淫羊藿活性成分促进骨细胞增殖分化研究进展

近年来以股骨头坏死为代表的各类骨伤疾病发病率呈逐年上升趋势,淫羊藿作为常用的补肾强骨中药被广泛应用于中医骨科临床并对治疗各种骨伤疾病取得了显著疗效。但淫羊藿中何种成分行使功能,是临床用药及相关药品研发亟需解决的关键问题。近年来研究发现,淫羊藿中的淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮、淫羊藿多糖以及一些微量元素均具有促进骨细胞增殖分化作用,其中淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮在分子学领域的药理机制研究取得了巨大进展,大量实验研究表明,上述成分可以通过控制骨细胞相关基因的表达、调节信号通路促进骨形成蛋白2(BMP2)以及骨保护素(OPG)蛋白的合成,在细胞因子水平解释了淫羊藿促进骨细胞增殖分化的内在机制,对于淫羊藿中含有的淫羊藿多糖及微量元素促进骨细胞增殖分化作用,研究学者只进行了验证实验,其深层次的作用机制有待进一步探究。本文以淫羊藿中主要活性成分淫羊藿苷、淫羊藿次苷、淫羊藿总黄酮、淫羊藿多糖以及一些微量元素为依据,综述各成分促进骨细胞增殖及分化作用研究进展,以期为新药研发和提高临床疗效提供一定理论参考。     

广州地区几种市售淫羊藿药材的质量分析

目的：对广州地区市场上流通的不同产地来源的淫羊藿药材所含淫羊藿苷和总黄酮的含量进行比较。方法：采用《中国药典》2000年版一部淫羊藿药材含量测定项下的方法测定淫羊藿约材所含淫羊藿苷和总黄酮的含量。结果：不同产地淫羊藿中淫羊藿苷和总黄酮的含量存在差异。结论：无论在理论上还是在实际应用上都具有一定的指导意义。     

离体大鼠肠道菌群对淫羊藿苷的代谢研究

目的：考察大鼠肠道茵群对淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的代谢情况。为研究淫羊藿苷的口服吸收机理打下基础。方法：将待测药物与新配制的大鼠肠内容物混悬液在37℃孵化,采用高效液相色谱法同时测定孵化前后溶液中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度。结果：淫羊藿苷被肠道菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ,而淫羊藿次苷Ⅱ不被代谢。结论：研究淫羊藿次苷Ⅱ的吸收和代谢机理对于研究淫羊藿苷的口服吸收机理非常有必要。     

高效液相色谱法测定贵州产淫羊藿药材不同药用部位中淫羊藿苷的含量

目的：通过测定贵州产淫羊藿药材不同药用部位中淫羊藿苷的含量,为合理开发利用贵州淫羊藿资源提供理论依据。方法：对不同种类、产地、药用部位的淫羊藿药材样品,采用HPLC法分别测定其淫羊藿苷含量。结果：16种贵州产淫羊藿药材因种类、产地、药用部位不同,其淫羊藿苷含量有较大差异。结论：贵州产部分淫羊藿的质量符合或超过中国药典（2005版）标准,为了淫羊藿资源的可持续利用,药材生产应以采收地上部分质量为好。     

离体大鼠肠道菌群对淫羊藿苷的代谢研究

目的：考察大鼠肠道菌群对淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的代谢情况，为研究淫羊藿苷的口服吸收机理打下基础。方法：将待测药物与新配制的大鼠肠内容物混悬液在37℃孵化，采用高效液相色谱法同时测定孵化前后溶液中淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度。结果：淫羊藿苷被肠道菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ，而淫羊藿次苷Ⅱ不被代谢。结论：研究淫羊藿次苷Ⅱ的吸收和代谢机理对于研究淫羊藿苷的口服吸收机理非常有必要。     

淫羊藿属主要资源种类的HPLC指纹图谱特征和种类鉴定

目的：淫羊藿的物种鉴定一直是中药材研究和应用中比较困难的问题，本实验旨在尝试建立一种淫羊藿药材物种鉴定方法。方法：对淫羊藿Epimedium brevicornu、箭叶淫羊藿E. sagittatum、柔毛淫羊藿E. pubescens、朝鲜淫羊藿E. koreanum、巫山淫羊藿E. wushanense、粗毛淫羊藿E. acuminatum、天平山淫羊藿E. myrianthum和黔岭淫羊藿E. leptorrhizum等8个淫羊藿药材主要来源物种,以及淫羊藿属的其他24个物种中黄酮类成分的HPLC指纹图谱进行了研究，提取可用于种类鉴定的特征。结果与结论：朝鲜淫羊藿具有的HPLC指纹特征，可以区别于其他物种，心叶淫羊藿、粗毛淫羊藿、天平山淫羊藿的大部分样品也具有可资鉴别的指纹特征，而柔毛淫羊藿和黔岭淫羊藿种内图谱模式相对稳定，但是难以与其他物种区别，箭叶淫羊藿和巫山淫羊藿则种内图谱变化十分复杂。本研究也展示出淫羊藿药材质量极其不稳定。     

