小半夏加茯苓汤不同提取部位总生物碱含量研究

目的 研究小半夏加茯苓汤不同提取部位总生物碱的含量差异,为制定小半夏加茯苓汤的提取工艺和质量控制标准奠定基础.方法 采用紫外分光光度法测定小半夏加茯苓汤醇提物不同极性溶剂萃取部位总生物碱的含量,以溴百里酚蓝作为显色剂,最大吸收波长为410 nm.结果 小半夏加茯苓汤不同提取部位的总生物碱在0.0122～0.1220 mg/ml(r=0.9997)范围内呈良好线性关系,其正丁醇萃取部位总生物碱含量占23.2540％、水层总生物碱含量占10.7448％、石油醚层总生物碱含量占7.2594％、乙酸乙酯层总生物碱含量占8.2019％.结论 小半夏加茯苓汤不同提取部位总生物碱含量差异较大,以正丁醇萃取部位含量最高,其次是水层、石油醚层、乙酸乙酯层,即各部位总生物碱含量由高至低依次为正丁醇萃取部位、水层、石油醚层、乙酸乙酯层,为进一步研究小半夏加茯苓汤的止呕药效部位奠定了基础.     

产地对半夏相关毒性物质基础和急性毒性影响的实验研究

目的对不同产地半夏药材水提组分中相关毒性物质基础的含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨产地对半夏毒性物质含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、酸碱滴定法、经典急性毒性实验法,进行半夏水提组分总生物碱、总有机酸及其可测单一成分的含量测定和急性毒性比较研究。结果不同产地的半夏总有机酸含量依次为湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏;琥珀酸含量依次为山东半夏〉湖北半夏〉贵州半夏;总生物碱含量依次为湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏;麻黄碱含量依次为湖北半夏〉贵州半夏〉山东半夏;鸟苷含量依次为湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏。毒性大小为：湖北半夏〉山东半夏〉贵州半夏。结论产地对半夏相关毒性物质的含量与毒性大小有一定的影响,且半夏毒性大小与总有机酸、总生物碱含量呈一定相关性。     

三七药材中农药及重金属残留特征研究

目的:了解有机氯农药残留及5种重金属(铜、砷、镉、汞、铅)在三七植物体中的残留特征。方法:于2013年4月选择云南省嵩明县白邑镇、寻甸县六哨乡3年生三七进行样品采集,采集三七植株60株及其根际土壤样品1 kg。对其各个部位及栽培土壤样品进行有机氯农药残留及5种重金属的检测。采用2010年版《中国药典》(一部)的农药残留量测定法测定有机氯农药残留,采用铅、镉、汞、砷、铜法测定5种重金属。结果:嵩明县白邑镇三七各部位均检出五氯硝基苯,其含量为根皮>须根≥剪口>筋条>茎叶;而寻甸县六哨乡三七仅根皮及须根中检出五氯硝基苯,其含量为根皮>须根。三七样品各部位均未检出汞,其他重金属含量均以须根中最高;土壤中砷、铅含量较高,而样品中砷、铅含量远低于土壤。结论:三七不同部位的农药、重金属的含量是不同的,须根部位农药、重金属含量相对较高。三七样品含有有机氯农药残留,主要为五氯硝基苯;三七对镉的蓄积能力较强。     

不同醇处理方式对半夏毒性物质基础含量和急毒影响的比较研究

目的比较不同醇处理方式对半夏总生物碱和总有机酸含量的影响,并对其急性毒性进行观察与评价,为临床用药的安全性提供依据。方法分别用不同醇处理方式制备半夏不同样品,采用紫外分光光度法,取各供试品溶液与空白对照液,在波长416 nm处测定吸光度,计算总生物碱含量,采用酸碱滴定法测定各样品中总有机酸的含量。按照经典小鼠急毒试验方法,公斤体重法计算最大耐受量(MTD),测定最大给药量(MLD),考察半夏75%醇渗、75%醇提(MTD)值,30%醇提组、30%醇渗组(MLD)值,连续给药观察14天,记录各组动物体重变化,毒性症状谱及死亡情况。结果半夏不同醇处理提取(75%醇渗、75%醇提、30%醇提组、30%醇渗组)中总生物碱含量为75%醇渗液>75%醇提液>30%醇渗液>30%醇提液;总有机酸含量为75%醇渗液>75%醇提液>30%醇提液>30%醇渗液。急毒研究结果显示,半夏75%醇渗MTD可达94.4 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的734.2倍;半夏75%醇提MTD可达99.2 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的771.6倍;半夏30%醇提MLD值为295.2 g.kg-1.d-1,相当于临床人用量的2 296.0倍。半夏30%醇渗MLD值为291.6g.kg-.1d-1,相当于临床人用量的2268.0倍。结论提取温度和醇提取浓度对半夏毒性相关物质基础含量影响较大,总生物碱和总有机酸部位均在高浓度醇溶液中含量最高,总生物碱的提取还受温度影响,而总有机酸受温度影响不大。急毒试验结果显示,不同醇提取样品毒性大小与总生物碱、总有机酸含量有一定的相关性。     

