成纤维细胞介导的IL－4基因疗法对小鼠浆细胞瘤的治疗效果

为观察白细胞介素４（ＩＬ－４）基因疗法对晚期浆细胞瘤的治疗作用，用成纤维细胞介导的ＩＬ－４基因疗法治疗小鼠Ｊ５５８Ｌ浆细胞瘤，并对其免疫学机制进行了初步探讨。对经治疗小鼠存活期的观察表明，该疗法对早期荷瘤小鼠（荷瘤３天以内）无明显治疗效果；而对晚期荷瘤小鼠（荷瘤１０天以上）则具有较明显的治疗效果；当与常规瘤苗联合应用时其疗效更加明显。对经治疗的荷瘤小鼠体内抗肿瘤免疫功能的检测表明，晚期荷瘤小鼠经ＩＬ－４基因治疗后第１２天，脾细胞ＮＫ活性及经诱导后的ＬＡＫ活性变化不明显，而经诱导的ＣＴＬ杀伤活性明显提高；当与常规瘤苗联合应用时ＣＴＬ杀伤活性的提高更为明显。结果显示，成纤维细胞介导的ＩＬ－４基因疗法主要通过增强ＣＴＬ杀伤活性而对晚期浆细胞瘤小鼠发挥治疗作用。     

万宝口服液对荷瘤小鼠免疫功能的影响

本文观察了万宝口服液对荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响，结果表明，万宝口服液２．４、４．８、９．６ｇ三剂量均明显增加荷瘤小鼠溶血素含量，增强脾淋巴细胞增殖反应；提高脾ＮＫ细胞杀伤率。     

自杀基因疗法结合HSP—PC瘤苗抗黑色素瘤研究

目的：研究５－氟尿嘧啶／胞嘧啶脱氨酶（５ＦＣ／ＣＤ）基因疗法与热休克蛋白－多肽复合物（ＨＳＰ－ＰＣ）瘤苗免疫疗法联合抗肿瘤效果。方法：将携带ＣＤ基因的重组腺病毒注射到小鼠黑色素瘤体内，腹腔注射５－ＦＣ，同时皮下接种ＨＳＰ７０－ＰＣ。结果：经联合治疗后，７０％荷瘤小鼠肿瘤体积缩小、消退，小鼠存活期延长，肿瘤组织明显坏死?炎症细胞、ＣＤ＾＋４、及ＣＤ＾＋８Ｔ细胞浸润明显。结论：５－ＦＣ／ＣＤ基因疗法结     

GM-CSF基因转染瘤苗对小鼠T淋巴细胞亚群及生存期的影响

将携带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）基因的重组腺病毒载体转集BAI．B／c小鼠肝癌细胞株（H22），体外经60Coγ射线灭活后制成瘤苗，用以治疗荷瘤小鼠。应用流式细胞仪（FCM）测定荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化，并观察荷瘤小鼠生存期。结果发现，GM－CSF基因转染瘤苗能显著提高小鼠外周血CDs8＋T淋巴细胞亚群的含量，荷瘤小鼠生存期显著延长。结果表明：GM—CSF基因转染瘤苗能诱导出有效的抗肿瘤免疫反应，提示应用该疗法进行肿瘤基因治疗的可行性。     

大肠杆菌CD自杀基因与GM-CSF基因联合转移对小鼠红白血病的治疗作用

目的：观察自杀基因与细胞因子基因联合转移的抗肿瘤作用与免疫机制。方法：将表达大肠杆菌胞嘧啶脱胺酶（ＣＤ）的重组腺病毒（ＡｄＣＤ）及表达小鼠粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）基因的重组腺病毒（ＡｄＧＭＣＳＦ）直接进行体内注射，合并应用５氟胞嘧啶（５ＦＣ）对红白血病皮下荷瘤小鼠模型进行治疗。结果：联合基因治疗能显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤的生长，并明显延长其生存期（Ｐ＜０．０５）；免疫功能检测表明，联合基因治疗组小鼠ＣＴＬ杀伤活性明显高于单用ＡｄＣＤ／５ＦＣ、ＡｄＧＭＣＳＦ、对照病毒ＡｄＬａｃＺ／５ＦＣ或ＰＢＳ治疗组；病理分析显示，联合基因治疗组肿瘤细胞发生明显坏死，瘤内及瘤周有大量的炎性细胞浸润。结论：应用自杀基因与细胞因子基因联合转染可更有效地抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长，且可诱导抗肿瘤免疫应答     

