大鼠手术后疲劳综合征模型的建立及其评价

目的 制作和评价大鼠手术后疲劳综合征模型。方法 完全模仿手术的全过程切除大鼠的部分肝脏。结果 70％肝切除实验大鼠一般情况表现差．体力耐受力下降．出现一定程度的抑郁表现，并在营养学指标、小肠黏膜应激反应损伤和肝脏白蛋白基因表达方面发生明显改变。结论 切除70％肝脏制作大鼠动物模型，具有临床术后疲劳综合征的基本特征．可作为研究手术后疲劳综合征的实验动物模型。     

大鼠肝、胰十二指肠联合切除残肝肝细胞生长因子表达的研究

目的 用实验动物模型同时切除肝脏、胰腺及十二指肠，以探讨肝细胞生长因子(HGF)对残肝再生的影响。方法 60只SD大鼠被随机分为4组：①68％肝切除组；②68％肝叶切除加50％胰腺切除组；③68％肝叶切除加十二指肠切除组；④68％肝叶切除、加50％胰腺切除加近端十二指肠切除组。每组中3只大鼠分别于术后12、24、48、72和168h处死并采集肝脏样本，计算肝再生率。切除的肝脏组织用RT-PCR技术检测HGF在术后不同时间的表达，并与免疫组化法检测的肝细胞增殖细胞核抗原(PCNA)进行对比研究。结果 68％肝切除组残肝HGF的表达逐渐增强，24h达到高峰，随后逐渐下降，168h时达最低水平。而肝、胰切除，肝十二指肠切除和肝、胰十二指肠切除可显著减少残肝细胞HGF的表达，并使HGF的表达延迟至术后48h。结论 HGF可促进肝脏切除术后残肝的再生反应，而起源于胰腺和十二指肠外分泌腺的其他因素亦对HGF的表达起显著的调节作用，从而影响肝细胞的增殖。     

不同入肝血流阻断法行肝硬化大鼠肝切除的比较

目的：比较不同入肝血流阻断法行肝硬化大鼠肝切除的手术安全性及对肝脏、小肠损伤的影响。 方法：大鼠采用CCl4加乙醇复合法诱导肝硬化模型后行Higgins法70%肝切除。根据术中肝血流阻断法的不同分为A组（Pringle法）;B组（半肝血流阻断法）;C组（保留半肝动脉血流阻断法）;D组（门静脉转流保留半肝动脉血流阻断法）,阻断时间均为30 min。比较各组手术成功率,肝切除24 h后动物存活率及肝细胞及小肠病理改变。 结果：A、B、C、D组手术成功率各分别为90.9%（10/11）、76.9%（10/13）、80.3%（10/12）、76.9%（10/13）,组间差异无统计学意义（P>0.05）;肝切除术后24 h存活率分别为3/10（30%）、10/10（100%）、9/10（90%）、10/10（100%）,B、C、D组大鼠存活率均明显高于A组（均P<0.05）。病理学结果显示,A组肝组织、小肠黏膜明显损伤,除C组小肠黏膜损伤与A组类似外,其他各组肝组织损伤均较A组轻微,且小肠黏膜基本无损伤。 结论：在肝硬化大鼠肝切除中,采用半肝血流阻断法、保留半肝动脉血流阻断法、门静脉转流保留半肝动脉血流阻断法的手术安全性及肝损伤程度均优于Pringle法。

     

大鼠肝损伤动物模型的建立

目的 探讨制作SD大鼠肝损伤动物模型的方法.方法 选用SD大鼠40只,随机分成对照组和模型组,每组20只,模型组切除大鼠肝脏的70%,对照组在同样的条件下打开关闭腹腔,分别在术前和术后12h、1、3、5、7、14 d检测两组大鼠的肝功能指标,术后14 d光镜观察肝脏的病理变化.结果 模型组肝功能指标AST、ALP和DBIL在术后12 h至7 d,ALT和TB在术后12h至5d与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),至术后14d两组大鼠肝功能各项指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);术后14 d光镜观察大鼠肝脏组织切片,对照组大鼠肝细胞之间排列疏松,细胞棱角较锐利,肝窦较宽,模型组大鼠出现肝细胞水肿,肥大,嗜酸性变的代偿性病理变化.结论 切除大鼠肝脏总体积的70%可有效建立大鼠肝损伤的模型.     