脱毒栽培、野生宿半夏总生物碱测定

半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata（Thunb．）Breit．的干燥块茎。其主要成分含有淀粉,辣性物,半夏蛋白,苷类,酚类,甾醇类,脂肪酸类,无机元素,生物碱类等多种化学成分。其药理作用有镇咳,止吐,解毒等功效,生物碱是半夏药理作用的主要有效成分。药材中生物碱含量的多少是评价药材质量好坏的重要指标之一。为此,作者对皖北地区产的野生半夏（宿半夏）和经过脱毒栽培品种的总生物碱成分,     

附子不同部位及其炮制品生物碱的含量比较△

目的:比较附子不同部位及其炮制品生物碱含量变化。方法:采用HPLC法同时测定附子不同部位及其炮制品中6种单、双酯型生物碱的含量,采用滴定法测定其总生物碱含量,分析其不同部位及其炮制品生物碱含量的变化。结果:单酯型生物碱大小依次为:制附子皮>黑顺片>白附片>附子皮>生附子,双酯型生物碱大小为:附子皮>生附子>制附子皮>黑顺片>白附片,总生物碱大小为:附子皮>生附子>制附子皮>黑顺片>白附片。结论:附子皮中生物碱的含量高,毒性大,为了保证其临床有效性与安全性,黑顺片与白附片临床应用应有所区分。     

山东半夏不同炮制品相关毒性物质基础含量与急毒实验比较研究

目的进行山东半夏不同炮制品相关毒性物质基础含量与急性毒性的比较研究,考察炮制对相关毒性物质基础含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、酸碱滴定法和经典急性毒性实验法,进行半夏、清半夏水提组分总生物碱、总有机酸及其可测单一成分的含量测定和急性毒性比较研究。结果相关物质基础含量测定结果显示：总有机酸、总生物碱和鸟苷含量大小为半夏〉清半夏;琥珀酸、麻黄碱含量为清半夏〉半夏。毒性研究结果显示：半夏、清半夏水提组分MLD值为301.2g/kg和374.4g/kg,分别相当于临床70kg成人每公斤体重日用量的2342.7倍和2912.0倍。结论炮制对山东半夏相关毒性物质含量与毒性有一定的影响,半夏毒性大于其炮制品清半夏。     

紫外分光光度法测定雷公藤口服液总生物碱的含量

目的 :分析雷公藤口服液总生物碱的含量。方法 :用醇提 -氧化铝柱层析 -紫外分光光度法测定雷公藤口服液中的雷公藤倍半萜类生物碱含量。结果 :平均回收率为 98.0 8% ,RSD为 0 .35 9% (n=5 )。结论 :适用于雷公藤制剂中总生物碱的含量测定     

半夏总生物碱的含量测定

目的测定不同产地半夏总生物碱的含量,比较相互差异。方法对半夏药材用超声提取,依据酸性染料比色法的原理,在416nm波长下进行测定材料中总生物碱。结果获得良好的回收率（99.98%）,RSD为0.09%。样品在8h内基本稳定。结论测定方法简单快速;不同产地半夏总生物碱含量有一定差异,但相差不大。     

不同煎煮时间对熟附子生物碱的影响

目的 通过测定熟附子不同煎煮时间的生物碱含量,确定最佳的煎煮时间,为规范化的煎煮工艺提供参考.方法 采用HPLC和UV方法分别测定熟附子煎煮液中6种生物碱和总生物碱的含量,并以此含量为指标综合评价其煎煮工艺.结果 熟附子主要含有单酯型生物碱和微量的双酯型生物碱,煎煮0.5h后,3种双酯型生物碱完全消失,而煎煮1h...     

