DMOG稳定缺血/再灌注心肌组织低氧诱导因子-1α表达时间规律的研究*

目的 观察二甲氧乙二酰甘氨酸（DMOG）预处理对大鼠缺血再灌注（I/R）心肌组织中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响,探讨DMOG稳定HIF-1α表达的时间规律。方法 雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham组）、心肌缺血再灌注组（MI/R组）、DMOG+MI/R组、YC-1+MI/R组（YC-1为HIF-1α抑制剂）。建立心肌缺血/再灌注模型,心肌缺血45 min,再灌注0 h、3 h、6 h、9 h四个时间点。留取心脏左室前壁标本,分别采用Western blot和Real-time PCR法检测心肌组织中HIF-1α 的蛋白与mRNA表达水平。结果 ①再灌注相同时间点,D+MI/R组的HIF-1α蛋白表达量均明显高于MI/R组;在观察时间内,D+MI/R组的HIF-1α蛋白表达量呈现出先增高、后降低的趋势,并且在再灌注3h时达峰值（P<0.05）。②HIF-1α的mRNA表达量在不同组间及再灌注各个时间点均无明显差异（P?0.05）。结论 DMOG预处理能够稳定心肌I/R时HIF-1α的蛋白表达量,峰值出现于再灌注3h,而对HIF-1α的mRNA表达量无明显影响,表明这种作用主要发生于蛋白合成过程,而非基因转录水平。     

作者单位：030001山西省太原市 山西医科大学基础医学院生理学系,细胞生理学山西省重点实验室通讯作者：贺忠梅,E-mail：hezmei@126.com

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)稳定表达对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡的影响及可能机制。方法 采用结扎冠脉左前降支45min,再灌注3h的方法,构建大鼠心肌缺血再灌注损伤模型;实验分为假手术组(Sham)、心肌缺血/再灌注组(MI/R)、HIF-1α活化剂DMOG 心肌缺血/再灌注组(D MI/R)、HIF-1α抑制剂YC-1 心肌缺血/再灌注组(YC-1 MI/R);采用全自动生化分析仪测定血清心肌酶(CK-MB,LDH)活性;Western blot检测心脏组织HIF-1α蛋白表达;Evens blue/TTC染色测定心肌梗死面积;TUNEL染色及Caspase-3,8,9活性测定心肌细胞凋亡。结果 (1)与MI/R 组相比,D MI/R 组的HIF-1α蛋白表达量明显增加,心肌酶CK-MB、LDH的活性降低,心肌梗死面积明显减小,并且心肌组织的病理损伤减轻;(2)稳定HIF-1α表达可明显降低心肌细胞凋亡率,且部分逆转了缺血再灌注后心肌组织Caspase-9与Caspase-3的活性升高。结论 HIF-1α稳定表达可抑制线粒体途径介导的心肌细胞凋亡,从而发挥对缺血再灌注损伤的心脏保护效应。     

胡黄连苦苷Ⅱ在心肌缺血再灌注损伤中的保护作用及机制

目的:探讨胡黄连苦苷Ⅱ(picroside-Ⅱ,P-Ⅱ)对心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的保护作用及其对TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、缺血再灌注组(I/R组)、胡黄连苦苷Ⅱ+缺血再灌注组(P-Ⅱ+I/R组)。P-Ⅱ+I/R组术前30min给予胡黄连苦苷Ⅱ(25mg/kg)尾静脉注射。除SO组外,其余2组大鼠均行冠状动脉左前降支结扎30min再灌注4h,建立心肌I/R损伤模型;使用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的水平;HE染色观察心肌组织病理改变;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡并计算凋亡率;蛋白免疫印迹法检测TLR4、NF-κB及IL-6和TNF-α的表达。结果:胡黄连苦苷Ⅱ预处理可显著降低LDH和CK的水平及心肌细胞凋亡率,差异有统计学意义(P0.05);同时,缺血再灌注损伤中明显上调的TLR4、NF-κB以及IL-6、TNF-α蛋白表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:胡黄连苦苷Ⅱ能够减轻大鼠心肌I/R损伤,这种保护作用可能与其抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路密切相关。     

