脂欣康胶囊抗载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成作用

为观察脂欣康胶囊对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠动脉粥样硬化 (As)的影响 ,将 6周龄ApoE基因敲除小鼠随机分为模型组与脂欣康组 ,相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠为正常对照组。脂欣康组灌服脂欣康胶囊内之药粉 ,模型组、正常对照组均灌服生理盐水。连续灌胃 14周后 ,用 10 %福尔马林灌注后 ,取主动脉做形态学观察及图像分析。结果表明 ,正常对照组主动脉壁正常 ,无As病灶。模型组动脉粥样硬化 (As)病变显著 ,多为粥样硬化期病灶 ,可见由大量泡沫细胞形成的脂纹脂斑期病变 ,也可见由大量泡沫细胞及胆固醇结晶形成的粥样斑块期病灶。脂欣康组As病变较模型组明显减轻 ,多为早期粥样硬化 ,斑块面积显著小于模型组 ,P <0 .0 5。结果提示脂欣康有减轻ApoE基因敲除小鼠As的作用。     

硫化氢抑制apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化中ICAM-1的表达

目的　探讨硫化氢(H2S)对apoE基因敲除小鼠(apoE-/-小鼠)动脉粥样硬化中细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)的调节作用。方法　6周龄雄性C57BL/6J和apoE-/-小鼠分为C57BL/6对照组、apoE-/-组、apoE-/-+硫氢化钠(NaHS)组和apoE-/-+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组各8只,普通饮食饲养10周。硫电极法测定血清中H2S的含量;ELISA法测定血清中ICAM-1的含量;荧光实时定量RT-PCR法测定主动脉组织中ICAM-1 mRNA的表达。油红O染色观察小鼠主动脉根部斑块面积的变化。结果 与C57BL/6J小鼠相比,apoE-/-小鼠血清中H2S的含量明显下降(P 0.01),血清中ICAM-1的含量和主动脉组织中ICAM-1 mRNA的表达明显升高(P 0.01),主动脉根部出现明显斑块;给予NaHS后,apoE-/-小鼠血清中H2S的含量明显升高(P 0.05),血清和主动脉组织中ICAM-1的表达明显降低(P 0.01和P 0.05),动脉粥样斑块明显缩小(P 0.05);给予PPG后,apoE-/-小鼠血清中H2S的含量明显降低(P 0.05),血清和主动脉组织中ICAM-1的表达明显增高(P 0.05和P 0.01),动脉粥样斑块明显增大(P 0.01)。结论　气体信号分子H2S可明显抑制动脉粥样斑块形成过程中ICAM-1的表达与分泌。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与尿激酶型纤溶酶原激活物在载脂蛋白E 敲除大鼠动脉粥样硬化斑块表达的意义及相关性*

目的：探究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（ EMMPRIN）与尿激酶型纤溶酶原激活物（ μPA）在载脂蛋 白E 基因（ ApoE）敲除大鼠动脉粥样硬化斑块表达意义及相关性。方法：选择ApoE 敲除大鼠,将其分为对照组 与高脂饮食组,对照组大鼠实施正常饮食喂养,高脂饮食组实施高脂饮食喂养,并分别于喂养的第6、10、14、 18 周处死部分大鼠,采用H-E 染色观测动脉粥样硬化斑块形态, 免疫印迹及RT-PCR 检测主动脉粥样硬化斑块内 EMMPRIN和μPA 的表达及其mRNA表达,并实施组间比较。结果：高脂饮食组大鼠动脉出现明显动脉粥样硬化 斑块,且随着时间的推进,逐渐加重,而对照组大鼠并未出现明显的动脉粥样硬化斑块;喂养第6、10、14、18 周时高脂饮食组大鼠主动脉内EMMPRIN和μPA 的表达及其mRNA表达均明显高于对照组;EMMPRIN与μPA 表 达呈正相关。结论： EMMPRIN与μPA 在动脉粥样斑块中的表达水平呈正相关关系,两者可能参与动脉粥样硬化 斑块的形成并发挥促进作用。     