常温下肝门阻断对大鼠小肠组织学和微循环的影响

在肝切除术和肝脏移植过程中 ,肝门阻断是减少术中出血的主要方法。以往研究多集中在肝门阻断后对肝脏的损伤 ,而由于缺血再灌注损伤和血液动力学障碍造成的肝外多器官损伤 (ＥＨＭＯＤ)研究相对较少[1] 。肠道屏障功能障碍在多器官功能不全综合征 (ＭＯＤＳ)中的作用 ,近年来日益受到重视[2 ] 。本实验对肝门阻断后小肠损伤的机制进行探讨。材料和方法一、实验动物采用成年健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,平均体重 (2 75± 2 5 ) ｇ。制作小肠淤血模型。二、实验仪器和试剂检测ＣＤ6 2Ｐ采用流式细胞术 ,第一抗体Ｐ Ｓｅ ｌｅｃｔｉｎ (ＣＴＢ2…     

肝移植时供肝耐受无心跳热缺血的安全时限实验研究

目的 探讨肝移植时供肝耐受无心跳热缺血损伤的安全时限。方法 建立广西巴马小型猪原位肝移植动物模型并按移植前供肝经历心脏停搏时间0、30、45、60min分为4组，观测肝移植后各组一周存活率、肝功能、肝脏病理和肝脏能量代谢以及术中肝脏复流后微循环改变。结果上述各组术后一周存活率分别为：100％(5／5)、100％(5／5)、60％(3／5)、20％(1／5)。肝脏能量代谢等指标的改变在供肝无心跳热缺血时间30min前是可逆的，随心跳热缺血时间的延长远渐向不可逆演变。结论 在本实验条件下，巴马小型猪心脏停搏供体肝移植时供肝耐受无心跳热缺血损伤的安全时限约为30min。     

间断低氧预适应对大鼠肝切除缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨间断低氧预适应对大鼠肝大部切除术后残余肝脏合并缺血再灌注引发过氧化损伤的保护作用。方法78只SD大鼠,用SPSS软件将其随机分为4组：假手术组（SO组,n=6）、肝切除组（PH组,n=24）、肝切除合并缺血再灌注损伤组（IR组,n=24）和间断低氧预适应组（IHP组,n=24）。以无创伤血管夹阻断IR组大鼠入肝血流后切除肝脏的左叶和中叶（约占全肝的70％）,20min后开放入肝血流,残余肝脏发生了缺血再灌注损伤。将IHP组大鼠暴露于10％的低氧环境中,每日持续1h,连续进行1周,最后1次低氧暴露后行肝切除术（同IR组）。SO组大鼠在术后2h取材检测,其余各组分别于术后2、6、12及24h进行检测。检测血清转氨酶（ALT、AST）水平和肝匀浆组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。结果术后2h,PH组、IR组和IHP组大鼠血清ALT和AST水平均高于SO组（尸〈0．05）。在术后6、12和24h,IHP组大鼠血清ALT和AST均高于PH组,但低于IR组（均P〈0．05）。与IR组相比,IHP组大鼠术后各时间点残余肝脏中SOD活性明显升高,而MDA含量则显著降低（均P〈0．05）。结论间断低氧预适应对残余肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用,其机理可能与提高肝脏的抗氧化能力有关。     

肝缺血再灌注对肠道损伤及细菌移位的研究进展

肝缺血再灌注损伤除了对肝脏损伤外,还可因肠组织缺血缺氧、再灌注损伤、内毒素血症、免疫屏障受损等引起肠黏膜上皮细胞脱落、坏死,增加小肠通透性,促发肠道细菌和内毒素移位,诱发MODS,并且肝脏损伤和肠道损伤相互形成恶性循环。因此,在肝缺血再灌注过程中,有效的保护肠黏膜屏障,防止细菌和内毒素移位,将减少肝切除、肝移植等手术的并发症,提高其存活率。     

大鼠原位辅助性肝移植治疗急性肝功能衰竭

为了评价大鼠原位辅助性部分肝移植（ＡＰＯＬＴ）对急性肝功能衰竭的支持作用。切除７５％的肝脏并阻残余肝脏的血供５０分钟导大鼠急性肝功能衰竭。治疗组受体计切除７５％并将３０％的供肝植于原位，然后阻断残余的右上叶的右下叶之血供５０分钟。结果显示，大鼠急性肝功能衰竭的５天生存率仅３３％，而接受ＡＰＯＬＴ者５天生存率和移植肝存活率分别为８０％和７３％，术后第５天肝功能基本恢复正常。可见，大肝切除和余肝缺血诱     

鼠肝大部切除诱发细菌移位时门静脉高压的作用

为了研究门脉高压在肝大部分切除致细菌移位中的作用,选用228只大鼠,分为70％肝切除组(Hr70组)、90％肝切除组(Hr90组)、门静脉次全结扎组(PV组)和假手术组(SO组)。术后0、1、2、4、6小时测定平均动脉压、门静脉压,作门静脉,腔静脉血细菌培养,肝、肾、脾、肺、肠系膜淋巴结、近远端小肠、横结肠取样镜检,激光Doppler检测横结肠及小肠壁的微循环。     

