大鼠颌下腺GnRH受体基因的体外扩增及基因序列分析

目的 研究大鼠颌下腺ＧｎＲＨ受体基因的存在及其基因序列。方法 从ＳＤ大鼠颌下腺提取总ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增ＧｎＲＨ受体基因,利用双脱氧链终止法对扩增产物进行序列测定。结果 从ＳＤ大鼠颌下腺扩增出ＧｎＲＨ受体的特异性条带,经序列分析,扩增产物的基因序列与文献报道大鼠脑垂体的完全一致。结论 大鼠颌下腺有ＧｎＲＨ受体基因的表达,能合成ＧｎＲＨ受体,是ＧｎＲＨ的靶器官,颌下腺产生的ＧｎＲＨ可作用于颌下腺的靶细胞,参与颌下腺生理功能的调节。     

文昌鱼脑泡内GnRH和5-HT神经的自调节及相互调节的形态学依据

本文用邻片免疫组织化学双标记方法，对文昌鱼脑泡中ＧｎＲＨ 和５ ＨＴ 神经自调节及相互调节的形态学基础进行了研究。结果发现，ＧｎＲＨ 阳性神经元含有ＧｎＲＨ 受体和５ ＨＴ 受体；５ ＨＴ 阳性神经元含有５ ＨＴ 受体和ＧｎＲＨ 受体。提示，文昌鱼脑泡中ＧｎＲＨ 和５ ＨＴ 神经元存在类似哺乳动物下丘脑的自调节和相互调节机制。     

大鼠颌下腺GnRH及其受体的免疫组织化学双标记和年龄变化

用免疫组织化学法，以邻片双标记技术研究了大鼠颌下腺内ＧｎＲＨ及ＧｎＲＨ受体的分布；并对不同的发育阶段大鼠颌下腺内ＧｎＲＨ及其受体进行了原位定量分析，结果表明，雄性成年大鼠颌下腺浆液性腺泡的腺上皮细胞及各级导管上皮细胞既呈ＧｎＲＨ又呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。     

GnRH及其受体在人肝癌和肝硬化组织中表达的免疫细胞化学研究

ＧｎＲＨ及其受体在人肝癌和肝硬化组织中表达的免疫细胞化学研究张金山黄威权黄高升＊张远强（第四军医大学组织学与胚胎学教研室＊病理学教研室）新近研究发现，体外培养的人肝癌细胞上有ＧｎＲＨ结合位点，天然的ＧｎＲＨ对该细胞系的生长有抑制作用，然而在体的人肝癌...     

促性腺激素释放激素 GnRH 相关肽存在于培养的大鼠垂体前叶促性腺激素细胞

为了探讨垂体促性腺激素细胞中ＧｎＲＨ相关肽（ＧＡＰ）的来源，本实验选用两种特异性抗ＧＡＰ抗体和抗ＦＳＨ－β抗体，采用免疫细胞化学双重染色技术，研究了ＧＡＰ在培养的大鼠垂体前叶细胞内的分布和定位。结果发现一些培养细胞可表达ＧＡＰ，而且ＧＡＰ免疫反应产物和ＦＳＨ免疫反应产物共存于同一种细胞。这表明ＧＡＰ存在于培养的大鼠垂体前叶促性腺激素细胞内。本文讨论了ＧＡＰ的来源及其可能的生物学作用。     

促性腺激素释放激素GnRH相关肽存在于培养的大鼠垂体前叶促性腺激素…

为了探讨垂体促性腺激素细胞中ＧｎＲＨ相关肽（ＧＡＰ）的来源，本实验选用两种特异性抗ＧＡＰ抗体和抗ＦＳＨ－β抗体，采用免疫细胞化学双重染色技术，研究了ＧＡＰ在培养的大鼠垂体前叶细胞内的分布和定位。结果发现一些培养细胞可表达ＧＡＰ，而且ＧＡＰ免疫反应产物和ＦＳＨ免疫反应产物共存于同一种细胞。这表明ＧＡＰ存在于培养的大鼠垂体前叶促性腺激素细胞内，本文讨论了ＧＡＰ的来源及其可能的生物学作用。     