南蛇藤素对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达、巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响

目的:探讨南蛇藤素对高脂饲养ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-)主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达、巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响。方法:8周龄雄性ApoE-/-小鼠12只,随机分为南蛇藤素组或二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组,每组各6只。均给以高脂饲养8周,在高脂饲养的后4周,分别给予南蛇藤素2 mg·kg-1·d-1或相当剂量的DMSO腹腔注射(ip)4周。麻醉处死小鼠后,取小鼠主动脉,以石蜡包埋,行主动脉根部连续切片.。免疫组化法检测主动脉粥样硬化斑块内CD40配体、CD68和平滑肌α-actin表达水平,以Image Pro Plus 6.0软件进行图像分析。结果:与对照组相比,南蛇藤素组主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达显著减少(P＜0.05);巨噬细胞的阳性率显著降低(P＜0.05);而两组间动脉粥样硬化斑块内平滑肌细胞的阳性率没有显著差异(P＞0.05)。结论:南蛇藤素可能通过减少ApoE-/-小鼠粥样斑块内CD40配体的表达和巨噬细胞的聚集,抑制动脉粥样硬化斑块中炎症反应,而发挥稳定动脉粥样硬化斑块的作用。     

南蛇藤素对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块内CIMO配体表达、巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响

目的：探讨南蛇藤素对高脂饲养ApoE基因敲除小鼠（ApoE^-/-）主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达、巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响。方法：8周龄雄性ApoE^-/-小鼠12只,随机分为南蛇藤素组或二甲基亚砜（DMSO）溶剂对照组,每组各6只。均给以高脂饲养8周,在高脂饲养的后4周,分别给予南蛇藤素2mg&#183;kg^-1&#183;d^-1或相当剂量的DMSO腹腔注射（ip）4周。麻醉处死小鼠后,取小鼠主动脉,以石蜡包埋,行主动脉根部连续切片。免疫组化法检测主动脉粥样硬化斑块内CD40配体、CD68和平滑肌α-actin表达水平,以Image ProPlus6．0软件进行图像分析。结果：与对照组相比,南蛇藤素组主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达显著减少（P〈0．05）;巨噬细胞的阳性率显著降低（P〈0．05）;而两组问动脉粥样硬化斑块内平滑肌细胞的阳性率没有显著差异（P〉0．05）。结论：南蛇藤素可能通过减少ApoE^-/-小鼠粥样斑块内CD40配体的表达和巨噬细胞的聚集,抑制动脉粥样硬化斑块中炎症反应,而发挥稳定动脉粥样硬化斑块的作用。     

虎杖配伍山楂抗动脉粥样硬化易损斑块病变的机制研究

目的:观察解毒中药虎杖配伍活血中药山楂对载脂蛋白E基因敲除小鼠[ApoE(-/-)小鼠]病理形态的影响和炎症因子的变化,以探讨中药虎杖配伍山楂改善动脉粥样硬化(AS)易损斑块病变的可能调控机制。方法:将高脂饲养的ApoE(-/-)小鼠分为虎杖组、山楂组、虎杖加山楂配伍组、血脂康组、高脂饲料模型组,并设ApoE(-/-)小鼠普通饲料对照组和C57BL/6J小鼠普通饲料对照组,共分7组,每组12只小鼠。连续灌胃给药17周,取血检测炎症因子超敏C反应蛋白(hs-CRP);取主动脉,光镜观察组织结构;免疫组织化学法检测核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果:高脂饲养各组小鼠及普通饲料模型组小鼠主动脉均可见不同程度的AS病理改变。各治疗组给予虎杖、山楂、虎杖加山楂配伍、血脂康后均能减轻小鼠主动脉病变情况。高脂饲料模型组血清NF-κB和hs-CRP水平均显著高于正常对照组和普通饲料组;各给药组均能明显降低NF-κB和hs-CRP表达水平,与高脂模型组相比差异显著(P0.01),其中以虎杖加山楂配伍组降低最明显。结论:虎杖加山楂配伍可能通过降低NF-κB和hs-CRP表达,发挥抗AS的形成、发展和稳定易损斑块的作用。     