白细胞介素3与白细胞介素6基因疗法对化疗造血损伤的恢复作用

为观察白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６基因疗法对化疗后造血恢复及重建的作用，研究了成纤维细胞介导的ＩＬ－３、ＩＬ－６基因疗法以及合用两种基因疗法对５－氟尿嘧啶所造成的造血损伤小鼠模型的恢复作用。结果发现，单用ＩＬ－３基因疗法对化疗后小鼠中性粒细胞及白细胞减少具有促恢复作用，但对血小板促恢复作用不明显；单用ＩＬ－６基因疗法对化疗后小鼠血小板及中性粒细胞减少具有促恢复作用；当合用ＩＬ－３、ＩＬ－６基因疗法时可使化疗后小鼠血小板、中性粒细胞及白细胞提前恢复到化疗前水平，尤其血小板恢复作用更明显，且最低水平时血小板和中性粒细胞数量高于单一疗法时的数量，但合用对白细胞恢复作用效果与单用ＩＬ－３基因疗法相比无显著差异。对小鼠骨髓ＣＦＵ－ＧＭ及ＣＦＵ－ＭＫ进行体外动态观察，发现合用疗法促进ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ恢复作用显著高于单一疗法。结果表明合用ＩＬ－３、ＩＬ－６基因疗法能显著恢复化疗导致的造血损伤，促进化疗后血细胞恢复的疗效显著优于单用ＩＬ－３或ＩＬ－６基因疗法，可望为恢复肿瘤患者放、化疗导致的机体造血损伤提供新的途径。     

脂质体介导的腹腔内IL-2和IL-6基因疗法对淋巴瘤小鼠巨噬细胞的激活作用

目的：探讨白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素６（ＩＬ－６）基因疗法的抗肿瘤作用机制。方法：将脂质体包裹的ＩＬ－２基因和ＩＬ－６基因直接注射至ＥＬ－４淋巴瘤小鼠腹腔后，研究淋巴瘤小鼠的腹腔巨噬细胞（Ｍφ）在基因治疗后的功能变化。结果：腹腔内单独注射脂质体包裹的ＩＬ－２基因后，可明显提高Ｍφ的ＭＨＣＩａ的表达，增强Ｍφ的杀伤活性，并促进Ｍφ诱导白细胞介素１（ＩＬ－１）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的产生；腹腔内单独注射脂质体包裹的ＩＬ－６基因后，对Ｍφ也具有激活作用，但效果不及前者。二者联合后能非常显著地提高荷瘤小鼠的Ｍφ的上述功能。结论：腹腔内脂质体介导的ＩＬ－２基因和ＩＬ－６基因治疗能有效地解除淋巴瘤小鼠体内Ｍφ功能的抑制，激活Ｍφ发挥抗肿瘤作用。     

GM—CSF基因转染瘤苗对小鼠T淋巴细胞亚群及生存期的影响

将携带有人粒细胞－巨噬细胞落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）基因的重要病毒载体的转染ＢＡＬＢ／ｃ小鼠肝癌细胞株（Ｈ２２）体我经＾６０Ｃｏγ射线灭活后制成瘤苗，用以治疗荷瘤小鼠，应用流式细胞仪（ＦＣＭ）测定荷瘤小鼠外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化，并观察荷瘤小鼠生存期。结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ基因转染瘤苗能量显著提高小鼠外周血ＣＤ＾＋８Ｔ淋巴细胞亚群的含量，荷瘤小鼠生存期显著延长，结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ基因转染瘤苗     