南充地区半夏资源调查及与省外半夏形态特征的比较

目的 调查、比较南充地区半夏资源与省外半夏药材的形态特征,确立前者的品质,为进一步开发利用和规范化种植提供科学依据。方法 查阅文献资料与野外实地调查相结合,采集、鉴定标本,比较药材性状和数据分析。结果 查清了南充地区半夏品种、资源分布、购销情况。结论 南充地区半夏是天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb．)Breit．的干燥块茎,是中国药典收载品种,资源分布广,蕴藏鞋500～1000吨,年产量100～200吨。药材呈类球形,表面白净,质地坚实,断面洁白,富含粉性,在国内外市场很有竞争力,具有很好的利用与开发价值。     

基原对半夏急性毒性和主要化学成分含量影响研究

目的对不同基原半夏的生物碱类和有机酸类成分含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨基原对半夏质量与毒性的影响。方法运用酸性染料比色法、酸碱滴定法、HPLC法、经典急毒实验法,进行半夏、水半夏药材中总生物碱,总有机酸,麻黄碱、鸟苷、琥珀酸含量测定及急性毒性比较研究。结果不同基原总生物碱、总有机酸、鸟苷、琥珀酸含量均为半夏〉水半夏,麻黄碱含量为水半夏〉半夏。一日内按最大给药量给小鼠灌胃半夏、水半夏生品混悬液分别为34.8g/kg、38.4g/kg（按含生药量计算）,相当于临床70kg人每公斤体重日用量的270.7倍、298.7倍以上,连续观察14天,小鼠一般状况良好,无一死亡。结论不同基原半夏药材中主要化学成分含量和毒性大小存在显著差异,半夏毒性大于水半夏,且其毒性大小与总生物碱和总有机酸含量存在一定相关性。     

鄂西高产半夏甾醇类成分的GC指纹图谱研究

目的:建立鄂西高产半夏的指纹图谱分析方法。方法:采用气相色谱(GC)技术,通过对不同产地、不同采收期、不同加工方法的半夏样品的测试分析,确定鄂西高产半夏的指纹图谱。结果:用5种甾醇类成分的色谱峰建立了半夏的指纹图谱;不同半夏图谱的相似度在0.877～0.999之间。结论:半夏甾醇类成分GC指纹图谱数据具有一定稳定性,可作为控制半夏质量的一种新方法。     

不同产地不同粒径半夏种茎发芽和生长能力比较

目的：通过对不同产地，不同粒径半夏种茎的发芽和生长能力进行比较研究，为制定半夏种茎的质量标准提供依据。方法：依据国家标准GB／T3543农作物种子检验规程中总则、抽样、净度分析、发芽实验、水分测定等方法对半夏种茎进行测定。结果：不同产地半夏种茎种质质量差异极显著，湖北京山、四川南充和河南三门峡野生半夏种茎的发芽能力明显优于山西运城和恩施来凤栽培的半夏种茎；不同粒径的半夏种茎的发芽率和发芽势差异显著，其中二级优于一级，优于三级。研究还确定了优质种茎的合适的含水量范围。结论：发芽率、粒径大小、含水量可作为半夏种茎质量的分级指标。     

不同居群野生半夏的生长节律及产量和质量比较研究

目的:观察不同居群野生半夏的生长节律,比较其不同居群产量和品质的差异,为川半夏的引种和良种选育提供依据。方法:将来源于四川主产区和部分省外的野生半夏种质共12份,引种于四川雅安,在生育期内详细考察各居群出苗、开花抽薹、珠芽产生情况;收获后考察各自的增殖率和增重率,并测定其主要化学成分。结果:不同居群半夏的生长节律基本表现一致;增殖率、增重率和可溶蛋白含量差异较大;生物碱和β-谷甾醇含量差异不大。采自四川渠县的S07-28居群产量和品质较优,值得进一步研究。结论:本试验结果可为川半夏的引种栽培和育种提供理论支持。     