阿托伐他汀对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变中TRPC5表达的影响

目的:观察载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中血管平滑肌细胞瞬时受体电位通道5(TRPC5)蛋白的表达变化,以及阿托伐他汀药物干预对TRPC5的影响并探讨其作用机制。方法:将40只6周龄雄性Apo E-/-小鼠随机分为模型组和他汀干预组,高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化模型。他汀干预组给予阿托伐他汀(20 mg·kg-1·d-1)灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。20只同龄雄性野生型C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养作为正常对照组。各组小鼠分别喂养至20和30周龄,分别取10只取血并处死。取主动脉根部做石蜡切片行HE染色形态学观察,测量并计算斑块相对面积;免疫组织化学染色检测各组小鼠TRPC5蛋白表达变化。取胸腹段主动脉行实时荧光定量PCR,检测主动脉中TRPC5通道蛋白mRNA的表达水平。结果:与模型组相比,阿托伐他汀干预组的血脂明显下降,斑块总面积明显减小,TRPC5蛋白水平及mRNA含量明显下降;30周龄模型组的TRPC5蛋白表达稍高于20周龄模型组,但差异无统计学意义;30周干预组较20周干预组相比,TRPC5水平有降低趋势且差异有统计学意义。结论:阿托伐他汀可能通过下调TRPC5蛋白表达从而延缓动脉粥样硬化进程。     

扫描电镜观察脂欣康胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化主动脉内膜超微结构的影响

为观察扫描电镜下脂欣康胶囊对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠动脉粥样硬化(As)主动脉内膜超微结构的影响，随机将6周龄ApoE基因敲除小鼠分为模型组与脂欣康组，以有相同遗传背景的同龄正常C57BL／6J小鼠为正常对照组。脂欣康组灌服脂欣康粉剂，模型组、正常对照组均灌服生理盐水。连续灌胃14周后，取新鲜的主动脉用2．5％戊二醛固定，扫描电镜观察并拍照。结果表明，模型组主动脉内膜病变显著且多样化，脂欣康组对主动脉内膜超微结构有良好的修复和保护作用。     

丹参多酚酸盐对ApoE基因敲除小鼠血清TNF-α的影响

目的:观察中药丹参多酚酸盐(salvianolate)对C57BL/6JApoE基因敲除小鼠血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的影响,以探讨其抗动脉粥样硬化的可能机制.方法:给8周龄雄性C57BL/6J ApoE基因敲除小鼠喂食高脂饮食,腹腔注射丹参多酚酸盐,随机将其分为模型组(仅腹腔注射生理盐水)、丹参多酚酸盐低剂量(60mg/kg)组、中剂量(120mg/kg)组、高剂量(240mg/kg)组,每组12只,共50只;正常对照组(即C57BL/6J野生型小鼠)10只.32周末时处死各组小鼠,留取血清,采用放射免疫分析检测各组小鼠血清TNF-α水平.结果:32周末时,随丹参多酚酸盐剂量的增加,ApoE基因敲除小鼠血清TNF-α浓度逐渐降低,丹参多酚酸盐各剂量组血清TNF-α水平均明显低于模型组(P均＜0.01);丹参多酚酸盐低剂量组与正常对照组比较,无统计学意义(P＞0.05),余两组与正常组比较,有明显统计学意义(P均＜0.01);丹参多酚酸盐各浓度组之间亦有明显差异(P均＜0.01).结论:各剂量组丹参多酚酸盐均能够降低ApoE基因敲除小鼠血清TNF-α水平,随剂量增加,减低越明显,说明丹参多酚酸盐能够抑制动脉粥样硬化炎症反应,可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一.     