小鼠心肌I/R模型中HIF-1α对IL-2的表达调控作用及其机制研究

目的 探究小鼠心肌细胞的缺血/再灌注（I/R）模型中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对白细胞介素-2(IL-2)的表达调控作用和作用机制。方法 将60只小鼠随机分为对照组、I/R组、I/R+HIF-1α组和I/R+siHIF-1α组四组（每组各15例）。采用经典结扎法构建I/R模型,尾静脉注射HIF-1α过表达或siHIF-1α质粒（2 mg/kg）。注射等量阴性对照质粒作为对照。2周后检测各组小鼠的HIF-1α蛋白、心肌损伤指标、心肌梗死面积、细胞凋亡、IL-2、VEGF mRNA和蛋白的水平。结果 四组小鼠的上述指标比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。I/R组的HIF-1α蛋白、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白T(cTnT)、心肌梗死面积、凋亡指数、IL-2和VEGF mRNA和蛋白的水平,显著高于对照组（P<0.05）。I/R+HIF-1α组的HIF-1α蛋白、IL-2、VEGF mRNA和蛋白的水平显著高于I/R组,CKMB、cTnT、梗死百分比、凋亡指数显著低于I/R组（P<0.05）。I/R+siHIF-1α组的HIF-1α蛋白、IL-2、V...     

心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤及其与核因子-κB的关系

目的:研究心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤现象及其与核因子(NF)-κB的关系。方法:32只家兔随机分为4组(每组8只):假手术组(S组)、持续缺血组(I组)、晚期再灌注组(I/R组)、PDTC干预组(P组),建立体内心肌缺血再灌注动物模型。S组冠状动脉旷置6h,I组冠状动脉持续结扎6h,I/R组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,P组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,并于再灌注前10min静脉注入PDTC(200mg/kg)。6h后处死动物取心脏组织分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽还原酶(GR)含量,免疫组化指标NF-κB、IκBα,凋亡指数(AI)。结果:与S组相比,I/R组、P组和I组的SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;I/R组与I组相比,SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;P组与I/R组相比SOD、GR、IκBα升高,MDA、NF-κB、AI降低;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:心肌缺血晚期再灌注可导致梗死边缘区心肌细胞凋亡增加,提示存在再灌注损伤现象。氧化应激增强、NF-κB的过度激活可能是导致晚期再灌注损伤的重要因素。     

大蒜素通过调节Bcl-2,Bax及NF-κB表达而抑制大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡(英文)

目的:探讨大蒜素预处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用、对心肌细胞凋亡的影响及Bcl-2,Bax,NF-κB是否参与抗凋亡作用。方法:建立大鼠在体心肌I/R损伤模型,将48只大鼠随机分为正常对照(Con)组、I/R组和大蒜素预处理(AP)组;各组均测定心肌梗死范围[IS/AAR(%),TTC法]、再灌注后血清肌酸磷酸肌酶同工酶MB(CK-MB)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并应用DNA琼脂糖凝胶电泳及TUNEL法检测各组凋亡指数(AI)、Bcl-2,Bax表达及NF-κB核结合活性。结果:AP组较I/R组IS/AAR(%)[(21.8±1.5)%vs.(44.6±4.6)%,P0.01],CK-MB[(16.4±1.6)vs.(34.1±1.8)U/L,P0.01]明显降低,SOD[(2 337±215)vs.(1 219±187)U/mg pro,P0.01]明显增高。AP组AI较I/R组明显降低[(7.0±1.2)%vs.(4.0±3.0)%,P0.01]。Bcl-2表达明显增加,Bax表达明显减少,NF-κB核结合活性明显降低。结论:大蒜素有明显抗大鼠心肌I/R损伤作用能与抗心肌细胞凋亡有关,对Bcl-2,Bax及NF-κB表达的调控起重要作用。     