自杀基因疗法结合HSP-PC瘤苗抗黑色素瘤研究

目的 :研究 5 -氟尿嘧啶 /胞嘧啶脱氨酶 (5FC/CD)基因疗法与热休克蛋白 -多肽复合物 (HSP -PC)瘤苗免疫疗法联合抗肿瘤效果。方法 :将携带CD基因的重组腺病毒注射到小鼠黑色素瘤体内 ,腹腔注射 5 -FC ,同时皮下接种HSP70 -PC。结果 :经联合治疗后 ,70 %荷瘤小鼠肿瘤体积缩小、消退 ,小鼠存活期延长 ,肿瘤组织明显坏死 ,炎症细胞、CD4+ 、及CD8+ T细胞浸润明显。结论 :5 -FC/CD基因疗法结合HSP -PC瘤苗免疫疗法抗小鼠黑色素瘤作用显著 ,具有临床应用前景。     

防风多糖JBO—6对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抗肿瘤作用的实…

本文研究了防风多糖ＪＢＯ－６对荷瘤小鼠免疫功能的改善作用及体内外抗肿瘤作用。结果证明防风多糖对Ｓ１８０荷瘤小鼠的脾指数有明显的增重作用；对荷瘤小鼠的胸腺细胞，脾Ｔ细胞及Ｂ细胞增殖均有明显改善作用；对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用及细胞毒作用及ＮＫ细胞有改善作用；体外防风多糖对Ｓ１８０细胞生长无抑制作用，但体内对Ｓ１８０移植瘤有明显的抑瘤作用，量效关系明显，１００ｍｇ／ｋｇ的抑瘤率高达６９．１％。     

混合骨髓移植的实验研究

目的：探讨在异基因骨髓移植治疗白血病中既控制移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）又同时保留移植物抗白血病（ＧＶＬ）作用的移植方案。方法：采用近交系小鼠移植模型，在异基因骨髓、脾细胞移植物中混合一定比例的同基因脾细胞，观察移植后受鼠ＧＶＨＤ死亡率、脾结节数、移植后不同时间骨髓造血重建细胞来源以及受鼠脾脏淋巴细胞对供、受鼠双方来源的刺激细胞增殖反应；采用Ｌ６１５小鼠白血病模型观察混合移植对荷瘤小鼠生存时间及死亡原因的影响。结果：混合移植可以有效减轻ＧＶＨＤ，异基因造血免疫细胞在受鼠体内一过性存留并发挥移植物抗宿主反应，使荷瘤小鼠生存时间明显延长。结论：异基因骨髓、脾细胞移植物中混合一定比例的同基因脾细胞使移植受鼠体内既具有主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）不合的免疫活性细胞发挥一过性ＧＶＬ作用，同时减轻了异基因骨髓移植的严重ＧＶＨＤ。     

杏多糖粗提物对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：从杏果肉中提取杏多糖粗提物，探讨其体外抑瘤功效及其机制。方法：实验于2003—06／08在新疆医科大学公共卫生学院动物实验室以S180荷瘤小鼠为研究对象，分别观察杏多糖各剂量组的抑瘤效果及对荷瘤小鼠免疫功能的影响，并以细胞免疫为主，探讨体内抑瘤作用的机制。结果：杏多糖400mg／kg剂量组对S180荷瘤小鼠肿瘤生长有抑制作用，抑瘤率为31．71％；杏多糖400mg／kg剂量组可明显增强荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力(P&;lt;0.05)，杏多糖400mg／kg剂量组对荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子α均有诱生作用，可刺激肿瘤坏死因子α接近正常水平(P&;lt;0．05)。杏多糖各剂量组白细胞介素2水平与荷瘤模型组间差异无统计学意义。结论：杏多糖粗提物具有一定的抗肿瘤作用，抑制肿瘤生长和增殖可以提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能。     

褪黑素抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长效果的研究

目的观察褪黑素对H22荷瘤小鼠模型肿瘤生长的抑制效果。方法复苏并培养H22细胞,将H22细胞以皮下注射方式接种到小鼠右侧腋部,建立H22荷瘤小鼠肿瘤模型,随机分为生理盐水组（对照组）、10mg／kg褪黑素组、20mg／kg褪黑素组,腹腔注射,1次／d,共注射14d,接种肿瘤15d后处死小鼠,观察肿瘤质量体积及肿瘤转移情况。结果成功构建H22荷瘤小鼠模型,褪黑素治疗组中,小鼠肿瘤的质量、体积较对照组明显降低（P〈0.05）,且具有一定的量效关系。结论褪黑素对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制效果。     

MUC1-2VNTR基因免疫治疗多发性骨髓瘤荷瘤小鼠的实验研究

目的:明确粘蛋白1两串联重复区(MUC1-2VNTR)基因疫苗对多发性骨髓瘤荷瘤BALB/c小鼠的治疗效果。方法:用转染pcDNA3.1-MUC1的P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞皮下接种以建立BALB/c荷瘤小鼠模型。用含MUC1-2VNTR的重组质粒pcDNA3.1-2VNTR/myc-hisB肌肉注射免疫小鼠,采用乳酸脱氢酶法检测细胞毒性T细胞(CTL)反应活性,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性。观察小鼠的抑瘤率,肿瘤质量。结果:用重组质粒免疫BALB/c荷瘤小鼠25 d后,重组质粒组肿瘤质量明显轻于空质粒对照组(0.5605±0.2065 g vs.1.521±0.6985g)(P0.01)。重组质粒肌肉注射组CTL、NK细胞活性显著高于对照组;小鼠脾淋巴细胞得到增殖,与空质粒对照组比较,差异非常显著(P0.01)。MUC1-2VNTR基因免疫能诱发小鼠抗肿瘤作用。结论:MUC1-2VNTR基因疫苗可针对多发性骨髓瘤荷瘤BALB/c小鼠诱导产生特异性细胞及体液免疫应答,能诱发小鼠抗肿瘤效应,对多发性骨髓瘤的治疗具有潜在的应用价值。     

B7-1与CD40L在淋巴瘤免疫治疗中的协同作用

为了研究B7-1与CD40L共刺激途径在淋巴瘤的免疫治疗中的作用，探讨治疗淋巴瘤疫苗有效的作用方式，将A20淋巴瘤细胞株接种在BALB／C小鼠身上以构建荷瘤小鼠模型，将B7-1与CD40L表达载体单独或联合导入肿瘤内，以PBS和空载体作为对照，观察肿瘤生长的情况；应用肿瘤病理切片和HE染色技术观察肿瘤组织形态及淋巴细胞浸润情况，采用CCK-8试剂盒检测荷瘤小鼠脾CTL杀伤效应。结果显示，瘤内注射B7-1或CD40L表达载体可导致肿瘤生长延缓或体积缩小，两者联合注射较对照组和单独注射组的肿瘤消退效应明显增强。肿瘤形态学观察表明，治疗小鼠肿瘤局部有炎性细胞浸润并伴有大面积的坏死，肿瘤局限化；CCK8试剂盒检测显示小鼠脾CTL杀伤能力增强。结论：B7-1与CD40L疫苗对淋巴瘤具有治疗效应，两者联合治疗的效果优于单一治疗。质粒载体瘤内注射可作为一种安全有效的肿瘤疫苗作用方式。     

微米中药复方抗癌一号延长荷瘤小鼠存活时间的可能机制

目的 通过微米中药复方抗癌一号对小鼠S180肉瘤的治疗效果的实验研究，探讨该微米中药抑制小鼠S180肉瘤生长的可能的作用机理。方法 S180肉瘤细胞接种到BALB/C小鼠皮下及腹腔，成功建立BALB/C小鼠肿瘤模型后，灌胃和腹腔注射复方抗癌一号微米中药及其提取液。结果 荷瘤小鼠体内实验表明该微米中药可明显抑制肿瘤生长，减少腹水的产生，明显延长荷瘤小鼠的存活时间。肿瘤抑制率为44%，生命延长率达到41.6%。荷瘤小鼠体外实验表明该微米中药具有明显的杀死瘤细胞作用，使肿瘤细胞变性坏死。结论 微米中药复方抗癌一号与其提取液相比，能更有效地抑制肿瘤生长，杀死肿瘤细胞，延长荷瘤小鼠存活时间。     

针刺治疗鼠胶原性关节炎的免疫学研究及其与Cx43基因的关系

目的探讨针刺治疗Cx43基因敲除鼠胶原性关节炎（CIA）的疗效及免疫学机制。方法以Cx43基因敲除小鼠杂合型和野生型为研究对象，用牛Ⅱ型胶原诱导CIA模型。在初次免疫后第4周开始针刺治疗，连续3周。观察关节炎分数，流式细胞术检测脾淋巴细胞中Th细胞亚群含量。结果Cx43基因敲除杂合型小鼠CIA发病率及关节炎分数明显低于野生型小鼠；针刺抑制野生型CIA小鼠Th1细胞分泌，降低Th1／Th2比值，对Th2细胞的分泌无明显影响；而针刺对Cx43基因敲除杂合型CIA鼠无明显影响。结论针刺治疗野生型CIA小鼠疗效明显优于Cx43基因敲除杂合型CIA小鼠，提示针刺疗效与Cx43基因密切相关，其疗效可能是通过调节Th1／Th2平衡起作用的。     

香菇多糖、银耳多糖对荷瘤小鼠的免疫调节作用

目的：探讨复合多糖对S180荷瘤小鼠功能的影响。方法：（1）模型：S180荷瘤小鼠动物型；（2）免疫检测方法：溶血素测定，T淋巴细胞转化功能测定，腹腔巨噬细胞吞噬功能测定。（3）受试药物及给药方法；复合多糖口服。结果：复合多糖以0．75g/kg剂量灌胃荷瘤小鼠，可明显提高血清溶血清（P＜0．05）和T淋巴细胞转化功能（P＜0．05），表明该制剂可明显提高荷瘤小鼠的体液和细胞免疫功能，同时以1．5g/kg和0.75g/kg剂量可明显提高荷瘤小鼠的腹腔吞噬细胞功能（P＜0．05－0．01），表明该制剂对非特异性免疫有明显的促进作用。结论：复多糖对肿瘤机体免疫功能有明显的促进作用。     

口服猪脾转移因子对正常,化疗,荷瘤小鼠DNCB皮肤DTH的影响

本实验结果表明，二硝基氯苯（ＤＮＣＢ）能致敏正常小鼠产生皮肤迟发型超敏反应（ＤＴＨ），而化疗，荷瘤小鼠皮肤ＤＴＨ受到明显抑制（Ｐ＜０．００１）；当ＤＮＣＢ致敏的正常，化疗，荷瘤小鼠同时口服与腹注猪脾转移因子（ＰＳ－ＴＦ）一定剂量后，对正常小鼠皮肤ＤＨＴ无明显影响（Ｐ＞０．０５）；对化疗，荷瘤小鼠皮肤ＤＴＨ有明显增强作用（＜０．０５－０．００１）。表明，ＰＳ－ＴＦ对化疗和肿瘤所致的细胞免疫功能下降有     

梁金菇多糖对荷瘤鼠的抗肿瘤作用和免疫功能影响

目的 :研究梁金菇多糖的抗肿瘤效果及其对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。方法 :建立荷瘤小鼠模型 ,观察梁金菇多糖体内的抑瘤作用 ,采用MTT法检测小鼠的脾淋巴细胞转化、NK杀伤活性及LAK杀伤活性的影响。结果 :梁金菇多糖能够明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长 ,能够促进正常和荷瘤小鼠的脾淋巴细胞的转化 ,提高刺激指数 ,提高NK杀伤活性及LAK杀伤活性。结论 :梁金菇多糖提高荷瘤小鼠的免疫功能是其掏肿瘤效应的机制之一。