大鼠下丘脑细胞培养中GnRH神经元的免疫细胞化学研究

采用免疫细胞化学方法，对分离培养１、３、５、７ｄ新生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）免疫反应性神经元进行了研究。结果发现，在培养的１ｄ即可检出ＧｎＲｈ神经元，ＧｎＲＨ神经元占培养中的神经元的１２．１％￣１４．８％。ＧｎＲＨ神经元多为双极，有些突起末端可见生长锥。还发现ＧｎＲＨ神经元之间及其与其他神经元之间，存在有多种形式的接触。这些资料提示，培养中的ＧｎＲＨ神经元，保留了在体ＧｎＲＨ神经元     

妊娠期胎盘组织与血浆促性腺素释放激素的初步研究

本文应用放射免疫测定方法，研究了妊娠期母体血浆与胎盘中ＧｎＲＨ含量变化。结果证实，在妊娠过程中，母体循环血中有ＧｎＲＨ免疫活性物质存在。并于妊娠９－１０周时出现高峰与５－８周比较有显著差异（Ｐ＜０．０５）。胎盘绒毛中ＧｎＲＨ含量亦随孕周龄增加而增加。至２１－２４周时达高峰。结果说明ＧｎＲＨｔ ｈＣＧ之间存在密切关系。提示ＧｎＲＨ在妊娠中特别是对早期胚胎的维持发挥了重要作用。     

大鼠下颌下腺GnRH及GnRH-mRNA的免疫组织化学与原位杂交研究

大鼠下颌下腺ＧｎＲＨ及ＧｎＲＨ－ｍＲＮＡ的免疫组织化学与原位杂交研究金花淑黄威权＊张金山＊文永植张崇理＊＊（第四军医大学组织学与胚胎学教研室＊延边医学院组织学与胚胎学教研室＊＊中国科学院动物研究所生殖生物学开放实验室）本文用免疫组织化学及原位杂交法，...     

大鼠颌下腺GnRH及其受体的免疫组织化学双标记及年龄变化的研究

大鼠颌下腺ＧｎＲＨ及其受体的免疫组织化学双标记及年龄变化的研究金花淑黄威权＊张金山＊文永植张崇理＊＊（延边医学院组织学与胚胎学教研室）（＊第四军医大学组织学与胚胎学教研室）（＊＊中科院动物研究所生殖生物学开放实验室）本实验用免疫组织化学法，研究了不同...     

P2X2受体在大鼠胃肠系统肌间神经节中的分布

目的:研究P2X2受体在大鼠胃肠系统肌间神经节中的分布,为研究ATP作为神经递质对胃肠道肌间神经节节细胞的作用提供形态学基础。方法:免疫组织化学。结果:从胃到结肠均有P2X2受体阳性神经元和神经纤维分布,胃、小肠和结肠分别约60％、70％和50％的肌间神经节节细胞为P2X2受体阳性。结论:胃肠道系统多数肌间神经节节细胞都能通过ATP受体特别是P2X2受体对ATP产生反应。     

光照应激对SD大鼠胃促性腺激素释放激素受体表达的影响

目的 观察光照应激状态下SD大鼠胃内促性腺激素释放激素受体（GnRHR）的表达变化。 方法 建立SD大鼠光照应激模型(共64只,实验组与对照组各32只),24h持续光照,分别取光照1d、2d、3d、4d、1周、2周、3周、4周和相应对照组大鼠的胃,采用免疫组织化学、Western blotting和实时PCR法检测GnRHR在各时间段大鼠胃黏膜中的定位及蛋白和mRNA的表达变化。 结果 GnRHR阳性细胞广泛分布于大鼠胃底腺壁细胞中,在对照组和实验组中的定位无差异。实验组大鼠的GnRHR蛋白表达水平高于其相应的对照组。持续光照1～4周后,实验组与其对照组相比差异显著（P<0.05）;当持续光照2周时,GnRHR的表达至最高水平,与其对照组相比,差异极显著（P<0.01）。实验组大鼠胃GnRHR mRNA表达水平高于对照组,持续光照3～4周后,实验组大鼠胃GnRHR mRNA表达水平显著增加（P<0.05）。 结论 光照应激可以影响消化道内GnRHR的表达,提示GnRH通过其受体介导,对消化功能具有潜在的生理调节功能。GnRH除参与消化道正常生理功能外,可能还是一种参与应激反应的激素。     

