用多聚酶链反应检测小儿白血病微小病毒B19感染及其临床价值

用多聚酶链反应检测小儿白血病微小病毒Ｂ１９感染及其临床价值刘笑梅朱宏柴忆欢王津媛朱玲王利微小病毒Ｂ１９（ＶＢ１９），易侵犯分裂旺盛的骨髓红系细胞，并能独立复制、繁殖，从而影响骨髓的造血功能。我们用多聚酶链反应（ＰＣＲ）法对２８例急性白血病（ＡＬ）患儿...     

急性白血病多药耐药相关蛋白基因表达及其与免疫表型和FAB…

为探讨急性白血病（ＡＬ）患者多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因表达与ＦＡＢ亚型及免疫表型的关系，应用半定量逆转录－多聚酶链反应技术检测了５４例ＡＬ患者ＭＲＰ基因的表达。以正常人或非恶性血液病患者的单信核细胞为对照组，发现临床耐药组ＭＲＰ基因表达（中位数１．１８）高于完全缓解（ＣＲ）组（中位数０．２２，Ｐ＝０．０６５９）。ＡＬ各组ＭＲＰ基因表达均明显高于对照组（中位数）。ＭＲＰ基因表达与白血病ＦＡＢ亚型     

用多聚酶链反应诊断早产、死胎及先天畸形儿巨细胞病毒感染

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测７２例早产、死胎及先天性畸形儿尸解石蜡包埋标本中的巨细胞病毒ＤＮＡ，阳性率６．９４％；５例阳性者中，双胎宫内死亡２例，先天性畸形２例，脑积水１例。结果提示异常妊娠和先天畸形的发生与巨细胞病毒感染有关。文中讨论了多聚酶链反应诊断巨细胞病毒感染的价值。     

小儿急性T淋巴细胞白血病tal－1基因缺失分析

根据ｔａｌ－１基因缺失上下游序列设计一对引物，应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术对１０株人白血病细胞株和７０例小儿急性白血病骨髓标本进行ｔａｌ－１基因缺失分析。结果ＣＥＭ、ＨＢＳ－２和ＲＰＭＩ－８４０２三株Ｔ细胞白血病（Ｔ－ＡＬＬ）细胞株以及３／１６例Ｔ－ＡＬＬ发现ｔａｌ－１基因缺失，５４例其它类型急性白血病均未见基因缺失，而且具ｔａｌ－１基因缺失的Ｔ－ＡＬＬ细胞均为胸腺发育Ｉ期，免疫表型特征为ＣＤ＿２＋、ＣＤ＿７＋、ＣＤ＿１￣－、ＣＤ＿４￣－和ＣＤ＿８￣－。ＰＣＲ方法敏感性达１０￣（－４）。说明ｔａｌ－１缺失发生于部分Ｔ－ＡＬＬ中，可用于微小残留病的检测。     

定量不对称PCR－SSCP检测携带N－ras基因点突变的微量残留白血病细胞

定量不对称ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测携带Ｎ－ｒａｓ基因点突变的微量残留白血病细胞蔡辉国，陈佩贞，张立冬，马双，王立，杨天楹我们采用多聚酶链反应－单链ＤＮＡ构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析检测携带Ｎ－ｒａｓ基因点突变的微量残留白血病细胞（ＭＲＬＣ），其灵敏...     

荧光定量PCR诊断HCMV病毒感染的阈值建立

人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）在我国１０岁以下儿童的感染率（抗ＨＣＭＶ－－ＩｇＧ阳性率）超过９５％。当机体抵抗力低下时，ＨＣＭＶ可引起多种组织的感染甚至危及生命。多聚酶链反应可作为ＨＣＭＶ感染早期快速的检测手段，但由于该病毒潜伏感染的特点（多为肾脏），正常健康人的尿液内亦有少量的ＨＣＭＶ，一般定性ＰＣＲ可能存在一定的假阳性。因此我们采用荧光标记探针，以Ｔａｐｍａｎ技术对尿液中ＨＣＭＶ基因进行定量检测，观     

以PCR－SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53基因点突变

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核昔酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缀氨酸。２２例髓系白血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变导致功能失活在淋巴细胞白血病的发病中可能起一定的作用。     

多聚酶链反应检测幽门螺杆菌临床意义

多聚酶链反应检测幽门螺杆菌临床意义康黎（江西省波阳县人民医院，波阳３３３１００）幽门螺杆菌（ＨｅｌｉｃｏｂａｔｅｒＰｙｌｏｒｉ，ＨＰ）的检测方法有多种，包括细菌涂片、培养、尿素酶试验、血清学检查、１４Ｃ呼吸试验等都有一定的诊断价值，应用多聚酶链反应（...     