5种淫羊藿对软骨组织生长和软骨细胞增殖影响的对比研究

目的：对比研究心叶淫羊藿、箭叶淫羊藿、朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿对软骨生长和软骨细胞增殖活性的影响。方法：以鸡胚股骨组织为研究对象,采用配对试验设计,把同一鸡胚的两个股骨组织分别分入对照组或实验组,每组共10个股骨组织。对照组股骨组织在不含中药的培养液中培养,实验组股骨组织在含3％淫羊藿提取物的培养液中培养。以软骨长度、软骨重量、软骨细胞增殖(MTT法)为指标观察5个品种淫羊藿的软骨生物活性。结果：心叶淫羊藿和箭叶淫羊藿实验组的股骨长度、股骨湿重、股骨干重及细胞增殖量指标均高于对照组(P＜0.01),而朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿实验组的股骨长度、股骨湿重、股骨干重及细胞增殖指标与对照组结果相近,差异无显著性。结论：心叶淫羊藿和箭叶淫羊藿具有明确的促进体外软骨生长和软骨细胞增殖的作用,而朝鲜淫羊藿、巫山淫羊藿和川西淫羊藿品种没有表现出这种生物活性。     

淫羊藿总黄酮精制方法的建立

目的：建立中药淫羊藿总黄酮的精制方法和质量控制标准。方法：以淫羊藿苷的含量为指标，应用止交试验设计筛选淫羊藿总黄酮的最佳精制工艺；分光光度法测定总黄酮含量。结果：分光光度法测定提取产物中主要活性成分淫羊藿总黄酮的含量平均为54％以上。结论：本研究所建立的淫羊藿总黄酮提取工艺及质量控制方法切实可行、成本低廉.     

5种淫羊藿黄酮类成分对体外培养成骨细胞的影响

目的：观察5种淫羊藿黄酮——淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B、淫羊藿定C对体外培养成骨细胞增殖、细胞基质钙及矿化结节钙的影响。方法：取新生1～3dSD大鼠头盖骨用酶消化法分离成骨细胞，第3代细胞经MTT法、甲基百里香酚蓝(MTB)比色法观察5种黄酮对体外培养成骨细胞增殖、细胞基质钙及矿化结节钙的影响。结果：淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿定C0．1—10μmol／L浓度均能显著地促进成骨细胞增殖，淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿定B0．1—10tanol／L浓度均能显著增加细胞基质钙,淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B0．1～10pmol／L浓度、淫羊藿苷lpmol／L浓度及淫羊藿定C0．1～1pmol／L浓度均能显著增加矿化结节钙。结论：淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B、淫羊藿定C具有增加细胞基质钙及促进体外培养成骨细胞增殖和矿化的作用。     

高效液相色谱法法测定不同产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量

目的比较不同产地、不同品种的淫羊藿中淫羊藿苷含量差异。方法建立新的HPLC检测方法，测定其淫羊藿苷的含量。结果陕西汉中的淫羊藿中淫羊藿苷含量较高，朝鲜淫羊藿中淫羊藿苷含量最高，达到1．33％，是同产地的淫羊藿的1．8倍。结论不同产地淫羊藿中淫羊藿苷的含量存在较大的差异，产地及品种影响淫羊藿药材的质量。     

ICP-MS半定量分析箭叶淫羊藿中重金属元素种类

目的: 测定箭叶淫羊藿中重金属元素的种类和半定量(SQ)含量。方法: 采用ICP-MS半定量全质量轴扫描对箭叶淫羊藿供试品溶液进行m/z 5～260全部质量数采集。结果: 箭叶淫羊藿含锰(Mn),铁(Fe),钴(Co),镍(Ni),铜(Cu),锌(Zn),镓(Ga),锗(Ge),砷(As),硒(Se),铷(Rb),锶(Sr),钇(Y),锆(Zr),铌(Nb),钼(Mo),镉(Cd),锡(Sn),锑(Sb),铯(Cs),钡(Ba),镧(La),铈(Ce),钕(Nd),镨(Pr),钍(Th),钐(Sm),钽(Ta),汞(Hg),铅(Pb),铋(Bi)等31种重金属,质量浓度范围1.3×10^-2～93.5 mg·kg^-1,其中(Fe)和(Mn)的含量分别为93.5,76.6 mg·kg^-1,为含量最高的两种重金属原素。结论: 本实验测定了箭叶淫羊藿中重金属种类及半定量(SQ)含量,为箭叶淫羊藿中重金属元素元的全定量测定以及《中国药典》2010年版收载的其余3个基源的淫羊藿半定量测定提供参考。     