瞬时受体电位通道(TRPV1)在热性惊厥中的作用及其机制研究

<正>目的:通过分析C57BL/6野生型小鼠和TRPV1基因敲除鼠热性惊厥行为学、脑内炎性因子表达变化,探讨TRPV1对热性惊厥发生及复发的致病机制。方法:高热诱导C57BL/6野生型小鼠和TRPV1基因敲除鼠热性惊厥后:比较两组间热性惊厥行为学、脑电图及核心温度的差异;ELISA检测两组间大脑及经辣椒素和高热处理后BV2细胞中炎性因子的表达差异。结果:     

载脂蛋白E在ABCA1和ABCG1介导的胆固醇流出中的作用

目的:探讨载脂蛋白E(ApoE)在ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)介导的胆固醇流出中的作用及可能机制。方法:将RAW264.7细胞随机分为3组:空白对照组:用单纯培养基培养;低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLr^-/-)组:用20mg/LLDLr^-/-小鼠脂蛋白处理细胞;ApoE基因敲除(ApoE^-/-)组:用20mg/LApoE^-/-小鼠脂蛋白处理细胞。采用透射电镜和酶法检测细胞内脂质含量,用液闪仪技术检测胆固醇流出变化,用免疫印迹技术和实时定量PCR技术检测ABCA1和ABCG1的表达水平。结果:与对照组相比,LDLr^-/-小鼠脂蛋白处理后细胞内脂质含量并未明显改变,而ApoE^-/-小鼠脂蛋白处理48h后,细胞内胆固醇酯增加了60%;同时,与LDLr^-/-小鼠脂蛋白处理组相比,用ApoE^-/-小鼠脂蛋白处理后,巨噬细胞胆固醇流出至载脂蛋白A-I(ApoA-I)和高密度脂蛋白(HDL)的量均明显降低。与对照组相比,LDLr^-/-小鼠脂蛋白和ApoE^-/-小鼠脂蛋白处理显著增加ABCA1和ABCG1的蛋白和mRNA水平,但是ApoE^-/-小鼠脂蛋白对ABCA1和ABCG1蛋白和mRNA水平的诱导程度明显低于LDLr^-/-小鼠脂蛋白。结论:ApoE在介导巨噬细胞胆固醇流出中发挥重要作用,该作用与其调节ABCA1和ABCG1的表达水平有关。     

Differential expression of cysteine and aspartic proteases during progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice

Several groups of proteolytic enzymes are able to degrade components of the extracellular matrix. During atherosclerosis, matrix remodeling is believed to influence the migration and proliferation of cells within the plaque. In the present study, gene expression of several proteases and their inhibitors was analyzed during the development of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient (ApoE-/-) mice. Quantitative real-time polymerase chain reaction was used to study gene expression of proteases after 10 and 20 weeks in ApoE-/- and C57BL/6 mice and in atherosclerotic lesions and nonaffected regions of the same ApoE-/- mouse. Some of the differentially expressed proteolytic enzymes were studied by immunohistochemistry. The matrix metalloproteinase (MMP)-9 and its inhibitor TIMP-1 were differentially expressed and the expression increased with time. Urokinase-type plasminogen activator showed no major expression. In contrast, cathepsins B, D, L, and S all showed strong and increased expression in ApoE-/- mice compared to C57BL/6 mice whereas the expression of their inhibitor, cystatin C, did not differ between the two mouse strains. The expression of cathepsins was mainly localized to the lesions and not to nonaffected regions of the aorta of ApoE-/- mice. Furthermore, cathepsin expression was similar to the expression of the macrophage marker macrosialin (CD68) although expression of cathepsins B, D, and L could be demonstrated in healthy C57BL/6 mice and in nonaffected vessel segments of atherosclerotic ApoE-/- mice. Cathepsin S mRNA expression was restricted to lesions of ApoE-/- mice. Furthermore, cathepsin S was the only cathepsin that was expressed in the media and absent in lipid-rich regions. All cathepsins studied showed intimal expression, the degree and localization of which differed between individual cathepsins. In conclusion, increased expression of several cathepsins in atherosclerotic lesions suggests that these proteases may participate in the remodeling of extracellular matrix associated with the atherosclerotic process.     