犬和大鼠回肠壁丛内5-羟色胺能神经元免疫组织化学观察

目的　观察犬和大鼠回肠壁丛内 5 羟色胺能神经元。方法　应用 5 羟色胺 (5 HT)抗体的免疫组织化学改良法对正常小狗 (5只 )回肠切片标本、正常大鼠 (8只 )和 5 羟色胺酸前处理大鼠 (4只 )回肠外纵肌全层铺片标本内含 5 HT免疫反应性 (5 HT IR)神经元进行了观察研究。结果　正常大鼠回壁内神经节 (丛 )内可见少数 5 HT IR核周体 ,及肠肌丛周围和节间束中含有丰富的 5 HT IR纤维。 5 羟色胺酸 (5 HTP)处理后大鼠与正常鼠相比较 ,回肠壁丛内 5 HT IR胞体和带膨体纤维的可见数稍多 ,及免疫反应性增强。正常狗远端内 5 HT IR神经元胞体和纤维非常丰富 5 HT IR基础丛内有 1～ 4个 5 HT IR神经元胞体。结论　本研究对犬和大鼠肠内 5 HT能神经元的存在提供了直接的形态学证据 ,肠 5 HT能神经元与胃肠运动的调节功能及其可能的受体机制有关     

大鼠肝促性腺激素释放激素受体的定位研究

目的探讨大鼠肝是否表达促性腺激素释放激素(GnRH)受体,为GnRH能否参与肝代谢功能的调节提供形态学依据。方法采用兔抗GnRH的抗独特型抗体的免疫组织化学SABC法及地高辛标记探针的原位分子杂交法,对5例大鼠肝GnRH受体表达进行研究。结果大鼠肝细胞既呈GnRH受体阳性又有GnRH受体mRNA杂交信号。GnRH受体阳性物质和GnRH受体mRNA杂交信号物质均分布在大鼠肝细胞的细胞质,细胞核未检测到GnRH受体阳性物质及GnRH受体mRNA杂交信号。不同部位的肝细胞其GnRH受体免疫反应强度和GnRH受体mRNA杂交信号强度存在差别。结论大鼠肝细胞能表达GnRH受体,不同部位的肝细胞对GnRH受体表达水平存在差异。     

大鼠肠肌丛胆碱酯酶和亮氨酸脑啡肽双染法研究

应用酶组织化学和免疫组织化学双染法,对大鼠肠肌丛内胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元进行了研究.在同一张标本上同时显示胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元,后者用二盐酸联苯胺作显色剂.结果观察到三种不同染色的神经元:(1)胆碱酯酶阳性神经元;(2)亮氨酸脑啡肽单染神经元;(3)胆碱酯酶-亮氨酸脑啡肽双染神经元.并同时统计了30个肌间神经节,发现平均每个肌间神经节含这三种神经元的数目依次为8.33,0.07和2.40.以上结果提示亮氨酸脑啡肽可以与乙酰胆碱共存于经典的胆碱能神经元.本文还对大鼠肠肌丛内.胆碱能神经元的类型及其与脑啡肽神经元之间的关系进行了讨论.     

促性腺激素释放激素受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布

目的探讨颈胸神经节是否具备接受促性腺激素释放激素(GnRH)作用的条件。方法实验采用免疫组织化学SP法,观察GnRH受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布特点。结果在颈胸神经节中,神经元胞体均为GnRH受体免疫反应阳性,其细胞膜以及膜下胞质中的颗粒状物质呈棕黄色,GnRH受体为强阳性表达,而胞核呈阴性表达。部分神经元可见其突起,呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达。卫星细胞也呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达。图像分析表明,呈阳性反应的神经元胞体与节内其他阳性成分相比,其GnRH受体相对表达量差异性极显著(P0.01)。结论在雌性山羊颈胸神经节中,神经元胞体是GnRH发挥作用的主要靶细胞,颈胸神经节具备接受GnRH作用的条件。提示GnRH有可能通过作用于颈胸神经节交感节后神经元上的GnRH受体来影响心肺器官的功能活动,即颈胸神经节可能是心肺功能活动中协调GnRH内分泌调节和该神经节自主神经调节两途径之间的中继站。     