淫羊藿提取物对犬血流动力学的影响

目的：观察淫羊藿提取物对麻醉犬血流动力学的影响。方法：采用麻醉犬在体心脏实验法。观察淫羊藿提取物对犬血流动力学参数的影响。结果：淫羊藿提取物能降低麻醉犬总外周血管阻力和左室舒张末期压，增加冠状动脉血流量、心输出量、每搏输出量、心肌收缩参数、心肌舒张参数、心指数、心搏指数。结论：淫羊藿提取物能改善麻醉犬血流动力学。     

ICP-MS测定海藻饮片中无机元素分析

目的:测定海藻中无机元素含量,为分析其药效作用提供数据。方法:采用微波消解-电感耦合等离子体质谱技术测定海藻无机元素,聚类分析法进行判别分析。结果:海藻中无机元素含量差别较大,K、Na、Ca、Mg等无机离子含量较高,Ta等离子含量最低,主要无机元素含量聚类时可分为9类。结论:海藻中含有丰富的无机元素,实验结果可为海藻药效深入研究提供参考。     

淫羊藿醇提工艺条件的研究

目的：优选淫羊藿的提取条件。方法：采用正交试验，以淫羊藿苷、淫羊藿总黄酮为综合评价指标对醇提条件进行筛选。结果：优选的最佳工艺是采用10倍量70％的乙醇提取2次，每次1．5h。结论：通过验证试验，表明所选的工艺条件较好。     

淫羊藿饮片杂质问题的研究与探讨

目的:探讨淫羊藿饮片中的杂质问题。方法:检查15批次淫羊藿饮片中各类杂质的含量,并测定淫羊藿饮片各部位中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷I五种黄酮类成分的含量。结果:15批次淫羊藿饮片杂质平均含量为23.66%,其中非药用部分茎占18.39%,柄占4.22%,其它杂质异物占1.05%,并且茎、柄中5种黄酮类成分的含量为淫羊藿叶中含量的1/10。结论:淫羊藿饮片中茎、柄杂质的大量存在直接导致了饮片整体质量的降低,因此建议在2010版《中国药典》质量标准制订中,将淫羊藿药材的药用部位规定为干燥叶片,从药材源头开始杜绝非药用部分茎、柄的存在,从而提高淫羊藿药材和饮片的整体质量,保证饮片的纯净度和投药量的准确度,进而确保临床疗效。     

箭叶淫羊藿炮制前后对小鼠副性器官的影响

目的:观察箭叶淫羊藿炮制前后补益作用的强弱.方法:观察箭叶淫羊藿炮制前后不同提取液对去势雄性小鼠副性器官发育的影响.结果:生品和炮制品箭叶淫羊藿的水提取液和醇提液对去势小鼠副性器官的萎缩有明显的抑制作用,且生品和炮制品的作用强度无显著性差异.结论:生品和炮制品箭叶淫羊藿均具有补益作用,且作用强度无明显差异.     

HPLC-MS3法分析朝鲜淫羊藿有效部位化学成分

目的：研究朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum有效部位中的化学成分.方法：70％乙醇提取，大孔树脂柱纯化得有效部位；运用HPLC—MS^3联用技术分析化合物结构.结果：从朝鲜淫羊藿有效部位中鉴定出9个化合物.结论：HPLC—MS^3能简单、快速的分析朝鲜淫羊藿黄酮苷类化学成分.     

花蕊石中9种无机元素初级形态研究

目的:测定中药花蕊石及水煎液中无机元素含量,对花蕊石无机元素的初级形态进行分析。方法:采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定花蕊石中9种无机元素的含量,并进行了初级形态分析。结果:各元素在残渣中的含量均远远超过其在溶液中的含量。元素在原药中含量特征如下MgCaFeKZnMnCu,其中Se,Cu,Mo,K的提取率较高。结论:矿物药元素水煎液提取率和浸留比与植物药相比相对较小,花蕊石中Se,Cu可以认为是该药中作用最大的元素或最特征的元素。     

淫羊藿的药理研究进展

目的 :目前淫羊藿的研究备受重视 ,为此 ,对其近年来有效成分及其提取物的药理学研究进展进行综述。方法 :根据近 10年的药理研究成果 ,综述淫羊藿药用植物对心脑血管系统、血液系统、免疫系统、生殖系统、骨髓系统及抗衰老、抗肿瘤方面的药理实验研究。结果 :淫羊藿有效成分及其提取物具有广泛的生理活性。结论 :我国淫羊藿植物资源相当丰富 ,应将现代药理研究成果与中药现代化相结合 ,更有效地开展新药研究与开发。     

正交试验优选丽安康片提取工艺

目的:优选丽安康片提取工艺.方法:水提取部分以黄芪甲苷为指标,乙醇提取部分以淫羊藿苷为指标,分别采用正交试验优化提取工艺条件.结果:最佳提取工艺为黄芪、当归水提共煎,加8倍量水煎煮3次,每次1.5h,70℃减压干燥;淫羊藿加14倍量70％乙醇提取2次,每次1h.结论:优选的提取工艺合理、稳定、可行,可作为丽安康片的提取工艺.