诱导型一氧化氮合酶对二甲氧乙二酰甘氨酸预处理晚期肾保护作用的影响

目的探讨脯氨酸羟化酶抑制剂二甲氧乙二酰甘氨酸(DMOG)预处理对小鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)的晚期保护作用以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在此过程中的作用。方法 24只雄性C57/BL小鼠随机分为4组:假手术(sham)组、IRI组、DMOG预处理组(DMOG+IRI)和GW274150干预组(GW274150+DMOG+IRI)。采用夹闭双侧肾蒂30min再灌注24h方法建立小鼠肾IRI模型。观察DMOG预处理及特异性iNOS抑制剂GW274150干预对小鼠肾功能、肾组织病理和细胞凋亡的影响;并应用Westernblot方法检测低氧诱导因子(HIF-1α)和iNOS蛋白的表达。结果 DMOG预处理组小鼠肾功能、肾组织病理学和肾组织细胞凋亡程度均较IRI组显著改善,GW274150干预可使以上作用明显减弱。结论 DMOG预处理对IRI产生晚期肾保护作用,iNOS抑制剂可削弱这种保护性影响,意味着iNOS参与了HIF-1α活化引发的晚期肾保护作用。     

Toll样受体4对心肌缺血再灌注损伤中高迁移率族蛋白B1和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)对小鼠心肌缺血再灌注损伤中的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 构建缺血30 min及再灌注6h时的TLR4-基因缺陷型(C3H/HeJ)小鼠和对照组小鼠(C57BL/6J)在体心肌缺血再灌注模型.两组小鼠分别设立假手术组(Sham).免疫组织化学法检测心肌细胞HMGB1蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测心肌细胞中TNF-α mRNA的表达.结果 与C3H/HeJ sham组和C57BL/6J sham组比较,C57BL/6J I/R组和C3H/HeJ I/R组中HMGB1 (P ＜0.01)、TNF-α mRNA(P＜0.01)的表达水平均升高;与C57BL/6J I/R组比较,C3H/HeJ I/R组HMGB1 (P ＜0.01)、TNF-α (P ＜0.01)的表达水平受到抑制,而C3H/HeJ sham组和C57BL/6J sham组无显著差异(P＞0.05).结论 TLR4在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要作用,其机制可能与其配体HMGB1结合促进TNF-α分泌,介导心肌缺血再灌注损伤的炎性反应.     

黄连解毒汤对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察黄连解毒汤对在体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用SD大鼠心肌缺血再灌注模型(I/R),将56只SD大鼠随机等分为7组:假手术组、心肌缺血再灌注组、溶剂(%CMC-Na)对照组、黄连解毒汤(HLJDT)低剂量组、HLJDT中剂量组、HLJDT高剂量组,复方丹参组.连续给药7 d,末次给药24 h后,复制大鼠心肌I/R损伤模型.测定血清肌酸激酶(CK)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-1β水平,测量心肌梗死范围,取心肌组织检测 NF-κB.结果 与假手术组比较,缺血再灌注组血清TNF-α、IL-1β、CK水平明显增高(P<0.05),梗死范围明显增加(P<0.05),且NF-κB表达明显增高(P<0.05);实验组较缺血再灌注对照组的TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB水平明显降低,梗死范围明显降低(P<0.05).结论 黄连解毒汤显著缩小心肌梗死面积,降低心肌酶,减少心肌细胞内TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB蛋白的表达,发挥对缺血再灌注心肌的保护作用.     

SIRT1/TLR4/NF-κB在丹参素治疗大鼠心肌梗死的保护作用

目的 探讨SIRT1/TLR4/NF-κB在丹参素治疗大鼠心肌梗死的保护作用。方法 构建SD大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,随机分为:对照组,模型组、丹参素组(2 mg/kg)三组,每组15只。HE染色法观察心肌组织病理学改变;TTC双染法测定心肌梗死面积;免疫组织化学法检测SIRT1表达;采用Western blot法检测SIRT1、TLR4、NF-κB、Bcl-2、Caspase3蛋白的表达;ELISA法检测心肌组织IL-6和TNF-α表达。结果 丹参素组大鼠心肌凋亡数量、心肌梗死面积比模型组显著降低(P0.05)。丹参素组SIRT1表达平均光密度显著升高(P0.05)。丹参素组TLR4、NF-κB、Caspase3蛋白表达明显下降,SIRT1、Bcl-2蛋白含量表达比模型组显著上升(P0.05);丹参素组心肌组织IL-6和TNF-α表达显著下降(P0.05)。结论 丹参素可通过促进SIRT1表达,抑制TLR4/NF-κB信号通路来改善大鼠心肌梗死,对心肌起到营养和保护的作用。     

英夫利昔治疗瘘管型克罗恩病的研究进展

瘘管是克罗恩病（CD）常见的一种并发症,往往导致患者生活质量明显下降.许多临床试验证实英夫利昔对瘘管型CD安全有效.对传统治疗方案无效者,早期规律给予英夫利昔可很好地控制疾病进展和复发.对单药治疗效果不佳者,联合英夫利昔和内外科治疗可提高疗效.本文就近年英夫利昔治疗瘘管型CD的研究进展作一综述.     