半夏类药材提取物抗HeLa细胞活性研究

目的:研究半夏类药材提取物体外抗肿瘤的活性。方法:用流式细胞术检测半夏类药材提取物诱导HeLa细胞凋亡作用,并分析掌叶半夏提取物对细胞生长周期和Caspase-3表达的影响。结果:半夏类药材的抗肿瘤活性主要集中在总有机酸提取物或醋酸乙酯提取部位;掌叶半夏和半夏的抗肿瘤活性作用较强,水半夏相对较弱;抗肿瘤作用与抑制S期细胞增殖和激活Caspase家族诱导细胞凋亡有很大的关系。结论:半夏、水半夏和掌叶半夏的根茎,都有抗肿瘤的活性,以掌叶半夏活性最强;诱导细胞凋亡是它们抗肿瘤的作用机制之一。     

Authentication of Pinellia ternata and its adulterants based on PCR with specific primers

Tubers of Pinellia ternata are one of the well known traditional Chinese medicines. According to the Chinese Pharmacopoeia, the remedy is commonly used as an antitussive and expectorant. The shapes of young tubers from species of P. ternata are similar to those of P. pedatisecta and Arisaema heterophyllum, but different in medicinal properties. In order to provide molecular evidence for genuine origin identification of P. ternata species, the mannose-binding lectin sequences of P. ternata and its adulterants P. pedatisecta and A. heterophyllum were cloned using genomic walker technology. Based on the sequence analyses, we designed a pair of species-specific primers to authenticate P. ternata. For PCR-selective restriction (PCR-SR), we identified two distinctive sites which can be recognized by the restriction endonucleases BAMHI and NCOI in the open reading frame sequences of P. ternata, P. pedatisecta and A. heterophyllum. Our results indicate that the methods of PCR and PCR-SR are effective, accurate and applicable for identification of the bulbs of P. ternata.     

半夏药材中鸟苷和尿苷的含量测定及半夏指纹图谱研究

目的建立不同产地半夏的指纹图谱,对主要核苷类成分含量进行测定。方法采用Hanbon Science & Technolog Co.Ltd.色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,检测波长为254 nm,所得不同样品的指纹图谱用相似度评价软件进行分析。结果确定了10个共有峰,建立了半夏药材的指纹图谱。但各主要核苷类成分的含量有较大的差异,其中宜兴半夏的鸟苷、尿苷含量均为最高,达到0.061%和0.052%。结论该方法简单、快速、准确,可作为半夏质量控制的方法。     

基因测序技术在中药质量研究中的应用（Ⅰ）——山东郓城猴头半夏基原的DNA测序鉴别

目的：分析半夏Pinellia ternata(Thunb.)Breit.及其伪品虎常南星Pinellia pedatisecta Schott的核基因组序列,为半夏正品基原鉴别提供分子依据。方法：采用PCR直接测序技术测定半夏及其伪品的18S rRNA基因核苷酸序列并作序列变异和选择性内切酶谱（PCR－SR）分析。结果：半夏和伪品的18S rRNA序列长度均为1805bp,根据排序比较,半夏原植物与商品药材间的序列完全相同,虎掌南星亦如此。而半夏与其伪品虎掌南星间则存在序列差异（有4个变异位点）。在半夏18S rRNA序列中有一个限制性内切酶Ase Ⅰ识别位点,通过PCR－SR图谱显示800bp和900bp2个酶切片断,而虎掌南星则无此位点,PCR－SR图谱显示1个未消化的1800bp片断。结论：通过核基因组序列和PCR－SR图谱差异DNA测序技术可成为半夏正品基原鉴别准确而有效的分子方法。     

半夏类药材不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用

目的:观察并比较半夏类药材不同提取物诱导体外培养的人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用。方法:应用流式细胞术,检测半夏类药材不同提取物促进人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用,并观察了2种掌叶半夏醋酸乙酯提取物对细胞凋亡的量效关系。结果:3种药材都有诱导Bel-7402肿瘤细胞凋亡的活性,其诱导肿瘤细胞凋亡的有效成分主要集中在总有机酸或醋酸乙酯提取部分。结论:掌叶半夏和半夏诱导肿瘤细胞凋亡的作用较强,水半夏较弱,并且2种掌叶半夏样品的醋酸乙酯部分对促进Bel-7402细胞凋亡呈现一定的剂量依赖性。