ApoE^-/-母体孕期高脂高胆固醇饮食对子代成年鼠动脉粥样硬化的影响

目的研究母体孕期高脂高胆固醇饮食对子代成年鼠动脉粥样硬化的发生影响。方法ApoE^-/-孕鼠分为高脂高胆固醇饮食组（G组）和普通饮食组（P组）,G组雄性子代成年鼠分为高脂高胆固醇饮食组（G—G）和普通饮食组（G—P）,P组子代雄性成年鼠继续喂养普通饲料（P—P）,60d后检测子代成年鼠总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）浓度,HE染色观察血管形态学变化及动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）斑块形成情况。结果G—G组和G—P组的TC、TG、LDL和HDL浓度较P—P组明显升高,且与P—P组相比Tc浓度存在显著性差异（P〈0．05）,TG、LDL和HDL浓度存在极显著性差异（P〈0．01）;P—P组无AS斑块形成,G—G组与G．P组均有AS斑块形成,前者斑块形成率及斑块面积与血管管腔面积之比（PA／LA）都高于后者,两组PA／LA存在极显著性差异（P〈0．01）。结论母体孕期高脂高胆固醇饮食对子代成年鼠动脉粥样硬化的发生具有重要影响。     

高脂血症对大鼠肾脏内质网应激的影响及辛伐他汀的干预作用

目的： 探讨内质网应激在高脂血症引起的肾脏损伤中的作用及辛伐他汀的干预作用。方法: 30只雄性Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组（n=10）给予普通饲料喂养;高脂组（n=10）给予高脂饲料喂养;辛伐他汀组（n=10）在高脂饲料喂养的基础上给予辛伐他汀10 mg·kg-1·d-1灌胃。18周后检测大鼠24 h尿蛋白及血清胆固醇、甘油三酯水平。光镜观察大鼠肾组织病理改变。免疫组化方法检测大鼠肾脏GRP78、p-JNK的表达。TUNEL检测肾组织凋亡细胞。RT-PCR检测肾组织GRP78 mRNA、CHOP mRNA的表达。结果: 18周时,高脂组大鼠24 h尿蛋白、血脂水平、GRP78及p-JNK蛋白的表达、GRP78及CHOP mRNA的表达、肾组织凋亡细胞均高于正常对照组（P<0.01）; 辛伐他汀组上述改变显著低于高脂组（均P<0.05）。结论: 内质网应激参与了高脂血症引起的肾脏损伤,辛伐他汀可以通过抑制肾脏的内质网应激反应而起肾脏保护作用。     

FOXP3基因对ApoE-knockout小鼠动脉粥样硬化的影响

目的:研究FOXP3对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法:构建FOXP3-siRNA慢病毒载体,免疫磁珠分选Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞。利用Westernblot方法对构建的载体进行功能性研究。实验动物分为阴性对照组、阳性对照组、FOXP3-siRNA慢病毒注射组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组。比较各组小鼠的斑块面积和不同组织Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目和功能;利用ELISA法检测各组脾细胞炎性因子浓度;利用RT-PCR和Westernblot分析不同组织中FOXP3转录水平和Foxp3蛋白表达水平。结果:与对照组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组比较,FOXP3-siRNA慢病毒注射组小鼠斑块面积明显增加(P<0.05);Foxp3+ CD4+ CD25+Treg细胞的数目显著减少(P<0.05),功能下降;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平降低(P<0.05)。与对照组和FOXP3-siRNA慢病毒注射组比较,输注Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞组斑块面积显著减小(P<0.01);Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目显著增加(P<0.01),功能增强;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平增高(P<0.01)。结论:FOXP3可能通过调控体内炎症反应而产生抗动脉粥样硬化作用。     

