0.01)、肝细胞HL-7702(P0.01).结论:MR在肝细胞癌组织/肝癌细胞系中高表达提示可能与肝细胞癌的发生、发展及恶性程度密切相关.     

基因芯片在肝细胞癌相关基因筛选中的初步研究

目的探讨基因表达谱芯片技术在筛查肝细胞癌相关基因群表达中的作用。方法采用美国Affymetrix公司的U133A2．0基因表达谱芯片，按一步法抽提肝细胞癌及正常肝脏组织总RNA，分离纯化两种组织的mRNA；经逆转录合成掺人生物素标记的cDNA合成探针，与芯片杂交和严格洗片后，用荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像，分析肝细胞癌及正常肝组织中差异表达的基因。结果在18400条基因中，肝细胞癌组织与正常肝脏组织间有2756条（14．98％）存在差异表达的基因，其中上调基因1772条和下调基因984条，对2756条差异表达基因作了初步功能分类，这些基因与肝细胞癌的发病机制存在相关性。结论基因表达谱芯片技术可以筛选出肝细胞癌表达异常的相关基因群，对其进一步研究有助于认识肝细胞癌的发病机制。     

Hedgehog信号通路在人肝细胞癌细胞系及肝癌组织中的表达与意义

目的探讨Hedgehog信号通路在人肝细胞癌细胞系及Shh基因在肝癌组织中的表达及意义。方法采用半定量RT-PCR法检测Hep3B和HCC-LM3细胞中Shh、Ihh、Ptch、Smo、Gli mRNA及21例肝细胞癌癌组织和癌旁肝组织中Shh mRNA的表达状况。结果Shh、Ihh、Ptch、Smo、Gli mRNA在两个肝癌细胞系中均有表达。其中,Shh、Gli1 mRNA在Hep3B细胞中的表达强度显著高于HCC-LM3细胞,而Gli2和Gli3的表达强度正相反;Ihh、Smo mRNA在Hep3B细胞中的表达强度高于HCC-LM3细胞,但两者间无显著性差异;Ptch mRNA在两个细胞系细胞中的表达无显著性差异;Shh mRNA在肝细胞癌癌组织中的阳性检出率为57.1%（12/21）,在癌旁组织中为4.8%（1/21）,两者间有显著性差异（P〈0.05）。其中,6例高分化、8例中分化和7例低分化肝细胞癌中Shh mRNA的阳性检出率分别为83.3%（5/6）、62.5%（5/8）和28.6%（2/7）,表现为随肝细胞癌由高到低的分化而呈显著性下降的趋势（P〈0.05）;Shh mRNA的表达强度在肝细胞癌癌组织之间、癌与癌旁组织之间无显著性差异。结论Hedgehog信号通路的异常激活参与了肝细胞癌的发生发展过程,Shh mRNA在部分高中分化肝细胞癌中表达上调,这或许为探讨肝癌的发生机制、早期诊断及治疗提供了新的依据。     

DLC-1基因在肝细胞癌组织中表达的研究

目的 研究肝癌缺失基因-1（DLC-1）在人原发性肝癌组织中的表达及与肝细胞癌侵袭转移的关系。方法收集51例复旦大学附属中山医院外科手术切除的肝细胞癌及癌旁正常组织标本,用荧光定量RT-PCR方法分析组织中DLC-1基因的表达。结果在51对配对的肝细胞癌与癌旁无瘤肝组织中,前者DLC-1基因表达水平明显低于后者（P〈0．01）,且高侵袭性肝细胞癌组明显低于低侵袭性肝细胞癌组（P〈0．05）。结论DLC-1基因在HCC组织中呈低表达,其表达水平与其侵袭性高低相关。     

肝细胞癌中耐药基因的表达及意义

目的通过对肝细胞癌（HCC）中3种耐药基因MDR1、MRP、GST-π的检测,探讨肝细胞癌中耐药基因的表达特点及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测3种耐药基因在51例肝细胞癌组织和10例正常肝组织中的表达。结果 （1）MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中的表达分别为0.55±0.27、0.62±0.29、0.64±0.31,正常肝组织中的表达分别为0.23±0.10、0.25±0.07、0.26±0.12,耐药基因在肝细胞癌中的表达高于正常肝组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）;（2）耐药基因的表达与肿瘤Edmondson分级呈正相关（P〈0.05）;（3）MRP与GST-π的表达相关。结论肝细胞癌中存在有原发性耐药的现象,且多种机制并存。MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中有较高的表达。联合检测对制定科学有效的治疗方案有一定价值。     

胃癌HOXB6基因异常甲基化及其表达

目的 检测胃癌组织中HOXB6基因是否存在异常甲基化，并探讨其与基因表达及临床因素的关系。方法 用联合重硫酸盐限制性分析法（COBRA法）对7种胃癌细胞系和73例胃癌中层得的胃镜下活检组织进行HOXB6基因的甲基化定量检测，并采用逆转录聚合酶链反应方法检测基因的表达及脱甲基化处理后基因的再表达，结果 7种胃癌细胞系中有4种异常甲基化，异常甲基化的细胞系基因表达减少或消失，并且脱甲基化处理后基因可以重新表达，73例胃癌患者的癌部位和非癌部位的活检组织中，20例癌组织甲基化阳性（27.40%)，而非癌组织中无1例阳性。结论 胃癌中HOXB6基因的异常甲基化与基因表达抑制密切相关。并且脱甲基化后基因可以再表达；胃癌组织中HOXB6基因异常甲基化具有高度特异性，可作为肿瘤标志物用于临床诊断。     

基于多数据库联合挖掘研究PTP4A3的表达对肝细胞癌发生发展的影响

目的通过多数据库联合挖掘探索PTP4A3在肝细胞癌发生发展中的作用。方法基于Oncomine及癌症和肿瘤基因图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库联合数据分析PTP4A3在肝细胞癌组织和正常组织中的表达水平;通过Human Protein Atlas数据库,进一步研究PTP4A3在肝细胞癌和正常组织中的表达;同时基于Kaplan-Meier Plotter数据库进一步分析PTP4A3表达水平与肝细胞癌预后的关系。结果基于Oncomine数据库分析PTP4A3在肝细胞癌中高表达的研究有1项,低表达的0项。涉及PTP4A3在肝细胞癌组织和正常组织中转录水平的5项研究中,共包括768个样本,与正常组织相比,PTP4A3在肝细胞癌组织中高表达(P=1.06×10~(-5))。基于TCGA数据库(正常组50例,肝细胞癌组371例),PTP4A3在肝细胞癌组织中显著高表达(P 0.0001)。在Human Protein Atlas数据库的免疫组织化学数据中,相对于正常肝组织,PTP4A3在肝细胞癌中显著高表达。Kaplan-Meier Plotter数据库(n=364)分析显示,PTP4A3的mRNA表达量与肝细胞癌患者总体生存率存在相关性,即高表达PTP4A3的患者总体生存率较低,预后较差(P=0.049)。结论数据库挖掘显示PTP4A3基因具有促进肝细胞癌发生发展的作用,是肝细胞癌的关键基因之一,为以PTP4A3作为肝细胞癌药物靶点研究和治疗提供基础。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP