四种免疫学检查在脑囊虫病诊断和治疗中的应用

目的探讨4种免疫学检查在脑囊虫病诊治中的应用价值及临床意义。方法对确诊的脑囊虫病病人治疗前后血清及脑脊液进行间接血凝试验（IHA）、酶联免疫吸附实验（ELISA）、囊虫循环抗原（CAg）以及短程抗体（IgG4）检测,并对其检测结果进行分析比较。结果治疗前脑囊虫病人血清IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是68.28%、65.19%、51.54%和63.84%。脑脊液IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是30.68%、39.98%、46.03%和41.94%。治疗后血清IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是67.40%、65.63%、12.33%和11.89%。结论血清及脑脊液IHA、ELISA检测囊虫循环抗原（CAg）以及短程抗体（IgG4）,对囊虫病诊断方面均有一定的敏感性,但因抗体可持续数年,因此IHA、ELISA不能作为疗效考核的指标。囊虫循环抗原（CAg）检测以及短程抗体（IgG4）检测可作为疗效考核的指标。     

国内囊虫病免疫诊断的研究概况

猪囊尾蚴寄生人体所致囊尾蚴病，又称囊虫病，囊虫在人体寄生部位广泛，依常见的顺序为：皮下组织、肌肉、脑、眼、心、舌、肝、肺、腹膜、上唇、乳房、子宫、神经鞘、骨等，临床表现复杂，其危害程度远较成虫寄生为大，囊虫病的病原学诊断较为困难，随囊虫寄生部位的深浅而异，对寄生部位较深或可疑病人多采用免疫学诊断方法。国内学者对囊虫病的免疫学诊断已作了不少的研究。     

抗猪囊虫单克隆抗体对脑囊虫病的诊断价值

目的：评价用自制的抗猪囊虫单克隆抗体建立I-ELISA检测方法应用于临床脑囊虫病的诊断价值。方泼：用低温无水乙醇沉淀法分离纯化单抗IgG(腹水抗体效价l：3200)；用改良的过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标单抗；用抑制性酶联免疫吸附法(I-ELISA)检测患者脑脊液和血清标本中囊虫特异性抗体。结果：检测63例确诊为脑囊虫病的患者脑脊液，抗体阳性6l例，阳性率为97％；血清60例，抗体阳性53例，阳性率为88％；其他颅内感染疾病患者脑脊液标本240例，血清标本240例，肝肺包虫病患者血清10例，正常脑脊液25例(阑尾炎手术腰麻患者)，健康志愿者血清32例，检测结果均为阴性。结论：抗囊虫抗原的单克隆抗体用常规鼠源B细胞杂交瘤技术获得，该单克隆抗体具有相当高的特殊性和检出率，对诊断脑囊虫病有很高的临床应用价值。     

单抗胶乳凝集试验和间接荧光抗体试验诊断囊虫病的研究

目的:探讨单克隆抗体胶乳凝集试验(McAb-LAT)和间接荧光抗体试验(IFAT)在囊虫病临床诊断中的价值。方法:应用猪囊尾蚴冰冻切片抗原进行 IFAT 检测囊虫病患者抗体;应用抗猪囊尾蚴单克隆抗体致敏胶乳微球进行 LAT,检测囊虫病患者循环抗原。结果:囊虫病患者的抗体检出率为83.71%,分型抗体检测,混合型及脑型检出率明显高于皮肌型(P<0.01);患者循环抗原的检出率为73.05%,脑型患者囊虫活动期的循环抗原检出率明显高于囊虫钙化期(P<0.01),药物治疗3个月以上患者循环抗原的阳性率降为44.11%。结论:McAb-LAT 和 IFAT 在囊虫病临床诊断中有较高价值,循环抗原的检测在脑型囊虫病活动期诊断和疗效考核中具有重要意义。     

包虫病几种免疫诊断方法的比较

包虫病是棘球属和泡球属绦虫的幼虫引起的具有地方流行性和自然疫源性的动物源性人畜共患寄生虫病。在我省包虫病流行比较广泛 ,它不但严重危害着人类的健康 ,而且还影响着畜牧业的发展。现将我院近年来所用几种简易免疫诊断方法、结果情况作一分析。资料与方法1　临床资料　收集我院 2 0 0 0年 9月— 2 0 0 1年8月肝腹腔包虫病及肝囊肿病患者的术前 3种简易试剂诊断结果、Ｂ超、ＣＴ结果及临床手术治疗结果 89例 ,其中男 40例 ,占 44 .9% ;女 49例 ,占 55.1 %。年龄 <40岁 45例 ,占 50 .5% ,年龄 >40岁 44例 ,占 49.5%。2　原理　包虫病快…     

江苏省铜山县部分农村人群囊虫病血清流行病学调查

目的 了解江苏省铜山县猪带绦虫／囊虫病流行情况。方法 运用血清流行病学知识,对猪带涤虫／囊虫病进行调查。结果 猪带绦虫病现患率为０．４７０％,囊虫病现患率为０．０９５％。血清囊虫病ＥＬＩＳＡ阳性率为１．８９０％。结论 说明了我省猪带绦虫和囊虫和囊虫病血清流行情况以及存在的问题。     

囊虫病的免疫学诊断进展和展望

囊虫病的免疫学诊断进展和展望首都医科大学寄生虫学教研室张帆由猪带绦虫幼虫──囊尾蚴引起的囊尾蚴病又称囊虫病，对人的危害很大，尤以脑囊虫病为甚。由于囊虫病特别是脑囊虫病的诊断复杂且困难，免疫学诊断在囊虫病的诊断上的应用，引起人们的极大的关注。国内外近年...     

脑囊虫病的磁共振成像诊断

本文报告２８例脑囊虫病增强前后的ＭＲＩ表现，其中脑实质型２６例，脑室型和混合型各１例。脑囊虫依据其病程先后，可分为活动期、退变期、混合期和钙化期；ＭＲＩ特征性改变是在小囊肿内有一偏心（或居中）结节或点状信号，Ｔ１ＷＩ显示最清晰。注射Ｇｄ－ＤＴＰＡ后，囊壁和囊内结节多明显强化。ＭＲＩ诊断脑囊虫明显优于ＣＴ，尤其对脑干和后颅凹病变效果更佳。     

RP—HPLC测定拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度

目的：建立RP—HPLC法同时测定人血清中抗癫痫药拉莫三嗪和苯巴比妥浓度的方法。方法：采用AgilentZorbax XDB—C18（4．6mm×150mm,5μm）色谱柱;流动相：0．1％乙酸-乙腈,梯度洗脱;检测波长：240nm;流速：1．0ml／min。结果：拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度分别在0．02-1．00μg、0．02-3．00μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为97．62％和97．96％,拉莫三嗪2．0、20．0、40．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为4．3％、3．9％和2．9％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．1％、5.4％％和3．9％;苯巴比妥5．0、20．0和50．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为3．5％、4．2％和3．6％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．0％、4．7％和4．2％。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于临床上常规监测拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度。     

应用抗apo(a)单克隆抗体的双抗体夹心法测定人血清Lp(a)

载脂蛋白（a）[apo（a）]免疫BALB／c小鼠，应用杂交瘤技术制备了17株抗apo（a）单克隆抗体（McAb），其中4株与人血清Lp（a）反应良好，且不与低密度脂蛋白（LDL）和纤溶酶原（Pmg）反应。将这4株McAb等量混和作为包被抗体，辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗apoB多克隆抗体作为第二抗体，建立了测定人血清Lp（a）的双抗体夹心ELISA法。本法可完全排除apoB和Pmg的干扰，对Lp（a）的特异性良好，有较好的精密度，板内CV为3.8～8.5％，板间CV为4.2～9.6％。以本法测定93例正常人血清Lp（a）的水平，结果表明Lp（a）呈明显的偏态分布，中位数157mg／L，范围为15～1000mg／L。     

LC-MS/MS同时测定人体血浆中辛伐他汀及其活性代谢物辛伐他汀酸

目的 建立一种简单、灵敏、选择性好的液相色谱(LC-MS)与电喷雾质谱光谱法(MS)同时测定辛伐他汀(I)和辛伐他汀酸(Ⅱ)的检测模式.方法 经过提取,使用D3辛伐他汀(Ⅲ)和D3辛伐他汀酸(Ⅳ)作为内标,溶质分离在对称屏蔽下进行,RP8,5μ柱(150 mm×3.9mm),流动相为乙腈:50 mmol铵醋酸,pH值3.0(80:20).一个大气压电离单四极质谱检测.高效液相色谱(HPLC)系统与涡轮离子喷涂界面的MS/MS系统形成接口.辛伐他汀和辛伐他汀酸的量化是通过计算峰面积比(I/Ⅲ和Ⅱ/Ⅳ)而实现.MRM模式分析提取,并与标准曲线(R辛伐他汀=0.9994和R辛栈他汀=0.9996)进行比较.确定检测的准确性和精度,计算4个浓度(0.25、0.75、20.00和60.00 ng/mL)辛伐他汀和0.25、0.75、15.00和45.00 ng/mL辛伐他汀酸批内和批间的差异.结果 建立了LC-MS/MS同时测定人体血浆中辛伐他汀及其活性代谢物辛伐他汀酸的方法,批内相对标准差(RSD)低于15.00％,从3.40％到14.75％不等,批间RSD小于15.00％,从11.59％到1.47％不等.人体血浆检测限为0.25 ng/mL辛伐他汀和0.25 ng/mL辛伐他汀酸.结论 LC-MS/MS同时测定人体血浆中辛伐他汀及其活性代谢物辛伐他汀酸,方法简单,灵敏度高.     

二阶导数荧光法同时测定人血清中血红蛋白和白蛋白含量

目的:建立同时测定人血清中血红蛋白和白蛋白含量的方法.方法:在pH 7.4的条件下,测定人血清中血红蛋白和自蛋白的二阶导数荧光光谱,采用峰零交叉测量法,同时求血红蛋白和白蛋白的含量.结果:血红蛋白测定的线性范围为2.0×10<'-7>～12.0×10～mol/L,r=O.997,回收率为96.6%～100.1%;白蛋白...     

人血清中牛磺酸的HPLC-荧光法测定方法学研究

目的：建立测定人血清中牛磺酸浓度的HPLC-荧光法。方法：以阿德福韦为内标,待测血清样品经乙腈沉淀,上清液加入荧光胺生成衍生化物,色谱柱为PhenomenexKromasilNH2柱,乙腈-水（47：53,磷酸调pH到4．0）为流动相,流速1．2ml／min,荧光检测波长275nm（激发波长）、420nm（发射波长）。结果：每个样品分析时间约10min,扣除血清中内源性牛磺酸,牛磺酸的线性范围为1．875～120．000μg／ml,日内、日间精密度的RSD均小于15％,低、中、高浓度（3．750、15.000、60．000μg／ml）的平均提取回收率分别为88．9％、96．O％和98．7％。结论：该法操作快速、简单、准确,可用于临床药代动力学的研究。     

RP-HPLC同时测定苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的血药浓度

目的采用反相高效液相色谱法同时测定苯巴比妥（PB）、苯妥英（PHT）和卡马西平（CBZ）血药浓度。方法色谱柱为Agilent Zorbax 8nm Extend—C18（5μm,4．6mm×150mm）,流动相为y（甲醇）：v[v（o．1mol／L乙酸钠）：v（o．05％β环糊精）=32：18]=68：32,柱温为室温,流速为0．8mL／min,检测波长为230nm,进样量为20μL。结果PB、DPH和CBZ分离良好,分离度皆大于1．5;最低检测浓度分别为0．3802、0．1823和0．1444μg／mL;线性范围分别为0．4-60、0．2-30和0．2-30μg／mL;回收率分别为97．04％、96．52％和97．09％;日内和日问相对标准偏差皆小于5．80％。结论本方法简便、快速、重现性好,结果可靠,适用于临床常规检查。     

反相高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱和多索茶碱的浓度

目的 建立反相高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱和多索茶碱浓度的分析方法.方法 血清样品加入咖啡因为内标,三氯醋酸沉淀蛋白,采用Ultimate XB-C18(250 mm× 4.6mm,5μm)色谱柱分离,流动相为甲醇:水=30∶70,流速为1.0mL/min,检测波长为273 nm,柱温为30℃.结果 荼碱在0.97～48.40mg/L范围内,线性关系良好,r=0.9999;多索茶碱在1.10～54.80 mg/L范围内,线性关系良好,r=0.9998.日内精密度和日间精密度良好,荼碱、多索茶碱的低、中、高3种浓度方法回收率分别为6.01%、2.25%、0.86%和5.71%、2.02%、1.07%.结论 该法操作简便,结果准确可靠,可满足临床快速监测的需要.     

高效液相色谱法同时测定人血浆中霉酚酸及其葡糖苷酸

目的:建立霉酚酸(MPA)及其葡糖苷酸(MPAG)血药浓度测定方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)-二极管阵列检测器测定血药浓度,检测波长254 nm.血样加乙腈沉淀蛋白.色谱柱:Hypersil ODS2(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:A相为25％ CH3CN+75％ 0.02 mol/L KH2PO4(pH 3.0),B相为70％ CH3CN +30％ 0.02 mol/L K2HPO4(pH 6.5),梯度洗脱;流速:1.0 ml/min.结果:MPA、MPAG血药浓度线性范围分别为1.0～50 μg/ml(r=0.999 4,n=6)和2.5～100 μg/ml(r=0.999 5,n=7),MPA、MPAG血浆最低检测浓度分别为0.5 μg/ml和1.0 μg/ml,高、中、低3种浓度MPA平均回收率分别为(95.75±2.31)％、(104.10±1.91)％和(98.11±4.24)％,MPAG则分别为(97.37±1.43)％、(101.10±5.41)％和(105.44±7.59)％.结论:本研究为MPA和MPAG的药代动力学研究及血药浓度监测提供了一种测定方法.     

固相萃取-反相HPLC法同时快速测定血浆中4种氟喹诺酮类药物

目的 建立同时快速测定人血浆中4种氟喹诺酮类药物(氟罗沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星)的方法 .方法 采用C<,18>固相萃取小柱萃取血浆中的4种氟喹诺酮类药物.色谱柱为ODS-BP柱(5 μ,250 mm×4.6 mm),流动相为含1.31 g/L L-异亮氨酸和0.80 g/L CuSO<,4>的水溶液-甲醇(80:20,V:V),激发波长为280 nm,发射波长为504 nm,流速为0.8 ml/min. 结果 4种氟喹诺酮类药物可良好分离,分离度达到1.5以上.4种药物的线性范围均是0.1-20 μg/ml,r均大于0.997 5,氟罗沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星的最小检测限依次分别为50 ng/ml、1 ng/ml、100 ng/ml、100ng/ml,萃取回收率均高于87.97%,方法 回收率均在95.40%与101.82%之间,日内RSD均小于3.7%,日间RSD均小于1.5%. 结论 固相萃取-反相HPLC法简便,灵敏度高,准确度高,精密度好,可用于氟喹诺酮类药物的快速测定.