高脂高胆固醇饮食对3基因突变小鼠动脉粥样硬化性病变的影响

目的： 探讨高脂高胆固醇饮食性因素对3个脂代谢相关基因突变小鼠血脂代谢及动脉内膜损伤的影响。方法：分析高脂高胆固醇饮食喂养的3基因突变（ApoE-/-/LDLR-/-/Leprdb/db）小鼠血脂、血糖水平和主动脉内膜病变的特点。结果：高脂高胆固醇饮食喂养的3基因突变小鼠血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和血糖水平均显著高于普通饮食组。该饮食喂养2周和5周龄小鼠血浆TC、TG的浓度分别达(106.75±3.40) mmol/L和(9.12±1.35) mmol/L,高出普通饮食组4.33和2.36倍。主动脉内膜出现灶状内皮肿胀、脱落、单核/淋巴细胞黏附以及泡沫细胞形成。随喂养周数的增加出现内弹力板排列不整、部分断裂、内皮和平滑肌细胞内脂质沉积,并发生内膜增生型病变增多、范围扩大。血脂紊乱的加重与动脉内膜的损伤呈正相关。高脂高胆固醇饮食组小鼠的血脂紊乱和动脉内膜损伤均较普通饮食组严重,并伴有明显的肝细胞脂肪病变。结论：高脂高胆固醇饮食促进了3基因突变小鼠血脂代谢紊乱及主动脉内膜损伤的发生,提前并加重了动脉粥样硬化性病变的发生发展。     

HSP60通过Toll样受体对ApoE~(-/-)小鼠树突状细胞功能影响研究

目的:探讨HSP60通过Toll样受体(TLR)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导在体外对ApoE-/-小鼠树突状细胞(mDC)的功能影响。方法:将ApoE-/-小鼠构建动脉粥样硬化模型后,从骨髓提取DC,体外培养成熟后分三组:HSP组、LPS组及对照组,分别与HSP60、LPS及生理盐水孵育后,应用流式细胞仪检测细胞表面TLR及CD80水平,RT-PCR检测TLR的mRNA水平,免疫印迹法检测MAPK家族中p38及ERK水平;上清液用ELISA法检测IL-6及TNF-α水平。结果:与对照组比较,HSP组中DC表达TLR及MAPK家族水平、成熟标记物CD80水平、分泌IL-6及TNF-α水平均明显升高(P0.01);但与LPS组比较则无显著差异(P0.05)。结论:HSP60通过TLR介导MAPK信号转导参与动脉粥样硬化模型mDC的活化过程。     

以大黄素为声敏剂介导声动力疗法对小鼠 动脉粥样硬化治疗作用的研究

目的 探讨以大黄素为声敏剂介导声动力疗法对小鼠动脉粥样硬化治疗作用。方法 高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠发生动脉粥样硬化。将50只ApoE-/-小鼠分为不做任何处理的模型对照组、以5-氨基酮戊酸介导的阳性对照组、大黄素高、中、低剂量介导SDT组,每组 10只。除模型组外,其余各组自高脂4周起,分别进行相应的声动力治疗,隔天1次,于12周处死小鼠。取心脏,制备切片,通过油红染色检测斑块大小。取主动脉,进行荧光定量PCR检测基质金属蛋白酶TMP-2、TMP-9和TIMP-1,分析对斑块稳定性的影响。同样检测细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-10和TGF-β,分析对炎症的影响。结果 大黄素介导声动力疗法能减轻动脉粥样硬化斑块大小;显著增加TIMP-1而降低TMP-2和TMP-9在主动脉的表达。显著降低促炎性细胞因子TNF-α和IFN-γ而增加抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β在主动脉局部的表达。结论 大黄素介导声动力疗法可能通过降低炎症反应发挥抗动脉粥样硬化作用,该方法对于动脉粥样硬化的治疗具有积极意义。     