生长激素对肝大部切除术后鼠肠黏膜的保护作用

目的: 探讨鼠肝大部切除术后生长激素对肠黏膜屏障的保护作用,为临床使用重组人生长激素保护肠黏膜提供实验依据.方法: 90只SD大鼠随机分为对照组、生理盐水(normal saline,NS)组和生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)组,后两组切除肝左叶和右叶;各组连续用药6 d,分别于术后第1,2,3,5和10天取回肠组织行光镜形态学观察及图像分析检测肠黏膜厚度和绒毛高度,并对回肠黏膜上皮细胞行核增殖抗原(proliferate cell nucleus antigen,PCNA)免疫组织化学测定;取心脏血4~6 ml,检测内毒素.结果: 肝大部分切除术后第1,2天,内毒素明显升高,而rhGH组与对照组无明显差异.术后第3,5天,回肠黏膜明显萎缩,绒毛变薄;黏膜上皮细胞PCNA明显下降(P<0.01).应用rhGH 3 d后,回肠绒毛高度、黏膜厚度和PCNA度均增加(P<0.01);术后第5天,达到对照组水平.结论: 肝大部分切除术后肠黏膜屏障受损,应用rhGH可保护肠黏膜屏障,减少血浆内毒素水平.     

Ginsenoside Rb1 improves energy metabolism in the skeletal muscle of an animal model of postoperative fatigue syndrome

Background

Postoperative fatigue syndrome (POFS) is a common clinical complication followed by almost every major abdominal surgery. Ginsenoside Rb1 (GRb1), a principle ginsenoside in ginseng, could exert a potent anti-fatigue effect on POFS. However, the mechanism is still unknown. Previous studies revealed that alterations in the energy metabolism in the skeletal muscle may play a vital role in the development and progression of fatigue. In the present study, we investigate the effect of GRb1 on energy metabolism in the skeletal muscle of a rat model of POFS induced by major small intestinal resection.

Methods

GRb1 (10 mg/kg) was intraperitoneally administrated once daily for 1, 3, 7, and 10 d from the operation day, respectively. The locomotor activity was recorded every day, and total food intake was calculated starting from 24 h after surgery. After GRb1 treatment was completed, blood and skeletal muscle were sampled. The level of blood glucose was determined by an automatic biochemical analyzer. The content of adenosine triphosphate (ATP) in skeletal muscle was determined by high-performance liquid chromatography. The activity of energy metabolic enzymes Na⁺-K⁺-ATPase, pyruvate kinase, and succinate dehydrogenase (SDH) was assessed by commercially available kits.

Results

The results revealed that GRb1 could increase locomotor activity of POFS rats and significantly increase their total food intake postoperatively (P < 0.05). Furthermore, GRb1 also significantly increased ATP content in the skeletal muscle of POFS rats (P < 0.05). Meanwhile, the activity of Na⁺-K⁺-ATPase and SDH in the skeletal muscle of POFS rats was enhanced by GRb1 (P < 0.05). However, no significant differences in blood glucose and pyruvate kinase were found between the POFS and GRb1 treatment rats (P > 0.05).

Conclusions

These results suggest that GRb1 may improve skeletal muscle energy metabolism in POFS, and the underlying mechanism may be associated with an increase in the content of ATP and an enhancement in the activity of energy metabolic enzymes such as Na⁺-K⁺-ATPase ATPase and SDH in the skeletal muscle.     

Ischemia-reperfusion of small liver remnant promotes liver tumor growth and metastases--activation of cell invasion and migration pathways.

Elucidating the mechanism of liver tumor growth and metastasis after hepatic ischemia-reperfusion (I/R) injury of a small liver remnant will lay the foundation for the development of therapeutic strategies to target small liver remnant injury, and will reduce the likelihood of tumor recurrence after major hepatectomy or liver transplantation for liver cancer patients. In the current study, we aimed to investigate the effect of hepatic I/R injury of a small liver remnant on liver tumor development and metastases, and to explore the precise molecular mechanisms. A rat liver tumor model that underwent partial hepatic I/R injury with or without major hepatectomy was investigated. Liver tumor growth and metastases were compared among the groups with different surgical stress. An orthotopic liver tumor nude mice model was used to further confirm the invasiveness of the tumor cells from the above rat liver tumor model. Significant tumor growth and intrahepatic metastasis (5 of 6 vs. 0 of 6, P=0.015), and lung metastasis (5 of 6 vs. 0 of 6, P=0.015) were found in rats undergoing I/R and major hepatectomy compared with the control group, and was accompanied by upregulation of mRNA levels for Cdc42, ROCK (Rho kinase), and vascular endothelial growth factor, as well as activation of hepatic stellate cells. Most of the nude mice implanted with liver tumor from rats under I/R injury and major hepatectomy developed intrahepatic and lung metastases. In conclusion, hepatic I/R injury of a small liver remnant exacerbated liver tumor growth and metastasis by marked activation of cell adhesion, invasion, and angiogenesis pathways.     