大黄素诱导急性胰腺炎胰腺细胞凋亡机制的实验研究

目的 从凋亡信号传导的角度探讨中药大黄素治疗大鼠急性胰腺炎的分子生物学机制。方法 将44只雄性Wistar大鼠随机分为正常组，非治疗组，大黄素组，以腹腔注射雨蛙肽物方法诱导大鼠急性胰腺炎模型。并于大黄素治疗后6，24，48，72，96小时处死大鼠。应用HE染色比较胰腺组织病理学改变，应用Tunel法检测胰腺细胞凋亡指数，应用RT-PCR技术检测治疗前后凋亡调控基因Bak和BaxmRNA表达。结果 大黄素干预治疗急性胰腺炎后96小时淀粉酶值显低于未治疗组，胰腺细胞凋亡指数显高于未治疗组，凋亡调控基因BakmRNA的表达与未治疗组之间无显性差异。而BaxmRNA的表达显高于未治疗组。结论 大黄素治疗实验性急性胰腺炎的机制可能与干预凋亡调控基因有关。诱导凋亡调控基因Bax表达增强可能是干预凋亡信号传导的重要机制，而与Bak基因表达无关。     

苯并咪唑类药物治疗包虫病研究进展

包虫病主要是由细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的幼虫引起的严重的人兽共患寄生虫病。在我国,由于受手术复发、死亡等手术水平的限制,药物治疗仍然是目前最主要的治疗方法,每年药物治疗的数量远大于手术治疗数。药物在术前缩小病灶、减轻痛苦,延长患者寿命发挥着重要作用。本文综述苯并咪唑类药物及其新剂型的动物及临床治疗包虫病现况,为探索包虫病药物治疗研究的发展方向提供依据。     

Use of Gaming in Self-Management of Diabetes in Teens

With the growing prevalence of diabetes in teens and frequent concomitant problems with adherence, adolescents are a frequent target for diabetes self-management support and education. Due to widespread use of technology among teens in general, the use of serious games, games used for purposes beyond entertainment with the intention to educate and support health behavior for teens with diabetes self-management, is an emerging and promising practice. This report explores games intended for teens with diabetes, how the use of games may enhance clinical practice, and provides suggestions for future research and better utilization of these technologies. Current research on the use of gaming for promoting diabetes management in teens is fairly limited, with some initial support for improvements in both behavioral and clinical outcomes among teens. More research is clearly needed in order to further determine how gaming can best be utilized to impact health outcomes in these teens, as well as potential mechanisms of change.     

莫昔沙星的抗结核作用及其应用研究进展

全球结核病的疫情非常严重,尤其是耐多药结核病不断增加,WHO于20世纪90年代就一再呼吁予以重视。解决此世界性难题的首要措施就是积极落实现代结核病控制策略,亦即直接监视督导下短程化疗（DOTS）,在此基础上要研发新药,使耐多药结核病的治疗和缩短结核病疗程两个跨世纪性课题有所突破^[1]。     

2011年全国血吸虫病监测点疫情分析

目的了解2011年全国81个血吸虫病监测点疫情变化趋势。方法收集2011年全国81个血吸虫病监测点螺情、人畜病情和相关因素的调查数据,分析不同地区疫情特征及变化情况。结果2011年全国血吸虫病监测点血清学检测阳性率以及居民感染率分别为7.78%和0.54%,家畜感染率为0.97%,较2010年均有所下降。2011年81个血吸虫病监测点共查出感染性钉螺面积98.30 hm2,活螺平均密度为0.222 6只/0.1 m2,感染性钉螺平均密度为0.000 3只/0.1 m2,钉螺感染率为0.14%。有螺地带敞放家畜12 422头,比2010年上升46.99%。结论2011年全国血吸虫病监测点疫情较2010年下降不明显。仍需加大家畜传染源控制措施的实施力度。