小檗碱激活巨噬细胞自噬并改善动脉粥样硬化斑块脆弱性

目的探索小檗碱(BBR)对高糖及高脂引起的动脉粥样硬化斑块脆弱性的影响,并进行初步的机制研究。方法将雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为对照组、高糖组[腹腔注射链脲佐菌素(STZ)45 mg/(kg·d),连续5 d]和高脂组[高脂饮食(HFD)];造模2周后,高糖组随机取10只小鼠组成药物预防组[灌胃,BBR 50 mg/(kg·d)];造模4周后,高糖组随机分为模型(STZ)组(灌胃,溶剂)、BBR 25、50、100(STZ)组[灌胃,BBR分别25、50、100 mg/(kg·d)]、阿托伐他汀组[灌胃,2.5 mg/(kg·d)]、恩格列净组[灌胃,1.25 mg/(kg·d)],高脂组随机分为模型(HFD)组(灌胃,溶剂)、BBR50(HFD)组[灌胃,BBR 50 mg/(kg·d)];6周后,取小鼠主动脉进行病理切片染色及免疫组织学检测,评估动脉粥样硬化病变情况及斑块脆弱性指数。以佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系Thp1分化为巨噬细胞,研究小檗碱对自噬和炎性反应信号通路的影响;采用Western blot检测小鼠主动脉及细胞中MIF、NLRP3、AMPK/mTOR信号通路及自噬相关蛋白表达;ELISA检测血清及细胞上清液中IL-1β的水平。结果与对照组相比,高糖及高脂组动物有典型的动脉粥样硬化病变,且斑块脆弱性指数明显升高,给予小檗碱治疗后,斑块面积减小,脆弱性指数显著下降(P<0.05);小檗碱下调小鼠主动脉组织和Thp1细胞中MIF蛋白的表达,促进AMPK的活化,抑制mTOR磷酸化,促进自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达比例升高、SQSTM1/P62表达降低,下调炎性体NLRP3及IL-1β的表达。结论小檗碱能够减轻高糖及高脂引起的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块沉积并改善斑块的脆弱性,其机制可能与下调MIF的蛋白表达,以及通过AMPK/mTOR信号通路促进巨噬细胞自噬进而抑制炎性反应有关。     

Effects of Smad decoy ODN on shear stress-induced atherosclerotic ApoE-/-mouse

Atherosclerosis is a complex disease which involves both genetic and environmental factors in its development and progression. Shear stress is the drag force per unit area acting on the endothelium as a result of blood flow, and it plays a critical role in plaque location and progression. TGF-β1 is often regarded to have pro-atherosclerotic effect on vascular disease. TGF-β1 downstream targets Smad, for regulating a set of genes associated with atherosclerosis. Therefore, modulation of TGF-β1 and Smad expression may be the important targets for the prevention and treatment of shear stress-induced vascular disease. However, the precise mechanism of the anti-atherosclerotic effects of novel therapeutic approach has not been elucidated by using animal models regarding the shear stress-induced vascular disease. Therefore, we designed to test whether Smad decoy ODN would prevent the development of atherosclerosis in the shear stress-induced ApoE-/-mice on a western diet. We examined the effect of cast placement on the development of atherosclerosis, and the carotid artery was harvested at the sacrifice to observe histological changes. Also, we evaluated the impact of Smad decoy ODN in the regulation of genes expression related to atherosclerosis, including TGF-β1, PAI-1, and α-SMA. Our results showed that western diet with cast placement developed atherosclerosis in ApoE-/-mouse. Also, administration of Smad decoy ODN decreases the expression of TGF-β1, PAI-1, and α-SMA. These results demonstrate the potential of Smad decoy ODN to prevent the progression of atherosclerosis in ApoE-/-mouse model with western diet and shear stress.