小体积肝切除促进肝硬化大鼠模型肝脏再生及肝功能恢复的实验研究

目的 观察小体积肝切除对肝硬化大鼠模型肝脏再生及肝功能恢复的影响.方法 采用CCl4腹腔注射方法制备肝硬化大鼠模型,肝硬化大鼠模型实施20％肝切除(n=30),以肝硬化假手术组(n=30)和正常大鼠20％肝切除组(n=30)作对照.在肝硬化模型制备至20％肝切除术后3个月的过程中,采用苏木精-伊红染色观察肝脏形态结构的变化,定期检测模型肝功能、凝血功能,采用Western blot、Re-al-time PCR检测肝细胞生长因子和转化生长因子-β以及增殖细胞核抗原在肝细胞中的表达情况,并与对照组进行比较.结果 在肝硬化模型制备过程中,苏木精-伊红染色提示大鼠肝脏逐渐呈现肝纤维化、肝硬化样改变;与正常大鼠比较,肝硬化动物模型中转化生长因子-β基因、蛋白表达逐渐增强.在接受20％肝切除术后3个月,肝硬化模型肝功能及凝血功能均较术前有所改善,同时TGF-β表达水平显著低于作为对照的肝硬化假手术组(P＜0.05),而肝细胞生长因子和增殖细胞核抗原基因、蛋白表达水平显著高于作为对照的肝硬化假手术组(P＜0.05).结论 小体积肝切除有助于促进肝硬化大鼠模型肝脏再生及肝功能的恢复,这为进一步深入开展小体积肝切除防治肝硬化进展的相关研究提供了新思路.     

High expression of the CD14 gene and interleukin-1beta gene in the liver and lungs of cirrhotic rats after partial hepatectomy

BACKGROUND: A hepatic resection is invasive for cirrhotic patients because postoperative complications, such as hepatic disturbance sometimes resulting in hepatic failure and pulmonary disturbances, are frequent and serious. We investigated here the alteration of the CD14 and inflammatory cytokine genes expressed in the liver and lungs after partial hepatectomy (PH) of a cirrhotic rat model to help elucidate the pathophysiological change occurring during the postoperative course of hepatectomized cirrhotic patients. MATERIALS AND METHODS: Wistar rats were orally administrated carbon tetrachloride once a week for 14 weeks to induce liver cirrhosis. In comparison with cirrhotic and normal rats, we analyzed the expression of the CD14, tumor necrosis factor-alpha, and interleukin (IL)-1beta genes in remnant liver and whole lung tissue during 48 h after 30% partial hepatectomy with Northern blottings and measured asparatate aminotransferase (AST) in serum for evaluation of postoperative hepatic injury. Gadolinium chloride (GdCl3; 7 mg/kg body weight) was intravenously injected 24 h before partial hepatectomy to suppress Kupffer cells (KC) activation. RESULTS: The expression of the CD14 and IL-1beta genes moderately increased at 6 h and peaked at 12 h in parallel with the time course of AST values after PH only in cirrhotic rats. GdCl(3) significantly inhibited the elevation of AST similar to the inhibition of the expression of the CD14 and IL-1beta genes after PH. In addition, the expression of these genes showed marked enhancement in the lungs of the cirrhotic hepatectomy model. CONCLUSIONS: KC activation was responsible for hepatic injury after PH, and the CD14 system appeared to be an early trigger for KC activation followed by induction of inflammatory cytokine IL-1beta synthesis leading to hepatic injury. Furthermore, the CD14 system was suggested to participate in respiratory disturbances after hepatectomy in cirrhosis.     