多发性骨髓瘤患者EB病毒DNA的检测

多发性骨髓瘤患者ＥＢ病毒ＤＮＡ的检测张王刚陈银侠曹星梅王香玲王俊宏刘捷王剑利李陕区多发性骨髓瘤（ＭＭ）的病因及发病机制仍不清楚，最近研究发现ＥＢ病毒（ＥＢＶ）可诱发免疫功能低下者发生ＭＭ［１，２］。我们应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１９９５年新...     

以PCR—SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53…

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核工本酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缬氨酸，２２例髓系白 血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变     

可变串联重复区多聚酶链反应法评估异基因骨髓移植后的嵌合状态

为更好地评价异基因骨髓移植（ａｌｏ－ＢＭＴ）后的嵌合状态，采用可变串联重复区（ＶＮＴＲ）Ｄ１Ｓ８０位点多聚酶链反应（ＰＣＲ）法对１０例白血病患者ａｌｏ－ＢＭＴ后的嵌合状态进行检测。结果９例为完全嵌合（ＣＣ），１例为混合嵌合（ＭＣ），其中２例经核型分析结果证明为ＣＣ，６例经小卫星ＤＮＡ探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析也证明为ＣＣ。说明ＶＮＴＲ位点ＰＣＲ法检测ａｌｏ－ＢＭＴ后的嵌合状态具有方法简便、快速、灵敏度高的优点，且不需放射性同位素操作，不受血型、性别、ＨＬＡ配型及骨髓增生低下等影响。     

免疫球蛋白重链基因指纹图谱分析小儿急性淋巴细胞白血病的克隆性

目的：探讨小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排形式的种类，以及是否存在几个克隆并存的情况。方法：应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和单链构象多态性（ＳＳＣＰ）技术，构建ＩｇＨ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ基因指纹（ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ），分析３４例ＡＬＬ患儿ＩｇＨ基因重排的基因指纹图谱。结果：单克隆的ＩｇＨ基因重排中除了单等位基因重排９例（３２．１４％）外，有１５例（５３．５７％）是双等位基因重排；４例（１４．２９％）白细胞数高、免疫表型是早期Ｂ细胞的病例表现寡克隆性ＩｇＨ重排。结论：从基因水平证实，小儿ＡＬＬ多发生ＩｇＨ双等位基因重排，且有多个克隆并存的现象。     

急性白血病多药耐药相关蛋白基因表达及其与免疫表型和FAB分型的关系

为探讨急性白血病（ＡＬ）患者多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因表达与ＦＡＢ亚型及免疫表型的关系，应用半定量逆转录－多聚酶链反应技术检测了５４例ＡＬ患者ＭＲＰ基因的表达。以正常人或非恶性血液病患者的单个核细胞为对照组。发现临床耐药组ＭＲＰ基因表达（中位数１．１８）高于完全缓解（ＣＲ）组（中位数０．２２，Ｐ＝０．０６５９）。ＡＬ各组ＭＲＰ基因表达均明显高于对照组（中位数０）。ＭＲＰ基因表达与白血病ＦＡＢ亚型无关。ＣＤ１３＋与ＣＤ１３－组ＭＲＰ基因表达有显著性差异（Ｐ＝０．００２９），而与其它细胞免疫表型无关。根据ＭＲＰ基因表达在ＡＬ各组的分布，将ＭＲＰ与β２微球蛋白之比大于１．０定为ＭＲＰ＋，临床耐药组ＭＲＰ＋占６６．６７％，明显高于ＣＲ组（２０％，Ｐ＝０．０２１３）     