Ultrastructure of intramural ganglia in the striated muscle portions of the guinea pig oesophagus

The ultrastructure of the myenteric plexus located in the striated muscle portion of the guinea pig oesophagus was examined and compared with that of the plexus associated with the smooth muscle portion of the rest of the digestive tract. The oesophageal ganglia had essentially the same architecture as those of the smooth muscle portion, such as a compact neuropil without the intervention of connective tissue and blood vessels. Some features, however, were particular to the striated muscle part of the oesophagus. It was clearly demonstrated that myelinated fibres, probably sensory terminals of vagal origin, join the myenteric ganglia. Synapses and terminal varicosities are sparsely distributed within the ganglia and fewer morphological types of axon varicosities could be distinguished compared with other regions. Glial cells are well developed in the oesophageal myenteric ganglia. These cells outnumber the ganglion cells, having a higher ratio than in the lower digestive tract, and form numerous cytoplasmic lamellar processes. The lamellar processes, located at the surface of the ganglia, considerably reduce the area of neuronal membrane which directly contacts the basal lamina. The role of these lamellar processes in the oesophageal ganglia is discussed.     

Neurofilament and glial fibrillary acid protein-related immunoreactivity in rodent enteric nervous system

Using antisera raised against neurofilaments and the glial fibrillary acidic protein (GFAP) we have examined the appearance and distribution of neurofilament- and GFAP-like immunoreactivity in the enteric nervous system of rat, mouse and guinea-pig. In whole mounts of the external circular and longitudinal muscle layers, including the myenteric plexus, a high number of neurofilament-positive perikarya were visualized both in the ganglia and in the circularly running interconnecting strands in all three species. These cells were large, usually with eccentrically placed nuclei and single, relatively thick neurofilament-positive processes. In addition, in guinea-pig myenteric plexus a small number of cells with multiple processes could be seen. Both in the longitudinal and circular interconnecting strands a large number of thin, smooth, neurofilament-positive fibres were observed. This regular network of ganglia and strands was superimposed on a sparse system of thin, usually individual neurofilament-positive fibres in the underlying circular muscle layer. Cryostat sections revealed neurofilament-positive cell bodies in the submucous plexus, whereas fibres showing neurofilament-like immunoreactivity were observed in all layers of the gut wall, with the exception of the epithelium. In whole mounts including rat and mouse myenteric plexus, a large number of cells and fibres showing GFAP-like immunoreactivity were visualized. The GFAP-positive cells were smaller and more numerous than the neurofilament-positive ones. They were present both within the ganglia and in the interconnecting strands. Several short fluorescent processes could frequently be seen emanating from the cell body. Both the strands and the ganglia contained a high number of thin, GFAP-positive fibres. Fluorescent fibres and cells were also observed in the circular muscle layer. In sections of rat and mouse small intestine, cells were observed throughout the gut wall, with the exception of the epithelium. Double labelling experiments clearly showed that neurofilament- and GFAP-positive cells represented separate cell populations. Furthermore, GFAP-positive cells and fibres outlined the neurofilament-positive perikarya. It is thus likely that the GFAP-positive cells represent enteric glial cells. The pre- and postnatal development of neurofilament- and GFAP-like immunoreactivity was studied in whole mounts from rat embryos and pups. Furthermore, the presence of neurofilament and GFAP-positive fibres was observed in whole mount preparations of rat and mouse mesenterium.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

卵泡刺激素在大鼠胰腺中的定位及其与促性腺激素释放激素受体共存关系

目的：研究卵泡刺激素在大鼠胰腺中的分布及其与促性腺激素释放激素受体的共存关系。方法：采用免疫组织化学法和邻片双标记方法。结果：大鼠胰腺外分泌部腺泡内的部分腺细胞和胰岛中的部分内分泌细胞呈现FSH免疫阳性反应,阳性产物分布于胞质,胞核阴性。卵泡刺激素与促性腺激素释放激素受体在大鼠胰岛细胞中有重叠分布。结论：大鼠胰腺外分泌部的腺泡细胞和胰岛的细胞能表达卵泡刺激素。卵泡刺激素和促性腺激素释放激素受体共存于大鼠胰岛细胞中。表达卵泡刺激素的胰岛细胞可能受促性腺激素释放激素调节。