烫伤大鼠肠粘膜环氧合酶活性和mRNA表达的变化

目的　探讨烫伤大鼠伤后 72h内肠粘膜环氧合酶 (COXs)活性和mRNA表达的变化及其意义。　方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,用底物荧光法检测COX 1、COX 2酶活性变化 ,RT PCR法检测COX 1、COX 2mRNA的表达。　结果　烫伤后大鼠肠粘膜内COX 2酶活性和mRNA表达明显升高 ,而COX 1酶活性和mRNA表达变化幅度较小。　结论　COXs参与了烫伤大鼠肠粘膜损伤的病理过程 ,两种异构酶可能发挥不同的作用。     

小剂量多巴胺对烫伤大鼠休克期肠粘膜的保护作用

目的　观察小剂量多巴胺对严重烫伤大鼠休克期肠粘膜机械屏障的保护作用。方法　大鼠预置心导管 ,30 %Ⅲ度烫伤后静脉复苏。观察大鼠常规治疗 (对照组 )和小剂量多巴胺 (3μg·kg-1·min-1)持续给药后 ,血清中二胺氧化酶 (DAO)、丙二醛 (MDA)及乳酸水平的变化 ,对肠道的病理学改变进行评分。　结果　多巴胺治疗组大鼠休克期一般情况明显好于对照组 ,小剂量多巴胺能显著降低严重烫伤大鼠血清中的乳酸、MDA、DAO水平 ,以伤后 3～ 12h明显 ;多巴胺治疗组大鼠回肠病理学评分明显优于对照组。　结论　小剂量多巴胺对严重烫伤大鼠休克期肠粘膜机械屏障有明显的保护作用。     

肠道缺乏胆汁酸对大鼠肝再生的影响

目的 探索肠道缺乏胆汁酸对肝再生的影响.方法 通过喂养大鼠0.2%胆酸(胆酸负荷组)、2%考来烯胺(胆酸缺乏组)建立干扰肠道胆汁酸代谢的动物模型,以喂养标准饲料作为对照组,所有大鼠均行70%肝部分切除术(PH).比较PH后0、1、2、3、7 d三组大鼠的肝脏再生情况,并检测法尼酯衍生物X受体FXR及其靶基因胆汁酸合成限速酶CYP7a1的mRNA表达.结果 胆酸缺乏组的肝再生率在PH后3、7 d显著低于胆酸负荷组和对照组(P＜0.05),1 d时PCNA和Ki-67标记指数(22.21%±2.31%、17.25%±6.50%)显著低于胆酸负荷组(44.4%±4.92%、30.83%±3.91%)和对照组(38.74%±6.42%、27.04%±7.22%),且标记指数高峰延迟.在PH后,胆酸缺乏组FXR mRNA表达显著低于其他两组,而FXR的靶基因CYP7al的mRNA则随时间升高,明显高于其他两组.结论 肠道缺乏胆汁酸可延迟肝脏再生,并伴随FXR mRNA表达下降.     

支链氨基酸和相关拮抗剂降低大鼠中枢5-羟色胺合成减轻术后疲劳综合征的研究

目的：研究观察支链氨基酸（BCAA）和相关拮抗剂作用于中枢5-羟色胺（5-HT）代谢通路后大鼠术后疲劳的改变情况,并探讨5-HT在术后疲劳综合征（POFS）发生发展中的作用。方法50只SD大鼠随机分为5组,每组10只,对照组分别为假手术组和模型组（均注射生理盐水）;干预组分别为注射中性氨基酸转运体抑制剂（BCH）的BCH组、注射5-HT重摄取抑制剂氟西汀的氟西汀组和注射BCAA（缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸以5∶3∶2比例的混合液）的BCAA组。除假手术组仅开腹翻动肠袢外,其余各组行70％中段小肠切除端端吻合术。各组术前1 h、术后1、2、3、4 d腹腔注射给药,每天1次。观察手术前后各组大鼠的一般情况;术后第1～7天分别进行Morris水迷宫试验（包括隐藏平台获得试验和空间搜索试验）以检测大鼠学习记忆能力和鼠尾悬吊试验（检测大鼠体力耐力）评估大鼠疲劳程度;术后第8天采用高效液相色谱-荧光检测器检测大鼠脑组织（海马、纹状体及下丘脑）中的色氨酸、5-HT及5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的水平。结果与模型组相比,干预组大鼠一般情况较好,术后疲劳程度减轻。在隐藏平台获得试验中,模型组穿越平台次数最少,与其他4组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）;模型组与BCAA组的潜伏时间最长,与假手术组和BCH组比较,差异也有统计学意义（P＜0．05）;在空间搜索试验中,模型组与BCAA组的穿越平台次数最少,模型组潜伏期时间与干预组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。鼠尾悬吊试验显示,BCH组和BCAA组大鼠体力耐力较模型组和氟西汀组更好（P＜0．05）。高效液相-荧光检测法检测,3个干预组的脑组织色氨酸水平均明显低于模型组（P＜0．01）;模型组海马5-HT水平高于BCH组和氟西汀组（P＜0．05）;纹状体中5-HT水平比较,假手术组最?