急性淋巴细胞白血病T细胞受体δ基因不完全重排的研究

应用ＤＮＡ多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术对急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）进行了Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）δ基因重排的研究，并获得了３个ＡＬＬ患者ＴＣＲδ基因的Ｖ－（Ｄ）－Ｄ结合部顺序（Ｎ顺序）。证明ＡＬＬ，特别是Ｂ细胞ＡＬＬ中，ＴＣＲδ基因不完全重排的发生率比较高，最常见的两种重排类型为Ｖδ２－（Ｄ）－Ｄδ３和Ｄδ１／２－Ｄδ３。δ基因的不完全重排是早期淋巴分化调控中一个重要的内容。δ基因Ｖ－（Ｄ）－Ｊ结合部     

血液病患者血及骨髓涂片中微小病毒B19的检测

目的：用聚合酶链式反应（PCR）技术检测白血病患者骨髓及血涂片中微小病毒B19－DNA，从而了解白血病患者B19的感染情况，方法：收集临床已确诊的白血病患者的骨髓及血涂片标本，其中，骨髓涂片标本43例（急性淋巴细胞白血病17例，急性非淋巴细胞白血病18例，混合白血病2例，慢性粒细胞性白血病6例），血涂片30例（急性淋巴细胞白血病12例，急性非淋巴细胞白血病14例，慢性白血病4例），正常体检人员血涂片30例，用本文建立的PCR及限制性内切酶酶切检测的方法检测所收集标本的B19－DNA进行病例对照研究，结果：骨髓涂片和血涂片之间B19的检出率无统计学差异（P＞0．05），但是二者与正常对照组相比均有统计学差异，分别为P＜0．005和P＝0．05，急性淋巴细胞白血病，急性非淋巴细胞白血病和慢性白血病B19的检出率之间无统计学差异（P＞0．05），结论：研究显示白血病患者由于化疗及免疫功能低下，易感染B19病毒，病毒感染后易诱发骨髓造血功能低下。     

多重PCR检测急性淋巴细胞白血病IgH及TCRγ链重排基因

多重ＰＣＲ检测急性淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲγ链重排基因徐兵周淑芸孙竞免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排，可作为淋巴细胞白血病特异性基因标志。应用多聚酶链（ＰＣＲ）技术检测重排基因以其灵敏、快速等特点而优于其它传统方法。但目前Ｐ...     

小巨核细胞免疫酶标染色在急性白血病诊断及分型中的意义

小巨核细胞免疫酶标染色在急性白血病诊断及分型中的意义王曦，程爽小巨核细胞是一种病态的巨核细胞，可存在于多种血液病的骨髓中。抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体免疫酶标染色对巨核细胞有特异性。我们应用免疫酶标ＡＢＣ染色观察７０例急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）及...     

用聚合酶链反应检测急性非淋巴细胞白血病微量残留细胞

目的：探讨用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测急性非淋巴细胞白血病微小残留病的意义。方法：利用ＰＣＲ扩增降钙素（ＣＴ）基因５＇端第４个甲基化位点附近的ＤＮＡ序列，所有样本ＤＮＡ在做ＰＣＲ前用过量的限制性内切酶消化，检测２５例初治或复发的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ），１０例完全缓解期患者。细胞系ＨＬ－６０作阳性对照，正常对照组１０例。结果：２５例ＡＮＬＬ中，１７例阳性（６４％），１０例缓解期骨髓标本，４     

脑瘫患儿CT改变与巨细胞病毒感染关系的初步研究

用多聚酶链反应法（ＰＣＲ）检测７４例脑瘫患儿尿中巨细胞病毒ＤＮＡ（ＣＷＶ－ＤＮＡ），ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率为５４．１％，同时行ＣＴ检查，其中４７例（６３．５％）异常，在ＣＴ异常组中ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率为６３．８％，而ＣＴ正常组阳性率为３６．５％，两者比较差异有显著性。（Ｐ＜０．０５）。示ＣＭＶ感染可能与婴儿脑损伤有关，且在一部分患儿可引起解剖性损伤。     

骨髓增生异常综合征p53基因突变的临床意义

骨髓增生异常综合征ｐ５３基因突变的临床意义江继发潘祥林朱平王正起王应福王岩我们采用多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析方法检测了６７例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者的ｐ５３基因点突变，结合向白血病转化，观察该基因在转变中相对危险性和...